一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從從黃柏皮分離小檗堿后的乙醇廢液中制備黃柏內酯的方法，該方法以從黃柏皮乙醇提取液中分離粗品小檗堿后的濾液為原料，采用復合酶進行酶解，得到沉淀物，再用乙醇進行回流提取，過濾得濾液，濾液進行減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液。將濃縮液以大孔吸附樹脂法進行富集、洗脫，得洗脫液，將洗脫液進行濃縮、結晶，干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。獲得的黃柏內酯得率達到0.35%（相對于黃柏原料）左右，含量達到80%以上。本發(fā)明能綜合利用黃柏資源，變廢為寶，減少對環(huán)境污染，分離工藝簡單，回收率高，檸檬苦素含量高，不使用有毒有機溶劑，環(huán)境友好，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法，尤其是涉及一種酶處理技術結合大孔吸附樹脂分離技術從黃柏皮提取小檗堿后的廢液中制備黃柏內酯的方法。

【背景技術】
[0002]黃柏內酯又稱朽1檬苦素、朽1檬烯、白鮮內酯，是一種三職類苦味素，主要來源于蕓香科植物黃柏(Phellodendron amurense Rupr.)的皮，白鮮(Dictamnus alba L.)的皮等。被證明具有驅蟲、抗?jié)?、降血糖作用，還能使腸管弛緩，縮短α氯醛糖和烏拉坦引起的小鼠睡眠時間等生理功效。黃柏是我國中藥中的傳統(tǒng)藥材，具有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡等功效，主要用于濕熱瀉痢，黃疸，帶下，熱淋，腳氣，骨蒸勞熱，盜汗，遺精，瘡瘍腫毒，濕疹瘙癢等癥。黃柏皮主要含小檗堿、藥根堿、黃柏堿、掌葉防己堿、蝙蝠葛堿等生物堿，另含黃柏酮、黃柏內酯、白鮮交酯等活性成分。黃柏皮中小檗堿含量較高，是用于提取小檗堿的主要中藥材原材料之一，黃柏皮中也含有較豐富的黃柏內酯，含量在0.5%左右。目前利用黃柏皮提取小檗堿的工藝中，都沒有對其中的黃柏內酯進行分離加以利用，因而浪費了大量的資源，同時對環(huán)境也造成了很大的污染。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)黃柏皮提取小檗堿后的廢液中含有大量的黃柏內酯成分，在以往的工藝中都是將這部分液體進行丟棄，這不僅污染了環(huán)境，也大大的浪費了黃柏資源。而采取適當?shù)奶幚矸椒▽Ψ蛛x小檗堿的濾液進行處理，并采用大孔吸附樹脂進行富集純化，能有效制備黃柏內酯產(chǎn)品。大孔吸附樹脂由于具有吸附速度快、選擇性好、再生處理方便、使用周期長等特點，在中草藥活性成分的提取分離中應用得到越來越多的應用。本方法對從黃柏皮提取小檗堿后的廢液進行酶解處理，結合溶劑提取和大孔吸附樹脂分離，從廢液中獲得黃柏內酯。本方法能對黃柏資源進行綜合利用，同時建立了一條黃柏來源的黃柏內酯的快速、高效、經(jīng)濟的制備方法。


【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明提供了一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法。該方法以從黃柏皮中乙醇提取液中分離獲得粗品小檗堿后的濾液為原料，采用復合酶進行酶解，得到沉淀物，再用乙醇進行回流提取，過濾得濾液，濾液進行減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液。將濃縮液采用大孔吸附樹脂柱進行富集、洗脫，得洗脫液，將洗脫液進行濃縮、結晶，干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。獲得的黃柏內酯得率達到0.35% (相對于黃柏原料)左右，含量達到80%以上。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現(xiàn)的。其包括如下步驟:(I)對從黃柏皮提取小檗堿后的濾液進行酶解處理:原料:以從黃柏皮乙醇提取液中分離獲得粗品小檗堿后的濾液，用氨水調節(jié)濾液PH值至弱酸性，加熱保持溫度50°C，往濾液中加入0.5%的復合酶，酶解30分鐘，升溫至90°C，讓酶失活。得到沉淀物。(2)乙醇回流提取:將得到的沉淀物分離后，加乙醇回流提取，提取完后過濾，得濾液，將濾液減壓濃縮成濃縮液。(3)大孔吸附樹脂分離，選擇弱極性或非極性大孔吸附樹脂如D101、AB-8，將樹脂進行預處理，充分溶脹、去除其中所含未聚合的有機溶劑。將大孔吸附樹脂裝填在玻璃柱或不銹鋼柱子中，將濃縮液濕法上樣，同時薄層色譜檢測流出液中黃柏內酯含量，樹脂直至吸附飽和。對吸附飽和的大孔吸附樹脂柱用I倍床體積(BV)的蒸餾水以2倍BV/h速度洗脫未被吸附的提取液，然后以3BV的50%的乙醇以2BV/h速度洗脫，收集洗脫液，然后再以3BV的70%的乙醇以2BV/h速度洗脫，收集洗脫液。(4)將50%乙醇洗脫得到的洗脫液減壓濃縮，冷卻結晶，過濾、干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。經(jīng)過本發(fā)明的方法制備得到的黃柏內酯得率為0.35%左右，含量可達80%以上?？傊?，本發(fā)明的優(yōu)點是:可以對提取小檗堿的黃柏皮資源進行綜合利用。采用復合酶對分離小檗堿后的廢液進行處理，有效的提高了黃柏內酯的含量。本發(fā)明采用大孔吸附樹脂分離技術制備黃柏內酯，分離效率高，不使用有毒溶劑，為綠色環(huán)保的提取工藝，制備工藝簡單，成本低，產(chǎn)品質量高。本發(fā)明利用廢棄的資源進行黃柏內酯的制備，既有效利用了資源，開拓了一種新的材料資源，節(jié)約了資源和成本。

【具體實施方式】
[0004]實施例1
以采用乙醇提取法從黃柏皮提取小檗堿的提取液中分離小檗堿后得到的廢液為原料，量取廢液10L，用氨水調節(jié)濾液PH值至5-7左右，加熱保持溫度50°C左右，往濾液中加入50g的復合酶，酶解30分鐘，升溫至90°C，讓酶失活，自然沉降5-10小時，得到沉淀物。將得到的沉淀物分離后，加5-8倍體積乙醇回流提取，提取完后過濾，得濾液，將濾液減壓濃縮到200mL。選擇DlOl大孔吸附樹脂，將樹脂進行預處理，充分溶脹、去除其中所含未聚合的有機溶劑。將500mL體積的大孔吸附樹脂裝填在玻璃柱或不銹鋼柱子中，將200mL濃縮液濕法上樣，同時薄層色譜檢測流出液中黃柏內酯含量，直至吸附飽和。對吸附飽和的大孔吸附樹脂柱用200mL的蒸餾水以400mL/h速度洗脫未被吸附的上柱液，然后用600mL體積的50%的乙醇以400mL/h速度洗脫，收集洗脫液，然后再以3BV的70%的乙醇以2BV/h速度洗脫，收集洗脫液。將50%乙醇洗脫得到的洗脫液減壓濃縮至10mL左右，冷卻結晶12h，將晶體過濾，干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。得黃柏內酯量為30g左右，含量為80.5%。
[0005]實施例2
以采用乙醇提取法從黃柏皮提取小檗堿的提取液中分離小檗堿后得到的廢液為原料，量取廢液100L，先減壓濃縮至20L，用氨水調節(jié)濾液PH值至5-7左右，加熱保持溫度50°C左右，往濾液中加入0.1 %的復合酶，酶解30分鐘，升溫至90°C，讓酶失活，自然沉降5-10小時，得到沉淀物800g左右。將得到的沉淀物分離后，加5-8倍液料比的乙醇回流提取，提取完后過濾，得濾液，將濾液減壓濃縮成至100mL左右。選擇預處理好的AB-8大孔吸附樹月旨，將2000mL體積的大孔吸附樹脂裝填在玻璃柱或不銹鋼柱子中，將100mL濃縮液濕法上樣，同時薄層色譜檢測流出液中黃柏內酯含量，直至吸附飽和。對吸附飽和的大孔吸附樹脂柱用100mL的蒸餾水以4L/h速度洗脫未被吸附的提取液，然后用3L體積的50%的乙醇以2L/h速度洗脫，收集洗脫液，然后再以3BV的70%的乙醇以2BV/h速度洗脫，收集洗脫液。將50%乙醇洗脫得到的洗脫液減壓濃縮至100mL左右，冷卻結晶12h，將晶體過濾，干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。黃柏內酯量為300g左右，含量為81%。
【權利要求】
1.一種從黃柏皮提取小檗堿后的乙醇廢液中制備黃柏內酯的方法其特征在于:包括以下步驟(I)對從黃柏皮提取小檗堿后的乙醇廢液進行酶解處理:以從黃柏皮乙醇提取液中分離獲得粗品小檗堿后的廢液為原料，用氨水調節(jié)濾液PH值至弱酸性，加熱保持溫度500C，往濾液中加入0.5 %的復合酶，酶解30分鐘，升溫至90°C，讓酶失活，沉降，得到沉淀物；(2)乙醇回流提取:將得到的沉淀物分離后，加乙醇回流提取，提取完后過濾，得濾液，將濾液減壓濃縮成濃縮液；(3)大孔吸附樹脂分離，選擇弱極性或中等極性大孔吸附樹脂對濃縮液進行分離，采用不同濃度的乙醇進行洗脫，收集黃柏內酯部分洗脫液，將洗脫液進行濃縮，冷卻、結晶、過濾、干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。
2.一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法，其特征在于步驟(I )，對從黃柏皮中提取小檗堿后的濾液的酶解，在弱性條件下，溫度45-55°C，加入0.4-0.8 %的復合酶，酶解20-40分鐘后，加熱使酶失活。
3.一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法，其特征在于步驟(2)和(3)，包括如下步驟:乙醇回流提取黃柏內酯；大孔吸附樹脂分離黃柏內酯。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法，其特征在于，乙醇回流提取黃柏內酯:將酶解得到的沉淀物進行乙醇回流提取，加入5-10體積倍的乙醇，回流提取1-2小時，過濾后得濾液，減壓回收乙醇，得濃縮液。
5.根據(jù)權利要求3所述的一種從黃柏皮提取小檗堿后的廢液制備黃柏內酯的方法，其特征在于，大孔吸附樹脂分離黃柏內酯:將上步的濃縮液用弱極性或中等極性的大孔吸附樹脂進行吸附，不同濃度乙醇進行洗脫，薄層色譜跟蹤檢測流出液中黃柏內酯的含量，將收集到的黃柏內酯段洗脫液合并，濃縮回收乙醇，結晶，得黃柏內酯沉淀，離心，干燥，得黃柏內酯產(chǎn)品。
【文檔編號】C07J73/00GK104262452SQ201410481959
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月22日 優(yōu)先權日:2014年9月22日
【發(fā)明者】謝紅旗, 曾建國 申請人:湖南農(nóng)業(yè)大學