一種d-δ-生育酚的分離提純方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種d-δ-生育酚的分離提純方法，將硅膠柱層析和樹脂離子交換吸附結(jié)合使用，離子交換樹脂采用采用CO2進(jìn)行解析，有效的提高了d-δ-生育酚的收率。該方法對(duì)設(shè)備要求較低、能耗小、適宜于工業(yè)化。
【專利說(shuō)明】—種d- δ -生育酚的分離提純方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于化學(xué)工程領(lǐng)域，具體涉及一種d- δ -生育酚的分離提純方法。

【背景技術(shù)】
[0002]天然維生素E是一種混合物，主要由從母育酚衍生而來(lái)的四種生育酚同系物組成，包括d- α -生育酚、d- β -生育酚、d- Y -生育酚和d- δ -生育酚，它們都帶有飽和的C16側(cè)鏈，僅在苯環(huán)上甲基的數(shù)目和位置上存在差異。雖然它們結(jié)構(gòu)極其相似，但生物活性卻不相同，分別為d- α -生育酚>d-13 -生育酚>d_ Y -生育酚>d_ δ -生育酹，而抗氧化性則是d- δ -生育酚最高，d- β _、d- Y -和d- δ -生育酚可通過化學(xué)轉(zhuǎn)型的方法轉(zhuǎn)化為d- α -生育酚，從而得到高純度的d- α -生育酚濃縮液。然而，d- δ -生育酚的分離提純目前少見報(bào)道。
[0003]申請(qǐng)?zhí)枮?2137090.7的專利申請(qǐng)涉及一種高含量混合生育酚的提取方法，采用固定床對(duì)脫臭餾出物進(jìn)行酯化和吸附分離法從低生育酚含量的原料中提取含量大于90%混合剩余酚的方法。美國(guó)專利US 3122565, US 3402183, US 2005/131240均采用離子交換樹脂分離生育酚，得到了高純度的D- α -生育酚、D- Y -生育酚和D- δ -生育酹，由于各個(gè)生育酚同系物結(jié)構(gòu)差異很小，需消耗大量的樹脂和溶劑，分離成本太高，無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化；美國(guó)專利 US 4480108,US 4602098,US 4607111 等根據(jù) D-α -生育酚、D-β -生育酚、D-Y -生育酚和D- δ -生育酚的酯類衍生物進(jìn)行脫酰反應(yīng)的難易程度不同，采用脫酰反應(yīng)與色譜分離或蒸餾過程相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)各個(gè)生育酚同系物的分離。這類方法并不是直接以生育酚作為分離原料，而且過程較為復(fù)雜，因此也不易于工業(yè)應(yīng)用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供一種d- δ -生育酚的分離提純方法，該方法對(duì)設(shè)備要求較低、能耗小、適宜于工業(yè)化。
[0005]本發(fā)明采用的技術(shù)方案為，一種d- δ -生育酚的分離提純方法，具體包括以下步驟:
[0006](I)稱取一定量的混合生育酚濃縮液，按1:1?2 (m/v)加入非極性或低極性溶劑，加熱至全溶；
[0007](2)將混合生育酚濃縮液按照硅膠質(zhì)量的10%?45% wt.轉(zhuǎn)移至硅膠柱上方，使其緩慢流過硅膠柱，待所有溶液被完全吸附到硅膠柱上，加入0.5_1BV(柱體積)非極性或低極性溶劑洗脫，然后再用0.5BV?IBV的3%?5%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子，進(jìn)一步提高混合溶劑的極性，最后加入0.5BV?IBV的8%?10%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子；
[0008](3)上述過程中，分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測(cè)結(jié)果合并具有相同組分的洗脫液，洗脫液脫除溶劑后得到富集d- δ -生育酚的濃縮液；
[0009](4)將步驟(3)得到的濃縮液溶解于I?2(m/v)倍體積的溶劑中，轉(zhuǎn)移至堿性陰離子交換樹脂柱上進(jìn)行離子交換吸附，并用CO2進(jìn)行解析，得到的解析液經(jīng)分子蒸餾濃縮后得到高含量d-δ-生育酚。
[0010]優(yōu)選的，步驟(I)中按1:1 (m/v)加入非極性或低極性溶劑。
[0011]優(yōu)選的，非極性溶劑為正己烷、正庚烷中的一種或兩種。
[0012]優(yōu)選的，低極性溶劑為石油醚。
[0013]優(yōu)選的，極性溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃中的一種或多種。
[0014]優(yōu)選的，步驟(3)中，加入IBV(柱體積)非極性或低極性溶劑洗脫，然后再用
0.5BV的3%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子，進(jìn)一步提高混合溶劑的極性，最后加入0.5BV的8%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子；
[0015]優(yōu)選的，步驟(4)中的離子交換吸附所采用的溶劑為乙醇或甲醇溶液。
[0016]堿性陰離子交換樹脂可以選擇現(xiàn)有技術(shù)常見的D201、D202等等。
[0017]本發(fā)明的樣品來(lái)源可以來(lái)源于食油、水果、蔬菜及糧食，也可以是試驗(yàn)用的混合生育酚濃縮液。樣品來(lái)源也可以通過制備獲得，制備方法:以DD油為原料，通過分子蒸餾和離子交換吸附得到混合生育酚濃縮液，該混合生育酚濃縮液中生育酚的含量可以是25%?90%，然后以此為原料進(jìn)行本發(fā)明d- δ -生育酚的分離提純方法。
[0018]相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下優(yōu)勢(shì):
[0019]將硅膠柱層析和樹脂離子交換吸附結(jié)合使用，使得d- δ -生育酚的分離和提純效果更好；
[0020]硅膠柱層析所采用的上柱量以及多種溶劑體系的依次使用，即采用非極性溶劑或低極性溶劑一非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液的梯度洗脫，是發(fā)明人經(jīng)過長(zhǎng)期創(chuàng)造性勞動(dòng)摸索出來(lái)的最佳選擇，非常有效的提高了 d- δ -生育酚的收率；
[0021]離子交換樹脂采用采用CO2進(jìn)行解析，工藝成熟，能耗小；
[0022]本發(fā)明的方法對(duì)設(shè)備要求較低、適宜于工業(yè)化。

【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述:
[0024]實(shí)施例1
[0025]稱取20g的高含量混合生育酚濃縮液(所述高含量混合生育酚濃縮液通過制備獲得，制備方法:以DD油為原料，通過分子蒸餾和離子交換吸附得到混合生育酚濃縮液，該混合生育酚濃縮液中生育酚的含量是30% )，加入20ml正己烷，加熱至全溶，將生育酚溶液轉(zhuǎn)移至裝有200g硅膠的柱上方，使其緩慢流過硅膠柱，待所有溶液被完全吸附到硅膠柱上，加入IBV (柱體積)正己烷洗脫，然后改用0.5BV的3%四氫呋喃-正己烷混合洗脫液洗脫柱子，然后進(jìn)一步提高混合溶劑的極性，加入0.5BV的8%四氫呋喃-正己烷混合洗脫液洗脫柱子；上述過程中，分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測(cè)結(jié)果合并具有相同組分的洗脫液，洗脫液脫除溶劑后得到富集d- δ -生育酚的濃縮液，共得濃縮液4.12g，其中總生育酚含量66.71%,d-δ-生育酚相對(duì)含量89.3%，收率91.01 % ;將該濃縮液溶解于4.5ml倍體積的乙醇溶液中，轉(zhuǎn)移至堿性陰離子交換樹脂柱上進(jìn)行離子交換吸附，吸附完畢后用CO2進(jìn)行解析，然后用乙醇洗脫得到解吸液，解吸液脫溶并經(jīng)分子蒸餾后得到2.39g高含量d- δ -生育酚濃縮液，其中總生育酚含量93.6 %，d- δ -生育酚相對(duì)含量93.83%，收率85.54%。
[0026]以上實(shí)施例顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍，在不脫離本發(fā)明范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種d- δ -生育酚的分離提純方法，具體包括以下步驟: (1)稱取一定量的混合生育酚濃縮液，按1:1?2 (m/v)加入非極性或低極性溶劑，加熱至全溶； (2)將混合生育酚濃縮液按照硅膠質(zhì)量的10%?45%wt.轉(zhuǎn)移至硅膠柱上方，使其緩慢流過硅膠柱，待所有溶液被完全吸附到硅膠柱上，加入0.5_1BV(柱體積)非極性或低極性溶劑洗脫，然后再用0.5BV?IBV的3%?5%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子，進(jìn)一步提高混合溶劑的極性，最后加入0.5BV?IBV的8%?10%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子； (3)上述過程中，分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測(cè)結(jié)果合并具有相同組分的洗脫液，洗脫液脫除溶劑后得到富集d- δ -生育酚的濃縮液； (4)將步驟(3)得到的濃縮液溶解于I?2(m/v)倍體積的溶劑中，轉(zhuǎn)移至堿性陰離子交換樹脂柱上進(jìn)行離子交換吸附，并用CO2進(jìn)行解析，得到的解析液經(jīng)分子蒸餾濃縮后得到高含量d-δ-生育酚。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ-生育酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(I)中按1:1 (m/v)加入非極性或低極性溶劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ -生育酚的分離提純方法，其特征在于，非極性溶劑為正己烷、正庚烷、石油醚中的一種或兩種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ -生育酚的分離提純方法，其特征在于，低極性溶劑為石油醚。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ -生育酚的分離提純方法，其特征在于，極性溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ -生育酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(3)中，加入1BV(柱體積)非極性或低極性溶劑洗脫，然后再用0.5BV的3%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子，進(jìn)一步提高混合溶劑的極性，最后加入0.5BV的8%非極性溶劑或低極性溶劑與極性溶劑的混合洗脫液洗脫柱子。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種d-δ-生育酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(4)中的離子交換吸附所采用的溶劑為乙醇或甲醇溶液。
【文檔編號(hào)】C07D311/72GK104230872SQ201410452296
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】張?jiān)慈? 肖翔, 章生, 魏國(guó)華 申請(qǐng)人:寧波大紅鷹生物工程股份有限公司