一種竹節(jié)草素的制備方法及抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種植物提取物的制備方法及應(yīng)用，尤其涉及一種竹節(jié)草素的制備方法及抗腫瘤應(yīng)用。制備方法包括以下步驟：（1）取竹節(jié)草根莖粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度40-60℃的條件下，通入液態(tài)CO2超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5-10MPa，溫度50-60℃解析，得萃取物；（2）上述萃取物用熱水分散，加入大孔樹脂中吸附，乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液濃縮，得沉淀物；（3）上述沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置重結(jié)晶，干燥即得竹節(jié)草素。采用本發(fā)明制備方法，工藝操作簡(jiǎn)便、得率高，污染小，適合高純度竹節(jié)草素的生產(chǎn)。竹節(jié)草素具有抗腫瘤作用，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，利于提高生物利用度。
【專利說明】一種竹節(jié)草素的制備方法及抗腫瘤應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開了一種植物提取物的制備方法及應(yīng)用，特別涉及一種竹節(jié)草素的制備 方法及抗腫瘤應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 節(jié)草素（Aciculatin)，黃色結(jié)晶，分子式為C22H2208，分子量為414. 41，是從竹節(jié)草 的根莖中提取分離得到的一種黃酮苷類化合物。藥理研究表明，竹節(jié)草素對(duì)KB細(xì)胞具有細(xì) 胞毒活性。竹節(jié)草為鴨跖草科植物竹筋草的全草，具有清熱解毒、利尿消腫、止血的功效；主 瘡癤癰腫、咽喉腫痛、熱痢、白濁、小便不利、外傷出血等癥。
[0003] 通過文獻(xiàn)檢索，國(guó)內(nèi)尚未見竹節(jié)草素用于制備抗腫瘤藥物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為滿足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療癌癥，提供一種竹節(jié)草素的制備方法 及抗腫瘤應(yīng)用。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案： 竹節(jié)草素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取竹節(jié)草根莖粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度 40-60°C的條件下，通入液態(tài)C02超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5-10MPa，溫度50-60°C解析， 得萃取物； (2) 上述萃取物用熱水分散，加入大孔樹脂中吸附，乙醇水溶液梯度洗脫，收集洗脫液 濃縮，得沉淀物； (3) 上述沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得竹節(jié)草素。
[0006] 步驟（2)中所述的大孔樹脂可選AB-8、HZ816、D101和HPD100中的一種。
[0007] 步驟（2)中所述的乙醇水溶液梯度洗脫為：先取4-8BV20-60%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再 用3-8BV70-95%乙醇溶液洗脫。
[0008] 所述制備的竹節(jié)草素，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽 酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0009] 采用本法制備竹節(jié)草素，工藝簡(jiǎn)便易操作，制備量大，產(chǎn)品得率高，而且低污染；添 加腸吸收促進(jìn)劑，有利于提高生物利用度。
[0010] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0011] 實(shí)施例1 : 竹節(jié)草素的制備 竹節(jié)草根莖原料干燥后粉碎60目，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02,設(shè)置在 萃取壓力15MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為20kg/h，動(dòng)態(tài)萃取3小 時(shí)，在壓力5MPa，溫度50°C調(diào)件下解析，得到萃取物120g。萃取物加2L熱水分散加入裝有 500gAB-8樹脂的樹脂柱中吸附，取4BV60%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再用5BV 90%乙醇溶液洗脫有 效成分，收集洗脫液減壓濃縮，放置沉淀，沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾、 洗滌干燥即得竹節(jié)草素，含量97. 4%。
[0012] 實(shí)施例2: 竹節(jié)草根莖原料干燥后粉碎80目，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02,設(shè)置在 萃取壓力19MPa、溫度60°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為25kg/h，動(dòng)態(tài)萃取2小 時(shí)，在壓力8MPa，溫度60°C調(diào)件下解析，得到萃取物130g。萃取物加2L熱水分散加入裝有 500g HZ816樹脂的樹脂柱中吸附，取5BV50%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再用5BV 80%乙醇溶液洗 脫有效成分，收集洗脫液減壓濃縮，放置沉淀，沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置結(jié)晶，過 濾、洗滌干燥即得竹節(jié)草素，含量96. 7%。
[0013] 實(shí)施例3: 竹節(jié)草根莖原料干燥后粉碎60目，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02,設(shè)置在 萃取壓力25MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為20kg/h，動(dòng)態(tài)萃取3小 時(shí)，在壓力6MPa，溫度50°C調(diào)件下解析，得到萃取物110g。萃取物加2L熱水分散加入裝有 500g D101樹脂的樹脂柱中吸附，取6BV40%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再用8BV75%乙醇溶液洗脫有 效成分，收集洗脫液減壓濃縮，放置沉淀。沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾、 洗滌干燥即得竹節(jié)草素，含量97. 5%。
[0014] 實(shí)施例4: 竹節(jié)草素的抗腫瘤應(yīng)用 1、材料 動(dòng)物：昆明種小鼠，雌雄各半性，體重20±2g，由南京中醫(yī)藥大學(xué)提供。
[0015] 細(xì)胞株：Sarc〇ma 180腹水型瘤株（S180)，由中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所提供。
[0016] 2、方法 取50只小鼠，每只小鼠左腋下接種S18(l瘤液，次日隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為生 理鹽水對(duì)照組（NS組)、陽(yáng)性對(duì)照組、竹節(jié)草素低劑量組（2mg/kg)、中劑量組（4mg/kg)、高劑 量組（8mg/kg)。接種24h后竹節(jié)草素給藥組灌胃給藥，連續(xù)7,陽(yáng)性對(duì)照組試驗(yàn)期間腹腔注 射2次，隔日給藥。期間，每日觀察小鼠的一般活動(dòng)、皮毛、糞便等情況。最后一次給藥24h 后斷頸處死，稱重，并計(jì)算抑瘤率。
[0017] 3、結(jié)果 本發(fā)明植物提取物對(duì)小鼠 S18(l皮下荷瘤有明顯的抑制作用，抑瘤率為70. 86-76. 04%， 結(jié)果見表1。
[0018] 抑瘤率（％)= (1-治療組平均瘤重/空白對(duì)照組平均瘤重）X% 表1本發(fā)明植物提取物對(duì)S18(l皮下荷瘤小鼠的抑瘤作用（n=10， i±S)

【權(quán)利要求】
1. 一種竹節(jié)草素的制備方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 取竹節(jié)草根莖粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度 40-60°C的條件下，通入液態(tài)C02超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5-10MPa，溫度50-60°C解析， 得萃取物； (2) 上述萃取物用熱水分散，加入大孔樹脂中吸附，乙醇水溶液梯度洗脫，收集洗脫液 濃縮，得沉淀物； (3) 上述沉淀物加入85%甲醇回流溶解，放置重結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得竹節(jié)草素。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的竹節(jié)草素的制備方法，其特征在于：步驟（2)中所述的大孔樹 脂可選 AB-8、HZ816、D101 和 HPD100 中的一種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的竹節(jié)草素的制備方法，其特征在于：步驟（2)中所述的乙醇水 溶液梯度洗脫為：先取4-8BV20-60%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再用3-8BV70-95%乙醇溶液洗脫。
4. 根據(jù)權(quán)利要求Γ3所述方法制備的竹節(jié)草素，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的竹節(jié)草素，其特征在于腸吸收促進(jìn)劑包含中鏈脂肪酸鹽、膽 酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
【文檔編號(hào)】C07D493/18GK104230951SQ201410445534
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳, 楊存 申請(qǐng)人:南京標(biāo)科生物科技有限公司