一種Aβ聚集抑制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種Aβ聚集抑制劑，其特征在于它的氨基酸序列為：氨基端-CTIWYG-羧基端。本肽序列經原子力顯微鏡掃描技術檢測，進一步用細胞毒性實驗評價得到。它對導致阿爾茨海默病的主要毒性體-Aβ的聚集具有良好的抑制作用，可嘗試開發(fā)為阿爾茨海默病治療藥物。
【專利說明】一種Αβ聚集抑制劑
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種Αβ聚集抑制劑，特別是一種抗阿爾茨海默病的毒性體Αβ抑制劑。
【背景技術】
[0002]目前，全球至少有3500萬人患有阿爾茨海默病，且每年的致死率正在上升。每年全球的總花費估計達到2000億美元,研究表明，Αβ (Amyloid β -peptide)寡聚體是老年癡呆癥病人體內的顯著毒性體，因此抑制Αβ寡聚體的生成是阻止老年癡呆癥發(fā)生最有效的策略。然而，目前無有效方法用于Αβ抑制劑設計，主要面對三方面的嚴重挑戰(zhàn):1、缺少有效的高通量篩選方法:實驗篩選方法需要合成和純化Αβ，這對于大量化合物的篩選無疑是費時、昂貴且不現實。2、缺少Αβ寡聚體的高分辨率結構:Αβ寡聚體呈亞穩(wěn)態(tài)，因此利用X-射線衍射和NMR技術很難得到其結構，使基于結構的合理藥物設計難以實現。3、缺少對Αβ自組裝機制的理解:包括肽的哪一部分構成在淀粉樣纖維生成過程中起著關鍵作用；種子和纖維生成相關的路徑與中間體是什么；Αβ是否親和到特定的受體;Αβ如何生成毒性體以及毒性的機制是什么。因此，設計新型Aβ抑制劑對老年癡呆癥診斷和治療具有重要的實踐意義。

【發(fā)明內容】

[0003]有鑒于此，為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種Αβ聚集抑制劑，它的氨基酸序列為:氨基端-CTIWYG-羧基端，可嘗試開發(fā)為抗阿爾茨海默病治療藥物。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0004]為了使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結合附圖對本發(fā)明作進一步的詳細描述，其中:
[0005]圖1是新設計肽CTIWYG對A β抑制作用的原子力顯微鏡掃描結果。
【具體實施方式】
[0006]I)肽對Αβ抑制作用的原子力顯微鏡掃描實驗；
[0007]用單光束娃懸臂探測器,在輕敲模式(Tapping Mode)模式下測定,至少掃描4個區(qū)域以確保結構正確采樣。圖1為新設計肽CTIWYG對Αβ抑制作用的原子力顯微鏡掃描結果，可看出，經過2天，CTIWYG對Αβ具有明顯的抑制作用。此肽可作為Αβ聚集抑制劑，其序列為:氨基端-CTIWYG-羧基端。
[0008]圖1新設計肽CTIWYG對A β抑制作用的原子力顯微鏡掃描結果(Tapping模式，A為對照實驗(無抑制劑)，Αβ的濃度為1μπι，Β中Αβ的濃度為20 μ Μ，六肽的濃度為5(^11，存放2天，37°0。
[0009]e)細胞毒性試驗；[0010]用Polyanionic dye calcein對活細胞進行綠色突光標記，并測定其活性，ethidium-Ι染色對死細胞進行紅色熒光標記。相對于由Αβ導致的細胞失活，加入CTIWYG和新制備的A β與細胞共同培養(yǎng)后，對應的死亡與成活細胞率為0.412，相對于沒有加入肽的對照實驗可明顯地減少細胞凋亡。當肽與存放24小時的A β溶液與細胞進行混合后，經檢測得到死與活細胞比率為0.780。
[0011] 以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例，并不用于限制本發(fā)明，顯然，本領域的技術人員可以對本發(fā)明進行各種改動和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權利要求及其等同技術的范圍之內，則本發(fā)明也意圖包含這些改動和變型在內。
【權利要求】
1.一種Αβ聚集抑制劑，其特征在于它的氨基酸序列為:氨基端-CTIWYG-羧基端。
【文檔編號】C07K7/06GK103910781SQ201410100093
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年3月18日 優(yōu)先權日:2014年3月18日
【發(fā)明者】梁桂兆, 肖會芝, 錢宇, 鄭潔 申請人:重慶大學