一種10-去乙?；涂ㄍii的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種10-去乙酰基巴卡亭III的制備方法，該方法以7-木糖基紫杉烷為起始原料，先使用硼氫化物選擇性去除其C13位側(cè)鏈，再通過木糖苷酶酶解去除其C-7位木糖基從而獲得10-去乙酰巴卡亭II。本發(fā)明的制備方法可同時將紅豆杉屬植物中所含的多種含10DAB母核結(jié)構(gòu)的7-木糖基紫杉烷化合物轉(zhuǎn)化為10DAB，具有產(chǎn)物收率高、反應條件溫和、后處理簡單、易于實現(xiàn)工業(yè)化等優(yōu)點；其主要原料7-木糖基紫杉烷為紫杉醇提取過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物，因此還增加了植物資源的利用率，對于保護紅豆杉植物資源、降低腫瘤治療費用等，都具有極為重要的意義。
【專利說明】—種10-去乙?；涂ㄍ I I的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物合成【技術領域】，尤其涉及一種10-去乙酰基巴卡亭III的制備方法。
【背景技術】
[0002]紫杉醇(paclitaxel)是從紅豆杉屬植物樹皮或者針葉中分離提取的一種獨具抗癌活性的二萜類化合物。已批準將紫杉醇用于一些不同種類腫瘤的化療，包括頑固性卵巢癌和轉(zhuǎn)移性乳房癌等，被認為是迄今人類發(fā)現(xiàn)的療效最好的抗癌藥物之一。目前，工業(yè)化生產(chǎn)紫杉醇的方法主要是從紅豆杉植物中直接提取或提取其半合成前體，再合成紫杉醇。由于植物中紫杉醇含量極低，因此，半合成工藝目前已成為主流工藝。
[0003]10-去乙酰巴卡亭III (簡稱10DAB)，其結(jié)構(gòu)式如式I所示:
[0004]
【權利要求】
1.一種10-去乙?；涂ㄍII的制備方法，其特征在于，包括: (1)以7-木糖基紫杉烷為反應原料，使用硼氫化物選擇性去除7-木糖基紫杉烷的C13位側(cè)鏈； (2)將步驟(1)所得產(chǎn)物使用木糖苷酶酶解以去除其C7位的木糖基，從而得10-去乙?；涂ㄍII。
2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述7-木糖基紫杉烷為7-木糖-10-去乙酰紫杉醇、7-木糖-10-去乙酰紫杉醇C或7-木糖-10-去乙酰三尖杉寧堿的任意一種或幾種的混合物； 優(yōu)選地，按重量百分比計，所述7-木糖基紫杉烷中，7-木糖-10-去乙酰紫杉醇、7-木糖-10-去乙酰紫杉醇C或7-木糖-10-去乙酰三尖杉寧堿的總含量為20%-100%、優(yōu)選為50%-100%、更優(yōu)選為 70%-90%。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述硼氫化物為具有RBH4結(jié)構(gòu)的任何一種化合物或幾種化合物的混合物，其中R為金屬元素或有機取代基； 優(yōu)選地，所述金屬元素為Na、K、Li ； 優(yōu)選地，所述有機取代基為Bu4N-、Et4N-或Me4N-。
4.根據(jù)權利要求1-3任一項所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述硼氫化物與所述7-木糖基紫杉烷摩爾比為(2-20):1、優(yōu)選為(5-10):1、更優(yōu)選為8:1 ； 優(yōu)選地，步驟(1)的反應溶劑為四氫呋喃或甲醇；` 優(yōu)選地，步驟(1)的反應溫度為0-60°C、優(yōu)選為20-40°C、更優(yōu)選為30°C。
5.根據(jù)權利要求1-4任一項所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，將步驟(1)所得產(chǎn)物用極性溶劑溶解后再加入木糖苷酶進行酶解； 優(yōu)選地，所述極性溶劑為甲醇、N’，N’ - 二甲基甲酰胺或二甲基亞砜或其任意比例的混合物。
6.根據(jù)權利要求1-5任一項所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述木糖苷酶為源于Leifsonia shinshuensis DICP 16菌的發(fā)酵液、菌體懸浮液或菌體破碎液； 優(yōu)選地，每摩爾步驟(1)所得產(chǎn)物加入0.2-2U、優(yōu)選0.5-1U、更優(yōu)選0.8U的木糖苷酶； 優(yōu)選地，所述酶解反應溫度為30-35°C、優(yōu)選32°C ； 優(yōu)選地，所述酶解反應的pH值為6-7、優(yōu)選6.5 ； 優(yōu)選地，步驟(2)還包括將酶解反應液過大孔吸附樹脂柱，然后用70%-90%乙醇解吸的步驟；進一步優(yōu)選地，所述大孔吸附樹脂柱為AB-8、D101、HP20或XAD1600大孔吸附樹脂柱。
7.根據(jù)權利要求1-6任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括對步驟(2)所得產(chǎn)物進行分離純化和再結(jié)晶的步驟。
8.根據(jù)權利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述分離純化使用硅膠層析柱進行； 優(yōu)選地，所述硅膠層析柱的硅膠粒度為200-800目、優(yōu)選為300-800目、更優(yōu)選為300-400 目； 優(yōu)選地，所述硅膠層析柱的徑高比為1:(1-10)、優(yōu)選為1:(2-5)、更優(yōu)選為1:3 ； 優(yōu)選地，所述硅膠層析柱的裝柱方式為干法或濕法裝柱； 優(yōu)選地，步驟(2)所得產(chǎn)物與硅膠的質(zhì)量比為1: (15-100)、優(yōu)選為1:(30-60)、更優(yōu)選為 1:50 ；優(yōu)選地，使用二氯甲烷和甲醇的混合溶液作為流動相；進一步優(yōu)選地，二氯甲烷與甲醇的體積比為100:3-100:10 ;進一步優(yōu)選地，所述流動相的用量為5-15個柱體積、優(yōu)選為10個柱體積。
9.根據(jù)權利要求7或8所述的制備方法，其特征在于，所述再結(jié)晶的溶劑為甲醇或乙月青。
10.根據(jù)權利要求1-9任一項所述的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)將7-木糖基紫杉烷溶解于四氫呋喃中，加入2-20倍、優(yōu)選5-10倍、更優(yōu)選8倍摩爾量的硼氫化物、優(yōu)選硼氫化鈉，于0-60°C、優(yōu)選20-40°C、更優(yōu)選30°C下進行反應，反應結(jié)束后，用酸性水溶液、優(yōu)選乙酸水溶液進行稀釋，然后用二氯甲烷萃取，并減壓濃縮二氯甲燒相； (2)將步驟(1)所得產(chǎn)物溶解于極性溶劑、優(yōu)選甲醇、N’，N’- 二甲基甲酰胺或二甲基亞砜中，然后加入到木糖苷酶溶液中，每摩爾步驟(1)所得產(chǎn)物加入0.2-2U、優(yōu)選0.5-1U、更優(yōu)選0.8U的木糖苷酶；然后在pH6-7、30-35°C條件下攪拌反應，反應結(jié)束后過大孔吸附樹脂柱、優(yōu)選過AB-8、D101、HP20或XAD1600大孔吸附樹脂柱，再用70%_90%乙醇解吸，蒸干解吸液； (3)將步驟(2)所得產(chǎn)物采用硅膠柱層析進行分離，流動相為體積比為100:3-100:10的二氯甲烷與甲醇的混合溶液；所述流動相的用量為5-15個柱體積；收集目標餾分，并進行減壓干燥； (4)將步驟(3)所得產(chǎn)物加熱溶解于甲醇中，冷卻后獲得結(jié)晶，過濾并洗滌晶體，干燥后即得10-去乙酰基 巴卡亭III。
【文檔編號】C07D305/14GK103864729SQ201410073925
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2014年3月3日 優(yōu)先權日:2014年3月3日
【發(fā)明者】欒宏偉, 楊凌, 張輝 申請人:無錫紫熙生物科技有限公司