細(xì)胞反應(yīng)性的、長(zhǎng)效的或靶向的坎普他汀類似物及其用途
【專利摘要】在某些方面，本發(fā)明提供了細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物和包含細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的組合物。在某些方面，本發(fā)明提供了使用細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的方法，例如，用于抑制對(duì)細(xì)胞、組織或器官的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷。在某些方面，本發(fā)明提供了長(zhǎng)效坎普他汀類似物和包含長(zhǎng)效坎普他汀類似物的組合物。在某些方面，本發(fā)明另外提供了使用長(zhǎng)效坎普他汀類似物的方法，例如，用于抑制對(duì)細(xì)胞、組織或器官的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷。在某些方面，本發(fā)明提供了靶向坎普他汀類似物和包含靶向坎普他汀類似物的組合物。在某些方面，本發(fā)明另外提供了使用靶向坎普他汀類似物的方法，例如，用于抑制對(duì)細(xì)胞、組織或器官的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷。
【專利說明】細(xì)胞反應(yīng)性的、長(zhǎng)效的或靶向的坎普他汀類似物及其用途
[0001]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]本發(fā)明要求2011年5月11日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/484，836的優(yōu)先權(quán)，其整個(gè)內(nèi)容特此通過引用并入。
【背景技術(shù)】
[0003]補(bǔ)體是由超過30種血漿蛋白和細(xì)胞結(jié)合的蛋白組成的系統(tǒng)，該系統(tǒng)在先天性免疫和適應(yīng)性免疫中起重要作用。補(bǔ)體系統(tǒng)的蛋白通過多種蛋白相互作用和裂解事件在一系列酶促級(jí)聯(lián)中起作用。補(bǔ)體激活通過3個(gè)主要途徑而發(fā)生:抗體依賴性的經(jīng)典途徑，旁路途徑，和結(jié)合甘露糖的凝集素(MBL)途徑。不適當(dāng)?shù)幕蜻^度的補(bǔ)體激活是許多嚴(yán)重疾病和病癥的根本原因或促成因素，在過去的數(shù)十年中已經(jīng)做出了大量努力來探究不同的補(bǔ)體抑制劑作為治療劑。但是，仍然需要用于多種治療目的的用于抑制補(bǔ)體激活的創(chuàng)新方案。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]在某些方面,本發(fā)明提供了細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀(compstatin)類似物。例如,本發(fā)明提供了細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物，包含細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的組合物，和制備、鑒別、表征和/或使用細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的方法。在某些方面，本發(fā)明提供了一種生理上可接受的組合物，其包含細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。在某些方面，本發(fā)明提供了一種藥用級(jí)組合物，其包含細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。
[0005]在某些方面，本發(fā)明提供了長(zhǎng)效坎普他汀類似物。例如，本發(fā)明提供了長(zhǎng)效坎普他汀類似物，包含長(zhǎng)效坎普他汀類似物的組合物，和制備、鑒別、表征和/或使用長(zhǎng)效坎普他汀類似物的方法。在某些方面，本發(fā)明提供了一種生理上可接受的組合物，其包含長(zhǎng)效坎普他汀類似物。在某些方面，本發(fā)`明提供了一種藥用級(jí)組合物，其包含長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
[0006]在某些方面，本發(fā)明提供了靶向坎普他汀類似物。例如，本發(fā)明提供了靶向坎普他汀類似物，包含靶向坎普他汀類似物的組合物，和制備、鑒別、表征和/或使用靶向坎普他汀類似物的方法。在某些方面，本發(fā)明提供了一種生理上可接受的組合物，其包含靶向坎普他汀類似物。在某些方面，本發(fā)明提供了一種藥用級(jí)組合物，其包含靶向坎普他汀類似物。
[0007]本發(fā)明另外提供了保護(hù)細(xì)胞免于補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷的方法。在某些實(shí)施方案中，所述方法包括:使所述細(xì)胞與細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物接觸。在不同的實(shí)施方案中，所述細(xì)胞可以是任意類型的細(xì)胞。例如，在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞是血細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，所述血細(xì)胞是紅血細(xì)胞(RBC)，也被稱作紅細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞具有異常低的一種或多種補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)、表面密度和/或活性。例如，所述細(xì)胞可以具有編碼這樣的蛋白的基因的突變，其中所述突變會(huì)導(dǎo)致編碼的蛋白的表達(dá)減少或缺失和/或活性降低。在不同的實(shí)施方案中，所述細(xì)胞可以是任意動(dòng)物類型或物種。例如，所述細(xì)胞可以是哺乳動(dòng)物，例如，靈長(zhǎng)類動(dòng)物(人或非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物)、嚙齒動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠、兔)、有蹄動(dòng)物(例如，豬、綿羊、奶牛)、犬科動(dòng)物或貓科動(dòng)物。在許多實(shí)施方案中，所述保護(hù)是針對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物補(bǔ)體，例如，人補(bǔ)體。在某些實(shí)施方案中，使所述細(xì)胞離體(在受試者體外)接觸。在某些實(shí)施方案中，使所述細(xì)胞在體內(nèi)(在受試者例如人體內(nèi))接觸。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞將要移植進(jìn)受試者中或已經(jīng)移植進(jìn)受試者中。在某些方面，本發(fā)明提供了一種分離的細(xì)胞，其具有與其共價(jià)連接的坎普他汀類似物。在某些方面，本發(fā)明提供了一種分離的組織或器官，其具有與至少一些它的細(xì)胞連接的坎普他汀類似物。
[0008]本發(fā)明提供了治療需要治療補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙的受試者的方法。在某些實(shí)施方案中，所述方法包括:給所述受試者施用細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。在某些實(shí)施方案中，所述方法包括:給所述受試者施用長(zhǎng)效坎普他汀類似物。在某些實(shí)施方案中，長(zhǎng)效坎普他汀類似物是細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。在某些實(shí)施方案中，所述補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙是陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿(PNH)、非典型溶血性尿毒癥綜合征(aHUS)或與補(bǔ)體介導(dǎo)的溶血有關(guān)的其它障礙。在某些實(shí)施方案中，所述障礙是缺血/再灌注(I/R)損傷(例如，由于心肌梗塞、血栓栓塞性中風(fēng)或外科手術(shù)。在某些實(shí)施方案中，所述障礙是創(chuàng)傷。在某些實(shí)施方案中，所述障礙是移植排斥。
[0009]在本申請(qǐng)中提及的所有文章、書籍、專利申請(qǐng)、專利、其它出版物、網(wǎng)站和數(shù)據(jù)庫(kù)通過引用并入本文。在說明書和任意并入的參考文獻(xiàn)之間沖突的情況下，以說明書(包括對(duì)其做出的任何修改)為準(zhǔn)。除非另有說明，在本文中使用本領(lǐng)域接受的術(shù)語和縮寫的含義。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1的圖顯示了隨著肽濃度(μ Μ)而變化的坎普他汀類似物CA28 (SEQ ID NO:28)和3種長(zhǎng)效坎普他汀類似物(CA28-l、CA28-2、CA28-3)的補(bǔ)體激活抑制活性百分比。使用經(jīng)典的補(bǔ)體抑制測(cè)定，在體外試驗(yàn)了補(bǔ)體激活的抑制。該圖顯示了通過平均2組測(cè)量的結(jié)果所得到的值。CA28(圓圈；紅色)，CA28-1(交叉(x);藍(lán)色)；CA28_2 (三角形；綠色)，CA28-3(正方形；紫色)。
[0011]圖2的圖顯示了隨著化合物濃度(μΜ)而變化的CA28和長(zhǎng)效坎普他汀類似物CA28-2和CA28-3的補(bǔ)體激活抑制活性百分比。CA28 (正方形，淺灰色)，CA28-2 (菱形，黑色)，CA28-3(圓圈，深灰色)。CA28-3是含有多個(gè)肽部分的化合物。盡管每個(gè)肽部分的活性小于單個(gè)CA28分子的活性，在摩爾基礎(chǔ)上，CA28-3的總活性超過CA28的活性。
[0012]圖3的圖顯示了在單次靜脈內(nèi)注射以后，食蟹猴中CA28和長(zhǎng)效坎普他汀類似物CA28-2和CA28-3的血漿濃度相對(duì)于時(shí)間的關(guān)系。以200mg/kg施用CA28。分別以50mg/kg施用CA28-2和CA28-3。在為這些實(shí)驗(yàn)計(jì)算劑量時(shí)，假定施用的CA28-2和CA28-3物質(zhì)由80% (w/w，基于干重)的活性化合物組成。但是，在樣品分析過程中，標(biāo)準(zhǔn)曲線假定100%(w/w,基于干重)的活性化合物,超出30%的估測(cè)值。因而,Cmax的值會(huì)高估實(shí)際的Cmax。CA28 (正方形，淺灰色)，CA28-2 (三角形，黑色)，CA28-3 (圓圈，深灰色)。
[0013]圖4的圖顯示了隨著化合物濃度(μ M)而變化的CA28和長(zhǎng)效坎普他汀類似物CA28-4的補(bǔ)體激活抑制活性百分比。使用經(jīng)典的補(bǔ)體抑制測(cè)定，在體外試驗(yàn)了補(bǔ)體激活的抑制。該圖顯示了通過平均CA28-4的4組測(cè)量的結(jié)果所得到的值。CA28(正方形，淺灰色)，CA28-4(交叉，黑色)。 [0014]圖5的圖顯示了在單次靜脈內(nèi)注射以后，食蟹猴中CA28和長(zhǎng)效坎普他汀類似物CA28-2、CA28-3和CA28-4的濃度相對(duì)于時(shí)間的關(guān)系。以200mg/kg施用CA28。分別以50mg/kg施用CA28-2、CA28-3和CA28-4。在為這些實(shí)驗(yàn)計(jì)算劑量時(shí)，假定施用的CA28-2和CA28-3物質(zhì)由80% (w/w，基于干重)的活性化合物組成。但是，在樣品分析過程中，標(biāo)準(zhǔn)曲線假定100% (w/w，基于干重)的活性化合物。因而，Cmax的值會(huì)將在指定的劑量(基于干質(zhì)量)施用這些化合物時(shí)所達(dá)到的Cmax高估30%的估測(cè)值。CA28 (正方形，淺灰色)，CA28-2 (三角形，黑色)，CA28-3 (圓圈，深灰色)，CA28-4 (倒三角形，黑色)。
【具體實(shí)施方式】
[0015]1.定義
[0016]除非另有說明或另外從上下文中顯而易見，否則有關(guān)數(shù)字時(shí)的術(shù)語“大約”或“約”一般包括在所述數(shù)字的±10%內(nèi)、在某些實(shí)施方案中±5%內(nèi)、在某些實(shí)施方案中±1%內(nèi)、在某些實(shí)施方案中±0.5%內(nèi)的數(shù)字(所述數(shù)字不允許超過可能值的100%的情形除外)。
[0017]“補(bǔ)體組分”或“補(bǔ)體蛋白”是補(bǔ)體系統(tǒng)激活所涉及的蛋白或參與一種或多種補(bǔ)體介導(dǎo)的活性的蛋白。經(jīng)典補(bǔ)體途徑的組分包括例Clq、Clr、Cls、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C5b-9復(fù)合物(也被稱作膜攻擊復(fù)合物(MAC))，和任何上述的活性片段或酶切割產(chǎn)物(例如，C3a、C3b、C4a、C4b、C5a等)。旁路途徑的組分包括例如因子B、因子D和備解素。凝集素途徑的組分包括例如MBL2、MASP-1和MASP-2。補(bǔ)體組分還包括可溶性補(bǔ)體組分的細(xì)胞結(jié)合受體，其中這樣的受體在可溶性補(bǔ)體組分結(jié)合以后介導(dǎo)這樣的可溶性補(bǔ)體組分的一種或多種生物活性。這樣的受體包括例如C5a受體(C5aR)、C3a受體(C3aR)、補(bǔ)體受體
I(CRl)、補(bǔ)體受體2 (CR2)、補(bǔ)體受體3 (CR3、也被稱作⑶45)等。應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語“補(bǔ)體組分”無意包括充當(dāng)補(bǔ)體激活的“觸發(fā)劑”的那些分子和分子結(jié)構(gòu)，例如抗原-抗體復(fù)合物、存在于微生物或人工表面上的外來結(jié)構(gòu)等。
[0018]“補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙”是其中已知或懷疑補(bǔ)體激活在至少一些罹患該障礙的受試者中是促成因素和/或至少部分地`是誘發(fā)因素的任意障礙，例如，其中補(bǔ)體激活導(dǎo)致組織損傷的障礙。補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙的非限制性例子包括、但不限于；(i)以溶血或溶血性貧血為特征的各種障礙，諸如非典型溶血性尿毒癥綜合征、冷凝集素疾病、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿、輸血反應(yīng)；(?)移植排斥(例如，超急性或急性移植排斥)或移植物功能障礙；(iii)涉及缺血/再灌注損傷的障礙，諸如創(chuàng)傷、外科手術(shù)(例如，動(dòng)脈瘤修復(fù))、心肌梗塞、缺血性中風(fēng)；(iv)呼吸系統(tǒng)障礙，諸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD) ；(v)關(guān)節(jié)炎，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；(vi)眼科障礙，諸如年齡相關(guān)的黃斑變性(AMD)、糖尿病視網(wǎng)膜病變、青光眼和葡萄膜炎。“障礙”在本文中與“疾病”、“病癥”和類似詞語互換使用，表示生物體的健康的任何病損或異常功能狀態(tài)，例如，其中指示醫(yī)學(xué)和/或外科手術(shù)處置或受試者適當(dāng)?shù)貙で筢槍?duì)它的醫(yī)學(xué)和/或外科手術(shù)注意的任何狀態(tài)。還應(yīng)當(dāng)理解，在特定種類內(nèi)列出的特定障礙是為了方便，且無意限制本發(fā)明。應(yīng)該理解，某些障礙可以適當(dāng)?shù)亓性诙鄠€(gè)種類中。
[0019]“補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白”是參與調(diào)節(jié)補(bǔ)體活性的蛋白。補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白可以減量調(diào)節(jié)補(bǔ)體活性，例如，通過抑制補(bǔ)體激活或通過滅活一種或多種被激活的補(bǔ)體蛋白或加速一種或多種被激活的補(bǔ)體蛋白的衰變。補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的例子包括Cl抑制劑、C4結(jié)合蛋白、簇連蛋白、玻璃體結(jié)合蛋白、CFH、因子1、以及細(xì)胞結(jié)合蛋白CD46、CD55、CD59、CR1、CR2和CR3。
[0020]本文中關(guān)于兩個(gè)或更多個(gè)部分使用的“連接的”是指，所述部分彼此以物理方式結(jié)合或連接以形成足夠穩(wěn)定的分子結(jié)構(gòu)，以致所述部分在形成連接的條件下(并且優(yōu)選在使用新分子結(jié)構(gòu)的條件下，例如在生理?xiàng)l件下)保持結(jié)合。在本發(fā)明的某些優(yōu)選實(shí)施方案中，所述連接是共價(jià)連接。在其它實(shí)施方案中，所述連接是非共價(jià)的。各部分可直接或間接連接。當(dāng)兩個(gè)部分直接連接時(shí)，它們彼此共價(jià)鍵合，或者足夠緊鄰以致兩個(gè)部分之間的分子間力保持其結(jié)合。當(dāng)兩個(gè)部分間接連接時(shí)，它們各自共價(jià)地或非共價(jià)地連接至第三部分，所述第三部分保持所述兩個(gè)部分之間的結(jié)合。一般而言，當(dāng)將兩個(gè)部分說成通過“連接基團(tuán)”或“連接部分”連接時(shí)，所述兩個(gè)被連接的部分之間的連接是間接的，并且通常所述被連接的部分各自共價(jià)地鍵合至連接部分。使用“接頭”可以連接2個(gè)部分。接頭可以是與要連接的實(shí)體在合理時(shí)間段內(nèi)在符合所述實(shí)體(其部分可以根據(jù)條件經(jīng)過適當(dāng)保護(hù))的穩(wěn)定性的條件下足量反應(yīng)以產(chǎn)生合理產(chǎn)率的任何合適部分。通常，所述接頭含有至少2個(gè)官能團(tuán)，其中之一與第一實(shí)體反應(yīng)，另一個(gè)官能團(tuán)與第二實(shí)體反應(yīng)。應(yīng)當(dāng)理解，在接頭已經(jīng)與要連接的實(shí)體反應(yīng)以后，術(shù)語“接頭”可以表示得到的結(jié)構(gòu)的源自所述接頭的部分，或者至少表示不包括反應(yīng)過的官能團(tuán)的部分。連接部分可以包含這樣的部分:其不參與與要連接的實(shí)體的鍵，且其主要目的可以是使所述實(shí)體在空間上彼此分離。這樣的部分可以被稱作“隔離物”。
[0021]本文中使用的“多肽”表示氨基酸的聚合物，任選包括一個(gè)或多個(gè)氨基酸類似物。蛋白是由一個(gè)或多個(gè)多肽組成的分子。肽是相對(duì)較短的多肽，長(zhǎng)度通常介于約2個(gè)與60個(gè)氨基酸之間，例如長(zhǎng)度介于8個(gè)與40個(gè)氨基酸之間。術(shù)語“蛋白”、“多肽”和“肽”可互換使用。本文中使用的多肽可以含有氨基酸，例如蛋白質(zhì)中天然存在的氨基酸、蛋白質(zhì)中非天然存在的氨基酸和/或不為氨基酸的氨基酸類似物。本文中使用的氨基酸的“類似物”可以是在結(jié)構(gòu)上類似于氨基酸的不同氨基酸，或在結(jié)構(gòu)上類似于氨基酸的除氨基酸外的化合物。已知大量本領(lǐng)域公知的在蛋白質(zhì)中常見的20種氨基酸(“標(biāo)準(zhǔn)”氨基酸)的類似物?？梢孕揎椂嚯闹械囊粋€(gè)或多個(gè)氨基酸，例如，通過添加化學(xué)實(shí)體，如糖基、磷酸酯基、法呢基、異法呢基、脂肪酸基團(tuán)、用于連接、官能化或其它修飾的接頭等。某些非限制性的合適的類似物和修飾描述于W02004026328和/或下面。多肽可以例如在N末端被乙?；?或例如在C末端被酰胺化。
[0022]本文中使用的“反應(yīng)性官能團(tuán)”表示包括、但不限于以下的基團(tuán):烯烴、炔烴、醇、酚、醚、氧化物、鹵化物、醛、酮、羧酸、酯、酰胺、氰酸酯、異氰酸酯、硫氰酸酯、異硫氰酸酯、胺、肼、腙、酰肼、重氮基、重氮鎗、硝基、腈、硫醇、硫化物、二硫化物、亞砜、砜、磺酸、亞磺酸、縮醒、縮酮、酸酐、硫酸酯、次磺酸異腈、脒、酰亞胺、亞氨酯(imidate)、硝酮(nitrone)、輕胺、肟、異羥肟酸硫代異羥肟酸、聯(lián)烯(allene)、原酸酯、亞硫酸酯、烯胺、炔胺、脲、假脲、氨基脲、碳化二亞胺、氨基甲酸酯、亞胺、疊`氮化物、偶氮化合物、氧化偶氮基化合物和亞硝基化合物、N-羥基琥珀酰亞胺酯、馬來酰亞胺、巰基等。制備這些官能團(tuán)中的每一種的方法是本領(lǐng)域眾所周知的，并且它們對(duì)于特定目的的應(yīng)用或修飾都在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)(參見，例如，Sandier 和 Karo，編.0RGANIC FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, AcademicPress, San Diego, 1989,和 Hermanson, G., Bioconjugate Techniques,第 2 版，AcademicPress, San Diego,2008)。
[0023]“特異性結(jié)合”通常表示靶多肽(或更一般而言，靶分子)與結(jié)合分子(例如抗體或配體)之間的物理結(jié)合。所述結(jié)合通常依賴于可被結(jié)合分子識(shí)別的靶標(biāo)的特定結(jié)構(gòu)特征(例如抗原決定簇、表位、結(jié)合槽或裂隙)的存在。例如，如果抗體對(duì)表位A具特異性，則含有表位A的多肽的存在，或游離的未標(biāo)記的A在含有游離的經(jīng)標(biāo)記的A和與其結(jié)合的結(jié)合分子的反應(yīng)物中的存在，將降低與結(jié)合分子結(jié)合的經(jīng)標(biāo)記的A的量。應(yīng)當(dāng)理解，特異性不需要是絕對(duì)的，而通常表示在其中發(fā)生結(jié)合的情形。例如，本領(lǐng)域眾所周知，眾多抗體除與靶分子中存在的表位反應(yīng)外，還與其它表位交叉反應(yīng)。取決于欲使用抗體的應(yīng)用，所述交叉反應(yīng)性可以是可接受的。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將能夠選擇特異性程度足以適合在任何給定應(yīng)用(例如用于檢測(cè)靶分子、用于治療目的等)中進(jìn)行的抗體或配體。還應(yīng)當(dāng)理解，可以在額外因素的情形中評(píng)價(jià)特異性，例如結(jié)合分子對(duì)靶標(biāo)的親和力相對(duì)于結(jié)合分子對(duì)其它靶標(biāo)(例如競(jìng)爭(zhēng)劑)的親和力。如果結(jié)合分子對(duì)需要檢測(cè)的靶分子表現(xiàn)出高親和力并且對(duì)非靶分子表現(xiàn)出低親和力，則所述抗體可能成為可接受的試劑。在從一個(gè)或多個(gè)情形中確立結(jié)合分子的特異性后，即可將其用于其它、優(yōu)選類似的情形，而無需再評(píng)價(jià)其特異性。在某些實(shí)施方案中，在所測(cè)試的條件下，例如在生理?xiàng)l件下，表現(xiàn)出特異性結(jié)合的2個(gè)分子的親和力(如通過平衡解離常數(shù)Kd所測(cè)得)是10_3M或更小，例如，10_4M或更小，例如，10_5M或更小，例如，KT6M或更小，KT7M或更小，KT8M或更小，或KT9M或更小。
[0024]根據(jù)本發(fā)明治療的“受試者”通常是人、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物或低等動(dòng)物(例如，小鼠或大鼠)，其表達(dá)或含有至少一些靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，人)補(bǔ)體組分C3和任選的一種或多種其它靈長(zhǎng)類動(dòng)物補(bǔ)體組分。在某些實(shí)施方案中，所述受試者是雄性。在某些實(shí)施方案中，所述受試者是雌性。在某些實(shí)施方案中，所述受試者是成年人，例如，至少18歲(例如，18-100歲)的人。
[0025]本文中關(guān)于治療受試者使用的“治療”表示，提供治療，即，提供受試者的任何類型的醫(yī)學(xué)或外科手術(shù)處置?？梢蕴峁┲委熞员隳孓D(zhuǎn)、緩解疾病，抑制所述疾病的進(jìn)展，預(yù)防或降低所述疾病的可能性，或者以便逆轉(zhuǎn)、緩解疾病的一種或多種征狀或表現(xiàn)，抑制或防止所述征狀或表現(xiàn)的進(jìn)展，預(yù)防或降低止所述征狀或表現(xiàn)的可能性?！邦A(yù)防”表示，使至少一些個(gè)體在至少一段時(shí)間內(nèi)不會(huì)出現(xiàn)疾病或者疾病的征狀或表現(xiàn)。治療可以包括:在發(fā)展出指示疾病的一種或多種征狀或表現(xiàn)后，給受試者施用化合物或組合物，例如以便逆轉(zhuǎn)、緩解、降低所述疾病的嚴(yán)重程度，和/或抑制或防止所述疾病的進(jìn)展，和/或逆轉(zhuǎn)、緩解、降低所述疾病的一種或多種征狀或表現(xiàn)的嚴(yán)重程度，和/或抑制或所述疾病的一種或多種征狀或表現(xiàn)?？梢詫⒒衔锘蚪M合物施用給已經(jīng)發(fā)展疾病的受試者或相對(duì)于一般群體的成員而言具有增加的發(fā)展所述疾病的風(fēng)險(xiǎn)的受試者?？梢詫⒒衔锘蚪M合物施用給這樣的受試者:其已經(jīng)發(fā)展疾病，且與確診該疾病的其它個(gè)體相比，或者與所述受試者的典型的平均的這種征狀或表現(xiàn)或惡化風(fēng)險(xiǎn)相比，具有增加的發(fā)展所述疾病的一種或多種特定征狀或表現(xiàn)或者所述疾病的惡化的風(fēng)險(xiǎn)。例如，所述受試者可能已經(jīng)暴露于“觸發(fā)劑”，所述“觸發(fā)劑”使所述受試者處于增加的經(jīng)歷惡化的風(fēng)險(xiǎn)(例如，暫時(shí)增加的風(fēng)險(xiǎn))。可以預(yù)防性地施用化合物或組合物，即，在發(fā)展出所述疾病的任何征狀或表現(xiàn)之前。通常，在該情況下，所述受試者將處于發(fā)展疾病的風(fēng)險(xiǎn)中，例如，相對(duì)于一般群體的成員，所述成員任選地以年齡、性別和/或其它人口統(tǒng)計(jì)變量的方式相匹配。
[0026]本文中使用的術(shù)語“脂族”表示這樣的烴部分:其可以是直鏈(即，無分支)、支鏈或環(huán)狀(包括稠合的、橋連和螺稠合的多環(huán))，且可以是完全飽和的，或者可以含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，但是其是非芳族的。除非另外指出，脂族基團(tuán)含有1-30個(gè)碳原子。在某些實(shí)施方案中，脂族基團(tuán)含有1-10個(gè)碳原子。在其它實(shí)施方案中，脂族基團(tuán)含有1-8個(gè)碳原子。在其它實(shí)施方案中，脂族基團(tuán)含有1-6個(gè)碳原子，且在其它實(shí)施方案中，脂族基團(tuán)含有1-4個(gè)碳原子。合適的脂族基團(tuán)包括、但不限于:直鏈或支鏈的烷基、烯基和炔基，以及它們的雜合物，諸如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基或(環(huán)烷基)烯基。
[0027]本文中使用的“烷基”表示，具有約I至約22個(gè)碳原子(以及其中碳原子范圍和具體個(gè)數(shù)的所有組合和子組合)的飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀烴，其中在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，約I至約12個(gè)碳原子、或約I至約7個(gè)碳原子是優(yōu)選的。烷基包括、但不限于:甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戍基、環(huán)戍基、異戍基、新戍基、正己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)辛基、金剛烷基、3-甲基戊基、2，2-二甲基丁基和2，3-二甲基丁基。
[0028]本文中使用的“鹵素”表示F、Cl、Br或I。
[0029]本文中使用的“烷?；北硎酒渲芯哂屑s1-10個(gè)碳原子(以及碳原子范圍和具體個(gè)數(shù)的所有組合和子組合)、例如約1-7個(gè)碳原子的任選地被取代的直鏈或支鏈脂族無環(huán)殘基，如將理解的，所述殘基用單鍵連接至末端C = O基團(tuán)(且也可以被稱作“酰基”)。烷酰基包括、但不限于:甲酰基、乙酰基、丙?；?、丁?；?、異丁酰基、戊酰基、異戊酰基、2-甲基-丁?；?、2，2- 二甲氧基丙?；?、己?；?、庚酰基、辛?；龋⑶揖捅景l(fā)明的目的而言，甲酰基被視作烷?；！暗图?jí)烷?；北硎揪哂屑sI至約5個(gè)碳原子(以及碳原子范圍和具體個(gè)數(shù)的所有組合和子組合)的任選地被取代的直鏈或支鏈脂族無環(huán)殘基。這樣的基團(tuán)包括、但不限于:甲?；⒁阴；⒈；?、丁酰基、異丁酰基、戊?；?、異戊酰基等。
[0030]本文中使用的“芳基”表示具有約5至約14個(gè)碳原子(以及其中碳原子范圍和具體個(gè)數(shù)的所有組合和子組合)的任選地被取代的、單環(huán)或二環(huán)芳族環(huán)系，其中約6至約10個(gè)碳是優(yōu)選的。非限制性例子包括，例如，苯基和萘基。
[0031]本文中使用的“芳烷基”表示這樣的烷基殘基:其帶有芳基取代基，并且具有約6至約22個(gè)碳原子(以及其中碳原子范圍和具體個(gè)數(shù)的所有組合和子組合)，其中在某些實(shí)施方案中，約6至約12個(gè)碳原子`是優(yōu)選的。芳烷基可以任選地被取代。非限制性例子包括，例如，芐基、萘基甲基、二苯基甲基、三苯基甲基、苯基乙基和二苯基乙基。
[0032]本文中使用的術(shù)語“烷氧基”表示任選地被取代的烷基-O-基團(tuán)，其中烷基如先前所定義。不例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基和庚氧基。
[0033]本文中使用的“羧基”表示-C ( = O) OH基團(tuán)。
[0034]本文中使用的“烷氧基羰基”表示-C ( = O) O-烷基，其中烷基如先前所定義。
[0035]本文中使用的“芳?；北硎?C( = O)-芳基，其中芳基如先前所定義。示例性芳酰基包括苯甲?；洼良柞；?br> [0036]術(shù)語“環(huán)系”表示芳族或非芳族、部分不飽和的或完全飽和的、3-10元環(huán)系，其包括
3-8個(gè)原子大小的單環(huán)和可包括與非芳族環(huán)稠合的芳族5或6元芳基或芳族雜環(huán)基團(tuán)的二環(huán)系和三環(huán)系。這些雜環(huán)包括具有1-3個(gè)雜原子的那些雜環(huán)，所述雜原子獨(dú)立地選自氧、硫和氮。在某些實(shí)施方案中，術(shù)語雜環(huán)表示非芳族5-、6_、或7-元環(huán)或多環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)環(huán)原子是選自0、S和N的雜原子，包括、但不限于，二環(huán)或三環(huán)基團(tuán)，其包含具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自氧、硫和氮的雜原子的稠合6元環(huán)。在某些實(shí)施方案中，“環(huán)系”表示環(huán)烷基，其在本文中用于表示具有3-10個(gè)(例如，4-7個(gè))碳原子的基團(tuán)。環(huán)烷基包括、但不限于任選地被取代的環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。在某些實(shí)施方案中，“環(huán)系”表示任選地被取代的環(huán)烯基或環(huán)炔基部分。
[0037]通常，被取代的化學(xué)部分包括一個(gè)或多個(gè)替代氫的取代基。示例性取代基包括例如鹵代、烷基、環(huán)烷基、芳烷基、芳基、巰基、羥基(-0H)、烷氧基、氰基(-CN)、羧基(-COOH)、-C( = O) O-烷基、氨基羰基(-C( = O)NH2)、-N-取代的氨基羰基(-C( = O)NHR")、CF3XF2CF3等。關(guān)于上文所述的取代基，每個(gè)部分R”可獨(dú)立地為例如H、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基中任一個(gè)。
[0038]本文中使用的“L-氨基酸”表示通常存在于蛋白質(zhì)中的任何天然存在的左旋α-氨基酸，或那些α-氨基酸的烷基酯。術(shù)語“D-氨基酸”表示右旋α-氨基酸。除非另有說明，否則本文中提及的所有氨基酸都是L-氨基酸。
[0039]本文中使用的“芳族氨基酸”是包含至少一個(gè)芳族環(huán)的氨基酸，例如其包含一個(gè)芳基。
[0040]本文中使用的“芳族氨基酸類似物”是包含至少一個(gè)芳族環(huán)的氨基酸類似物，例如其包含一個(gè)芳基。
[0041]I1.概述
[0042]本發(fā)明提供了細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物和與其有關(guān)的方法，例如，其使用方法。細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物是這樣的化合物:其包含坎普他汀類似物部分和細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)，所述官能團(tuán)能夠與在細(xì)胞表面上暴露的官能團(tuán)反應(yīng)(例如，在生理?xiàng)l件向)以形成共價(jià)鍵。所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物因 而變得與細(xì)胞共價(jià)連接。不希望受任何特定理論約束，細(xì)胞連接的坎普他汀類似物會(huì)保護(hù)細(xì)胞免于補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷，例如，通過結(jié)合在細(xì)胞表面處和/或在細(xì)胞附近的C3(其可以是C3 (H2O)的形式)和抑制C3裂解和激活，和/或通過結(jié)合C3b和抑制它在細(xì)胞上的沉積或在補(bǔ)體激活級(jí)聯(lián)中的參與。在本發(fā)明的某些方面，使分離的細(xì)胞與細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物離體(在體外)接觸。在本發(fā)明的某些方面，所述細(xì)胞存在于分離的組織或器官(例如，要移植進(jìn)受試者中的組織或器官)中。在本發(fā)明的某些方面，通過將細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物施用給受試者，使細(xì)胞與細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物在體內(nèi)接觸。所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物變得在體內(nèi)與細(xì)胞共價(jià)連接。在某些方面，本發(fā)明的方案會(huì)保護(hù)細(xì)胞、組織和/或器官免于補(bǔ)體激活的有害作用至少2周，在這期間無需再治療。
[0043]在某些方面，本發(fā)明提供了包含靶向部分的坎普他汀類似物，所述靶向部分與存在于細(xì)胞或組織表面上的靶分子非共價(jià)地結(jié)合，或與未連接至細(xì)胞或組織的細(xì)胞外物質(zhì)非共價(jià)地結(jié)合。這樣的坎普他汀類似物在本文中被稱作“靶向坎普他汀類似物”)。所述靶分子經(jīng)常是連接至細(xì)胞膜和暴露于細(xì)胞表面上的蛋白或碳水化合物。所述靶向部分將坎普他汀類似物靶向細(xì)胞、組織或易于補(bǔ)體激活的位置。在本發(fā)明的某些方面，使分離的細(xì)胞與靶向坎普他汀類似物離體(在體外)接觸。在本發(fā)明的某些方面，所述細(xì)胞存在于分離的組織或器官(例如，要移植進(jìn)受試者中的組織或器官)中。在本發(fā)明的某些方面，將靶向坎普他汀類似物施用給受試者，且其變得與在體內(nèi)與細(xì)胞、組織或細(xì)胞外物質(zhì)非共價(jià)結(jié)合。在某些方面，本發(fā)明的方案會(huì)保護(hù)細(xì)胞、組織和/或器官免于補(bǔ)體激活的有害作用至少2周，在這期間無需再治療。在某些實(shí)施方案中，靶向坎普他汀類似物包含靶向部分和細(xì)胞反應(yīng)性部分。所述靶向部分將坎普他汀類似物靶向特定細(xì)胞類型，例如通過與這樣的細(xì)胞上的分子非共價(jià)地結(jié)合。所述細(xì)胞反應(yīng)性部分然后共價(jià)地結(jié)合細(xì)胞或細(xì)胞外物質(zhì)。在其它實(shí)施方案中，靶向坎普他汀類似物不包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
[0044]在某些方面，本發(fā)明提供了長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含延長(zhǎng)所述化合物在體內(nèi)的半衰期的部分諸如聚乙二醇(PEG)(例如，通過降低它從血液的清除率)。在某些實(shí)施方案中，長(zhǎng)效坎普他汀類似物不包含靶向部分或細(xì)胞反應(yīng)性部分。在某些實(shí)施方案中，長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含靶向部分和/或細(xì)胞反應(yīng)性部分。
[0045]II1.補(bǔ)體系統(tǒng)
[0046]為了促進(jìn)本發(fā)明的理解，且無意以任何方式限制本發(fā)明，本部分提供了補(bǔ)體和它的激活途徑的概述。其它細(xì)節(jié)參見，例如，Kuby Immunology, 2006年第6版；Paul, ff.E.，F(xiàn)undamental Immunology, Lippincott ffilliams&ffilkins:2008 年第 6 版:和 WalportMJ.，Complement.2 個(gè)部分的第一部分.N Engl J Med.，344 (14): 1058-66，2001。
[0047]補(bǔ)體是先天性免疫系統(tǒng)的一個(gè)分支，其在對(duì)抗傳染性病原體的身體防御中起重要作用。補(bǔ)體系統(tǒng)包含30多種血清蛋白和細(xì)胞蛋白，所述蛋白涉入三個(gè)主要途徑:稱為經(jīng)典途徑、旁路途徑和凝集素途徑。經(jīng)典途徑通常通過抗原與IgM或IgG抗體的復(fù)合物與Cl的結(jié)合而觸發(fā)(但某些其它激活劑也可以啟動(dòng)此途徑)。激活的Cl裂解C4和C2，除了產(chǎn)生C2a和C2b之外，還產(chǎn)生C4a和C4b。C4b與C2a組合以形成C3轉(zhuǎn)化酶，其裂解C3以形成C3a和C3b。C3b與C3轉(zhuǎn)化酶的結(jié)合會(huì)產(chǎn)生C5轉(zhuǎn)化酶，其將C5裂解成C5a和C5b。C3a、C4a和C5a是過敏毒素， 并且介導(dǎo)急性炎癥應(yīng)答中的多種反應(yīng)。C3a和C5a還是趨化因子，其吸引免疫系統(tǒng)細(xì)胞諸如嗜中性粒細(xì)胞。
[0048]旁路途徑是由例如微生物表面和各種復(fù)合多糖啟動(dòng)和放大。在此途徑中，C3向C3(H20)的水解(其以低水平自發(fā)發(fā)生)會(huì)導(dǎo)致因子B (其被因子D裂解)的結(jié)合，從而產(chǎn)生流體相C3轉(zhuǎn)化酶，所述C3轉(zhuǎn)化酶通過將C3裂解成C3a和C3b而激活補(bǔ)體。C3b結(jié)合靶標(biāo)諸如細(xì)胞表面，并與因子B(其以后被因子D裂解)形成復(fù)合物，從而產(chǎn)生C3轉(zhuǎn)化酶。表面結(jié)合的C3轉(zhuǎn)化酶會(huì)裂解和激活其它C3分子，導(dǎo)致在激活部位緊密靠近處的快速C3b沉積，并導(dǎo)致其它C3轉(zhuǎn)化酶的形成，這又會(huì)產(chǎn)生其它C3b。該過程會(huì)導(dǎo)致C3裂解和C3轉(zhuǎn)化酶形成的循環(huán)，這會(huì)顯著擴(kuò)大應(yīng)答。C3的裂解以及另一分子C3b與C3轉(zhuǎn)化酶的結(jié)合會(huì)產(chǎn)生C5轉(zhuǎn)化酶。此途徑的C3和C5轉(zhuǎn)化酶受宿主細(xì)胞分子CR1、DAF、MCP、⑶59和fH調(diào)節(jié)。這些蛋白質(zhì)的作用模式涉及衰變加速活性(即，解離轉(zhuǎn)化酶的能力)、在因子I對(duì)C3b或C4b的降解中充當(dāng)輔因子的能力，或二者。通常，補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白在宿主細(xì)胞表面上的存在會(huì)阻止在其上面發(fā)生顯著的補(bǔ)體激活。
[0049]兩種途徑中產(chǎn)生的C5轉(zhuǎn)化酶裂解C5以產(chǎn)生C5a和C5b。C5b然后結(jié)合至C6、C7和C8以形成C5b-8，其催化C9的聚合以形成C5b-9膜攻擊復(fù)合物(MAC)。MAC本身插入靶細(xì)胞膜中，并引起細(xì)胞裂解。細(xì)胞膜上的少量MAC可能具有除細(xì)胞死亡以外的多種后果。
[0050]凝集素補(bǔ)體途徑是由甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)和MBL相關(guān)絲氨酸蛋白酶(MASP)與碳水化合物的結(jié)合而啟動(dòng)。MBl-1基因(在人類中，稱為L(zhǎng)MAN-1)編碼位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體(Golgi)之間的中間區(qū)域中的I型嵌膜蛋白。MBL-2基因編碼存在于血清中的可溶性甘露糖結(jié)合蛋白。在人凝集素途徑中，MASP-1和MASP-2涉入C4和C2的蛋白酶解，產(chǎn)生上文所述的C3轉(zhuǎn)化酶。
[0051]補(bǔ)體活性受稱作補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)或補(bǔ)體激活(RCA)蛋白調(diào)節(jié)劑(RCA)的各種哺乳動(dòng)物蛋白調(diào)節(jié)(美國(guó)專利號(hào)6，897，290)。這些蛋白質(zhì)在配體特異性和補(bǔ)體抑制機(jī)制方面存在差異。它們可加速轉(zhuǎn)化酶的正常衰變和/或充當(dāng)因子I的輔因子，以將C3b和/或C4b酶促裂解成更小的片段。CCP的特征是存在多個(gè)(通常4-56個(gè))同源基序，所述同源基序被稱為短共有重復(fù)序列(SCR)、補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)模塊或SUSHI結(jié)構(gòu)域，其長(zhǎng)度為約50-70個(gè)氨基酸，含有包括四個(gè)二硫鍵鍵合的半胱氨酸(兩個(gè)二硫鍵)、脯氨酸、色氨酸和許多疏水殘基的保守基序。CCP家族包括補(bǔ)體受體I型(CRl ；C3b:C4b受體)、補(bǔ)體受體2型(CR2)、膜輔因子蛋白(MCP ;CD46)、衰變加速因子(DAF)、補(bǔ)體因子H(fH)和C4b結(jié)合蛋白(C4bp)。CD59是一種在結(jié)構(gòu)上與CCP無關(guān)的膜結(jié)合的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白。補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白通常用于限制否則可能在哺乳動(dòng)物(例如，人宿主)的細(xì)胞和組織上發(fā)生的補(bǔ)體激活。因而，“自我”細(xì)胞通常會(huì)被保護(hù)免于有害作用，所述有害作用否則會(huì)在這些細(xì)胞上發(fā)生補(bǔ)體激活以后而產(chǎn)生。補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的缺點(diǎn)或缺陷涉入多種補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙(例如，如本文中討論的)的發(fā)病機(jī)制。
[0052]IV.坎普他汀類似物
[0053]坎普他汀是一種環(huán)狀肽，其結(jié)合至C3并抑制補(bǔ)體激活。美國(guó)專利號(hào)6，319，897描述了一種具有序列 Ile-[Cys-Val-Val-Gln-Asp-Trp-Gly-His-His-Arg-Cys]-Thr(SEQ ID NO:I)的肽，其中兩個(gè)半胱氨酸之間的二硫鍵由括號(hào)表示。應(yīng)當(dāng)理解，在美國(guó)專利號(hào)6，319，897中未使用名稱“坎普他汀”，但隨后在科技文獻(xiàn)和專利文獻(xiàn)(參見，例如，Morikis，等人，Protein Sc1.,7(3):619-27,1998))中用它來表示具有與美國(guó)專利號(hào)6，319，897中所公開的SEQ ID NO:2相同的序列、但是如表1中所示在C末端處被酰胺化的肽(SEQ ID NO:8) ο術(shù)語“坎普他汀”在本文中與所述用法一致地使用(B卩，表示SEQID NO:8) 0已經(jīng)開發(fā)出具有比坎普他汀更高的補(bǔ)體抑制活性的坎普他汀類似物。參見，例如，W02004/026328 (PCT/US2003/029653), Morikis, D.，等人，Biochem Soc Trans.32 (第
I部分):28-32，2004，Mallik, B.，等人，J.Med.Chem.，274-286，2005 ；Katragadda,Μ.，等人.J.Med.Chem.，49:4616-4622,2006 ；W02007062249 (PCT/US2006/045539)；W02007044668 (PCT/US2006/039397)，W0/2009/046198 (PCT/US2008/078593)；W0/2010/127336(PCT/US2010/033345)和下面的討論。
[0054]坎普他汀類似物可`以在例如N末端和/或C末端被乙?；蝓０坊?。例如，坎普他汀類似物可以在N末端被乙酰化和在C末端被酰胺化。與本領(lǐng)域的用法一致，本文中使用的“坎普他汀”以及本文中相對(duì)于坎普他汀的活性描述的坎普他汀類似物的活性表示在C末端被酰胺化的坎普他汀(Mallik，2005，出處同上)。
[0055]坎普他汀或其補(bǔ)體抑制類似物的多聯(lián)體或多聚體也可用于本發(fā)明中。
[0056]本文中使用的術(shù)語“坎普他汀類似物”包括坎普他汀及其任何補(bǔ)體抑制類似物。術(shù)語“坎普他汀類似物”包括坎普他汀以及這樣的其它化合物:所述化合物基于坎普他汀設(shè)計(jì)或鑒別，并且當(dāng)使用例如本領(lǐng)域認(rèn)可的任何補(bǔ)體激活測(cè)定或基本上類似或相當(dāng)?shù)臏y(cè)定測(cè)量時(shí)，其補(bǔ)體抑制活性是坎普他汀的補(bǔ)體抑制活性的至少50%。某些合適的測(cè)定描述于:美國(guó)專利號(hào)6，319，897，W02004/026328, Morikis,出處同上，Mallik,出處同上，Katragadda 2006，出處同上，W02007062249 (PCT/US2006/045539) ；W02007044668 (PCT/US2006/039397)，W0/2009/046198 (PCT/US2008/078593);和 / 或 TO/2010/127336 (PCT/US2010/033345)。所述測(cè)定可例如測(cè)量旁路途徑或經(jīng)典途徑介導(dǎo)的紅細(xì)胞裂解，或者是ELISA測(cè)定。在某些實(shí)施方案中，使用在W0/2010/135717(PCT/US2010/035871)中描述的測(cè)定。
[0057]坎普他汀類似物的活性可以以其IC5tl(使補(bǔ)體激活抑制50%的化合物濃度)的方式來表示，如本領(lǐng)域所公認(rèn)的，較低IC5tl值指示較高活性。用于本發(fā)明中的優(yōu)選坎普他汀類似物的活性至少與坎普他汀的活性相同。應(yīng)當(dāng)指出，已知某些修飾會(huì)降低或消除補(bǔ)體抑制活性，并且其可以明確地排除在本發(fā)明任何實(shí)施方案之外。使用旁路途徑介導(dǎo)的紅細(xì)胞裂解測(cè)定(W02004/026328)，已經(jīng)將坎普他汀的IC5tl測(cè)量為12 μ Μ。應(yīng)當(dāng)理解，所測(cè)量的給定坎普他汀類似物的準(zhǔn)確IC5tl值將隨實(shí)驗(yàn)條件(例如，在測(cè)定中使用的血清濃度)而變化。例如從在基本上相同的條件下確定多種不同化合物的IC5tl值的實(shí)驗(yàn)所獲得的比較值是有用的。在一個(gè)實(shí)施方案中，坎普他汀類似物的IC5tl值不超過坎普他汀的IC5tl值。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物的活性是坎普他汀的2到99倍(即，所述類似物的IC50是坎普他汀IC5tl的1/2至1/99)。例如，所述活性可以是坎普他汀10-50倍，或是坎普他汀的50-99倍。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物的活性是坎普他汀的活性的99-264倍。例如，所述活性可以是坎普他汀的活性的100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260或264倍。在某些實(shí)施方案中，所述活性是坎普他汀的活性的250-300、300和350、350和400、或400和500倍。本發(fā)明另外涵蓋這樣的坎普他汀類似物:其活性是坎普他汀的活性的500-1000倍或更多。在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物的IC5tl是在約0.2μ M至約0.5μ M之間。在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物的IC5tl是在約0.1 μ M至約0.2 μ M之間。在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物的IC5tl是在約0.05 μ M至約0.1 μ M之間。在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物的IC50是在約0.001 μ M至約0.05 μ M之間。
[0058]使用等溫滴定量熱法，可以測(cè)量坎普他汀結(jié)合C3的Kd值(Katragadda,等人，J.Biol.Chem.，279 (53)，54987-54995，2004)。已經(jīng)將多種坎普他汀類似物與C3的結(jié)合親和力與它們的活性相關(guān) 聯(lián)，如本領(lǐng)域所公認(rèn)的，較低的Kd指示較高的結(jié)合親和力。證實(shí)了某些試驗(yàn)的類似物的結(jié)合親和力與活性之間的線性關(guān)系(Katragadda, 2004,出處同上；Katragadda 2006，出處同上)。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物結(jié)合C3的Kd介于(λ ΙμΜ與1.0μ M之間、介于(λ 05μΜ與0.1 μ M之間、介于(λ 025μΜ與0.05μΜ之間、介于0.015μΜ與0.025 μΜ之間、介于0.01 μΜ與0.015 μΜ之間、或介于0.001 μΜ與
0.01 μ M 之間。
[0059]“基于坎普他汀設(shè)計(jì)或鑒別的”化合物包括、但不限于包含通過以下方式獲得其序列的氨基酸鏈的化合物:(i)修飾坎普他汀的序列(例如，用不同的氨基酸或氨基酸類似物替換坎普他汀序列的一個(gè)或多個(gè)氨基酸，將一個(gè)或多個(gè)氨基酸或氨基酸類似物插入坎普他汀的序列中，或從坎普他汀序列刪除一個(gè)或多個(gè)氨基酸)；(ii)從其中將坎普他汀的一個(gè)或多個(gè)氨基酸隨機(jī)化的噬菌體展示肽文庫(kù)選擇，并任選進(jìn)一步根據(jù)方法(i)進(jìn)行修飾；或
(iii)通過篩選與坎普他汀或利用方法(i)或(ii)獲得的其任何類似物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合C3或其片段的化合物來鑒別。許多有用的坎普他汀類似物包含疏水簇、β轉(zhuǎn)角和二硫鍵。
[0060]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物的序列包含通過在坎普他汀序列中進(jìn)行1、2、3或4個(gè)置換(即，由不同標(biāo)準(zhǔn)氨基酸或非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸替代坎普他汀序列中的1、2、3或4個(gè)氨基酸)而獲得的序列，或基本上由所述序列組成。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，4位的氨基酸被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，9位的氨基酸被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，4位和9位的氨基酸被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，僅4位和9位的氨基酸被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，4位或9位的氨基酸被改變，或在某些實(shí)施方案中，4位和9位的氨基酸都被改變，而且另外位于選自1、7、10、11和13位的多達(dá)兩個(gè)氨基酸也被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，4位、7位和9位的氨基酸被改變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，2位、12位或兩個(gè)位置的氨基酸都被改變，前提條件是，所述改變保留欲環(huán)化的化合物的能力。在2位和/或12位的這種改變可以是除1、4、7、9、10、11和/或13位改變之外還有的改變。其序列是通過替換坎普他汀序列的一個(gè)或多個(gè)氨基酸而獲得的任何坎普他汀類似物的序列任選地在C末端進(jìn)一步包括多達(dá)1、2或3個(gè)額外氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述額外氨基酸是Gly。其序列是通過替換坎普他汀序列的一個(gè)或多個(gè)氨基酸而獲得的任何坎普他汀類似物的序列任選地在C末端進(jìn)一步包括多達(dá)5個(gè)或多達(dá)10個(gè)額外氨基酸。應(yīng)當(dāng)理解，除非另有說明或從上下文顯而易見，否則坎普他汀類似物可以具有本文所述各種實(shí)施方案的任何一個(gè)或多個(gè)特性或特征，并且任意實(shí)施方案的特性或特征可另外表征本文所述的任何其它實(shí)施方案。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物的序列包含除對(duì)應(yīng)于坎普他汀序列4位和9位的位置以外都與坎普他汀一致的序列，或基本上由所述序列組成。
[0061]坎普他汀和活性略高于坎普他汀的某些坎普他汀類似物僅含有標(biāo)準(zhǔn)氨基酸(“標(biāo)準(zhǔn)氨基酸”為甘氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、蛋氨酸、精氨酸、賴氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸和組氨酸)。具有提高的活性的某些坎普他汀類似物包含一個(gè)或多個(gè)非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸。有用的非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸包括單鹵代和多鹵代(例如氟代)氨基酸、D-氨基酸、高氨基酸、N-烷基氨基酸、脫氫氨基酸、芳族氨基酸(除苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸外)、鄰氨基苯甲酸、間氨基苯甲酸或?qū)Π被郊姿?、磷?氨基酸、甲氧基化氨基酸和α，α-二取代的氨基酸。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，通過用相應(yīng)的D-氨基酸替換本文別處所述的坎普他汀類似物中的一個(gè)或多個(gè)L-氨基酸，設(shè)計(jì)坎普他汀類似物。這樣的化合物及其使用方法是本發(fā)明的一個(gè)方面。適用的示例性非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸包括:2_萘基丙氨酸(2-NaI)、1_萘基丙氨酸(1-NaI)、2-茚滿基甘氨酸甲酸(2Igl)、二氫色氨酸(Dht)、4_苯甲?；?L-苯丙氨酸(Bpa)、2_α -氨基丁酸(2-Abu)、3_a-氨基丁酸(3-Abu)、4_a-氨基丁酸(4_Abu)、環(huán)己基丙氨酸(Cha)、同素環(huán)己基丙氨酸(hCha)、4_氟-L-色氨酸(4fW)、5_氟-L-色氨酸(5fW)、6_氟-L-色氨酸^fW)、4_羥基-L-色氨酸(40H-W)、5_羥基-L-色氨酸(50H-W)、6_羥基-L-色氨酸(60H-W)、1_甲基-L-色氨酸(IMeW)、4_甲基-L-色氨酸(4MeW)、5_甲基-L-色氨酸(5MeW)、7-氮雜-L-色氨酸(7aW)、α -甲基-L-`色氨酸(a Meff)、β -甲基-L-色氨酸(MeW)、N-甲基-L-色氨酸(匪eW)、鳥氨酸(orn)、瓜氨酸、正亮氨酸、Y-谷氨酸等。
[0062]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物包含一種或多種Trp類似物(例如相對(duì)于坎普他汀序列，在4位和/或7位)。示例性的Trp類似物如上所述。也參見Beene，等人.Biochemistry 41:10262-10269，2002 (特別描述單鹵代的和多鹵代的Trp類似物)；Babitzke 和 Yanofsky，J.Biol.Chem.270:12452-12456，1995(特別描述甲基化的和鹵代的Trp以及其它Trp和吲哚類似物);以及美國(guó)專利6，214，790,6, 169，057、5，776，970、4，870，097、4，576，750 和4，299，838。其它 Trp 類似物包括在 α 或 β 碳處以及任選在吲哚環(huán)的一個(gè)或多個(gè)位置被取代(例如被甲基取代)的變體。包含兩個(gè)或更多個(gè)芳族環(huán)(包括其被取代、未被取代或可替換地被取代的變體)的氨基酸作為Trp類似物是值得關(guān)注的。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在例如4位的Trp類似物是5-甲氧基、5-甲基-、1-甲基-或1-甲?；?色氨酸。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，使用包含1-烷基取代基(例如低級(jí)烷基(例如C1-C5)取代基)的Trp類似物(例如在4位)。在某些實(shí)施方案中，使用Ν(α)甲基色氨酸或5-甲基色氨酸。在某些實(shí)施方案中，使用包含1-烷?；〈?例如低級(jí)烷?；?例如C1-C5))的類似物。例子包括1-乙?；?L-色氨酸和L- β -色氨酸。
[0063]在某些實(shí)施方案中，Trp類似物的疏水性相對(duì)于Trp有所增加。例如，吲哚環(huán)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基(例如甲基)取代。在某些實(shí)施方案中，Trp類似物參加與C3的疏水相互作用。這樣的Trp類似物可以位于例如相對(duì)于坎普他汀序列的4位。在某些實(shí)施方案中，Trp類似物包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分，或者包含兩個(gè)或更多個(gè)被取代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分。
[0064]在某些實(shí)施方案中，Trp類似物與C3形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp增加，但疏水性相對(duì)于Trp沒有增加。Trp類似物的極性比Trp強(qiáng)，和/或參加與C3上氫鍵供體的靜電相互作用的能力有所增加。具有增加的氫鍵形成性質(zhì)的某些示例性Trp類似物在吲哚環(huán)上包含帶負(fù)電荷的取代基。這樣的Trp類似物可以位于例如相對(duì)于坎普他汀序列的7位。
[0065]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物包含一種或多種Ala類似物(例如在相對(duì)于坎普他汀序列的9位)，例如除在側(cè)鏈包含一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)外都與Ala —致的Ala類似物。在某些實(shí)施方案中，Ala類似物是無支鏈的單甲基氨基酸，例如2-Abu。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物包含一種或多種Trp類似物(例如，在相對(duì)于坎普他汀序列的4位和/或7位)和一種Ala類似物(例如，在相對(duì)于坎普他汀序列的9位)。
[0066]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物是包含序列為(X’ aa)n-Gln-Asp-Xaa-Gly- (X^aa) m (SEQ ID NO:2)的肽的化合物，其中各 X’aa 和各 X”aa 是獨(dú)立選擇的氨基酸或氨基酸類似`物，其中Xaa是Trp或Trp類似物，并且其中η > I和m > 1，而且n+m是5-21。所述肽具有Gln-Asp-Xaa-Gly的核心序列,其中Xaa是Trp或Trp類似物，例如，與氫鍵供體形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加、但在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。例如，所述類似物可以是其中Trp的吲哚環(huán)被帶負(fù)電部分(例如鹵素諸如氟)取代的類似物。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa是5-氟色氨酸。在沒有相反證據(jù)的情況下，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，其序列包含此核心序列并且抑制補(bǔ)體激活和/或結(jié)合C3的任何非天然存在的肽都能基于坎普他汀序列而設(shè)計(jì)。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，Xaa是除Trp類似物外允許Gln-Asp-Xaa-Gly肽形成β轉(zhuǎn)角的氨基酸或氨基酸類似物。
[0067]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，所述肽具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly(SEQ ID NO:3)的核心序列，其中V aa和Xaa選自Trp和Trp類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，所述肽具有 X，aa-Gln-Asp-Xaa-Gly(SEQ ID NO:3)的核心序列，其中 X’aa 和 Xaa 選自 Trp、Trp類似物以及包含至少一個(gè)芳族環(huán)的其它氨基酸或氨基酸類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在肽的情況下，所述核心序列形成β轉(zhuǎn)角。β轉(zhuǎn)角可以是柔性的，以致當(dāng)例如使用核磁共振(NMR)評(píng)估時(shí)，所述肽可呈現(xiàn)兩種或更多種構(gòu)象。在某些實(shí)施方案中，V aa是包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分、或者包含兩個(gè)或更多個(gè)被取代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分的Trp類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，X’ aa選自:2_萘基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-茚滿基甘氨酸甲酸、二氫色氨酸和苯甲?；奖彼?。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，X’ aa是疏水性比Trp強(qiáng)的Trp類似物。例如，V aa可以是1-甲基色氨酸。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，Xaa是形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加、但是在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加的Trp類似物在Trp的吲哚環(huán)上(例如在5位)包含修飾，例如鹵素原子對(duì)5位的氫原子的替代。例如，Xaa可以是5-氟色氨酸。
[0068]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，所述肽具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly_X”aa(SEQ IDNO:4)的核心序列，其中X’aa和Xaa各獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物，并且X”aa選自His、Ala、Ala類似物、Phe和Trp。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，X’ aa是疏水性比Trp強(qiáng)的Trp類似物，例如1-甲基色氨酸，或在吲哚環(huán)上(例如1、4、5或6位)具有烷基取代基的其它Trp類似物。在某些實(shí)施方案中，X’aa是包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分、或者包含兩個(gè)或更多個(gè)被取 代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分的Trp類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，V aa選自:選自:2_萘基丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-茚滿基甘氨酸甲酸、二氫色氨酸和苯甲?；奖彼?。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，Xaa是與C3形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加、但是在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加的Trp類似物在Trp的吲哚環(huán)上(例如在5位)包含修飾,例如鹵素原子對(duì)5位的氫原子的替代。例如,Xaa可以是
5-氟色氨酸。在某些實(shí)施方案中，X”aa是Ala或Ala類似物(例如Abu)或另一無支鏈單甲基氨基酸。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，所述肽具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly-X" aa (SEQID NO:4)的核心序列，其中V aa和Xaa各獨(dú)立地選自Trp、Trp類似物以及包含至少一個(gè)芳族側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，并且X” aa選自His、Ala、Ala類似物、Phe和Trp。在某些實(shí)施方案中，X”aa選自Trp類似物、芳族氨基酸和芳族氨基酸類似物。
[0069]在本發(fā)明的某些優(yōu)選實(shí)施方案中，所述肽是環(huán)狀的。所述肽可通過任何兩個(gè)氨基酸之間的鍵環(huán)化，其中一個(gè)氨基酸是(X’ aa)n，而另一個(gè)位于(X”aa)m內(nèi)。在某些實(shí)施方案中，肽的環(huán)狀部分是9到15個(gè)氨基酸長(zhǎng)，例如10到12個(gè)氨基酸長(zhǎng)。在某些實(shí)施方案中，肽的環(huán)狀部分是11個(gè)氨基酸長(zhǎng)，并且在2位與12位氨基酸之間具有鍵(例如二硫鍵)。例如，肽可以是13個(gè)氨基酸長(zhǎng)，并且在2位與12位氨基酸之間具有鍵，由此產(chǎn)生11個(gè)氨基酸長(zhǎng)的環(huán)狀部分。
[0070]在某些實(shí)施方案中，所述肽包含序列X’ aal-X’ aa2_X’ aa3_X’ aa4-Gln-Asp-Xaa_Gly-X”aal-X”aa2-X”aa3-X”aa4_X”aa5(SEQ ID NO:5)或由所述序列組成。在某些實(shí)施方案中，
Vaa4 和 Xaa 選自 Trp 和 Trp 類似物，并且 X，aal、X，aa2、X，aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X”aa4和X”aa5獨(dú)立地選自氨基酸和氨基酸類似物。在某些實(shí)施方案中，X’ aa4和Xaa選自芳族氨基酸和芳族氨基酸類似物。X’ aal、X’ aa2、X’ aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X” aa4和X”aa5中的任意一個(gè)或多個(gè)可以與坎普他汀中的相應(yīng)位置的氨基酸相同。在一個(gè)實(shí)施方案中，X”aal是Ala或無支鏈單甲基氨基酸。肽可以通過(i)X’aal、X’aa2或X’aa3與(ii)父”&&2、乂”&&3、乂”&&4或乂”&&5之間的共價(jià)鍵環(huán)化。在一個(gè)實(shí)施方案中，肽通過X’ aa2與X”aa4之間的共價(jià)鍵環(huán)化。在一個(gè)實(shí)施方案中，共價(jià)結(jié)合的氨基酸各自是Cys，而且共價(jià)鍵是二硫(S-S)鍵。在其它實(shí)施方案中，共價(jià)鍵是C-C、C-0、C-S或C-N鍵。在某些實(shí)施方案中，共價(jià)結(jié)合的殘基之一是其側(cè)鏈包含伯胺或仲胺的氨基酸或氨基酸類似物，另一共價(jià)結(jié)合的殘基是其側(cè)鏈包含羧酸基團(tuán)的氨基酸或氨基酸類似物，并且共價(jià)鍵是酰胺鍵。其側(cè)鏈包含伯胺或仲胺的氨基酸或氨基酸類似物包括賴氨酸，和通式結(jié)構(gòu)NH2(CH2)nCH(NH2)COOH的二氨基甲酸，諸如2，3-二氨基丙酸(dapa)、2，4-二氨基丁酸(daba)和鳥氨酸(orn)，其中η分別為I (dapa)、2 (daba)和3 (orn)。其側(cè)鏈包含羧酸基團(tuán)的氨基酸的例子包括二羧基氨基酸，例如谷氨酸和天冬氨酸。還可以使用類似物，例如羥基-L-谷氨酸。在某些實(shí)施方案中，肽用硫醚鍵環(huán)化，例如，如在PCT/US2011/052442(W0/2012/040259)中所述。例如，在某些實(shí)施方案中，任意肽中的二硫鍵被硫醚鍵替代。在某些實(shí)施方案中，形成胱硫醚。在某些實(shí)施方案中，所述胱硫醚是S-胱硫醚或Y-胱硫醚。在某些實(shí)施方案中，修飾包括:用CH2的添加來替代SEQ ID NO:5中的V aa2和V, aa4處的半胱氨酸之間的Cys-Cys 二硫鍵(或其它序列中的對(duì)應(yīng)位置)以形成在V aa2或X”aa4處的高半胱氨酸，和引入硫醚鍵以形成胱硫醚。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述胱硫醚是Y-胱硫醚。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述胱硫醚是S-胱硫醚。根據(jù)本發(fā)明的另一種修飾包括，在不添加CH2的情況下用硫醚鍵替代二硫鍵，由此形成羊毛硫氨酸。在某些實(shí)施方案中，至少在某些條件下，與含有二硫鍵的坎普他汀類似物相比，含有替代硫醚的二硫鍵的坎普他汀類似物具有增加的穩(wěn)定性。
[0071]在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物是包含具有以下序列的肽的化合物:
[0072]Xaa1-Cys-Val-Xaa2-Gln-Asp-Xaa2*-Gly-Xaa3-His-Arg-Cys~Xaa4(SEQ ID NO:
6);其中:
[0073]Xaal 是 IlejauLeiuBl-1lej1-VaUB1-Leu 或包含 Gly-1le 或 B1-Gly-1le 的二肽，且B1代表第一封端部分；
[0074]Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物；
[0075]Xaa3 是 His、Ala 或 Ala 類似物、Phe、Trp 或 Trp 類似物；
[0076]Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L-Thr、D_Thr、Ile、Val、Gly、Ala 或 Asn 中任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被第二封端部分B2替換；并且
[0077]兩個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接。在某些實(shí)施方案中，Xaa4是Leu、Nle、His或Phe、或選自 Xaa5_Ala 和 Xaa5_Asn 的二妝、或三妝 Xaa5-Ala_Asn,其中 Xaa5 選自 Leu、Nle、His或 Phe,且其中 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、Leu、Nle、His、Phe、Ala 或 Asn 中的中任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被第二封端部分B2替換；并且兩個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接。
[0078]在其它實(shí)施方案中，Xaal不存在，或?yàn)槿魏伟被峄虬被犷愃莆铮⑶襒aa2、Xaa2*、Xaa3和Xaa4如上面所定義。如果Xaal不存在，則N末端Cys殘基可以具有與其連接的封端部分B1。
[0079]在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa4為任何氨基酸或氨基酸類似物，并且Xaal、Xaa2、Xaa2*和Xaa3如上面所定義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa4是選自Thr-Ala和Thr-Asn的二肽，其中羧基末端-OH或者Ala或Asn任選地被第二封端部分B2替換。
[0080]在SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物的任意實(shí)施方案中，Xaa2可以是Trp。
[0081]在SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物的任意實(shí)施方案中，Xaa2可以是包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分、或者包含兩個(gè)或更多個(gè)被取代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分的Trp類似物。例如，Trp類似物可以選自2-萘基丙氨酸(2_NaI)、1-萘基丙氨酸(1-NaI)、2_茚滿基甘氨酸甲酸(Igl)、二氫色氨酸(Dht)和4-苯甲?；?L-苯丙氨酸。
[0082]在SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物的任意實(shí)施方案中，Xaa2可以是疏水性比Trp強(qiáng)的Trp類似物。例如，所述Trp類似物可以選自1-甲基色氨酸、4-甲基色氨酸、5-甲基色氨酸和6-甲基色氨酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，Trp類似物是1-甲基色氨酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa2是1-甲基色氨酸，Xaa2*是Trp，Xaa3是Ala，并且其它氨基酸與坎普他汀的那些相同。
[0083]在SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物的任意實(shí)施方案中，Xaa2*可以是Trp類似物，例如與C3形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加并且在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。在某些實(shí)施方案中，Trp類似物在吲哚環(huán)上包含帶負(fù)電取代基。例如，Trp類似物可以選自5-氟色氨酸和6-氟色氨酸。
[0084]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，Xaa2是Trp，并且Xaa2*是與C3形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加并且在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。在SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物的某些實(shí)施方案中，Xaa2是疏水性比Trp強(qiáng)的Trp類似物，例如選自1-甲基色氨酸、4-甲基色氨酸、5-甲基色氨酸和6-甲基色氨酸的Trp類似物，并且Xaa2*是與C3形成氫鍵的傾向相對(duì)于Trp有所增加并且在某些實(shí)施方案中疏水性相對(duì)于Trp沒有增加的Trp類似物。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa2是甲基色氨酸，并且Xaa2*是5-氟色氨酸。
[0085]在某些上述實(shí)施方案中，Xaa3是Ala。在某些上述實(shí)施方案中，Xaa3是無支鏈的單甲基氨基酸，例如Abu。
[0086]本發(fā)明另外提供了如上文所述的SEQ ID NO:6的坎普他汀類似物，其中Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp、Trp類似物，以及包含至少一個(gè)芳族環(huán)的其它氨基酸或氨基酸類似物，并且Xaa3是His、Ala或Ala類似物、Phe、Trp、Trp類似物、或另一芳族氨基酸或芳族氨基酸類似物。
[0087]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，存在于本文所述的任意坎普他汀類似物的N末端或C末端處的封端部分是使肽穩(wěn)定以防降解(否則其將在哺乳動(dòng)物(例如人類或非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物)血液或間隙液中發(fā)生)的任何部分。例如，封端部分B1可以是改變肽的N末端結(jié)構(gòu)從而抑制肽的N末端氨基酸與相鄰氨基酸之間的肽鍵裂解的任何部分。封端部分B2可以是改變肽的C末端結(jié)構(gòu)從而抑制肽的C末端氨基酸與相鄰氨基酸之間的肽鍵裂解的任何部分?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的任何合適的封端部分。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，封端部分B1包含?；?即，羧酸在去除-OH基團(tuán)后剩余的部分)。?；ǔ０?-12個(gè)碳，例如1-6個(gè)碳。例如，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，封端部分B1選自:甲酰基、乙?；⒈；?、丁?；?、異丁?；?、戊?；?、異戊?；取Ｔ谝粋€(gè)實(shí)施方案中，封端部分B1是乙?；?，即，Xaal是Ac-1le、Ac-Val、Ac-Leu 或 Ac-Gly-1le。
[0088]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，封端部分B2是伯胺或仲胺(-NH2或-NHR1，其中R是有機(jī)部分，例如烷基)。
[0089]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，封端部分B1是中和/或降低負(fù)電荷(否則其可以在生理pH存在于N末端)的任何部分。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，封端部分B2是中和/或降低負(fù)電荷(否則其可以在生理pH存在于C末端)的任何部分。
[0090]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物分別在N末端和/或C末端被乙?；蝓０坊??？财账☆愃莆锟梢栽贜末端被乙酰化、在C末端被酰胺化，和/或在N末端被乙?；驮贑末端被酰胺化。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，坎普他汀類似物在N末端包含烷基或芳基，而非乙?；0091]在某些實(shí)施方案中，所述坎普他汀類似物是包含具有以下序列的肽的化合物:
[0092]Xaal-Cys-Val-Xaa2-Gln-Asp-Xaa2*-Gly-Xaa3-His-Arg-Cys-Xaa4(SEQ ID NO:
7);其中:
[0093]Xaal 是 lie、Val、Leu> Ac-1Ie> Ac-Val> Ac-Leu 或包含 Gly-1le 或 Ac-Gly-1le 的二肽；
[0094]Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物；
[0095]Xaa3 是 His、Ala 或 Ala 類似物、Phe、Trp 或 Trp 類似物；
[0096]Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L-Thr、D_Thr、Ile、Val、Gly、Ala 或 Asn 中任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被-NH2替換；并且兩個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接。在某些實(shí)施方案中，Xaa4是Leu、Nle、His、或 Phe、或選自 Xaa5_Ala 和 Xaa5_Asn 的二妝、或三妝 Xaa5-Ala_Asn,其中 Xaa5 選自 Leu、Nle、His 或 Phe,且其中 L-Thr、D-Thr、lie、Val、Gly、Leu、Nle、His、Phe、Ala 或 Asn中任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被第 二封端部分B2替換；并且兩個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接。
[0097]在某些實(shí)施方案中，Xaal、Xaa2、Xaa2*、Xaa3和Xaa4如上文關(guān)于SEQ ID NO:6的各個(gè)實(shí)施方案所述。例如，在某些實(shí)施方案中，Xaa2*是Trp。在某些實(shí)施方案中，Xaa2是疏水性比Trp強(qiáng)的Trp類似物，例如1-甲基色氨酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa3是Ala。在某些實(shí)施方案中，Xaa3是無支鏈的單甲基氨基酸。
[0098]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，Xaal是He，且Xaa4是L-Thr。
[0099]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，Xaal是lie，Xaa2*是Trp，且Xaa4是L-Thr。
[0100]本發(fā)明另外提供了如上文所述的SEQ ID NO:7的坎普他汀類似物，其中Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp、Trp類似物、其它氨基酸或芳族氨基酸類似物，并且Xaa3是Hi S、Ala或Ala類似物、Phe、Trp、Trp類似物、或另一芳族氨基酸或芳族氨基酸類似物。
[0101]在本文所述任意坎普他汀類似物的某些實(shí)施方案中，使用Phe類似物而不是Phe。
[0102]表1提供了可用于本發(fā)明中的坎普他汀類似物的非限制性列表。所述類似物在左邊一欄中以縮寫形式提及，其中指示了在指定位置(1-13)與親本肽坎普他汀相比較的特定修飾。與本領(lǐng)域的用法一致，本文中使用的“坎普他汀”和本文中相對(duì)于坎普他汀的活性描述的坎普他汀類似物的活性，表示在C末端被酰胺化的坎普他汀肽。除非另有說明，否則表1中的肽在C末端被酰胺化。粗體字用于指示某些修飾。與坎普他汀有關(guān)的活性是基于公開的數(shù)據(jù)和其中所述的測(cè)定(W02004/026328，W02007044668, Mallik, 2005 ；Katragadda,2006)。當(dāng)參考多個(gè)報(bào)導(dǎo)活性的出版物時(shí)，使用最新公開的值，并且應(yīng)認(rèn)識(shí)到，在各測(cè)定之間存在差異的情況下，可以對(duì)值進(jìn)行調(diào)整。還應(yīng)當(dāng)理解，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在表I中列出的肽當(dāng)用于本發(fā)明的治療組合物和方法中時(shí)，通過兩個(gè)Cys殘基之間的二硫鍵環(huán)化。用于環(huán)化肽的替代方式也在本發(fā)明范圍內(nèi)。如上面所指出的，在本發(fā)明的不同實(shí)施方案中，坎普他汀類似物(例如，本文中公開的任意坎普他汀類似物)的一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以是N-烷基氨基酸(例如，N-甲基氨基酸)。例如，但不限于，在所述肽的環(huán)狀部分內(nèi)的至少一個(gè)氨基酸、在環(huán)狀部分的N末端的至少一個(gè)氨基酸和/或在環(huán)狀部分的C末端的至少一個(gè)氨基酸可以是N-烷基氨基酸，例如，N-甲基氨基酸。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，例如，坎普他汀類似物包含N-甲基甘氨酸，例如，在與坎普他汀的8位對(duì)應(yīng)的位置處和/或在與坎普他汀的13位對(duì)應(yīng)的位置處。在某些實(shí)施方案中，表1中的一種或多種坎普他汀類似物含有至少一個(gè)N-甲基甘氨酸，例如，在與坎普他汀的8位對(duì)應(yīng)的位置處和/或在與坎普他汀的13位對(duì)應(yīng)的位置處。
[0103]表1
[0104]
【權(quán)利要求】
1.一種生理上可接受的或藥用級(jí)的組合物，所述組合物包含細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述組合物是生理上可接受的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述組合物是藥用級(jí)組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述組合物是藥學(xué)上可接受的以用于施用給人。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物,其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含能夠共價(jià)地結(jié)合哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含含有細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)的細(xì)胞反應(yīng)性部分。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物包含與巰基(SH)基團(tuán)反應(yīng)以形成共價(jià)鍵的細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物包含與胺基團(tuán)反應(yīng)以形成共價(jià)鍵的細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含馬來酰亞胺基團(tuán)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性部分包含細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)、坎普他汀類似物部分和連接部分，所述連接部分將所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)與坎普他汀類似物部分部分分隔開。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物包含氨基酸，所述氨基酸的側(cè)鏈含有式(NH)-R的基團(tuán)，其中R代表包含細(xì)胞反應(yīng)性官能團(tuán)的部分。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有X’aa-Gln-Asp-Xaa-Gly(SEQ ID NO:3)的核心序列的環(huán)狀肽，其中V aa和Xaa選自Trp和Trp類似物，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly-X”aa(SEQ ID NO:4)的核心序列的環(huán)狀肽，其中X’ aa和Xaa各自獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物，且X”aa選自HiS、Ala、無支鏈的單甲基氨基酸、Phe, Trp和Trp類似物，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述肽具有X'aal-X’ aa2_X’ aa3_X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly-X，，aa-X，，aa2-X，，aa3-X，，aa4-X，，aa5(SEQ ID NO:5)的序列，且 X，aal、X，aa2、X’ aa3、X” aa2、X” aa3_X” aa4和X” aa5與坎普他汀中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有 X'aal-X’ aa2_X’ aa3_X’ aa4-Gln-Asp-Xaa-Gly-X”aal-X”aa2-X”aa3_X”aa4-X”aa5(SEQ ID NO:5)的序列的環(huán)狀肽，其中X’aa4和Xaa選自Trp和Trp類似物，其中X'aal、X，aa2、X，aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X” aa4 和 X” aa5 獨(dú)立地選自氨基酸和氨基酸類似物，其中所述肽經(jīng)由V aa2和X”aa4之間的鍵而環(huán)化，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的組合物，其中Vaa2和X”aa4是Cys，且其中X”aal任選地是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的組合物，其中Vaa2和X”aa4是Cys，其中V aal、X’ aa2、Vaa3、X”aa2、X”aa3、X”aa4和X”aa5中的任意一個(gè)或多個(gè)與坎普他汀中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且X”aal是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物是包含具有以下序列的環(huán)狀肽的化合物:
Xaal-Cys-Val-Xaa2-Gln-Asp-Xaa2*-Gly-Xaa3-His-Arg-Cys-Xaa4(SEQ ID NO:6);其中:
Xaal 是 lie 、Val, Leu、B1-1le' B1-Val' B1-Leu 或包含 Gly-1le 或 B1-Gly-1le 的二肽，且B1代表第一封端部分； Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物； Xaa3是His、Ala或Ala類似物、Phe、Trp或Trp類似物； Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二 妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、Ala 或 Asn 中的任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被第二封端部分B2替代；且 所述2個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中
Xaal 是 IIe>Val>Leu>Ac-1Ie>Ac-Val>Ac-Leu 或包含 Gly-1le 或 Ac-Gly-1le 白勺二肽；
Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物； Xaa3是His、Ala或Ala類似物、Phe、Trp、或Trp類似物； Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二 妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、Ala、或 Asn 中的任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被-NH2替代。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中Xaa2是具有比Trp更高的疏水性的Trp類似物。
22.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中Xaa2是Trp類似物，其包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分或2個(gè)或更多個(gè)被取代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分。
23.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中Xaa2*是Trp類似物，其具有在吲哚環(huán)上的帶負(fù)電取代基，且不具有與Trp相比增加的疏水性。
24.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中Xaa2*是Trp類似物，其包含在色氨酸的I或5位處的低級(jí)烷氧基或低級(jí)烷基取代基或在色氨酸的5或6位處的鹵素取代基。
25.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中Xaa2*是Trp類似物，其包含在色氨酸的I或5位處的低級(jí)烷氧基或低級(jí)烷基取代基或在色氨酸的5或6位處的鹵素取代基，且Xaa2*是Trp0
26.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物包含具有選自SEQIDNO:9-36的序列的環(huán)狀肽，且包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
27.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物包含具有選自SEQIDNO:14、21、28、29、32、33、34或36的序列的環(huán)狀肽，且包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
28.根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物包含具有SEQID NO:28、32或34的序列的環(huán)狀肽。
29.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有 V aal-X’ aa2_X’ aa3_X’ aa4-Gln-Asp-Xaa-Gly-X”aal-X”aa2-X”aa3_X”aa4-X”aa5(SEQ ID NO:5)的序列的環(huán)狀肽，其中X’aa4和Xaa選自Trp和Trp類似物，其中Vaal、X，aa2、X，aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X” aa4 和 X” aa5 獨(dú)立地選自氨基酸和氨基酸類似物，X’ aa2和X”aa4不是CyS，且所述肽經(jīng)由V aa2和X”aa4之間的鍵而環(huán)化，且其中所述化合物包含細(xì)胞反應(yīng)性部分。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的組合物，其中Vaal、V aa3、X”aa2、X，，aa3和X，，aa5中的任意一個(gè)或多個(gè)與根據(jù)權(quán)利要求18-28中的任一項(xiàng)所述的肽中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且X” aal是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸。
31.根據(jù)權(quán)利要求29所述的組合物，其中X’aa2和X”aa4之一是具有含伯胺或仲胺的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，X’ aa2和X”aa4中的另一個(gè)是具有含羧酸基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，且所述鍵是酰胺鍵。
32.根據(jù)權(quán)利要求29所 述的組合物，其中Vaal、V aa3、X”aal、X”aa2、X”aa3和X”aa5與根據(jù)權(quán)利要求18-28中的任一項(xiàng)所述的環(huán)狀肽中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且其中，任選地，X’ aa2和X”aa4之一是具有含伯胺或仲胺的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，Vaa2和X”aa4中的另一個(gè)是具有含羧酸基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，且所述鍵是酸胺鍵。
33.根據(jù)權(quán)利要求10-32中的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述環(huán)狀肽在N末端被乙?；?，在C末端被酰胺化，或者既在N末端被乙?；衷贑末端被酰胺化。
34.一種分離的細(xì)胞或器官，其具有與其共價(jià)地鍵合的坎普他汀類似物。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的分離的細(xì)胞或器官，其中所述分離的細(xì)胞或器官是人類細(xì)胞或器官。
36.根據(jù)權(quán)利要求34所述的分離的細(xì)胞或器官，其中所述分離的細(xì)胞是血細(xì)胞，或所述分離的器官是心臟、腎、肝、肺或胰腺。
37.一種降低細(xì)胞或器官對(duì)補(bǔ)體依賴性的損傷的敏感性的方法，所述方法包括:使所述細(xì)胞與細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物接觸，其中所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物共價(jià)地結(jié)合所述細(xì)胞或器官。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細(xì)胞或器官是人類細(xì)胞或器官。
39.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細(xì)胞是血細(xì)胞，或所述器官是心臟、腎、肝、肺或胰腺。
40.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細(xì)胞或器官是要移植進(jìn)受試者中的分離的細(xì)胞或器官，且所述方法包括:在移植之前，使所述細(xì)胞或器官與所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物接觸。
41.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細(xì)胞或器官已經(jīng)被移植進(jìn)受試者中，且所述方法包括:在移植之后，使所述器官與所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物接觸。
42.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述方法包括:用包含所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物的流體灌注所述器官。
43.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述方法包括:在將所述器官移植進(jìn)受試者中的過程中，使所述細(xì)胞或器官與所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物接觸。
44.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述方法包括:在將所述細(xì)胞或器官移植進(jìn)受試者中以后，將所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物施用給所述受試者。
45.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述方法包括:在將所述器官移植進(jìn)受試者中以后，將所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物施用給所述受試者，其中將所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物局部地施用給所移植的器官。
46.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述細(xì)胞或器官已經(jīng)或?qū)⒁浦策M(jìn)受試者中，所述受試者處于發(fā)展超急性或急性補(bǔ)體介導(dǎo)的輸血反應(yīng)或器官排斥的高危中。
47.一種治療受試者的方法，所述受試者需要治療補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙，所述方法包括:將細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物施用給所述受試者。
48.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中將所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物局部地施用至處于補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷的風(fēng)險(xiǎn)中的部位或經(jīng)歷補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷的部位。
49.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述障礙會(huì)導(dǎo)致對(duì)紅血細(xì)胞的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷，并血管內(nèi)地施用所述細(xì)胞反應(yīng)性坎普他汀類似物。
50.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述受試者具有補(bǔ)體調(diào)節(jié)缺陷。
51.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述受試者需要治療移植排斥。
52.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述受試者需要治療缺血/再灌注損傷。
53.根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述受試者需要治療溶血性貧血。
54.一種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其包含具有至少20千道爾頓(kD)的分子量的清除率降低部分(CRM)。
55.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含具有20千道爾頓(kD)至IOOkD的分子量的清除率降低部分(CRM)。
56.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含具有至少30千道爾頓(kD)的分子量的清除率降低部分。
57.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含具有至少40千道爾頓(kD)的分子量的清除率降低部分。
58.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含聚乙二醇(PEG)。
59.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含直鏈PEG。
60.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含支鏈PEG。
61.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含直鏈PEG，且包含連接在所述化合物的每個(gè)末端處的坎普他汀類似物部分。
62.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含具有3-10個(gè)分支的支鏈PEG。
63.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含具有3-10個(gè)分支的支鏈PEG，且所述分支中的至少約50%具有與其連接的坎普他汀類似物部分。
64.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含具有3-10個(gè)分支的支鏈PEG，且所述分支中的至少約75%具有與其連接的坎普他汀類似物部分。
65.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述清除率降低部分包含人血清白蛋白。
66.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其包含2-10個(gè)坎普他汀類似物部分。
67.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其包含2-100個(gè)坎普他汀類似物部分。
68.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物具有至少2天的血漿半衰期。
69.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物具有至少3天的血漿半衰期。
70.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物具有至少4天的血漿半衰期。
71.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含清除率降低部分，且其摩爾活性為具有`相同氨基酸序列、但是不包含所述清除率降低部分的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的活性的至少約20%。
72.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物,所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含清除率降低部分，且其摩爾活性為不包含所述清除率降低部分的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的活性的至少約30%。
73.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含多個(gè)坎普他汀類似物部分,且其摩爾活性為所述坎普他汀類似物部分的活性總和的至少約10%。
74.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物,所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含清除率降低部分，且其終末半衰期是可比較劑量的不包含所述CRM的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的終末半衰期的至少5倍。
75.根據(jù)權(quán)利要求54所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物的Cmax是可比較劑量的包含相同氨基酸序列、但是不包含所述清除率降低部分的坎普他汀類似物的Cmax的至少10倍。
76.—種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，其具有至少2天的血漿半衰期。
77.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物具有至少3天的血漿半衰期。
78.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，當(dāng)靜脈內(nèi)地注射進(jìn)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中時(shí)，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物具有至少4天的血漿半衰期。
79.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含清除率降低部分，且其摩爾活性為具有相同氨基酸序列、但是不包含清除率降低部分的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的活性的至少約20%。
80.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含清除率降低部分，且其摩爾活性為包含相同氨基酸序列、但是不包含所述清除率降低部分的坎普他汀類似物的活性的至少約30%。
81.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含多個(gè)坎普他汀類似物部分,且其摩爾活性為所述坎普他汀類似物部分的活性總和的至少約10%。
82.根據(jù)權(quán)利要求76所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物的Cmax是可比較劑量的不包含所述清除率降低部分的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的Cmax的至少10倍。
83.—種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其包含清除率降低部分，且其具有可比較劑量的不包含所述清除率降低部分的對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的至少約30%的活性和所述對(duì)應(yīng)坎普他汀類似物的至少10倍的Cmax,并且具有至少3天的血衆(zhòng)半衰期。
84.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly(SEQ ID NO:3)的核心序列的環(huán)狀肽，其中V aa和Xaa選自Trp和Trp類似物,且其中所述化合物包含清除率降低部分。
85.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有X’ aa-Gln-Asp-Xaa-Gly-X" aa (SEQ ID NO:4)的核心序列的環(huán)狀肽，其中V` aa和Xaa各自獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物，且X” aa選自His、Ala、無支鏈的單甲基氨基酸、Phe, Trp和Trp類似物，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
86.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述肽具有X’aal-X，aa2-X，aa3-X，aa-Gln-Asp-Xaa-Gly-X，，aa-X，，aa2-X，，aa3-X，，aa4-X，，aa5(SEQ ID NO:5)的序列，且X’ aal、X，aa2、X，aa3、X” aa2、X” aa3_X” aa4和X” aa5與坎普他汀中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
87.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有V aal-X’ aa2_X’ aa3_X’ aa4-Gln-Asp-Xaa_Gly-X，，aal-X，，aa2-X，，aa3-X，，aa4-X，，aa5(SEQ ID NO:5)的序列的環(huán)狀肽，其中X’aa4和Xaa選自 Trp 和 Trp 類似物，其中 X’ aal、X’ aa2、X’ aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X” aa4 和 X” aa5獨(dú)立地選自氨基酸和氨基酸類似物，其中所述肽經(jīng)由V aa2和X”aa4之間的鍵而環(huán)化，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
88.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中X’aa2和X”aa4是Cys，且其中X”aal任選地是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
89.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中X’aa2和X”aa4是 Cys，其中 X’ aal、X’ aa2、X’ aa3、X” aa2、X” aa3、X” aa4 和 X” aa5 中的任意一個(gè)或多個(gè)與坎普他汀中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且X”aal是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
90.根據(jù)權(quán)利要求54-83中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述坎普他汀類似物是包含具有以下序列的環(huán)狀肽的化合物:
Xaal-Cys-Val-Xaa2-Gln-Asp-Xaa2*-Gly-Xaa3-His-Arg-Cys-Xaa4(SEQ ID NO:6);其中:
Xaal 是 lie、Val, Leu、B1-1le' B1-Val' B1-Leu 或包含 Gly-1le 或 B1-Gly-1le 的二肽，且BI代表第一封端部分； Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物； Xaa3是His、Ala或Ala類似物、Phe> Trp或Trp類似物； Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二 妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、Ala 或 Asn 中的任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被第二封端部分B2替代；且 所述2個(gè)Cys殘基通過二硫鍵連接，且其中所述化合物包含清除率降低部分。
91.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中 Xaal 是 IIe>Val>Leu>Ac-1Ie>Ac-Val>Ac-Leu 或包含 Gly-1le 或 Ac-Gly-1le 白勺二肽； Xaa2和Xaa2*獨(dú)立地選自Trp和Trp類似物； Xaa3是His、Ala或Ala類似物、Phe、Trp、或Trp類似物； Xaa4 是 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、選自 Thr-Ala 和 Thr-Asn 的二 妝、或包含Thr-Ala-Asn 的三肽，其中 L_Thr、D-Thr> lie、Val、Gly、Ala、或 Asn 中的任一個(gè)的羧基末端-OH任選地被-NH2替代。
92.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中Xaa2是具有比Trp更高的疏水性的Trp類似物。
93.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中Xaa2是Trp類似物，其包含被取代的或未被取代的二環(huán)芳族環(huán)組分或2個(gè)或更多個(gè)被取代的或未被取代的單環(huán)芳族環(huán)組分。
94.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中Xaa2*是Trp類似物，其具有在吲哚環(huán)上的帶負(fù)電取代基，且不具有與Trp相比增加的疏水性。
95.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中Xaa2*是Trp類似物，其包含在色氨酸的I或5位處的低級(jí)烷氧基或低級(jí)烷基取代基或在色氨酸的5或6位處的鹵素取代基。
96.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中Xaa2*是Trp類似物，其包含在色氨酸的I或5位處的低級(jí)烷氧基或低級(jí)烷基取代基或在色氨酸的5或6位處的鹵素取代基，且 Xaa2* 是 Trp。
97.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含具有選自SEQ ID NO:9-36的序列的環(huán)狀肽。
98.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述坎普他汀類似物包含具有選自 SEQ ID NO:14、21、28、29、32、33、34 或 36 的序列的環(huán)狀肽。
99.根據(jù)權(quán)利要求90所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述坎普他汀類似物包含具有SEQ ID NO: 28、32或34的序列的環(huán)狀肽。
100.一種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物是這樣的化合物:所述化合物包含具有 V aal-x’ aa2-x’ aa3_X’ aa4-Gln-Asp-Xaa-Gly-X”aal-X”aa2-X”aa3_X”aa4-X”aa5(SEQ ID NO:5)的序列的環(huán)狀肽，其中V aa4和Xaa選自Trp和Trp類似物，其中Vaal、X，aa2、X，aa3、X” aal、X” aa2、X” aa3、X” aa4 和 X” aa5 獨(dú)立地選自氨基酸和氨基酸類似物，V aa2和V, aa4不是Cys，且所述肽經(jīng)由V aa2和V, aa4之間的鍵而環(huán)化。
101.根據(jù)權(quán)利要求100所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中X’aal、X’aa3、X”aa2、X”aa3和X”aa5中的任意一個(gè)或多個(gè)與根據(jù)權(quán)利要求18-28中的任一項(xiàng)所述的肽中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且X” aal是Ala或無支鏈的單甲基氨基酸。
102.根據(jù)權(quán)利要求100所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中X’aa2和X”aa4之一是具有含伯胺或仲胺的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，X’ aa2和X”aa4中的另一個(gè)是具有含羧酸基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，且所述鍵是酰胺鍵。
103.根據(jù)權(quán)利要求100所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中乂’&&14’&&34”&&14”&&2、X”aa3、和X”aa5與根據(jù)權(quán)利要求18_28中的任一項(xiàng)所述的環(huán)狀肽中的對(duì)應(yīng)位置處的氨基酸相同，且其中，任選地，X’ aa2和X”aa4之一是具有含伯胺或仲胺的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，X’aa2和X”aa4中的另一個(gè)是具有含羧酸基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸或氨基酸類似物，且所述鍵是酰胺鍵。
104.根據(jù)權(quán)利要求84-103中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其中所述環(huán)狀肽在N末端被乙?；?，在C末端被酰胺化，或者既在N末端被乙?；衷贑末端被酰胺化。
105.—種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其包含這樣的化合物:所述化合物包含具有選自SEQID NO:14、21、28、29、32、33、34 或 36 的序列的環(huán)狀肽。
106.根據(jù)權(quán)利要求84-105中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物包含這樣的化合物:所述化合`物中式1-XVI或式A-H中的任一個(gè)的化合物的至少一個(gè)NHS酯已經(jīng)與坎普他汀類似物部分的側(cè)鏈或末端中的氨基反應(yīng)。
107.一種制備長(zhǎng)效坎普他汀類似物的方法，所述方法包括:使式1-XVI或式A-H中的任一個(gè)的化合物與坎普他汀類似物部分反應(yīng)。
108.一種制備長(zhǎng)效坎普他汀類似物的方法，所述方法包括:使式1-XVI或式A-H中的任一個(gè)的化合物與坎普他汀類似物部分反應(yīng)，所述坎普他汀類似物部分包含SEQ ID NO:3-36中的任一個(gè)的氨基酸序列。
109.—種長(zhǎng)效坎普他汀類似物，其根據(jù)權(quán)利要求107-108所述的方法制備，或包含所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物的結(jié)構(gòu)。
110.根據(jù)權(quán)利要求84-106或109中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物，所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物進(jìn)一步包含靶向部分。
111.一種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求54-105中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物和藥學(xué)上可接受的載體。
112.—種藥用級(jí)組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求54-106或109中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
113.—種藥用級(jí)組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求54-106或109中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物和藥學(xué)上可接受的載體。
114.一種降低細(xì)胞或器官對(duì)補(bǔ)體依賴性的損傷的敏感性的方法，所述方法包括:使所述細(xì)胞與根據(jù)權(quán)利要求54-106或109-113中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物或組合物接觸。
115.根據(jù)權(quán)利要求114所述的方法，其中所述細(xì)胞或器官是人細(xì)胞或器官。
116.根據(jù)權(quán)利要求114所述的方法，其中所述細(xì)胞是血細(xì)胞，或所述器官是心臟、腎、肝、肺或胰腺。
117.根據(jù)權(quán)利要求114所述的方法，其中所述方法包括:將所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物或組合物施用給受試者。
118.一種治療受試者的方法，所述受試者需要治療補(bǔ)體介導(dǎo)的障礙，所述方法包括:將根據(jù)權(quán)利要求54-106或109-113中的任一項(xiàng)所述的長(zhǎng)效坎普他汀類似物或組合物施用給所述受試者。
119.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中將所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物局部地施用至處于補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷的風(fēng)險(xiǎn)中的部位或經(jīng)歷補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷的部位。
120.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述障礙會(huì)導(dǎo)致對(duì)紅血細(xì)胞的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷。
121.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述障礙會(huì)導(dǎo)致對(duì)紅血細(xì)胞的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷，且血管內(nèi)地或皮下地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
122.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者具有補(bǔ)體調(diào)節(jié)缺陷。
123.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療移植排斥。
124.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療缺血/再灌注損傷。
125.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療溶血性貧血。
126.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療自身免疫病。
127.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療神經(jīng)性疼痛。
128.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療MPGN。
129.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療視神經(jīng)脊髓炎。
130.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療脊髓損傷。
131.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中所述受試者需要治療哮喘、COPD。
132.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中血管內(nèi)地或皮下地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
133.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中血管內(nèi)地或皮下地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
134.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中靜脈內(nèi)地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
135.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中皮下地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
136.根據(jù)權(quán)利要求118所述的方法，其中肌肉內(nèi)地施用所述長(zhǎng)效坎普他汀類似物。
【文檔編號(hào)】C07K7/00GK103687867SQ201280033181
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2012年5月11日 優(yōu)先權(quán)日:2011年5月11日
【發(fā)明者】塞德里克·弗朗索瓦, 帕斯卡爾·德沙特萊 申請(qǐng)人:阿佩利斯制藥公司