專利名稱：超臨界CO₂萃取的紅蕓豆蛋白硒的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紅蕓豆內(nèi)容物提取方法，特別涉及一種超臨界CO2萃取的紅蕓豆蛋白硒的方法。
背景技術(shù)：
紅蕓豆為山西特產(chǎn)，顆粒碩大、色澤鮮艷，兼有營(yíng)養(yǎng)藥用價(jià)值，歷來(lái)是國(guó)際貿(mào)易市場(chǎng)上的暢銷貨；岢嵐縣地處·晉西北高寒山區(qū)，農(nóng)田面積廣闊，土層深厚，無(wú)霜期短，夏季持續(xù)高溫，降水量又相對(duì)集中，是紅蕓豆種植的理想場(chǎng)所。岢嵐縣全縣紅蕓豆種植面積達(dá)到13萬(wàn)畝，其中新建出口示范基地2萬(wàn)畝，可出口創(chuàng)匯350萬(wàn)美元。實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定種植面積、提高蕓豆品質(zhì)、增加農(nóng)民收入的目標(biāo)。岢嵐縣出產(chǎn)的紅蕓豆經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)富含有硒，硒是動(dòng)物和人體中一些抗氧化酶(谷胱甘肽過(guò)氧化物酶)和硒-P蛋白的重要組成部分，在體內(nèi)起著平衡氧化還原氛圍的作用，研究證明具有提高動(dòng)物免疫力作用，在國(guó)際上硒對(duì)于免疫力影響和癌癥預(yù)防的研究是該領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題。硒已被作為人體必需的微量元素，目前，中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦的成人攝入量為每日50-250微克，而中國(guó)2/3地區(qū)硒攝入量低于最低推薦值，因此，中國(guó)是一個(gè)既有豐富硒資源，又存在大面積硒缺乏地區(qū)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決紅蕓豆種蛋白硒有效提取技術(shù)問(wèn)題，而提供了一種超臨界CO2萃取的紅蕓豆蛋白硒的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是，超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，步驟如下
a、將紅蕓豆干燥粉碎后放入萃取釜中；
b、將超臨界狀態(tài)的CO2注入萃取釜中，在溫度為45 55°C，壓力為1.2 2. OMpa,C02流速為0. 10 O. 15L/min的條件下,萃取3. 5 4. 5小時(shí)；
C、溶有紅蕓豆蛋白硒植物提取物的CO2流體進(jìn)入分離釜，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度48 60和壓力2. OMpa 3. OMpa將紅蕓豆蛋白硒植物提取物分離出來(lái)，CO2氣體經(jīng)壓縮后進(jìn)入萃取釜循環(huán)使用。上述超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法，其中，所述超臨界CO2萃取的優(yōu)選溫度為50°C，壓力為1. 7Mpa，CO2流速為O. 12L/min。上述超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法，其中，所述干燥在溫度低于80°C的烘箱中進(jìn)行，干燥1. 5 2個(gè)小時(shí)，經(jīng)烘干后的紅蕓豆水含量低于10%。上述超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法，其中，萃取所得的紅蕓豆蛋白硒植物提取物中的蛋白硒的含量達(dá)2. 4μ g/ml。本發(fā)明超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法在進(jìn)行萃取前先將紅蕓豆干燥粉碎，克服了由于紅蕓豆外表堅(jiān)硬，CO2流體無(wú)法穿透其外表而導(dǎo)致的提取不完全的缺陷，增加了紅蕓豆與CCV流體的接觸面積，同時(shí)將紅蕓豆粉碎過(guò)40目篩，其粒度剛好使得CO2流體在萃取過(guò)程中順暢流通，與紅蕓豆更加充分地接觸，從而進(jìn)一步提高了紅蕓豆蛋白硒植物提取物的萃取效率。本發(fā)明超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法中所用的C02純度大于或等于99%，CO2為惰性氣體，可在常溫下操作，能有效地防止熱敏性成分和化學(xué)不穩(wěn)定成分的氧化和分解，利用CO2處于超臨界狀態(tài)下具有的高密度、低粘度和擴(kuò)散系數(shù)大的性質(zhì)提取紅蕓豆中的有效成分，然后在用降壓升溫的方法將溶解于CO2流體中的溶質(zhì)分離，起到提取和蒸餾的雙重作用，2. 5 4個(gè)小時(shí)即可完成一個(gè)提取過(guò)程。該方法操作周期短、提取效率高，同時(shí)可以避免有機(jī)溶劑的殘留，另外，由于CO2廉價(jià)易得，一般可回收80%左右，節(jié)約了能源，同時(shí)由于CO2無(wú)燃燒性，使用安全而且對(duì)環(huán)境無(wú)污染。本發(fā)明超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒植物提取物的方法工藝簡(jiǎn)單、操作方便，極大地提聞了生廣效率，提聞了紅蕓 的萃取效率，尤其是大大提聞了紅蕓 蛋白砸植物提取物中蛋白硒的含量。用該方法萃取的紅蕓豆蛋白硒植物提取物，萃取所得的紅蕓豆蛋白硒植物提取物中的蛋白硒的含量達(dá)2. 4μ g/mL，萃取效果明顯。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1，超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，步驟如下將紅蕓豆在80°C的烘箱中烘1. 5個(gè)小時(shí)，經(jīng)烘干后的紅蕓豆含水量為10%，將干燥后的紅蕓豆粉碎過(guò)40目篩，然后將過(guò)篩后的紅蕓豆放入超臨界萃取釜中進(jìn)行萃取。在溫度為50°C，壓力為1. 7Mpa，C02流速為O. 12L/min的條件下，萃取4個(gè)小時(shí)，紅蕓豆蛋白硒植物提取物溶解在超臨界CO2流體中，進(jìn)入分離釜中，經(jīng)過(guò)調(diào)節(jié)溫度和壓力，使溶解在超臨界C02流體中的紅蕓豆蛋白硒植物提取物分離出來(lái)，CO2循環(huán)使用。蛋白硒(有機(jī)硒)的測(cè)定 儀器與試劑
水:為GB/T 6682-2008規(guī)定的三級(jí)水。硝酸優(yōu)級(jí)純。高氯酸優(yōu)級(jí)純。鹽酸優(yōu)級(jí)純?；旌纤釋⑾跛崤c高氯酸按9 I體積混合。氫氧化鈉優(yōu)級(jí)純。硼氫化鈉溶液(8 g/L):稱取8. O g硼氫化鈉(NaBH4),溶于氫氧化鈉溶液(5 g/L)中，然后定容至1000 mL,混勻。鐵氰化鉀(100 g/L):稱取10.0 g鐵氰化鉀[(K3Fe (CN) 6)]，溶于100 mL水中，混勻。硒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液精確稱取100. O mg硒(光譜純)，溶于少量硝酸中，加2 mL高氯酸，置沸水浴中加熱3 h 4 h，冷卻后再加8. 4 mL鹽酸，再置沸水浴中煮2 min，準(zhǔn)確稀釋至1000 mL，其鹽酸濃度為O.1 mol/L，此儲(chǔ)備液濃度為每毫升相當(dāng)于100 μ g硒。硒標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液取100 μ g/mL硒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1. O mL,定容至100 mL,此應(yīng)用液濃度為 lug /mL。鹽酸(6 mol/L):量取50 mL鹽酸緩慢加入40 mL水中，冷卻后定容至100 mL。
過(guò)氧化氫(30 %)。原子熒光光譜儀，帶硒空心陰極燈。電熱板。微波消解系統(tǒng)。天平感量為I mg。粉碎機(jī)。烘箱 操作方法
標(biāo)準(zhǔn)工作曲線分別取 0.00 mL，0. 10 mL，0. 20 mL，0. 30 mL，0. 40 mL，0. 50 mL 標(biāo)準(zhǔn)
應(yīng)用液于15 mL離心管中用去離子水定容至10 mL，再分別加鹽酸2 mL，鐵氰化鉀溶液1. OmL,混勻，制成標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。儀器參考條件負(fù)高壓340 V ;燈電流100 mA ;原子化溫度800 °C;爐高8 mm ；載氣流速500 mL/min ;屏蔽氣流速1000 mL/min ;測(cè)量方式標(biāo)準(zhǔn)曲線法；讀數(shù)方式峰面積；延遲時(shí)間1 s ;讀數(shù)時(shí)間15 s ;加液時(shí)間8 s ;進(jìn)樣體積2 mL。測(cè)定設(shè)定好儀器最佳條件，逐步將爐溫升至所需溫度后，穩(wěn)定10 min 20 min后開(kāi)始測(cè)量。連續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)系列的零管進(jìn)樣，待讀數(shù)穩(wěn)定之后，轉(zhuǎn)入標(biāo)準(zhǔn)系列測(cè)量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。轉(zhuǎn)入試樣測(cè)量，分別測(cè)定試樣空白和試樣消化液，每測(cè)不同的試樣前都應(yīng)清洗進(jìn)樣器。試樣測(cè)定結(jié)果下式子計(jì)算。式中
權(quán)利要求
1.一種超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，其特征是步驟如下 a、將紅蕓豆干燥粉碎后放入萃取釜中； b、將超臨界狀態(tài)的CO2注入萃取釜中，在溫度為45 55°C，壓力為1.2 2. OMpa, CO2流速為0. 10 O. 15L/min的條件下,萃取3. 5 4. 5小時(shí)； C、溶有紅蕓豆蛋白硒植物提取物的CO2流體進(jìn)入分離釜，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度48 60和壓力2.OMpa 3. OMpa將紅蕓豆蛋白硒植物提取物分離出來(lái)，CO2氣體經(jīng)壓縮后進(jìn)入萃取釜循環(huán)使用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，其特征是上所述超臨界CO2萃取的優(yōu)選溫度為50°C，壓力為1. 7Mpa，CO2流速為O. 12L/min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，其特征是所述干燥在溫度低于80°C的烘箱中進(jìn)行，干燥1. 5 2個(gè)小時(shí)，經(jīng)烘干后的紅蕓豆水含量低于10%，粉碎40目。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紅蕓豆內(nèi)容物提取方法，特別涉及一種超臨界CO2萃取的紅蕓豆蛋白硒的方法。解決紅蕓豆種蛋白硒有效提取技術(shù)問(wèn)題，一種超臨界CO2萃取紅蕓豆蛋白硒的方法，步驟如下a、將紅蕓豆干燥粉碎后放入萃取釜中；b、將超臨界狀態(tài)的CO2注入萃取釜中，在溫度為45～55℃，壓力為1.2～2.0Mpa，CO2流速為0.10～0.15L/min的條件下，萃取3.5～4.5小時(shí)；c、將紅蕓豆蛋白硒植物提取物分離出來(lái)，CO2氣體經(jīng)壓縮后進(jìn)入萃取釜循環(huán)使用。用該方法萃取的紅蕓豆蛋白硒植物提取物，萃取所得的紅蕓豆蛋白硒植物提取物中的蛋白硒的含量達(dá)2.4μg/mL，萃取效果明顯。
文檔編號(hào)C07K1/14GK103044519SQ20121045647
公開(kāi)日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月14日
發(fā)明者段峻廷 申請(qǐng)人:山西乾澤生物科技有限公司