一種甲霜靈外消旋體的高效液相色譜拆分方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效液相色譜法拆分手性化合物甲霜靈的方法。本發(fā)明的特征是：采用高效液相色譜系統(tǒng)，填料為纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，以甲醇和水為流動相。從甲霜靈的外消旋體中拆分出高純度的R-甲霜靈和S-甲霜靈。本方法自動化程度高，生產(chǎn)效率高。
【專利說明】一種甲霜靈外消旋體的高效液相色譜拆分方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術領域】，具體涉及一種甲霜靈對映體的拆分方法。
【背景技術】
[0002]甲霜靈(Metalaxyl)，化學名稱為N-(2-甲氧基甲乙酰基)-N_(2，6-二甲基苯基)_外消旋氨基酸甲酯。甲霜靈是新型高效內吸性殺菌劑，可內吸進入植物內，水溶性比一般殺菌劑高得多，可以透入新脂性小的卵菌的細胞膜，起殺菌作用，對卵菌綱中的霜霉菌和疫霉菌具有選擇性特效，例如對馬鈴薯晚疫病、葡萄霜霉病、啤酒花霜霉病、甜菜疫病、油菜白銹病、煙草黑脛病等都有良好的防治效果?？捎糜诠项?、蔬菜、葡萄、煙草等霜霉病，馬鈴薯晚疫病，煙草黑腥病等，持效期長。也可用于棉花猝倒病、谷子白發(fā)病，防治效果也十分理想。甲霜靈是外消旋體，其左旋體(R體)具有更高更強的殺菌性，將左旋體(R體)應用于植物病菌，則殺滅病菌更為徹底，而且藥效持續(xù)時間更久更長，這樣就減少了施藥次數(shù).增長了施藥周期，提高了藥效、節(jié)約了成本、減少了對環(huán)境的污染。雖然甲霜靈從八十年代中期就開始進入中國市場，但是對其拆分的研究目前還處于分析階段。因而建立拆分甲霜靈外消旋體的方法具有很大的經(jīng)濟社會效益。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種甲霜靈對映體的高效液相色譜系統(tǒng)的拆分方法。
[0004]本發(fā)明為實現(xiàn)上述發(fā)明目的采用的技術方案如下:一種甲霜靈對映體的高效液相色譜的拆分方法，其特征在于用纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)為固定相，用甲醇和水的混合物為流動相，用高效液相色譜系統(tǒng)從甲霜靈外消旋物中拆分出高純度的R-甲霜靈和S-甲霜靈，包括一下步驟:` (1)將甲霜靈外消旋體溶于流動相中，濃度為:0~100mg/ml；
(2)用高效液相色譜系統(tǒng)拆分甲霜靈外消旋體；
(3)濃縮得到高純度的兩種甲霜靈對映體。
[0005]本發(fā)明具有以下技術效果:本發(fā)明采用高效液相色譜系統(tǒng)，從甲霜靈的外消旋體中拆分出具有光學純度的甲霜靈對映體，工藝簡單，產(chǎn)品質量穩(wěn)定，溶劑采用甲醇，可回收利用，無污染，實現(xiàn)清潔生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0006]1、色譜柱填料及流動相(溶劑)選擇
填料纖維素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆型手性固定相，采用公知的方法(Okamoto Y , Kawashima M , Hatada K J.Chromatomgr.1986，363:173~186)制備，填料粒度為f 150um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利于分離；但粒徑越小系統(tǒng)壓力越大，最適宜的粒徑范圍是l(T30um。
[0007]流動相(溶劑)為甲醇和水的混合物。[0008]2、分離步驟
樣品用流動相溶解，濃度為(TlOOmg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，纖維素-三(3，5.二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為lOum，流動相為甲醇和水，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經(jīng)HPLC分析純度≥98.0%。
[0009]實施例1
樣品用流動相溶解，濃度為20mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ 10X250mm，纖維素-三(3，5.二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為1011!11，上樣量101^，流動相為甲醇:水=80:20，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經(jīng)HPLC分析純度≥98.0%。
[0010]實施例2
樣品用流動相溶解，濃度為50mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ20X250mm，纖維素-三(3，5.二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為lOum，上樣量80mg，流動相為甲醇:水=85:15，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經(jīng)HPLC分析純度≥98.2%。
[0011]實施例3
樣品用流動相溶解，濃度為100mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ20X250mm，纖維素-三(3，5.二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為10窗，上樣量120mg，流動相為甲醇冰=88:12,等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經(jīng)HPLC分析純度> 98.2%。
【權利要求】
1.一種甲霜靈對映體的高效液相色譜拆分方法，其特征在于:采用高效液相色譜分離系統(tǒng)，流動相為甲醇和水，洗脫方式等度洗脫，色譜柱填料為纖維素-三(3，5.二甲基苯基氨基甲酸酯)，填料粒度l(T30um，操作溫度為2(T40°C。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是:甲醇為色譜純。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是:流動相甲醇與水的體積比(V/V)范圍為7:3~9:1 。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于所述的最適宜的操作溫度為30°C。
【文檔編號】C07C235/16GK103787909SQ201210423165
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年10月30日 優(yōu)先權日:2012年10月30日
【發(fā)明者】張大兵, 居延娟, 李枝玲 申請人:江蘇漢邦科技有限公司