專利名稱：一種樟皮堿b的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種樟皮堿B的制備方法。
背景技術(shù)：
樟皮堿B (Nectandrin B)為木脂素類物質(zhì)，CAS 號 74683-16-2，分子式 C2tlH24O5,分子量 344. 41,樟皮喊 B 來源于樟科(Lauraceae)紅楠 Machilus thunbergii Sieb. etZucc.的樹皮。研究表明，樟皮堿B具有免疫抑制作用，對分裂素(刀豆球蛋白A)誘導(dǎo)的人外周血液淋巴細胞增生有抑制作用，其IC50為3. 30 μ g/ml (9. 6 μ Μ) ；5-脂氧化酶抑制劑，治療因花生四烯酸代謝失調(diào)引起的疾病如炎癥、過敏等；樟皮堿B還是醛糖還原酶抑制劑。通過文獻檢索，國內(nèi)尚未見從紅楠的樹皮中制備樟皮堿B的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種樟皮堿B的制備方法，工藝簡單、提取率高，整個過程具有安全、無毒等優(yōu)點。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的
a.取紅楠的樹皮粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%乙醇溶液為夾帶劑，在萃取壓力20-32MPa、溫度45_60°C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取50_90min，在壓力7_9MPa，溫度30-40°C解析得萃取物；
b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物；
c.上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標成分，冷藏結(jié)晶，得樟皮堿B。步驟a中所述CO2流量為3_5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12_18%。步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，石油醚-丙酮體積比為20-5:3。步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為4-7:7-9:3-5:3-5，下相為流動相，上相為固定相。本發(fā)明的積極效果是
1.采用超臨界CO2萃取，高效無溶劑殘留，對環(huán)境無污染；
2.采用柱層析純化，操作簡單，處理量大；
3.采用高速逆流色譜分離，分離速度快，樣品無損失，溶劑可以循環(huán)使用，適合連續(xù)制備。
具體實施例方式 下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明。實施例I :
紅楠的樹皮粉碎，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力25MPa、溫度45°C，達到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為4ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，動態(tài)萃取90min，在壓力7MPa、溫度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮20: 3、12:3、5:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7:9:4:5混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉(zhuǎn)主機SOOrpm，泵入下相做流動相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2. 5ml/min,同時用固定相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測，純度 98. 2%ο實施例2:
紅楠的樹皮粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力20MPa、溫度50°C，達到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的18%，動態(tài)萃取50min，在壓力9MPa、溫度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮18:3、10:3、5:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5:8:3:4混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉(zhuǎn)主機900rpm，泵 入下相做流動相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min，同時用固定相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測，純度98. 0%。實施例3:
紅楠的樹皮粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力32MPa、溫度60°C，達到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為5ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的16%，動態(tài)萃取80min，在壓力8MPa、溫度30°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮17: 3、9:3、5:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按4:7:5:3混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉(zhuǎn)主機SOOrpm，泵入下相做流動相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，同時用固定相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測，純度
98.1%。
權(quán)利要求
1.一種樟皮堿B的制備方法，其特征在于以下步驟 a.取紅楠的樹皮粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%乙醇溶液為夾帶劑，在萃取壓力20-32MPa、溫度45_60°C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取50_90min，在壓力7_9MPa，溫度30-40°C解析得萃取物； b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物； c.上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標成分，冷藏結(jié)晶，得樟皮堿B。
2.據(jù)權(quán)利要求I所述樟皮堿B的制備方法，其特征在于步驟a中所述CCV流量為3-5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12-18%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述樟皮堿B的制備方法，其特征在于步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，石油醚-丙酮體積比為20-5:3。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述樟皮堿B的制備方法，其特征在于步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為4-7:7-9:3-5:3-5，下相為流動相， 上相為固定相。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種樟皮堿B的制備方法。方法步驟如下a.取紅楠的樹皮粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙醇為夾帶劑進行超臨界CO2萃??；b.萃取物采用中性氧化鎂柱層析進行純化，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物；c.粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標成分，冷藏結(jié)晶，得樟皮堿B。采用本發(fā)明制備樟皮堿B，工藝簡單、效率高，所得產(chǎn)品含量高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D307/12GK102827107SQ20121037188
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司