專利名稱：一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物有效成分提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從筋骨草中提取蛻皮激素的方法。
背景技術(shù)：
植物蛻皮激素是部分植物中含有的一類特異次生代謝物，這類物質(zhì)可以在昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)、農(nóng)林有害昆蟲(chóng)控制、家蠶等經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)養(yǎng)殖以及其他節(jié)肢動(dòng)物的繁育、除治等方面廣泛應(yīng)用。從植物中提取蛻皮激素也成為了現(xiàn)在的研究、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)的熱點(diǎn)。昆明植物所篩選得到蛻皮激素含量很高的植物露水草，已作為工業(yè)生產(chǎn)蛻皮激素的理想植物資源。但是露水草作為一種有限的植物資源很難滿足實(shí)際中的需求，市場(chǎng)中高質(zhì)量蛻皮激素的缺口比較大，這就需要新的原料來(lái)填補(bǔ)。筋骨草是一種含有蛻皮激素、而且原料十分豐富的植物，是替代露水草的理想材料，但筋骨草中蛻皮激素的含量不足露水草的1/4，進(jìn)行有效提取具有一定難度，至今沒(méi)有一種成熟的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種提取純度高、收率高的在筋骨草中提取蛻皮激的方法。本發(fā)明采用了如下的技術(shù)方案
一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，包括以下步驟
(1)取烘干并破碎的筋骨草原料，用6 10倍質(zhì)量的水回流浸提廣3小時(shí)，浸提次數(shù)為2^3次，過(guò)濾，合并各次的濾液，并在0. 09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至原料重量；
(2)離心步驟(1)得到的濃縮液，保留上清液；
(3)向上清液中加入乙醇至終濃度為3(Γ40%，在室溫下靜置3小時(shí)以上，讓雜質(zhì)充分沉
淀；
(4)離心步驟(3)得到的溶液，保留上清液，在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至原料重量，同時(shí)回收乙醇；
(5)將步驟(4)中得到的濃縮液過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂；
(6)先用5%的乙醇洗脫、再用30 40%的乙醇洗脫，保留30 40%乙醇的脫附液；
(7)將步驟(6)中的脫附液在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；
(8)在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓蒸發(fā)步驟(7)得到的乙酸乙酯層，使蛻皮激素結(jié)
曰
曰曰；
(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。本發(fā)明提供了一種成熟的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，具備以下優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明采用水浸提，乙醇用量小，節(jié)約了成本；(2)通過(guò)乙醇沉淀和低濃度乙醇洗脫的方式除去雜質(zhì)，提高了蛻皮激素成品的純度。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，其特征在于，包括以下步驟
(1)取烘干并破碎的筋骨草原料，用6倍質(zhì)量的水回流浸提3小時(shí)，浸提次數(shù)為3次，過(guò)濾，合并各次的濾液，并在0. 09MPa、55°C的條件下減壓濃縮至原料重量；
(2)離心步驟(1)得到的濃縮液，保留上清液；
(3)向上清液中加入乙醇至終濃度為30%，在室溫下靜置3小時(shí)，讓雜質(zhì)充分沉淀；
(4)離心步驟(3)得到的溶液，保留上清液，在0.09MPa、55°C的條件下減壓濃縮至原料重量，同時(shí)回收乙醇；
(5)將步驟(4)中得到的濃縮液過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂，流速控制為0.5BV/h ；
(6)先用5%的乙醇洗脫、再用30%的乙醇洗脫，保留30%乙醇的脫附液；
(7)將步驟(6)中的脫附液減壓濃縮在0.09MPa、55°C的條件下至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；
(8)在0.09MPa、55°C的條件下減壓蒸發(fā)步驟(7)得到的乙酸乙酯層，使蛻皮激素結(jié)晶；
(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。實(shí)施例1制得的蛻皮激素成品中蛻皮激素的含量為91. 7%，收率為0. 0813%。實(shí)施例2
一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，包括以下步驟
(1)取烘干并破碎的筋骨草原料，用8倍質(zhì)量的水回流浸提2小時(shí)，浸提次數(shù)為2次，過(guò)濾，合并各次的濾液，并在0. 09MPa、60°C的條件下減壓濃縮至原料重量；
(2)離心步驟(1)得到的濃縮液，保留上清液；
(3)向上清液中加入乙醇至終濃度為35%，在室溫下靜置4小時(shí)，讓雜質(zhì)充分沉淀；
(4)離心步驟(3)得到的溶液，保留上清液，在0.09MPa、60°C的條件下減壓濃縮至原料重量，同時(shí)回收乙醇；
(5)將步驟(4)中得到的濃縮液過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂，流速控制為lBV/h；
(6)先用5%的乙醇洗脫、再用35%的乙醇洗脫，保留35%乙醇的脫附液；
(7)將步驟(6)中的脫附液減壓濃縮在0.09MPa、60°C的條件下至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；
(8)在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓蒸發(fā)步驟(7)得到的乙酸乙酯層，使蛻皮激素結(jié)
曰
曰曰；
(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。實(shí)施例2制得的蛻皮激素成品中蛻皮激素的含量為93. 0%，收率為0. 0925%。實(shí)施例3
一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，包括以下步驟
(1)取烘干并破碎的筋骨草原料，用10倍質(zhì)量的水回流浸提1小時(shí)，浸提次數(shù)為2次，過(guò)濾，合并各次的濾液，并在0. 09MPa、55°C的條件下減壓濃縮至原料重量；
(2)離心步驟(1)得到的濃縮液，保留上清液；(3)向上清液中加入乙醇至終濃度為40%，在室溫下靜置5小時(shí)，讓雜質(zhì)充分沉淀；
(4)離心步驟(3)得到的溶液，保留上清液，在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至原料重量，同時(shí)回收乙醇；
(5)將步驟(4)中得到的濃縮液過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂，流速控制為1.5BV/h ；
(6)先用5%的乙醇洗脫、再用40%的乙醇洗脫，保留3(Γ40%乙醇的脫附液；
(7)將步驟(6)中的脫附液減壓濃縮在0.09MPa、55°C的條件下至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；
(8)在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓蒸發(fā)步驟(7)得到的乙酸乙酯層，使蛻皮激素結(jié)
曰
曰曰；
(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。實(shí)施例3制得的蛻皮激素成品中蛻皮激素的含量為92. 17%，收率為0. 0827%。比較分析實(shí)施例廣3，乙醇濃度為35%時(shí)，蛻皮激素的溶解度高，而雜質(zhì)的溶解度低，為最優(yōu)的沉淀雜質(zhì)和洗脫蛻皮激素的乙醇濃度；而當(dāng)步驟(4)中將過(guò)柱流速控制為lBV/h時(shí)，CAD-40大孔樹(shù)脂對(duì)蛻皮激素有最好吸附效果。
權(quán)利要求
1.一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，其特征在于，包括以下步驟(1)取烘干并破碎的筋骨草原料，用6 10倍質(zhì)量的水回流浸提廣3小時(shí)，浸提次數(shù)為2^3次，過(guò)濾，合并各次的濾液，并在0. 09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至原料重量；(2)離心步驟(1)得到的濃縮液，保留上清液；(3)向上清液中加入乙醇至終濃度為3(Γ40%，在室溫下靜置3小時(shí)以上，讓雜質(zhì)充分沉淀；(4)離心步驟(3)得到的溶液，保留上清液，在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至原料重量，同時(shí)回收乙醇；(5)將步驟(4)中得到的濃縮液過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂；(6)先用5%的乙醇洗脫、再用30 40%的乙醇洗脫，保留30 40%乙醇的脫附液；(7)將步驟(6)中的脫附液在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓濃縮至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；(8)在0.09MPa、55-60°C的條件下減壓蒸發(fā)步驟(7)得到的乙酸乙酯層，使蛻皮激素結(jié)曰曰曰；(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。
2.如權(quán)利要求1所述的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，其特征在于，步驟(3)中向上清液中加入乙醇至終濃度為35%。
3.如權(quán)利要求1所述的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，其特征在于，步驟(5)的第二次洗脫用35%的乙醇。
4.如權(quán)利要求1所述的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，其特征在于，步驟(5)中將流速控制為lBV/h。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，包括以下步驟(1)用6~10倍質(zhì)量的水回流浸提筋骨草2~3次，每次1~3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液并減壓濃縮；(2)離心，保留上清液；(3)向上清液中加入乙醇沉淀雜質(zhì)；(4)離心，保留上清液，減壓濃縮；(5)過(guò)CAD-40大孔樹(shù)脂；(6)依次用5%、35%的乙醇洗脫，保留后者的脫附液；(7)減壓濃縮至無(wú)醇味，用等量乙酸乙酯萃取2次，保留乙酸乙酯層；(8)減壓蒸發(fā)結(jié)晶；(9)干燥晶體即得成品蛻皮激素。本發(fā)明提供了一種成熟的從筋骨草中提取蛻皮激素的方法，采用水浸提，乙醇用量小，節(jié)約成本；通過(guò)乙醇沉淀和低濃度乙醇洗脫的方式除去雜質(zhì)，保證了蛻皮激素成品的純度。
文檔編號(hào)C07J9/00GK102558269SQ201110449099
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2011年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月29日
發(fā)明者侯飛, 杜大慶, 聶復(fù)禮, 馬全民 申請(qǐng)人:浙江惠松制藥有限公司