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一種脂肽的水解方法

文檔序號(hào):3584345閱讀:609來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:一種脂肽的水解方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及脂肽,尤其是涉及一種脂肽的水解方法。
背景技術(shù)
脂肽是由肽鏈和脂肪鏈所組成的具有生物活性物質(zhì),脂肽在酸性、堿性、酶等條件下發(fā)生水解,水解的最終產(chǎn)物是氨基酸和脂肪酸。目前大部分行業(yè),如化妝品,藥品和食品行業(yè),多采用酶法水解進(jìn)行生產(chǎn)。該方法具有水解位點(diǎn)特定,反應(yīng)時(shí)間短,PH溫和等特點(diǎn),但是酶制劑的成本偏高,對(duì)反應(yīng)環(huán)境要求嚴(yán)格,還有后續(xù)滅活等問(wèn)題。現(xiàn)有技術(shù)脂肽酸水解采用的條件6mol/L鹽酸,110°C _150°C水解,現(xiàn)有技術(shù)存在主要問(wèn)題是由于水解溫度高,脂肽的羥基脂肪酸殘基會(huì)脫水成為烯酸,導(dǎo)致副產(chǎn)物增多;工業(yè)生產(chǎn)操作困難,能耗大,反應(yīng)需要壓力容器控制,存在安全隱患。同樣,堿性水解中也存在羥基脂肪酸脫水嚴(yán)重的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可在保證了水解率的同時(shí),減少副反應(yīng)的發(fā)生,提高產(chǎn)物的純度的脂肽的水解方法。本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種脂肽的水解方法,其特征在于, 該方法包括以下步驟將脂肽加入酸溶液中,放置在加熱裝置中反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。所述的酸溶液為濃度為6. Omol/L的鹽酸溶液。所述的加熱裝置溫度為80°C、90°C、IOO0C。所述的加熱裝置溫度為90°C。所述的脂肽與酸的質(zhì)量比為1 (50 250)。所述的脂肽是由肽鏈和脂肪鏈所組成的具有生物活性物質(zhì)。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明使脂肽酸性水解的溫度降低了 10-30°C,減少了副產(chǎn)物、 大幅度降低了能耗,解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。


圖1本發(fā)明技術(shù)脂肽水解樣品獲得羥基脂肪酸甲脂化產(chǎn)物的總離子色譜圖;圖2現(xiàn)有技術(shù)脂肽水解樣品獲得羥基脂肪酸甲脂化產(chǎn)物的總離子色譜圖;圖3本發(fā)明技術(shù)羥基脂肪酸脫水產(chǎn)生的烯酸甲酯化產(chǎn)物的質(zhì)譜圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1 脂肽水解取5. Omg脂肽樣品于反應(yīng)瓶中,加入l.OmL 6. Omol/L鹽酸溶液使之溶解,分別放置在80°c、90°c、10(rc和110°C的烘箱中反應(yīng)20h。反應(yīng)完畢,用甲醇全部轉(zhuǎn)移至25mL 比色管。加入4倍體積的去離子水,混勻后,用乙醚萃取三次,收集有機(jī)層并用水洗滌,常溫常壓干燥除去溶劑和水分。干燥后,加入1.0mol/LH2S04/CH30H(l/10, v/v),55°C下酯化6小時(shí)。用乙醚萃取三次,收集有機(jī)層并用水洗滌,常溫常壓干燥除去溶劑和水分,待測(cè)GC-MS。使用Agilent的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(6890GC,5975MSD),使用HP-5MS色譜柱 (30mX0. 25mmX0. 25 μ m, Agilent)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明技術(shù)90°C和現(xiàn)有技術(shù)110°C條件下水解得到的色譜圖結(jié)果分別如圖1和圖2所示。圖1-2中分別標(biāo)示了 6個(gè)β -羥基脂肪酸酯和4個(gè)脫水烯酸酯,這4個(gè)峰的質(zhì)譜圖如圖3所示。對(duì)羥基脂肪酸酯和烯酸酯的色譜峰進(jìn)行積分,以峰面積進(jìn)行計(jì)算,定義如下公式烯酸峰面積總量(U)=烯酸峰面積總和(Un-isoC14+Un_n C14+Un_iso C15+Un_anti
C15)羥基脂肪酸峰面積總量(H)=羥基脂肪酸峰面積總和(iso C13+anti C13+iso C14+n C14+iso C15+anti C15)注公式中Un-iso Cw為脫水異構(gòu)十四碳羥基脂肪酸;Un-n C14為脫水正構(gòu)十四碳羥基脂肪酸,Un-iso C15為脫水異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸;Un-anti C15為脫水反異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸。iso C13為異構(gòu)十三碳羥基脂肪酸;anti C13為反異構(gòu)十三碳羥基脂肪酸;iso C14 為異構(gòu)十四碳羥基脂肪酸;η C14為正構(gòu)十四碳羥基脂肪酸;iso C15為異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸,anti C15為反異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸。按下式計(jì)算脫水率
脫水率(D)
U+ H表1脂肽酸性水解數(shù)據(jù)表
水解條件
鹽酸溶液·時(shí)間溫度■ UHDhr0C(χ:106)%800.2010.7026.0 mol/L20發(fā)明技術(shù)90 1000.69 2.2212.60 10.905 17現(xiàn)有技術(shù)1104.188.0934 由表1可見(jiàn),在酸解條件下,本發(fā)明技術(shù)80°C、9(TC、10(rC水解得到的羥基脂肪酸總量(H)是現(xiàn)有技術(shù)110°C水解得到羥基脂肪酸總量的1.3 1.6倍,并且本發(fā)明技術(shù) 80°C、90°C、100°C水解的脫水率(D)為現(xiàn)有技術(shù)110°C下水解脫水率的1/17 1/2。
實(shí)施例2一種脂肽的水解方法,該方法包括以下步驟將脂肽加入6. Omol/L的鹽酸溶液中,脂肽與鹽酸的質(zhì)量比為1 250,放置在加熱裝置中于90°C加熱反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。實(shí)施例3一種脂肽的水解方法,該方法包括以下步驟將脂肽加入6. Omol/L的鹽酸溶液中,脂肽與鹽酸的質(zhì)量比為1 50,放置在加熱裝置中于80°C加熱反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。實(shí)施例4一種脂肽的水解方法,該方法包括以下步驟將脂肽加入6. Omol/L的鹽酸溶液中,脂肽與鹽酸的質(zhì)量比為1 150,放置在加熱裝置中于80°C加熱反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。實(shí)施例4一種脂肽的水解方法,該方法包括以下步驟將脂肽加入6. 0mol/L的鹽酸溶液中,脂肽與鹽酸的質(zhì)量比為1 200,放置在加熱裝置中于80°C加熱反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。
權(quán)利要求
1.一種脂肽的水解方法,其特征在于,該方法包括以下步驟將脂肽加入酸溶液中,放置在加熱裝置中反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽的水解方法,其特征在于,所述的酸溶液為濃度為 6. Omol/L的鹽酸溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽的水解方法,其特征在于,所述的加熱裝置溫度為 80°C、90°C、100°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種脂肽的水解方法,其特征在于,所述的加熱裝置溫度為 90 "C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽的水解方法,其特征在于,所述的脂肽與酸的質(zhì)量比為 1 (50 250)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽的水解方法,其特征在于,所述的脂肽是由肽鏈和脂肪鏈所組成的具有生物活性物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種脂肽的水解方法,該方法包括以下步驟將脂肽加入酸溶液中,放置在加熱裝置中反應(yīng)20h,即得脂肽水解液。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有可在保證了水解率的同時(shí),減少副反應(yīng)的發(fā)生,提高產(chǎn)物的純度等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07K1/12GK102276685SQ20111023054
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月11日
發(fā)明者劉金峰, 楊世忠, 牟伯中, 趙越 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué)
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