專利名稱：一種純化白當(dāng)歸素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種采用高速逆流色譜技術(shù)純化白當(dāng)歸素方法。
背景技術(shù)：
白當(dāng)歸素(Byakangelicin)又叫比克白芷內(nèi)脂，為呋喃香豆素類化合物，分子式 C17O18O7,分子量334，分子結(jié)構(gòu)式為白當(dāng)歸素為淡黃色微細(xì)針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)124-125°，能溶于乙醇、乙醚、乙酸乙酯、 丙酮等溶劑，不溶于水。研究表明，白當(dāng)歸素有對(duì)HeLa人體癌細(xì)胞有細(xì)胞毒活性。白當(dāng)歸素在傘型科植物白芷或杭白芷中含量較高。現(xiàn)有從白芷藥材中分離白當(dāng)歸素的方法多是采用重結(jié)晶和填充柱色譜法分離。1938年日本學(xué)者野口敬身等從白芷的乙醚提取物中分離出白當(dāng)歸素，隨后秦清之等采用硅膠柱法分離出白當(dāng)歸素等成分。我國專利中有采用大孔樹脂和制備液相分離方法，如專利(申請?zhí)?00810200253. 8) “白芷中單體化合物的分離純化方法”。而專利(申請?zhí)?00910232803.9) “一種白當(dāng)歸素的制備方法”該專利公開的方法是超臨界(X)2萃取和重結(jié)晶方法。由于白芷中還有多種香豆素成分， 現(xiàn)有純化方法存在收率低，操作復(fù)雜等技術(shù)缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷，提供一種純化純化白當(dāng)歸素方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種純化白當(dāng)歸素的方法，其特征在于取白芷藥材粉碎，加6-10倍量80-90%乙醇超聲提取2-3次，提取液減壓回收試劑，濃縮液乙酸乙酯萃取，萃取液回收試劑，再采用高速逆流色譜分離，根據(jù)紫外檢測器圖譜收集目的成分，濃縮小體積冷藏結(jié)晶即得。所述的高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)為正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水組成，配比為 4-5 3-5 5-6 3-4。取上相為流動(dòng)相，下相為固定相，也可由氯仿、甲醇、水組成，配比為4-7 3-5 2-6，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相。
本發(fā)明在超聲提取時(shí)，選用超聲波功率3_20kw，超聲頻率20-60KHZ。本發(fā)明在高速逆流色譜分離萃取物時(shí)，主機(jī)轉(zhuǎn)速控制在700-1000rpm，流動(dòng)相流速為 l-3ml/min。本發(fā)明優(yōu)勢在于方法采用超聲提取，提取時(shí)間短，提取效率高；方法采用高速逆流色譜分離，分離過程無產(chǎn)品損失，制備周期短，制備量大，易操作，克服了傳統(tǒng)填充柱分離過程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現(xiàn)性差的技術(shù)缺陷。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 白芷藥材粉碎，取5kg加入超聲提取罐中，加10倍量90 %乙醇超聲提取，開啟功率 2kw,頻率40KHZ，提取60min，濾出液體，再加入6倍量乙醇超聲30min，合并兩次提取液減壓回收乙醇，加適量水，放入分液漏斗，加入乙酸乙酯萃取3次，萃取液濃縮至小體積。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按4 :5:6: 3比例混合，靜置分層，取下相注入高速逆流色譜柱， 開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為700rpm，同時(shí)以5ml/min的流速泵入上相，待整個(gè)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡后，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為2ml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標(biāo)流分，減壓濃縮后冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出低溫干燥得8. 5g，經(jīng)HPLC檢測，含量98. 4%。實(shí)施例2:白芷藥材粉碎，取5kg加入超聲提取罐中，加7倍量80%乙醇超聲提取，乙醇超聲提取3次，合并提取液減壓回收乙醇，加適量水，放入分液漏斗，加入乙酸乙酯萃取3次，萃取液濃縮至小體積。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5 :4:6: 4比例混合，靜置分層，取下相注入高速逆流色譜柱，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為lOOOrpm，同時(shí)以6ml/min的流速泵入上相，待整個(gè)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡后，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為3ml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標(biāo)流分，減壓濃縮后冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出低溫干燥得7. Sg,經(jīng)HPLC檢測， 含量98. 1% ο實(shí)施例3:白芷藥材粉碎，取5kg加入超聲提取罐中，加7倍量80%乙醇超聲提取，乙醇超聲提取3次，合并提取液減壓回收乙醇，加適量水，放入分液漏斗，加入乙酸乙酯萃取3次，萃取液濃縮至小體積。取氯仿、甲醇、水按5 5 3比例混合，靜置分層，取上相注入高速逆流色譜柱，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為900rpm，同時(shí)以6ml/min的流速泵入下相，待整個(gè)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡后，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為2ml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標(biāo)流分，減壓濃縮后冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出低溫干燥得8. 2g，經(jīng)HPLC檢測，含量98. 5%。實(shí)施例4:白芷藥材粉碎，取5kg加入超聲提取罐中，加7倍量80%乙醇超聲提取，乙醇超聲提取3次，合并提取液減壓回收乙醇，加適量水，放入分液漏斗，加入乙酸乙酯萃取3次，萃取液濃縮至小體積。取氯仿、甲醇、水按5 5 3比例混合，靜置分層，取上相注入高速逆流色譜柱，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為800rpm，同時(shí)以6ml/min的流速泵入下相，待整個(gè)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡后，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為2ml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集目標(biāo)流分，減壓濃縮后冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出低溫干燥得7. 7g，經(jīng)HPLC檢測，含量98. 8%。
權(quán)利要求
1.一種純化白當(dāng)歸素的方法，其特征在于取白芷藥材粉碎，加6-10倍量80-90%乙醇超聲提取2-3次，提取液減壓回收試劑，濃縮液乙酸乙酯萃取，萃取液回收試劑，再采用高速逆流色譜分離，根據(jù)紫外檢測器圖譜收集目的成分，濃縮小體積冷藏結(jié)晶即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述純化白當(dāng)歸素的方法，其特征在于所述的高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)為正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水組成，配比為4-5 3-5 5-6 3-4，取上相為流動(dòng)相，下相為固定相，也可由氯仿、甲醇、水組成，配比為4-7 3-5 2-6，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種純化白當(dāng)歸素的方法，其特征在于取白芷藥材粉碎，加6-10倍量80-90％乙醇超聲提取2-3次，提取液減壓回收試劑，濃縮液用乙酸乙酯萃取，萃取液回收試劑，再采用高速逆流色譜分離，根據(jù)紫外檢測器圖譜收集目的成分，濃縮小體積冷藏結(jié)晶即得。采用本發(fā)明制備白當(dāng)歸素，工藝簡單易操作，收率高，產(chǎn)品含量高，適合規(guī)?；苽?。
文檔編號(hào)C07D493/04GK102250108SQ201110151708
公開日2011年11月23日 申請日期2011年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月7日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司