專利名稱:一種細胞色素c溶液的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于化工技術(shù)領(lǐng)域,尤其是涉及一種細胞色素C溶液的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù):
細胞色素c也稱細丙,是一種以鐵卟啉為輔基的呼吸酶,在生物氧化過程中,它是一個非常重要的電子傳遞體,其作用原理為在酶存在的情況下,對組織的氧化、還原有迅速的酶促作用。通常外源性細胞色素c不能進入健康細胞,但在缺氧時,細胞膜的通透性增加,細胞色素C有可能進入細胞及線粒體內(nèi),增強細胞氧化,提高氧的利用。細胞色素c為細胞呼吸激動劑,用作組織缺氧治療的急救和輔助用藥,如一氧化碳中毒,安眠藥中毒,也用于腦血管障礙,中風后遺癥的治療。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡單,收率較高的細胞色素c溶液的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的優(yōu)點用該方法生產(chǎn)的細胞色素c溶液工藝簡單,穩(wěn)定,成本低廉,收率達85%以上。本發(fā)明在酸水提取液采用了吸附材料A,以及對細胞色素c溶液粗品,經(jīng)離子交換樹脂處理,得優(yōu)質(zhì)的細胞色素c溶液精品,可用于臨床。本發(fā)明的技術(shù)方案為一種細胞色素c溶液的生產(chǎn)方法,其工藝過程如下A)取經(jīng)獸醫(yī)檢驗合格的哺乳動物;B)哺乳動物的心肌經(jīng)酸水提?。籆)酸水提取液經(jīng)吸附材料A吸附后用無機鹽水溶液洗脫;D)洗脫液用無機鹽調(diào)節(jié)至比重達1. 22-1. 44 ;E)洗脫液用三氯乙酸沉淀,過濾得沉淀物;F)沉淀物用水溶解后用透析法純化,經(jīng)檢驗合格后,得細胞色素c溶液粗品;G)細胞色素c溶液粗品,經(jīng)離子交換樹脂吸附后,用無機鹽水溶液洗脫;H)洗脫液用透析法純化,經(jīng)檢驗合格后,得細胞色素c溶液精品,與_5°C以下保存。
具體實施例方式下面用實施例進一步描述本發(fā)明,有利于對本發(fā)明及其優(yōu)點,效果更好的了解,但所述實施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。實施例A)取經(jīng)獸醫(yī)檢驗合格的哺乳動物。B)哺乳動物的心肌10Kg,加入15Kg純化水,用2mol/L硫酸調(diào)pH4. 0,機械攪拌3 小時。靜置0. 5小時后,離心過濾,得酸水提取液約20Kg。C)酸水提取液用anol/L氨水調(diào)pH8. 0,按4%量(w/v)加吸附劑吸附樹脂,分三次攪拌吸附。將已經(jīng)吸附的吸附樹脂用純化水沖洗干凈后上柱,用硫酸銨(dl. 15)洗脫,得洗脫液。D)洗脫液用硫酸銨調(diào)節(jié)至比重達1. 22-1. 44 ;E)洗脫液按照每IOOOml加20%三氯乙酸25ml產(chǎn)生沉淀,過濾得沉淀物。F)沉淀物用水溶解后用透析袋進行透析法純化,經(jīng)檢驗合格后,得細胞色素c溶液粗品。G)細胞色素c溶液粗品,經(jīng)離子交換樹脂M 800吸附后,用0. 59mol/LNaCl和 90mmol/L Na2HPO4 溶液洗脫。H)洗脫液裝入透析袋,用透析法純化,經(jīng)檢驗合格后,得細胞色素c溶液精品, 于-5°C以下保存。
權(quán)利要求
1.一種細胞色素C溶液的生產(chǎn)工藝,其特征是以哺乳動物心制取細胞色素c溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的一種細胞色素c的生產(chǎn)方法,其特征在于,所述的哺乳動物為豬、狗、牛、羊、馬中的一種,優(yōu)選為豬、牛。
3.根據(jù)權(quán)利要求書1或2所述的細胞色素c溶液的生產(chǎn)工藝,其特征是取哺乳動物心臟經(jīng)酸水提取,吸附材料A吸附,酸水洗脫,鹽析,沉淀及透析法制取細胞色素c溶液粗品。 粗品經(jīng)離子交換純化,最終得到精制細胞色素c溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了以哺乳動物心提取細胞色素c溶液的生產(chǎn)方法。將哺乳動物心臟經(jīng)酸水提取,吸附材料吸附,酸水洗脫,鹽析,沉淀及透析法制得細胞色素c溶液粗品,粗品經(jīng)離子交換純化,最終精制得細胞色素c溶液。
文檔編號C07K1/18GK102206265SQ20111009475
公開日2011年10月5日 申請日期2011年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月15日
發(fā)明者金榮富, 陳學鋒, 陳靜 申請人:安徽宏業(yè)藥業(yè)有限公司