專利名稱：一種從大青葉中制備靛玉紅的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從大青葉中制備靛玉紅的方法，該方法是一種采用酸化醇提、氧 化鋁短柱分離、重結(jié)晶制備靛玉紅的方法。
背景技術(shù)：
靛玉紅又叫炮彈樹堿B。分子式C16H10N202分子量262·26性狀暗紅色針狀結(jié)晶，mp 356 358°C溶于乙酸乙酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙 醚，微溶于乙醇和醋酸，不溶于水。靛玉紅為一雙吲哚類生物堿。對多種移植性動物腫瘤有抑制作用，能破壞白血病 細(xì)胞；在其作用下，變性壞死的細(xì)胞多呈腫脹、溶解性壞死。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，靛玉紅還能增強(qiáng) 動物的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬能力。靛玉紅為我國首創(chuàng)的新型結(jié)構(gòu)的抗白血病藥物。目前國內(nèi)用于研究的靛玉紅有3種來源即從中藥大青葉和青黛中提取的天然產(chǎn) 物、半合成、全合成靛玉紅?，F(xiàn)有從大青葉制備靛玉紅的工藝研究很少，公開方法也不詳細(xì)。如謝國祥等在《中 成藥》第28卷第6期2006年發(fā)表的“大青葉中靛玉紅的提取分離工藝研究”，文獻(xiàn)中所公 開的方法是采用95%的乙醇，濃縮成浸膏，加3倍量水溶解，水溶液過大孔樹脂柱。取上清 液濃縮至干，堿性氧化鋁以氯仿一醋酸乙酯洗脫，洗脫液經(jīng)濃縮得紫紅色末，用甲醇.乙酸 乙酯重結(jié)晶。該工藝周期長、生產(chǎn)成本高，況且靛玉紅不溶于水，在大孔樹脂吸附步驟很難 實(shí)現(xiàn)，氧化鋁柱分離裝柱步驟，沒有詳細(xì)的公開操作。其他文獻(xiàn)多是介紹利用超聲、微波、超 臨界C02萃取等手段提高提取率和縮短提取時間，如李慧等人在《第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》上發(fā) 表的“大青葉中靛玉紅的超臨界萃取工藝及含量測定”，文獻(xiàn)所公開的方法只是詳細(xì)介紹超 臨界萃取的步驟，提取率介紹。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是提供一種從大青葉中制備靛玉紅的新方法。該方法簡單易操作，提高收 率，縮短生產(chǎn)周期。本發(fā)明的目的是這樣來實(shí)現(xiàn)的一種從大青葉中制備靛玉紅的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將大青葉原料粉碎20-40目，加入2-3%鹽酸溶液浸濕，加入60_80%甲 醇溶液提取2-3次，合并提取液；2)將上述第一次或前兩次提取液合并加入其量的0. 5-1 %活性炭回流脫色，濾 過，加入濃氨水調(diào)節(jié)PH至9-10，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，熱水洗滌中性，得粗結(jié)晶，母液調(diào)至中 性，做提取溶液用；3)柱分離將上述結(jié)晶物干燥分水，加入氧化鋁拌樣，裝入短粗柱，二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集紫紅色洗脫液，減壓回收試劑至1/4-1/5，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶將上述結(jié)晶物濾出，依次用乙酸乙酯甲醇混合溶液、乙酸乙酯重結(jié)晶， 干燥即得。所述提取條件每次乙醇加入原料的6-10倍量，回流提取，提取時間1-2小時。所述柱分離條件氧化鋁為120-160目中性氧化鋁，粗結(jié)晶和氧化鋁1 1_2混 合拌樣，再和純凈氧化鋁1 5-7裝柱，先3-4倍柱體積二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗 脫，再用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色色液體流出，改用二氯甲烷和乙酸乙酯 1 2-3洗脫至無紅色液體流出。所述的重結(jié)晶條件乙酸乙酯回流飽和溶解再加入其體積的1/10-1/15甲醇結(jié) 晶，乙酸乙酯回流飽和溶解結(jié)晶。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)鹽酸溶液浸濕原料，有利提高提取率，縮短提取 時間；氨水調(diào)節(jié)PH，有利于靛玉紅結(jié)晶，減少了雜質(zhì)的析出，減少了后序氧化鋁和洗脫劑的 用量，母液無需濃縮直接加入原料作提取溶劑，降低能耗和提取成本；不同極性洗脫劑洗 脫，除雜效果好，不同試劑結(jié)晶，產(chǎn)品含量高。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎20目，稱取20kg加入500L提取罐，用5L2%鹽酸溶液 浸濕后加入200L80%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，再加入160L80%甲醇溶液，回 流提取1小時，抽濾溶液，合并，得提取液320L，繼續(xù)加入120L80%甲醇溶液回流提取1小 時，套入下次提取用。提取液加入3. 2kg活性炭脫色1小時，過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié)PH 至10，放置結(jié)晶10小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物至中性，干燥得固體500g粉碎加 lkgl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑40cm短粗柱底部加2. 5kg純凈氧化鋁再加 入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先用12L 二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗 脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色色液體流出，再用二氯甲烷和 乙酸乙酯1 2洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液體，回收試劑至原體積的1/4，放置結(jié) 晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物23g，用乙酸乙酯回流飽和溶解再緩慢加入 其體積1/10的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用乙酸乙酯回流飽和溶解放置結(jié)晶，得 產(chǎn)品15g，含量98%。實(shí)施例2 取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎40目，稱取20kg加入500L提取罐，用5L3%鹽酸溶液 浸濕后加入200L60%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，再加入120L60%甲醇溶液，回 流提取1小時，抽濾溶液，合并，得提取液280L，繼續(xù)加入120L60%甲醇溶液回流提取1小 時，套入下次提取用。提取液加入1. 4kg活性炭脫色0. 5小時，過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié) PH至9，放置結(jié)晶8小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物至中性，干燥得固體510g粉碎加 510gl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑40cm短粗柱底部加3. 5kg純凈氧化鋁再加 入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先用15L 二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色色液體流出，再用二氯甲烷和乙酸乙酯1 3洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液體，回收試劑至原體積的1/5，放置結(jié) 晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物26g，用乙酸乙酯回流飽和溶解再緩慢加入 其體積1/15的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用乙酸乙酯回流飽和溶解放置結(jié)晶，得 產(chǎn)品14g，含量98. 1%0實(shí)施例3 取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎20目，稱取20kg加入500L提取罐，用5L3%鹽酸溶 液浸濕后加入200L80%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，得提取液160L，繼續(xù)加入 120L80%甲醇溶液回流提取1小時，套入下次提取用。提取液加入1. 6kg活性炭脫色1小 時，過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié)PH至10，放置結(jié)晶12小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物 至中性，干燥得固體420g粉碎加800gl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑40cm短粗 柱底部加2. 8kg純凈中性氧化鋁再加入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先 用16L 二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫 至紫紅色色液體流出，再用二氯甲烷和乙酸乙酯1 2洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液 體，回收試劑至原體積的1/5，放置結(jié)晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物18g， 用乙酸乙酯回流飽和溶解再緩慢加入其體積1/10的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用 乙酸乙酯回流飽和溶解放置結(jié)晶，得產(chǎn)品llg，含量98%。實(shí)施例4 取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎40目，稱取20kg加入500L提取罐，用5L2%鹽酸溶 液浸濕后加入200L60%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，得提取液160L，繼續(xù)加入 120L60%甲醇溶液回流提取1小時，套入下次提取用。提取液加入Ikg活性炭脫色1小時， 過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié)PH至9，放置結(jié)晶8小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物至中 性，干燥得固體430g粉碎加430gl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑40cm短粗柱底 部加3kg純凈中性氧化鋁再加入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先用IOL 二 氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色 色液體流出，再用二氯甲烷和乙酸乙酯1 2洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液體，回收 試劑至原體積的1/4，放置結(jié)晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物16g，用乙酸乙 酯回流飽和溶解再緩慢加入其體積1/10的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用乙酸乙酯 回流飽和溶解放置結(jié)晶，得產(chǎn)品10g，含量98. 2%。實(shí)施例5 取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎20目，稱取IOkg加入500L提取罐，用2L2%鹽酸溶液 浸濕后加入100L80%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，再加入80L80%甲醇溶液，回 流提取1小時，抽濾溶液，合并，得提取液160L，繼續(xù)加入60L80%甲醇溶液回流提取1小 時，套入下次提取用。提取液加入800g活性炭脫色1小時，過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié)PH 至10，放置結(jié)晶10小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物至中性，干燥得固體240g粉碎 480gl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑20cm短粗柱底部加1. 6kg純凈中性氧化鋁 再加入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先用8L 二氯甲烷和乙酸乙酯20 1 洗脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色色液體流出，再用二氯甲烷 和乙酸乙酯1 2洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液體，回收試劑至原體積的1/4，放置結(jié)晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物9g，用乙酸乙酯回流飽和溶解再緩慢加入其 體積1/15的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用乙酸乙酯回流飽和溶解放置結(jié)晶，得產(chǎn) 品7g，含量98%。 實(shí)施例6:取大青葉挑揀無雜質(zhì)，粉碎20目，稱取IOkg加入500L提取罐，用2L3%鹽酸溶 液浸濕后加入100L60%甲醇溶液，回流提取2小時，抽濾溶液，得提取液80L，繼續(xù)加入 100L60%甲醇溶液回流提取1小時，套入下次提取用。提取液加入500g活性炭脫色1小時， 過濾，溶液滴加濃氨水調(diào)節(jié)PH至10，放置結(jié)晶15小時。濾出得粗結(jié)晶，熱水洗滌結(jié)晶物至 中性，干燥得固體200g粉碎加400gl20-160目中性氧化鋁混合均勻，先在直徑20cm短粗柱 底部加Ikg純凈中性氧化鋁再加入混合氧化鋁，200目不銹鋼篩網(wǎng)覆蓋頂部壓實(shí)。先用5L 二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗脫，洗脫完畢，改用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅 色色液體流出，再用二氯甲烷和乙酸乙酯1 2洗脫至無紅色液體流出，收集紅色液體，回 收試劑至原體積的1/4，放置結(jié)晶，以上洗脫溶液分別回收下次使用。濾結(jié)晶物7g，用乙酸 乙酯回流飽和溶解再緩慢加入其體積1/10的99%甲醇放置結(jié)晶，濾過，結(jié)晶物再用乙酸乙 酯回流飽和溶解放置結(jié)晶，得產(chǎn)品5g，含量98%。
權(quán)利要求
一種從大青葉中制備靛玉紅的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將大青葉原料粉碎20-40目，加入2-3％鹽酸溶液浸濕，加入60-80％甲醇溶液提取2-3次；2)脫色結(jié)晶將上述第一次或前兩次提取液合并加入其量的0.5-1％活性炭回流脫色，濾過，加入濃氨水調(diào)節(jié)PH至9-10，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，熱水洗滌中性，得粗結(jié)晶；3)柱分離將上述結(jié)晶物干燥分水，加入氧化鋁拌樣，裝入短粗柱，二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集紫紅色洗脫液，減壓回收試劑至1/4-1/5，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶將上述結(jié)晶物濾出，依次用乙酸乙酯甲醇混合溶液、乙酸乙酯重結(jié)晶，干燥即得。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述提取條件每次乙醇加入原料的 6-10倍量，回流提取，提取時間1-2小時。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述柱分離條件氧化鋁為120-160目 中性氧化鋁，粗結(jié)晶和氧化鋁1 1-2混合拌樣，再和純凈氧化鋁1 5-7裝柱，先3-4倍 柱體積二氯甲烷和乙酸乙酯20 1洗脫，再用二氯甲烷和乙酸乙酯10 3洗脫至紫紅色 色液體流出，改用二氯甲烷和乙酸乙酯1 2-3洗脫至無紅色液體流出。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的重結(jié)晶條件乙酸乙酯回流飽和 溶解再加入其體積的1/10-1/15甲醇結(jié)晶，乙酸乙酯回流飽和溶解結(jié)晶。
全文摘要
一種從大青葉制備靛玉紅的新工藝是采用2-3％鹽酸溶液浸濕原料，60-80％甲醇回流提取2-3次，第一次或前兩次提取液活性炭脫色，濃氨水調(diào)節(jié)pH9-10，析出結(jié)晶，再和氧化鋁1∶1-2拌樣，裝入短粗柱，二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集靛玉紅洗脫液，回收試劑至1/4-1/5，放置結(jié)晶，重結(jié)晶。該工藝簡單易操作，所得產(chǎn)品含量高。
文檔編號C07D209/36GK101817778SQ20091026445
公開日2010年9月1日 申請日期2009年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月23日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司