專利名稱：從陜西衛(wèi)矛中提取的陜西衛(wèi)矛醇a及其提取工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及從陜西衛(wèi)矛中提取的陜西衛(wèi)矛醇A及其提取工藝。
二背景技術：
陜西衛(wèi)矛(f〃(WM/51 sc力e/757'朋W51 Maxim.)為衛(wèi)矛禾斗(Celastraceae)衛(wèi)矛 屬(^yOTyMA )植物，又名金絲吊蝴蝶、金蝴蝶。據《新華本草綱要》記載， 該科植物多具有殺蟲活性，主要集中在雷公藤屬、衛(wèi)矛屬、南蛇藤屬。自20世 紀80年代以來，我國學者對衛(wèi)矛科許多植物的殺蟲活性進行了廣泛的研究，其 中發(fā)現陜西衛(wèi)矛對昆蟲幼蟲具有拒食和麻醉作用。廣泛分布于我國華北南部， 華中各省，主要分布在河南省伏牛山區(qū)。為什么陜西衛(wèi)矛具有殺蟲活性呢？其 有效成分如何提取至今未見有公開報導。
三
發(fā)明內容
針對上述上述情況，為克服現有技術之不足，本發(fā)明之目的就是通過對陜 西衛(wèi)矛進行系統的化學成分研究，從陜西衛(wèi)矛葉、莖中分離并鑒定出一種新的 化合物，從而提供一種從陜西衛(wèi)矛中提取的陜西衛(wèi)矛醇A及其提取工藝，可有 效解決從陜西衛(wèi)矛中提取活性成分陜西衛(wèi)矛醇A的問題，其解決的技術方案是，
本發(fā)明的陜西衛(wèi)矛醇A，無色油狀，其比旋光度[ ]效-11.1 (c0.25,MeOH); 易溶于丙酮，甲醇。茴香醛-濃硫酸噴霧后加熱先顯藍色，而后變?yōu)榧t色(105。C)。 HR-TOF-MSm/z:277.1779[M+Na]+(計算值277.1779)，分子式C15H2603，其結 構式為圖l所示。
本發(fā)明的陜西衛(wèi)矛醇A的提取工藝為取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉，室溫15-25 "C下在70%丙酮水溶液中用閃式提取器(常用提取設備)組織破碎提取兩次， 每次15-20分鐘，提取液合并后低溫45-C減壓回收溶劑，得干粉，干粉加水分 散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色， 然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇洗脫液，低溫45"C減壓回收溶劑得干粉，將干粉用水溶解上凝膠Toyopearl HW-40柱，用水洗脫，得洗脫 液，將洗脫液點滴在薄層板(薄層板為公知常用試劑板)上展開，展開后用茴 香醛-濃硫酸顯色劑(茴香醛-濃硫酸顯色劑為公知常用顯色劑)噴霧，在105 T:下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值(組分的色譜斑點中心到原點的距離與溶劑 前沿至原點距離的比值)為0.4的流份，收集該流份，得到組分A，組分A依 次通過凝膠Toyopearl HW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠 Sephadex LH-20柱，硅膠柱得無色油狀陜西衛(wèi)矛醇A。
本發(fā)明是一種新的化合物，其制備方法先進、科學，操作方便，對陜西、 河南、山東等地的陜西衛(wèi)矛樣品按上述方法進行反復多次制備，均取得了相同 或相近似的結果，表明本發(fā)明可靠性強，有效解決了從陜西衛(wèi)矛中提取活性成 分陜西衛(wèi)矛醇A，為陜西衛(wèi)矛的應用提供了有利的技術手段和藥用價值，經濟 和社會效益巨大。
四

圖1為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的結構式。 圖2為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的HMBC圖。 圖3為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的^-NMR譜。 圖4為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的13C-NMR譜。 圖5為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的HSQC譜。 圖6為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的HMBC譜。 圖7為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的NOESY譜。 圖8為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的IR譜。 圖9為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的HRTOF-MS譜。 圖10為化合物陜西衛(wèi)矛醇A的UV譜。
五具體實施方式
以下結合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明
本發(fā)明所用儀器和材料柱層析填料DiaionHP-20、 MCI Gel CHP-20為日 本三菱化學公司生產，Toyopeari HW-40為日本TOSOH公司生產，Sephadex LH-20為ParmaciaBiotech公司生產，柱層析所用硅膠H由青島海洋化工廠生產 (160-200目)，薄層層析硅膠為青島海洋化工廠生產(顆粒范圍10-40fim)，以 0.5。/。CMC-Na制板，陰干，105。C活化0.5h。
核磁共振用DPX-400(400MHz for !H-NMR and 100MHz for "C-NMR)核磁 共振儀測定，TMS為內標，由鄭州大學分析測試中心代測。紅外分光光度計型 號為Shimadzu FTIR-8201,質譜由鄭州大學分析測試中心代測，所用質譜儀為 APEX II型。熔點用Kofler顯微熔點測定儀測定，未經校正。N-1000型旋轉蒸 發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)，SHB-B95A型循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工 貿有限公司)，DFZ-3型真空干燥箱(上海醫(yī)用恒溫設備廠)。 '
實施例1
取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉10kg，室溫18"C下在70。/。丙酮水溶液中用閃式提 取器組織破碎提取兩次，第1次20分鐘，第2次15分鐘，提取液合并后45i: 減壓回收溶劑，得干粉410g，干粉加水分散溶解，離心，上清液大孔吸附樹脂 柱DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色， 得到的10%甲醇洗脫液，45'C減壓回收溶劑，得干粉15g，將千粉用水溶解上凝 膠ToyopearlHW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開， 展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105"C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF 值為0.4的流份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopeari HW-40 柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得24mg 陜西衛(wèi)矛醇A。
實施例2
取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉15kg，室溫20'C下在70M丙酮水溶液中用閃式提 取器組織破碎提取兩次，每次各18分鐘，提取液合并后45'C減壓回收溶劑，得
6干粉605g，干粉加水分散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱DiaionHP-20， 用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇 洗脫液，45。C減壓回收溶劑，得干粉23g，將干粉用水溶解上凝膠Toyopearl HW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴 香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105"C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值為0.4的流 份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得36.5mg陜西衛(wèi)矛 醇A。
實施例3
取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉20kg，室溫22°€:下在70%丙酮水溶液中用閃式提 取器組織破碎提取兩次，第一次15分鐘，第2次20分鐘，提取液合并后45'C 減壓回收溶劑，得干粉825g,干粉加水分散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹 脂住DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10°/。甲醇沖洗至洗脫液無色， 得到的10%甲醇洗脫液，45'C減壓回收溶劑，得干粉32g，將干粉用水溶解上凝 膠Toyopearl HW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開， 展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105。C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF 值為0.4的流份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40 柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得47mg 陜西衛(wèi)矛醇A。
本發(fā)明的陜西衛(wèi)矛醇A的結構解析陜西衛(wèi)矛醇A，無色油狀；比旋光度 為M效-11.1 (c 0.25, MeOH);易溶于丙酮，甲醇。茴香醛-濃硫酸噴霧后加熱先 顯藍色，而后變?yōu)榧t色(105。C)。 HR-TOF-MS m/z: 277.1779[M+Na]+ (計算值: 277.1779)，分子式C15H2603。 UV: ^axMeOHnm(logs): 207.7 nm; IR(KBr): UmaxCm": 3434, 2927, 2867, 1627， 1456, 1385, 1372. 111->^411譜中，在低場區(qū)，出現5個氫 質子信號，其中^5.85 (1H， dd, 10.7， 17.3Hz， H曙2)， 5.10 (1H, dd， 1,6， 17.3Hz， H-1Z)和4.93 (lH,dd,J: 1.6, 10.7Hz, H-lc)是一個乙烯基的ABX系統，^5.54 (1H,dt, /= 15.6， 6.1Hz, H-5)和^5.43 (1H, d, 15.6Hz, H-6)構成一個反式雙鍵上的 兩個質子，其偶合常數是</=15.6他。除此之外，&3.70(lH,t，J=6.7Hz,H-10) 為一個次甲基質子信號，且連有含氧基團，其偶合常數J-6.7Hz說明含有一個 五元呋喃環(huán)的結構。在高場區(qū)，(2H， t, /= 6.1Hz， H-4)， 1.79 (2H, m, H-8) 和1.72 (2H， m， H-9)是3個亞甲基信號；&1.18 (3H, s， H-14), 1.11 (3H， s， H-15), 1.06 (3H, s, H-12)和1.06 (3H， s， H-13)是4個甲基信號。13C-NMR中出現15個碳 信號，在低場區(qū)，Jc 146.2 (C畫2)， 140.8 (C-6)， 123.9 (C-5)和& 112.0 (C-l)是一個 乙烯碳和一個反式雙鍵碳的信號；高場區(qū)，^86.5 (C-10)是1個含氧次甲基信號； ^73.7 (C-3), 84.2 (C-7)和73.7 (C-ll)是三個連氧叔碳信號；^46.3 (C-4)， 39.1 (C-8)和27.2 (C-9)是3個亞甲基碳信號；<5C25.8 (C-12), 25.8 (C-13), 26.3 (C-14)和 27.0(C-15)是4個甲基碳信號。在HSQC譜中5.10 (1H， dd， /= 1.6, 17.3Hz,H-:U) 和4.93 (1H， dd， 《/= 1.6, 10.7Hz, H-lc)與<5C 112.0 (C-l)相關，(5^.85 (1H， dd， / = 10.7， 17.3Hz， H-2)， ^5.54 (1H, dt, J" = 15.6, 6.1Hz, H陽5)和&5.43 (1H, d, / = 15.6Hz, H-6)分別與<5C 146.2 (C-2),123.9 (C-5)和140.8 (C-6)相關，證實了兩個烯 鍵的存在。在HMBC譜中^/5.10 (1H， dd, ■/= 1.6， 17.3Hz, H-lf)與& 146.2 (C-2), 73.7 (C-3)有遠程相關，(^5.85 (1H, dd， 《/= 10.7， 17.3Hz， H-2)與& 112.0 (C-l),
73.7 (C-3), 46.3 (C-4), 27.0 (C-15)有遠程相關，知l.ll (3H, s, H畫15)與& 146.2 (C-2)， 73.7 (C哩3)， 46.3 (C-4)有遠程相關，(2H, t, /= 2.4, 6.1Hz， H-4)與& 146.2 (C-2)， 73.7 (C-3), 27.0 (C-15), 123.9 (C誦5)禾口 140.8 (C-6)有遠程相關，^5.43 (1H, d, /= 15.6Hz, H-6)與& 123.9 (C誦5)， 46.3 (C-4), 84,2 (C-7)禾口 26.3 (C-14)有遠 程相關，&U8 (3H, s, H-14)與(5C 140.8 (C-6), 84.2 (C-7)和39.1 (C-8)有遠程相關，
(1H， t, /= 6.7Hz， H-10)與t5c84.2 (C-7), 39.1 (C-8)， 27.2 (C-9), 73.7 (C國ll),
25.8 (C-12)和25.8 (C-13)有遠程相關，以上數據表明化合物具有倍半萜烯醚的結 構。此外，C-10 [c5c86.5; &3.70 (1H, t， /= 6.7Hz, H-10)]絕對構型通過與其相似 化合物[5]的化學位移和偶合常數的比較，確定為構型；C-7的相對構型由 NOESY譜得到，當照射14-CH3可以觀察到10-H的減弱，因此可知14-CH3與IO-H分別位于呋喃環(huán)的同側，由于C-10的絕對構型為S，可知C-7的絕對構型 為i ; C-3的絕對構型通過與類似化合物[6]的化學位移比較，確定其絕對構型為 S。因此，化合物的結構為(3S， 7i , 105)-3, 11-二羥基-7, 10-環(huán)氧-3, 7， 11-三甲基十 二碳-1, 5-二烯，經文獻檢索未見報道，確定其為一新化合物，命名為陜西衛(wèi)矛 醇A。
下表給出本發(fā)明化合物陜西衛(wèi)矛醇A的iH-NMR (400 MHz, CD3OD)和
13C-NMR(100MHz,CD3OD)數據No.
Ids112.04.93 (1H， (!(!， /= 1.6， 10.7Hz)
1 frara5.10 (1H, dd, J= 1.6, 17.3Hz)
2146.25.85 (IH， dd，/= 10.7, 17.3Hz)
373.7
446.32.13 (2H, 6.1Hz)
123.95.54(1H，dt,h 15.6, 6.1Hz)
6140.85.43 (IH， d,J= 15.6Hz)
84.2
839.11.79 (2H,m)
927.21.72 (2H， m)
1086.53.70 (IH， t，J=6.7Hz)
1173.7
1225.81.06 (3H，s)
1325.81.06 (3H, s)
1426.31.18 (3H， s)
1527.01.11 (3H, s)
注該表給出了該化合物的碳氫歸屬，證明結構解析的正確性。
權利要求
1、一種陜西衛(wèi)矛醇A，其特征在于所說的陜西衛(wèi)矛醇A的分子式為C15H26O3。
2、 權利要求1所述的陜西衛(wèi)矛醇A的提取工藝，其特征在于，取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉，室溫15-25匸下在70%丙酮水溶液中用閃式提取器組織破碎提取兩次，每次15-20分鐘，提取液合并后低溫45t:減壓回收溶劑，得干粉，干粉加水分散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇洗脫液，低溫45。C減壓回收溶劑得干粉，將干粉用水溶解上凝膠Toyopearl HW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105。C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值為0.4的流份，收集該流份，得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得無色油狀陜西衛(wèi)矛醇A。
3、 根據權利要求2所述的陜西衛(wèi)矛醇A的提取工藝，其特征在于，取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉10kg，室溫18。C下在70。/。丙酮水溶液中用閃式提取器組織破碎提取兩次，第1次20分鐘，第2次15分鐘，提取液合并后45T:減壓回收溶劑，得干粉410g，干粉加水分散溶解，離心，上清液大孔吸附樹脂柱Diaion HP-20,用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇洗脫液，45。C減壓回收溶劑，得干粉15g，將干粉用水溶解上凝膠ToyopearlHW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105。C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值為0.4的流份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠Toy叩earl HW-40柱，MCI GelCHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得24mg陜西衛(wèi)矛醇A。
4、 根據權利要求2所述的陜西衛(wèi)矛醇A的提取工藝，其特征在于，取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉15kg，室溫2(TC下在70。/。丙酮水溶液中用閃式提取器組織破碎提取兩次，每次各18分鐘，提取液合并后45'C減壓回收溶劑，得干粉605g，干粉加水分散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇洗脫液，45 °C減壓回收溶劑，得干粉23g，將干粉用水溶解上凝膠ToyopeariHW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105。C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值為0.4的流份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠ToyopearlHW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得36.5mg陜西衛(wèi)矛醇A。
5、根據權利要求2所述的陜西衛(wèi)矛醇A的提取工藝，其特征在于，取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉20kg，室溫22"下在70%丙酮水溶液中用閃式提取器組織破碎提取兩次，第一次15分鐘，第2次20分鐘，提取液合并后45"C減壓回收溶劑，得干粉825g，干粉加水分散溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂住DiaionHP-20，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10%甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10%甲醇洗脫液，45。C減壓回收溶劑，得干粉32g，將干粉用水溶解上凝膠ToyopearlHW-40柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，在105"C下先顯藍色，后變?yōu)榧t色的RF值為0.4的流份，收集該流份得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得47mg陜西衛(wèi)矛醇A。
全文摘要
本發(fā)明涉及從陜西衛(wèi)矛中提取的陜西衛(wèi)矛醇A及其提取工藝，工藝是，取新鮮的陜西衛(wèi)矛莖、葉，室溫下在丙酮水溶液中組織破碎提取、減壓回收溶劑得干粉，干粉加水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱，用水沖洗至洗脫液無色，然后用10％甲醇沖洗至洗脫液無色，得到的10％甲醇洗脫液，低溫減壓回收溶劑得干粉，將干粉水溶上凝膠柱，用水洗脫，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開后用茴香醛-濃硫酸顯色劑噴霧，先顯藍色，后變?yōu)榧t色的流份，該流份依次通過凝膠Toyopearl HW-40柱，MCI Gel CHP-20柱，羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱，硅膠柱得無色油狀陜西衛(wèi)矛醇A，本發(fā)明是一種新的化合物，其制備方法操作方便，可靠性強，經濟和社會效益巨大。
文檔編號C07D307/00GK101665476SQ20091006590
公開日2010年3月10日 申請日期2009年8月24日 優(yōu)先權日2009年8月24日
發(fā)明者馮衛(wèi)生, 王小蘭, 鄭曉珂, 郭錦輝 申請人:河南中醫(yī)學院