專利名稱：：一種高純度的水飛薊賓葡甲胺、其制備方法及其在制備治療肝炎以及肝損害的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種高純度的水飛薊賓葡甲胺、其制備方法及其在制備治療急性肝炎、慢性肝炎的急性發(fā)作期以及中毒性肝損害的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：上世紀(jì)60年代，以H'Wagner為代表的西德藥學(xué)家們發(fā)現(xiàn)菊科植物水飛薊[Silybiimmarianum]種子中含有新型黃酮類成分，包括有水飛薊賓、水飛薊寧、水飛薊亭和水飛薊醇，總稱水飛薊素。其中主要成分為水飛薊賓，并經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)證明，具有保護(hù)肝細(xì)胞膜，改善肝功能作用，能對抗多種肝臟毒物所致的肝損傷，而且毒性極低，從而引起許多國家的注意，導(dǎo)致水飛薊的研究工作遍及五大洲。到1978年，僅有十年時間，西德等二十多個國家先后發(fā)表水飛薊研究論文達(dá)一百五、六十篇，其中藥理與臨床占一半以上，使水飛薊成為世界性保肝藥用植物。在國外，以利肝隆為代表的水飛薊素多種制劑已廣泛用于治療急、慢性肝炎、肝硬變等疾病。我國于1972年，由西德引進(jìn)水飛薊，在各地推廣種植取得成功，并將我國引種的水飛薊種子有效組分一總黃酮制成益肝靈片，提供臨床應(yīng)用。1980年江蘇省成立了水飛薊賓科研協(xié)作組對水飛薊賓的提取分離，水溶性水飛薊賓及制劑的制備、含量測定方法、百分吸收系數(shù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，所研制的水溶性水飛薊賓葡甲胺經(jīng)ll個臨床單位試用，證明療效顯著，治療慢性遷延性肝炎256例，總有效率74.6%，其中顯效率為52.0%。據(jù)衛(wèi)生部發(fā)布的統(tǒng)計(jì)資料，在法定報(bào)告的傳染病中病毒性肝炎的發(fā)病率和死亡率占首位。我國肝炎平均發(fā)病率約為100/10萬，即每年新發(fā)肝炎約120萬例。另據(jù)9295年全國病毒性肝炎的血清流行病學(xué)調(diào)査，我國一般人群的乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HbsAg)攜帶率為9.7%，估計(jì)約1.2億人攜帶乙肝病毒(HBV)。慢性肝病的患病率和死亡率分別為16%。和24.9/10萬，據(jù)此推算全國約有2000萬例慢性肝病患者，每年約30萬人死于慢性肝病。肝癌的死亡率為14.8/10萬，每年因肝癌死亡約18萬例?，F(xiàn)在用于臨床的水飛薊賓葡甲胺國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-100(U-(HD-0925)-2002含水飛薊素葡甲胺不得少于96.0%，含水飛薊賓葡甲胺不得少于75.0%，純度不高，只能用于口服制劑。而水飛薊賓葡甲胺是一個弱酸弱堿鹽，穩(wěn)定性差，口服后在胃酸環(huán)境下，容易析出難溶性的水飛薊賓，影響人體吸收，導(dǎo)致人體生物利用度低。中國專利(申請?zhí)?200410023872、200510080657)公開了用水飛薊賓葡甲胺制成注射用制劑的技術(shù)；中國專利(專利號200410041363)公開了"一種水飛薊提取物葡甲胺鹽的新制備方法"；但是上述文獻(xiàn)提到的水飛薊賓葡甲胺的含量都沒有用HPLC方法測定并且測得含量在98.0%以上。藥品的評價原則為"安全、有效、可控"?，F(xiàn)在用臨床上使用的水飛薊賓葡甲胺以及有報(bào)道的相關(guān)水飛薊賓葡甲胺研究文獻(xiàn)或?qū)＠墨I(xiàn)中，均未見有用HPLC方法測定飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上的，這就給水飛薊賓葡甲胺的臨床用藥帶來不可控的因素，留下不安全的隱患，使水飛薊賓葡甲胺的臨床應(yīng)用受到限制。針對以上問題，本發(fā)明提供了一種高純度的水飛薊賓葡甲胺，用高效液相色譜法測定，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上。
發(fā)明內(nèi)容為了解決以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種高純度的水飛薊賓葡甲胺，用HPLC方法測定，以水飛薊賓為對照品，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上。本發(fā)明還提供了一種制備高純度水飛薊賓葡甲胺的方法以及公開了一種含有治療有效量的高純度水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的高純度的水飛薊賓葡甲胺用HPLC測定，含量在98%以上，克服了以前水飛薊賓葡甲胺純度低、含量在75%以上的不足，消除了因?yàn)樗w薊賓葡甲胺純度低而帶來的臨床應(yīng)用安全隱患以及質(zhì)量可控性差的現(xiàn)象。由于純度高，穩(wěn)定性好，安全性好，水飛薊賓葡甲胺可以制成注射用制劑，比以往的口服制劑提高了人體生物利用度，充分發(fā)揮了水飛薊賓葡甲胺的治療疾病作用。本專利公開的高純度水飛薊賓葡甲胺與市售的水飛薊賓葡甲胺原料的溶血性試驗(yàn)證明，高純度的水飛薊賓葡甲胺沒有溶血作用，比市售的水飛薊賓葡甲胺安全性高，毒性減小。具體方案如下.-本發(fā)明公開了一種高純度的水飛薊賓葡甲胺，用高效液相色譜法測定，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上，其制備方法包括如下步驟市售水飛薊賓葡甲胺加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，干燥，得土黃色粉末；取(1)所得粉末，加入蒸餾水?dāng)嚢?，使溶解，過濾，濾液加入飽和食鹽水，于冰箱中放置，過濾，干燥，得淡黃色粉末；取(2)所得粉末，加入異丙醇,，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，干燥，得淡黃色粉末。本發(fā)明公開的高純度的水飛薊賓葡甲胺，用高效液相色譜外標(biāo)法測定，以水飛薊賓為對照品，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上。本發(fā)明公開的高純度的水飛薊賓葡甲胺，其特征在于，用高效液相色譜外標(biāo)法測定，以水飛薊賓為對照品，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上；其特征還在于，高效液相色譜面積歸一化圖譜中，共有5個色譜峰，其中2號峰、3號峰為水飛薊賓的兩個主峰，他們的峰面積之和占總峰面積的95.5%以上，5號峰為異水飛薊賓峰，其峰面積占總峰面積的0.5%以下，l峰號和4號峰為未知物質(zhì)峰，1號峰的峰面積占總峰面積的0.5%以下，4號峰的峰面積占總峰面積的3.5%以下；5個峰的相對保留時間依次為1號峰0.5200.575，2號峰1.000，3號峰:1.1101.135，4號峰:1.2511.320，5號峰:1.4951.590。上述測定高純度的水飛薊賓葡甲胺的高效液相色譜方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一水一O.5mol/L磷酸二氫鉀(10:10:1)為流動相(用O.2mol/L磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0)，檢測波長為288nm。理論板數(shù)按水飛薊賓峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。測定法水飛薊賓葡甲胺15mg，精密稱定，置5C'ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理20分鐘，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取經(jīng)105"C干燥至恒重的水飛薊賓對照品10mg，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果乘以1.405，即得。以上高效液相色譜法的其他條件為色譜柱Discovery0DS-C18柱，25cmX4.6腿，5um;柱溫3(TC';流速1.0ml/分鐘。本發(fā)明公開的高純度的水飛薊賓葡甲胺的制備方法，包括如下步驟(1)市售水飛薊賓葡甲胺加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4'C冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥得土黃色粉末；(2)取(1)所得粉末，加入蒸餾水?dāng)嚢?，使溶解，過濾，濾液加入飽和食鹽水，于4r冰箱中放置，過濾，干燥，得淡黃色粉末；(3)取(2)所得粉末，加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4'C冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥得淡黃色粉末。上述高純度的水飛薊賓葡甲胺的制備方法，其中步驟(1)中加入異丙醇的量為水飛薊賓葡甲胺的3050倍，減壓濃縮的溫度為4070°C;步驟(2)中加入蒸餾水的量為水飛薊賓葡甲胺的515倍，攪拌溫度為0l(TC，加入飽和食鹽水的量為水飛薊賓葡甲胺的10:20倍；步驟(3)中加入異丙醇的量為水飛薊賓葡甲胺的60100倍，減壓濃縮的溫度為4070°C。上述高純度的水飛薊賓葡甲胺的制備方法中，市售水飛薊賓葡甲胺為符合國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0925)-2002的化學(xué)品。上述高純度的水飛薊賓葡甲胺的制備方法過程簡單，操作方便，所用試劑及設(shè)備均為常用試劑及設(shè)備，適合大生產(chǎn)，沒有環(huán)保隱患。本發(fā)明還公開了一種高純度的水飛薊賓葡甲胺的藥物組合物，其中含有高純度的水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體。具體涉及口服制劑，如普通片劑、膠囊、分散片、顆粒劑、腸溶片、緩釋片、口崩片；注射用制劑，如凍干粉針、無菌分裝的注射用無菌粉末、輸液制劑、小針。本發(fā)明公開的含高純度的水飛薊賓葡甲胺的藥物組合物，其中含有10200mg的水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體，優(yōu)選為含有25mg或50mg或100mg的水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體，如淀粉、乳糖、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、預(yù)膠化淀粉、甘露醇、硬脂酸鎂、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、阿斯帕甜、檸檬香精、滑石粉等。本發(fā)明還公開了一種高純度的水飛薊賓葡甲胺在制備治療急性肝炎、慢性肝炎的急性發(fā)作期以及中毒性肝損害的藥物中的應(yīng)用。高純度的水飛薊賓葡甲氨制成的凍干粉針的藥效學(xué)研究和溶血試驗(yàn)研究如下水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針主要藥效學(xué)試驗(yàn)1.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對CCl4所致小鼠急性肝損傷的影響1.1方法取健康雄性昆明種小白鼠60只，體重18-22g。隨機(jī)分為①正常對照組;②模型組；③甘利欣對照組(30mg/:kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(25mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(50mg/kg);⑥水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(100mg/kg)。每組10只。甘利欣對照組及受試藥低、中、高劑量組均為尾靜脈給藥；正常對照組和模型組給予等體積的生理鹽水。各組連續(xù)給藥3天，每日一次。于第4日上午給藥后lh，模型組與各給藥組小鼠分別皮下注射0.5%CCL花生油溶液10ml/kg，正常組皮下注射等體積生理鹽水。當(dāng)日下午加強(qiáng)給藥一次，當(dāng)晚禁食不禁水。第5日上午最后一次給藥后lh，稱體重，眼眶靜脈叢取血，分離血清，采用試劑盒測定血清GOT、GPT。1.2結(jié)果模型組小鼠血清G0T、GPT含量顯著升高。水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組小鼠血清G0T、GPT含量顯著降低，與模型組相比有顯著差異性。結(jié)果見表l。表l水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對ccii所致急性肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的影響(n=10，又士SD)組別血清轉(zhuǎn)氨酶活力單位(U/L)正常對照組模型組甘利欣對照組GOT65.14±20.32AAA143.25±54.31"*74.36±13.25AA水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針98.67土21.34'"低劑量組水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針92.16±30.13A中劑量組水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針81.62±15.31A高劑量組GPT45.36±13.47AAA128.63±47.2廣65.47±21.63*AAA81.52±33.28*A69.27±13.45'AA59.64±38.13AA注與正常組比卞〈0.05，**P〈0.01，***P〈0.001;與模型組比Ap〈0.05，△，〈().01，嵐P〈0.001,2.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對D-氨基半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷的影響2.1方法取健康雄性SD大鼠60只，體重180-220g，隨機(jī)分為①正常對照組；②模型組；③甘利欣對照組(15mg/kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(15mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(30mg/kg);⑥水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(60mg/kg)。每組10只。甘利欣對照組及受試藥低、中、高劑量組均為尾靜脈給藥；正常對照組、模型組分別給予等體積的生理鹽水。各組依次給藥3天，每日一次。于第4日上午給藥后lh，模型組與各給藥組大鼠分別腹腔給予D-GlaN600mg/kg，正常組腹腔注射等體積生理鹽水。當(dāng)日下午加強(qiáng)給藥一次。第5日給藥一次，并于腹腔注射D-GlaN24h后分別稱重后，由眼眶靜脈叢取血，分離血清，采用試劑盒測定血清GOT、GPT。2.2結(jié)果模型組大鼠血清GOT、GPT含量顯著升高；肝臟小葉內(nèi)部分肝細(xì)胞水腫變性，散在的肝細(xì)胞點(diǎn)狀壞死，壞死區(qū)及匯管區(qū)內(nèi)有炎細(xì)胞浸潤。水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組大鼠血清GOT、GPT含量顯著降低，與模型組相比有顯著差異性；肝細(xì)胞損傷較模型組顯著減輕，呈量效關(guān)系。結(jié)果見表2。表2水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對D-G1!N所致急性肝損傷大鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的影響(n=10，又士SD)組別血清轉(zhuǎn)氨酶活力單位(U/L)正常對照組模型組甘利欣對照組GOT67.43±18.34AAA150.61±52.43附76.52±14,08AA水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針95.74士20.68"低劑量組水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針90.26±28.44A'中劑量組水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針80.76±20.35A'高劑量組GPT46.42±15.67AAA132.46±45.38*"62.41±23.82*AAA79.39±28.05'A65.04±18.52*厶厶54.61±25.64AA注與正常組比'P〈0.05，**P〈0.01，***P〈0.001;與模型組比Ap〈0.05，AAP〈0.01，AAAP<0.0013.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對CCl4所致大鼠慢性肝損傷的影響3.1方法按文獻(xiàn)方法，取健康雄性SD大鼠60只，體重150士20g，隨機(jī)分為①正常對照組；②模型組；③甘利欣對照組(15mg/kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(15mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(30mg/kg);⑥水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(60mg/kg)。每組10只。各給藥組均為腹腔注射給藥(ip，0.5ml/100g)，正常組和模型組腹腔注射等體積生理鹽水。模型組與各給藥組大鼠每周皮下注射CCL0.2ml/100g體重l次，正常組皮下注射等體積生理鹽水。(^14濃度依次為5%、10%、20%、30%，每3周遞增一個濃度，連續(xù)3個月。從給予CCl4前三日開始給藥，連續(xù)3個月。每周稱體重一次，改變給藥量。于末次皮下注射CCL48小時后①分別稱重后，烏拉坦麻醉，解剖，分離膽總管，膽道插管，收集膽汁(結(jié)果見利膽試驗(yàn))；②分離頸動脈，插管取血，分離血清，采用試劑盒測定血清G0T、GPT、血清總蛋白、血清白蛋白、血清總羥脯氨酸含量。3.2結(jié)果模型組大鼠體重顯著降低，肝指數(shù)顯著增加；血清G0T、GPT含量顯著升高，血清總蛋白、白蛋白、總羥脯氨酸含量顯著降低；肝臟小葉中央靜脈周圍肝細(xì)胞明顯脂肪變性，部分肝細(xì)胞崩解壞死，壞死區(qū)有炎細(xì)胞浸潤。水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量和中劑量組大鼠體重與正常組比較，有顯著差異性，高劑量組大鼠體重與正常組比較無顯著差異性；水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組大鼠肝指數(shù)顯著降低，與模型組相比有顯著差異性；各劑量組大鼠血清G0T、GPT含量顯著降低，與模型組相比有顯著差異性；血清總蛋白、白蛋白、總羥脯氨酸含量顯著增加，與模型組相比有顯著差異性；肝細(xì)胞損傷較模型組顯著減輕，呈量效關(guān)系。結(jié)果見表3、表4。表3水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對CCl4所致慢性肝損傷大鼠體重及肝指數(shù)的影響(n=10，又土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與正常組比卞〈0.05，**P<0.01,***P<0.001;與模型組比Ap〈0.05，△<().01，AAAP<0.001。表4水飛薊賓葡甲胺(凍千)粉針對CCl4所致慢性肝t員傷大鼠血清轉(zhuǎn)氨酶、蛋白、總羥脯氨酸指標(biāo)的影響(n=10,S±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注與正常組比卞〈0.05，**P〈0.01，***P〈0.001;與模型組比Ap〈0.05，AAP<0.01，AAAP〈0.001。4.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對CCL所致大鼠慢性肝損傷模型大鼠膽汁分泌的影響4.1方法動物分組、造模及給藥方法同3.3。造模及給藥3個月后，每組取8只大鼠，分別稱重，烏拉坦麻醉，分離膽總管，膽道插管，收集膽汁。4.2結(jié)果與模型組相比，水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組給藥3個月后均能顯著增加模型大鼠膽汁分泌量。結(jié)果見表5。表5水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對(^14所致慢性肝損傷大鼠膽汁分泌的影響(n=8，又士SD)組別體重(g)30min(ml)60min(mi;)90min(ml)正常對照組434.63±49.030.24±0.04A0.35±0.060.39±0.08模型組389.88±41.76o.mo.06'0.27±0.100.29±0.12甘利欣對照組396.38土52.210.33±0.11AA0.45±0.10*AA0.46±0.11A水飛薊賓葡甲391,25±54.860.30±0.10A0.42±0.UA0.40±0.〗4胺(凍千)粉針低劑量組水飛薊賓葡甲397.13±40.390.32±0.08'AA0.44±0.12AA0.48±0.12AA胺(凍干)粉針中劑量組水飛薊賓葡甲413.63±21.730.33±0.06"AAA0.45±0.()5**編0.51±0.09*AA胺(凍干)粉針高劑量組注與正常組比卞〈0.05，**P〈0.01，***P〈0.001;與模型組比Ap〈0.05，AAP<0.01，AAAP<0.001。5.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對正常大鼠膽汁分泌的影響5.1方法取雄性SD大鼠40只，體重200士20g，隨機(jī)分為①正常對照組；②甘利欣對照組(15mg/kg);(D水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(15mg/kg);水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(30mg/kg);(D水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(60mg/kg)。每組8只。各組采用股靜脈給藥(lml/100g)，正常對照組給予等體積生理鹽水。試驗(yàn)前12h禁食不禁水，20%烏拉坦溶液腹腔注射麻醉(7.5ml/kg)后固定，沿腹中線打開腹腔，找到胃幽門部，翻轉(zhuǎn)十二指腸，找到白色韌性膽管，并分離穿線，結(jié)扎乳頭部，用頭皮針膽道插管，導(dǎo)管上推至肝臟，用線固定。穩(wěn)定20min，先收集30min內(nèi)正常膽汁的分泌體積，各組如上法分別給藥，并于給藥后30min、60min各測定膽汁分泌量一次，與藥前膽汁分泌量比較。5.2結(jié)果與正常組比較，水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組均能顯著增加膽汁的分泌量，呈一定的量效關(guān)系。結(jié)果見表6。表6水飛薊賓葡甲胺(凍干)^針對正常大鼠膽汁分泌的影響(n=8，又土SD)藥后30min占藥前藥后60min占藥前組別體重(g)30min%30min%正常對照組249.25±13.6965.09±7.22!57.35±12.63甘利欣對照組238.75±13.3775.54±19.2480.49±26.43'水飛薊賓葡甲254.38±18.3385.01±18.76*73.86±18.10胺(凍千)粉針低劑量組水飛薊賓葡甲250.50±15.6686.57±23.95'73.48±18.58胺(凍干)粉針中劑量組水飛薊賓葡甲241.88±11.9393.46±25.13"79.66±17.67*胺(凍干)粉針高劑量組注與正常組比*P〈0.05，，〈0.01，***P<0.001。6.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠免疫器官重量的影響6.1方法取昆明種健康幼鼠60只，體重11-15g，雌雄各半，隨機(jī)分為①正常對照組；②環(huán)磷酰胺組；③甘利欣對照組(30mg/kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(25mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(50mg/kg);⑥水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(100mg/kg)。每組10只。各給藥組均為靜脈給藥，正常對照組及環(huán)磷酰胺組每日給予等體積的生理鹽水。各組每日給藥1次，于給藥的第4天，除正常對照組，每組動物每日均皮下注射環(huán)磷酰胺，劑量為0.015g/kg，連續(xù)4天。各組連續(xù)給藥7天。于末次給藥后24小時稱重后處死動物，解剖取出脾臟、胸腺及肝臟分別稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。并進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。6.2結(jié)果與正常組比，環(huán)磷酰胺能顯著降低小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。與環(huán)磷酰胺組相比，水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針有一定的增加免疫低下小鼠免疫器官重量的趨勢，但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明無顯著性差異。結(jié)果見表7。表7水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠免疫器官重量的影響(n=10,X士SD，mg/g體重)組別肝臟系數(shù)脾臟系數(shù)胸腺系數(shù)正常對照組45.02±5.224.88±2.9A2.42±0.88A環(huán)磷酰胺組42.61±2.053.26土0.53'1.54士0.97'甘利欣+環(huán)磷酰胺44.77±4.163.84±0.751.80士1.32水飛薊賓葡甲胺(凍干)42.53±2.023.66±0.781.78±0.38粉針低劑量+環(huán)磷酰胺水飛薊賓葡甲胺(凍干)43.05±3.643.70±0.501.89±0.84粉針中劑量+環(huán)磷酰胺水飛薊賓葡甲胺(凍千)43.58±2.713.82±0.751.99±0.92粉針高劑量+環(huán)磷酰胺:與正常組比'P〈0.05;與環(huán)磷酰胺組比厶P〈0.05。7.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(碳粒廓清試驗(yàn))7.1方法取健康雄性昆明種小鼠60只，體重18-22g，隨機(jī)分為①正常對照組；②環(huán)磷酰胺組；(D甘利欣對照組(30mg/kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(25mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(50mg/kg);◎水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(100mg/kg)。每組10只。各給藥組均靜脈給藥，正常對照組及環(huán)磷酰胺組每日給予等體積的生理鹽水。各組每日給藥1次，于給藥的第4天，環(huán)磷酰胺組每日皮下注射環(huán)磷酰胺，劑量為0.015g/kg，連續(xù)4天。各組連續(xù)給藥7天。于末次給藥后15min由尾靜脈注入20%印度墨汁lml/100g。分別于注射后2min和10min眼眶靜脈叢取血25|jl，放入盛有0.1。/。Na2C(V溶液2ml的試管中，搖勻后于675nnP]波長處測各管之光密度(吸光度，0D，以O(shè).P/。Na2C03液調(diào)零)按下式計(jì)算廓清指數(shù)(K):并進(jìn)行組間比較。1^(Lg0D「LgOD2)/(t2-1》7.2結(jié)果與正常組相比，環(huán)磷酰胺能顯著降低小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，顯著降低小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬能力。與環(huán)磷酰胺組相比，水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針能顯著提高小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬能力。結(jié)果見表8。表8水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能及免疫器官的影響(n=10，又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注與正常組比，*P〈0.05，**P<0.01，，復(fù)001;與環(huán)磷酰胺組比，AP<0.05，AAP<0.01，△P<0.001。8.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠血清溶血素抗體生成的影響8.1方法'取健康昆明種小白鼠60只，雌雄各半，體重18-22g，隨機(jī)分為①正常對照組；②環(huán)磷酰胺組(0.015g/kg);③甘利欣對照組(30mg/kg);水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(25mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(50mg/kg);(D水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(100mg/kg)。每組10只。各給藥組均靜脈給藥，正常對照組及環(huán)磷酰胺組給予等體積的生理鹽水。各組每日給藥l次，連續(xù)給藥7天。于給藥的第3天，環(huán)磷酰胺組每日皮下注射環(huán)磷酰胺，劑量為0.015g/kg，連續(xù)5天。并于給藥的第3天，同時再按每只0.2ml，ip20%綿羊紅細(xì)胞懸液。最后一次給藥后24h摘除小鼠眼球取血，室溫放置lh，離心(2000r/min)20min，取上層血清，同組10只混合，用生理鹽水做800倍稀釋，然后分別取出lml依次放入試管中，每管加入0.5ml5%綿羊紅細(xì)胞懸液及l(fā)ml1:10稀釋的豚鼠血清，將反應(yīng)管搖勻后移至37"恒溫水浴中保溫lh，中間輕輕振搖一次，反應(yīng)畢，立即移入冰浴中，終止反應(yīng)。將反應(yīng)管以2000r/min離心20min后取上清液lml加入3ml氰化高鐵血紅蛋白試劑，搖勻，放置10min，在紫外可見分光光度計(jì)上以540nm比色。另設(shè)不加補(bǔ)體(豚鼠血清)而以生理鹽水代替的空白對照管，其它操作均相同。取0.25ml5%綿羊紅細(xì)胞懸液，用氰化高鐵血紅蛋白試劑稀釋至4ml，搖勻，放置10min后540歷比色(以蒸餾水調(diào)零)。以下式計(jì)算樣品半數(shù)溶血值(HCs。)樣品HC^(樣品吸光度/綿羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血時的吸光度)X稀釋倍數(shù)8.2結(jié)果與正常組相比，環(huán)磷酰胺能顯著抑制抗體形成。水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠血清溶血素抗體形成無明顯影響。結(jié)果見表9。表9水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠血清溶血素<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注與正常組比'P〈0.05，**P〈0.01，***P《).001。9.水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響9.1方法取健康昆明種小白鼠60只，雌雄各半，體重18-22g，隨機(jī)分為①正常對照組；②環(huán)磷酰胺組；③甘利欣對照組(30mg/kg);④水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針低劑量組(25mg/kg);⑤水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針中劑量組(50mg/kg);⑥水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針高劑量組(100mg/kg)。每組10只。各給藥組均靜脈給藥，正常對照組及環(huán)磷酰胺組給予等體積的生理鹽水。各組每日給藥l次，連續(xù)給藥7天。于給藥的第3天，環(huán)磷酰胺組每日皮下注射環(huán)磷酰胺，劑量為0.015g/kg，連續(xù)5天。并于給藥的第3天，每鼠用手術(shù)剪剪去腹部毛，范圍約3cmX3cm，將1%DNFB50pl均勻涂抹致敏。最后一次給藥后，將1%DNFB溶液用移液器吸取10|J|均勻涂抹于小鼠左耳兩面進(jìn)行攻擊，24h后頸椎脫臼處死小鼠，剪下左右耳殼，用打孔器取下直徑7ram的耳片稱重，以左右耳片重量之差為腫脹度。同時稱取胸腺、脾臟和肝臟的重量，計(jì)算其臟器系數(shù)。9.2結(jié)果與正常組相比，環(huán)磷酰胺能顯著降低小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，顯著降低耳殼腫脹度。與環(huán)磷酰胺組相比，水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針各劑量組均能顯著提高小鼠耳殼腫脹度。說明水飛薊賓葡甲胺(凍干)粉針對小鼠的特異性細(xì)胞免疫有增強(qiáng)作用。結(jié)果見表io。表10水飛薊賓葡甲胺(凍干)，針對小鼠_遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響(n=10，又土SD)_組別耳殼腫脹度(g)肝系數(shù)(mg/g)脾系數(shù)(mg/g)胸腺系數(shù)(mg/g)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>水飛薊賓葡甲胺溶血試驗(yàn)1.方法配制水飛薊賓葡甲胺的濃度為50mg/ml,取試管7支，1-5管分別加入0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml,0.5ml的水飛薊賓葡甲胺，并用生理鹽水稀釋至2.5ml，于6號、7號試管中分別加入生理鹽水及蒸餾水2.5ml(完全溶血對照)。最后每管均加入2%兔紅細(xì)胞懸液2.5ml，輕輕搖勻，置37。C水浴中，分別記錄15min，30min，45min，l.Oh，2.0h，3.0h，4.0h各管的溶血和凝集情況。2.結(jié)果高純度水飛薊賓葡甲胺溶在試管里終濃度為5mg/ml時對兔紅細(xì)胞無溶血和凝集作用；市售水飛薊賓葡甲胺原料在試管里終濃度為卜5mg/ml時對兔紅細(xì)胞有溶血和凝集作用。結(jié)果見表io、表ll。表10自制水飛薊賓葡甲胺溶血試驗(yàn)表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>注"-"不溶血；"±"部分溶血；"+"完全溶血表ll市售水飛薊賓葡甲胺溶血試驗(yàn)表<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>注"-"不溶血；"±"部分溶血；"+"完全溶血圖l、實(shí)施例l水飛薊賓葡甲胺高效液相色譜圖圖2、實(shí)施例2水飛薊賓葡甲胺高效液相色譜圖圖3、實(shí)施例3水飛薊賓葡甲胺高效液相色譜圖具體實(shí)施例方式實(shí)施例1-取30g市售水飛薊賓葡甲胺，加入1500ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，保持0.5小時，趁熱過濾，濾液于4'C冰箱中放置8小時，過濾，濾液在7(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥24小時，得土黃色粉末；加入360ml蒸餾水，10。C攪拌10分鐘，使溶解，過濾，濾液加入480ml飽和食鹽水，于4"C冰箱中放置過夜，過濾，40'C真空干燥24小時，得淡黃色粉末；再加入2000ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4t:冰箱中放置8小時，過濾，濾液在7(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4CTC真空干燥24小時，得淡黃色粉末16.8g。對最終所得淡黃色粉末進(jìn)行含量測定，結(jié)果如下色譜柱DiscoveryODS-C18柱，25cmX4,6mm，5咖;柱溫30°C;流速1.0ml/分鐘。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一水一0.5mol/L磷酸二氫鉀(10:10:1)為流動相(用0.2mol/L磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0)，檢測波長為288nm。理論板數(shù)按水飛薊賓峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。測定法水飛薊賓葡甲胺15mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理20分鐘，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取經(jīng)105i:干燥至恒重的水飛薊賓對照品10mg，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果乘以1.405，即得含量為98.5%，液相色譜圖中，15號峰的峰面積占總峰面積的比例分別為0.17%，50.19%，46.70%，2.75%，0.18%，色譜圖見圖1。實(shí)施例2:取30g市售水飛薊賓葡甲胺，加入900ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，保持45分鐘，趁熱過濾，濾液于4"C冰箱中放置8小時，過濾，濾液在4(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4CTC真空干燥24小時，得土黃色粉末；加入120ml蒸餾K，0°C攪拌10分鐘，使溶解，過濾，濾液加入240ml飽和食鹽水，于4"C冰箱中放置過夜，過濾，4(TC真空干燥24小時，得淡黃色粉末；再加入1200ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4"C冰箱中放置8小時，過濾，濾液在4(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4CTC真空干燥24小時，得淡黃色粉末17.5g。按實(shí)施例l方法測定，含量為99.3%，液相色譜圖中，15號峰的峰面積占總峰面積的比例分別為0.15%,50.23%，46.65%，2.78%，0.18%，色i普圖見圖2。實(shí)施例3:取30g市售水飛薊賓葡甲胺，加入1200ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，保持15分鐘，趁熱過濾，濾液于4"C冰箱中放置8小時，過濾，濾液在6(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥24小時，得土黃色粉末；加入240ml蒸餾水，3X:攪拌10分鐘，使溶解，過濾，濾液加入360ml飽和食鹽水，于4。C冰箱中放置過夜，過濾，4(TC真空干燥24小時，得淡黃色粉末；再加入1600ml異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4"C冰箱中放置8小時，過濾，濾液在5(TC減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥24小時，得淡黃色粉末18.5g。按實(shí)施例l方法測定，含量為98.8%，液相色譜圖中，15號峰的峰面積占總峰面積的比例分別為0.03%，50.32%，46.76%，2.74%,0.15%，色i普圖見圖3。實(shí)施例4:水飛薊賓葡甲胺片劑的制備處方水飛薊賓葡甲胺50g乳糖ioog微晶纖維素50g羧甲基淀粉鈉12g硬脂酸鎂3g淀粉漿適量制備成1000片制備方法先將上述物料分別粉碎過100目篩，稱取處方量水飛薊賓葡甲胺、乳糖、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉，充分混合均勻，加入適量淀粉漿制成軟材，過16目篩制濕顆粒，8(TC干燥2小時后，16目整粒，加入硬脂酸鎂混合均勻后，壓制水飛薊賓葡甲胺片。實(shí)施例5:水飛薊賓葡甲胺膠囊劑的制備處方:水飛薊賓葡甲胺預(yù)交化淀粉微晶纖維素羧甲基淀粉鈉50g50g60g12g2g淀粉漿制備成1000粒制備方法先將上述物料分別粉碎過100目篩，稱取處方量水飛薊賓葡甲胺、預(yù)交化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉，充分混合均勻，加入適量淀粉漿制成軟材，過16目篩制濕顆粒，8(TC干燥2小時后，16目整粒，加入硬脂酸鎂混合均勻，灌裝膠囊即可。實(shí)施例6:水飛薊賓葡甲胺分散片的制備處方:水飛薊賓葡甲胺甘露醇微晶纖維素交聯(lián)羧甲基淀粉鈉阿斯帕甜滑石粉淀粉漿制備成制備方法先將上述物料分別粉碎過100目篩，100g55g40g25g5g2g3g適量1000片將水飛薊賓葡甲胺、甘露醇、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉充分混合均勻，加入適量淀粉漿制軟材，過16目制濕顆粒，80。C干燥2小時后，過16目篩整粒，分混合均勻，壓片即可實(shí)施例7:水飛薊賓葡甲胺口崩片的制備處方水飛薊賓葡甲胺甘露醇微晶纖維素乳糖交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮加入阿斯帕甜、檸檬酸和滑石粉，充滑石粉阿斯帕甜50g40g20g22g30g12g15g4g3g1.5g制備成1000片制備方法將上述物料分別過ioo目篩，先將水飛薊賓葡甲胺、甘露醇、交聯(lián)聚乙烯吡咯垸酮、碳酸氫鈉、阿斯帕甜、檸檬香精混合均勻，另將微晶纖維素、乳糖、擰檬酸混合均勻，將上述混合物和滑石粉充分混合均勻，直接粉末壓片即可。實(shí)施例8:水飛薊賓葡甲胺腸溶片的制備處方水飛薊賓葡甲胺100g乳糖100g微晶纖維素24g交聯(lián)羧甲基纖維素鈉20g聚乙烯吡咯烷酮50%醇溶液3g(以聚乙烯吡咯垸酮計(jì))硬脂酸鎂3g制備成1000片腸溶包衣液鄰苯二甲酸醋酸纖維素18g甘油三醋酸酯1.8g丙酮50%水溶液180ml包衣量1000片制備方法先將上述物料粉碎過100目篩，將水飛薊賓葡甲胺、乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉充分混合均勻，加入適量聚乙烯吡咯烷酮50%醇溶液制軟材，過16目篩制濕顆粒，8CTC干燥2小時后，16目篩整粒，加入硬脂酸鎂混合均勻，壓片，包衣即可。實(shí)施例9:水飛薊賓葡甲胺注射液的制備處方水飛薊賓葡甲胺25g注射用水加至2000nu制備成1000瓶制備方法將水飛薊賓葡甲胺用注射用水溶解定容，加入1.0g活性炭攪拌20min，過濾脫炭，無菌過濾，充氮灌裝2ml，封口，10(rC滅菌30min，檢漏，燈檢即可。實(shí)施例10:水飛薊賓葡甲胺大輸液的制備處方水飛薊賓葡甲胺2g氯化鈉90g注射用水加至10000ml制備方法將水飛薊賓葡甲胺和氯化鈉用注射用水溶解定容，加入5g活性炭攪拌20min，過濾脫炭，無菌過濾，充氮灌封于250ml輸液瓶中，IO(TC滅菌30min，檢漏，燈檢即可實(shí)施例11:注射用水飛薊賓葡甲胺的制備處方水飛薊賓葡甲胺25g甘露醇80g葡甲胺lg注射用水加至2000ml制備成1000瓶制備方法稱取水飛薊賓葡甲胺，甘露醇，葡甲胺，加注射用水溶解定容至2000ml，加入1.0g藥用活性炭，攪拌吸附20min除熱原，過濾脫炭，無菌過濾，灌裝2ml濾液至7ml西林瓶中，置凍干箱內(nèi)，預(yù)凍2-4小時，采用一次升華干燥，最高干燥溫度低于45。C，周期為24-36小時，凍干完畢壓塞，停機(jī)，出箱，軋蓋，檢漏即得。權(quán)利要求1、一種高純度的水飛薊賓葡甲胺，其特征在于用高效液相色譜法測定，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0％以上，其特征還在于其制備方法包括如下步驟(1)市售水飛薊賓葡甲胺加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，干燥，得土黃色粉末；(2)取(1)所得粉末，加入蒸餾水?dāng)嚢瑁谷芙?，過濾，濾液加入飽和食鹽水，于冰箱中放置，過濾，干燥，得淡黃色粉末；(3)取(2)所得粉末，加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，干燥，得淡黃色粉末。2、一種如權(quán)利要求l所述的高純度的水飛薊賓葡甲胺，其特征在于用高效液相色譜外標(biāo)法測定，以水飛薊賓為對照品，水飛薊賓葡甲胺的含量在98.0%以上；其特征還在于，高效液相色譜面積歸一化圖譜中，共有5個色譜峰，其中2號峰、3號峰為水飛薊賓的兩個主峰，他們的峰面積之和占總峰面積的95.5%以上，5號峰為異水飛薊賓峰，其峰面積占總峰面積的0.5%以下，l號峰和4號峰為未知物質(zhì)峰，1號峰的峰面積占總峰面積的0.5%以下，4號峰的峰面積占總峰面積的3.5%以下；5個峰的相對保留時間依次為1號峰O.5200.575，2號峰:1,000，3號峰:1.:L10L135，4號峰:1.2511.320，5號峰L4951.590;其特征還在于測定高純度的水飛薊賓葡甲胺的高效液相色譜方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇—水一0.5mol/L磷酸二氫鉀(10:10:1)為流動相(用0.2mol/L磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0)，檢測波長為288nm。理論板數(shù)按水飛薊賓峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;色譜柱Discovery0DS-C18柱，25cmX4.6mm，5um;柱溫30。C;流速1.0m1/分鐘；測定法水飛薊賓葡甲胺15mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理20分鐘，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取經(jīng)105"C干燥至恒重的水飛薊賓對照品10mg，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果乘以1.405，即得。3、一種如權(quán)利要求l所述的高純度的水飛薊賓葡甲胺的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟(1)市售水飛薊賓葡甲胺加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4。C冰箱中放置，過濾,，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，4(TC真空干燥得土黃色粉末；(2)取(1)所得粉末，加入蒸餾水?dāng)嚢瑁谷芙?，過濾，濾液加入飽和食鹽水，于4'C冰箱中放置，過濾，干燥，得淡黃色粉末；(3)取(2)所得粉末，加入異丙醇，加熱回流溶解樣品，趁熱過濾，濾液于4t:冰箱中放置，過濾，濾液減壓濃縮蒸干溶劑，4CTC真空干燥得淡黃色粉末。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中步驟(1)中加入異丙醇的量為水飛薊賓葡甲胺的3050倍，減壓濃縮的溫度為4070°C;步驟(2)中加入蒸餾水的量為水飛薊賓葡甲胺的515倍，攪拌溫度為010°C，加入飽和食鹽水的量為水飛薊賓葡甲胺的1020倍；步驟(3)中加入異丙醇的量為水飛薊賓葡甲胺的60100倍，減壓濃縮的溫度為4070。C。5、一種高純度的水飛薊賓葡甲胺的藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1的水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體。6、一種如權(quán)利要求5所述的高純度的水飛薊賓葡甲胺的藥物組合物，其中含有10200mg的水飛薊賓葡甲胺和藥學(xué)上可接受的載體。7、一種如權(quán)利要求1所述的高純度的水飛薊賓葡甲胺在制備治療急性肝炎、慢性肝炎的急性發(fā)作期以及中毒性肝損害的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種高純度的水飛薊賓葡甲胺、其制備方法及其在制備治療急性肝炎、慢性肝炎的急性發(fā)作期以及中毒性肝損害的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的高純度的水飛薊賓葡甲胺用HPLC測定，含量在98％以上，克服了以前水飛薊賓葡甲胺純度低而帶來的臨床應(yīng)用安全性差以及質(zhì)量可控性差的不足。由于純度高，穩(wěn)定性好，安全性好，本發(fā)明提供的高純度的水飛薊賓葡甲胺可以制成注射用制劑，比以往的口服制劑提高了人體生物利用度。文檔編號C07D407/04GK101177424SQ200610097448公開日2008年5月14日申請日期2006年11月9日優(yōu)先權(quán)日2006年11月9日發(fā)明者叢曉東申請人:江蘇聯(lián)創(chuàng)醫(yī)藥技術(shù)有限公司