專(zhuān)利名稱(chēng)：制備吡美莫司的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備抗炎化合物吡美莫司的方法并涉及純吡美莫司。
背景技術(shù)：
吡美莫司為抗炎化合物，得自由特定鏈霉菌屬菌株產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)天然產(chǎn)物子囊霉素。吡美莫司在美國(guó)以商標(biāo)名ELTJDEL出售，被批準(zhǔn)用于特應(yīng)性皮炎的治療。吡美莫司的系統(tǒng)命名為(1R，9S，12S，13R，14S，17R，18E，21S，23S，24R，25S，27R)-12-[(1E)-2-{(1R，3R，4S)-4-氯-3-甲氧基環(huán)己基}-1-甲基乙烯基]-17-乙基-1，14-二羥基-23，25-二甲氧基-13，19，21，27-四甲基-11，28-二氧雜-4-氮雜-三環(huán)[22.3.1.04，9]二十八碳-18-烯(octacos-18-ene)-2，3，10，16-四酮。吡美莫司為子囊霉素的32-位表氯代(32-epichloro)衍生物。其經(jīng)驗(yàn)式為C43H68ClNO11，其分子量為810.47。歐洲專(zhuān)利EP 427 680 B1公開(kāi)了合成無(wú)色泡沫狀樹(shù)脂形式的吡美莫司的方法。所公開(kāi)的方法包括以下四個(gè)反應(yīng)步驟(a)用叔丁基二甲基甲硅烷基醚保護(hù)C-24和C-32的兩個(gè)羥基；(b)對(duì)甲硅烷基保護(hù)的C-32位羥基進(jìn)行脫保護(hù)，在C-24位的羥基仍然保持受保護(hù)狀態(tài)；(c)對(duì)C-32位的游離羥基進(jìn)行氯取代，伴隨構(gòu)型轉(zhuǎn)變；和(d)對(duì)甲硅烷基保護(hù)的C-24位羥基進(jìn)行脫保護(hù)。EP 427 680未公開(kāi)合成中每個(gè)步驟的產(chǎn)率，但公開(kāi)了每個(gè)步驟后用色譜法純化該步驟的產(chǎn)物。因此，由反應(yīng)步驟的數(shù)目和所需色譜法純化的次數(shù)可預(yù)計(jì)在EP 427 680中公開(kāi)的方法的總產(chǎn)率較低。因此，步驟減少特別是色譜步驟減少的吡美莫司制備方法將會(huì)是有優(yōu)勢(shì)的。本發(fā)明提供了這樣的方法。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明提供了合成吡美莫司的方法，所述方法包括將子囊霉素溶于有機(jī)溶劑中，將子囊霉素溶液與堿混合，得到反應(yīng)混合物，將反應(yīng)混合物與轉(zhuǎn)化試劑(conversion reagent)混合，得到活化的子囊霉素衍生物，將活化的子囊霉素衍生物與氯離子源混合直至得到吡美莫司，回收吡美莫司。優(yōu)選地，用柱色譜法純化由上面的方法得到的吡美莫司。優(yōu)選地，純化的吡美莫司用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％，更優(yōu)選地，用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％。本發(fā)明還提供了用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％，更優(yōu)選用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％的吡美莫司。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了包含治療有效量的上述純吡美莫司的藥用制劑。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了治療患特應(yīng)性皮炎的患者的方法，所述方法包括給予該患者上述藥用制劑的步驟。
附圖簡(jiǎn)述

圖1吡美莫司的色譜圖(chromogram)。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了合成吡美莫司的方法，所述方法包括將子囊霉素溶于有機(jī)溶劑中，將子囊霉素溶液與堿混合，得到反應(yīng)混合物，將反應(yīng)混合物與轉(zhuǎn)化試劑混合得到活化的子囊霉素衍生物，將活化的子囊霉素衍生物與氯離子源混合直至得到吡美莫司，回收粗吡美莫司。任選地，在子囊霉素C-24位的羥基在所述過(guò)程中不被保護(hù)。與EP 427 680中描述的方法不同，對(duì)子囊霉素C-24位羥基的選擇性保護(hù)不是必需的，因?yàn)镃-32位羥基具有位置選擇活性(C-24位羥基仍保持原樣)。轉(zhuǎn)化試劑在C-32位將子囊霉素轉(zhuǎn)化位活性的子囊霉素衍生物。
優(yōu)選地，所述活化的子囊霉素衍生物為磺酸酯，更優(yōu)選為甲苯磺酸酯或甲磺酸酯，最優(yōu)選為三氟甲基磺酸酯。優(yōu)選地，所述有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜及其混合物。更優(yōu)選的，所述有機(jī)溶劑為甲苯或乙腈。優(yōu)選地，將子囊霉素在高于約25℃的溫度下溶于有機(jī)溶劑中。然后所得子囊霉素溶液在惰性氣體如氮?dú)庀略诘陀诩s25℃，優(yōu)選低于約0℃，更優(yōu)選低于約-20℃的低溫下攪拌。低溫對(duì)于選擇性反應(yīng)并獲得較少的副產(chǎn)物是必需的。攪拌優(yōu)選持續(xù)至足以使所有子囊霉素基本溶解。優(yōu)選地，所述堿的量為約1-約4當(dāng)量。所述堿可被逐滴、分批或一次性加入。所述堿可為有機(jī)或無(wú)機(jī)堿。優(yōu)選地，所述堿選自三乙基胺、二異丙基乙基胺(EDIPA)、N-甲基-嗎啉、N，N-二甲基苯胺、吡啶和取代的吡啶衍生物如2，6-二甲基吡啶、2，4，6-三甲基吡啶和4-二甲基氨基吡啶。更優(yōu)選地，所述堿選自二異丙基乙基胺(EDIPA)、2，4，6-三甲基吡啶和2，6-二甲基吡啶。所述堿還可在下一步驟中與活化轉(zhuǎn)化試劑一起加入到子囊霉素溶液中，如下所述。所加入的堿可為溶液形式，其中溶劑優(yōu)選選自二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁基醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、正己烷、正庚烷、環(huán)己烷及其混合物。更優(yōu)選地，所述溶劑為甲苯。優(yōu)選地，所述堿被直接加入(under neat conditions)。
優(yōu)選加入堿來(lái)阻止反應(yīng)混合物酸度的增加，因?yàn)椋诜磻?yīng)過(guò)程中，活化劑會(huì)形成酸，在沒(méi)有堿存在時(shí)，會(huì)使反應(yīng)混合物酸化。例如，當(dāng)所述活化劑為三氟甲磺酸酐時(shí)，在反應(yīng)過(guò)程中形成三氟甲磺酸，當(dāng)活化劑為酰氯如三氟甲磺酰氯時(shí)，在反應(yīng)過(guò)程中形成HCl。如果不加入堿，反應(yīng)混合物中酸的形成會(huì)增加反應(yīng)過(guò)程的酸度，減慢反應(yīng)速率，降解大環(huán)。因此，優(yōu)選向反應(yīng)混合物中加入堿來(lái)中和反應(yīng)過(guò)程中生成的酸。逐滴、分批或一次性加入堿之后或同時(shí)，將反應(yīng)混合物與活化轉(zhuǎn)化試劑混合。優(yōu)選地，要監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程，如用薄層色譜法(TLC)，直至反應(yīng)完全或幾乎完全。優(yōu)選地，所述轉(zhuǎn)化試劑選自氟磺酸酐、氟磺酰氯、三氟甲磺酸酐、三氟甲磺酰氯、甲磺酸酐、甲磺酰氯、苯基甲磺酸酐、苯基甲磺酰氯、對(duì)-甲苯磺酸酐、對(duì)-甲苯磺酰氯、苯磺酸酐和苯磺酰氯。更優(yōu)選地，所述轉(zhuǎn)化試劑選自三氟甲磺酸酐和三氟甲磺酰氯。所加入的轉(zhuǎn)化試劑可在溶液中，其中所述溶劑選自與堿形成溶液所用的相同的溶劑，如上所述。優(yōu)選地，所述溶劑選自甲苯、正己烷、正庚烷和環(huán)己烷。將子囊霉素完全或幾乎完全轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的活化的子囊霉素如子囊霉素32-三氟甲磺酸酯所需的時(shí)間可有所不同，這取決于反應(yīng)條件如溫度、溶劑、堿和所用活化劑。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員應(yīng)知道如何監(jiān)控反應(yīng)，如根據(jù)所選擇的條件在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔通過(guò)TLC監(jiān)控。作為非限制性實(shí)例，當(dāng)用三氟甲磺酸酐作為活化劑時(shí)，反應(yīng)幾乎是瞬間發(fā)生的，甚至在-40℃下也是如此，條件是反應(yīng)混合物中有足夠量的堿即約3-約4當(dāng)量。相反，例如，在用對(duì)-甲苯磺酰氯作為活化劑時(shí)，在0℃需要3-4當(dāng)量的堿反應(yīng)1-3小時(shí)，用1當(dāng)量的堿至少需要反應(yīng)一天。加入活化轉(zhuǎn)化試劑后，將反應(yīng)混合物與氯離子源的溶液混合。優(yōu)選地，所述氯離子源溶液被加入到反應(yīng)混合物中。有效的氯離子源包括但不限于氯化鋰、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、氯化鋁、氯化鐵(II)、氯化鐵(III)、氯化銨、有機(jī)堿的鹽酸鹽、季銨氯化物(quaternary ammonium chlorides)、季磷氯化物(quaternaryphosphonium chlorides)、四丁基氯化銨、芐基-三乙基氯化銨和類(lèi)似的季銨氯化物以及上面討論的堿的鹽酸鹽。優(yōu)選地，氯離子源為芐基三乙基氯化銨。用于氯離子源的溶劑包括上面討論的用于堿和活化劑的溶劑。或者，所述氯離子源被直接(neat)加入到反應(yīng)混合物中。加入氯離子源之后，將反應(yīng)在約0℃以上但低于反應(yīng)混合物中所用的溶劑或溶劑混合物的回流溫度的溫度下攪拌。優(yōu)選地，所述溫度為至少約25℃。再次監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程以確定反應(yīng)完全，如用TLC。中間體活化的子囊霉素衍生物如32-三氟甲基磺酸酯消失的時(shí)間可有所不同，這取決于所用的精確條件，主要取決于反應(yīng)溫度和所選氯離子源的溶解性。典型地，所述時(shí)間在室溫下為約1小時(shí)-1天。在較低的溫度下和/或氯離子源溶解性較差的情況下，反應(yīng)顯著減慢。較長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間是無(wú)益的，因?yàn)闀?huì)增加不需要的副產(chǎn)物形成的可能性。吡美莫司回收步驟包括將水與水不溶性有機(jī)溶劑一起加入得到雙相系統(tǒng)；分離所述雙相系統(tǒng)；用KHSO4水溶液、NaHCO3溶液和鹽水萃取有機(jī)相，濃縮有機(jī)相；和干燥?；蛘咚龌厥詹襟E包括向反應(yīng)混合物中加入水，得到雙相系統(tǒng)；分離所述雙相系統(tǒng)；和濃縮有機(jī)相。在濃縮最后階段使用高真空得到無(wú)定形固體的粗產(chǎn)物。優(yōu)選地，該粗產(chǎn)物在干燥步驟之前用柱色譜法純化。濃縮包含粗產(chǎn)物的溶液，置于色譜柱。色譜洗脫后合并純流分，濃縮，得到無(wú)定形固體。優(yōu)選地，純化步驟后所得的吡美莫司用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％，更優(yōu)選地用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包含用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％，更優(yōu)選用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％的吡美莫司。本發(fā)明的另一實(shí)施方案為包含治療有效量的上述純吡美莫司和一定量的藥學(xué)可接受賦形劑的藥用制劑。″治療有效量″是指當(dāng)給予患者用于治療疾病或其它不希望的醫(yī)學(xué)病癥時(shí)，對(duì)該疾病或病癥具有足夠有效的效果的純吡美莫司的量。所述″治療有效量″根據(jù)純度、所治療的疾病或病癥及其嚴(yán)重性、所治療的患者的年齡、體重等而有所不同。確定給定的純吡美莫司的治療有效量在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的范圍內(nèi)，無(wú)需再進(jìn)行常規(guī)實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明的另一實(shí)施方案為治療患特應(yīng)性皮炎的患者的方法，所述方法包括給予所述患者包含治療有效量的由本發(fā)明生產(chǎn)的純吡美莫司的藥用制劑的步驟。本發(fā)明另外的實(shí)施方案為為需要其的患者提供免疫抑制的方法，所述方法包括給予所述患者包含治療有效量的由本發(fā)明生產(chǎn)的純吡美莫司的藥用制劑的步驟。本發(fā)明的藥用制劑包含由本發(fā)明的方法生產(chǎn)的純吡美莫司。除活性成分外，本發(fā)明的藥用制劑還可包含一種或多種賦形劑。將賦形劑加入到制劑中有多種目的?？上虮景l(fā)明的制劑中加入稀釋劑。稀釋劑可增加固體藥用組合物的體積，可使包含該組合物的藥用劑型易于被患者和護(hù)理者使用。用于固體組合物的稀釋劑包括，例如，微晶纖維素(如AVICEL)、微細(xì)纖維素(microfine cellulose)、乳糖、淀粉、預(yù)膠化淀粉、碳酸鈣、硫酸鈣、蔗糖、葡萄糖結(jié)合劑、糊精、葡萄糖、磷酸氫鈣二水合物、磷酸三鈣、高嶺土、碳酸鎂、氧化鎂、麥芽糊精、甘露醇、聚甲基丙烯酸酯(如EUDRAGIT)、氯化鉀、粉狀纖維素、氯化鈉、山梨醇和滑石粉。被壓制成的劑型如片劑的固體藥用組合物可包括在壓片后幫助使活性成分和其它賦形劑粘合在一起的賦形劑。用于固體藥用組合物的粘合劑包括阿拉伯膠、海藻酸、卡波姆(如聚羧乙烯)、羧甲基纖維素鈉、糊精、乙基纖維素、明膠、瓜爾膠、氫化植物油、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素(如KLUCEL)、羥丙基甲基纖維素(如METHOCEL)、液體葡萄糖、硅酸鎂鋁、麥芽糊精、甲基纖維素、聚甲基丙烯酸酯、聚維酮(如KOLLIDON、PLASDONE)、預(yù)膠化淀粉、海藻酸鈉和淀粉。可向組合物中加入崩解劑來(lái)增加壓制固體藥用組合物在患者胃中的溶出度。崩解劑包括海藻酸、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉(如AC-DI-SOL、PRMELLOSE)、膠體二氧化硅、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮(如KOLLIDON、POLYPLASDONE)、瓜爾膠、硅酸鎂鋁、甲基纖維素、微晶纖維素、聚克立林鉀、粉狀纖維素、預(yù)膠化淀粉、海藻酸鈉、淀粉羥乙酸鈉(如EXPLOT AB)和淀粉?？杉尤胫鲃┮蕴岣叻菈褐乒腆w組合物的流動(dòng)性，并提高劑量的準(zhǔn)確性?？捎米髦鲃┑馁x形劑包括膠體二氧化硅、三硅酸鎂、粉狀纖維素、淀粉、滑石粉和磷酸三鈣。當(dāng)劑型如片劑為由壓制粉末組合物而制得時(shí)，所述組合物要經(jīng)受沖頭和沖模的壓力。一些賦形劑和活性成分會(huì)粘附在沖頭和沖模的表面，這會(huì)引起產(chǎn)品具有孔蝕和其它表面不規(guī)則?？上蚪M合物中加入潤(rùn)滑劑以減少粘附，并使產(chǎn)物易于從沖模釋放。潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、單硬脂酸甘油酯、棕櫚酰硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、氫化植物油、礦物油、聚乙二醇、苯甲酸鈉、月桂硫酸鈉、硬脂富馬酸鈉、硬脂酸、滑石粉和硬脂酸鋅。調(diào)味劑和增味劑(flavor enhancers)使劑型對(duì)患者來(lái)說(shuō)更可口。通常用于藥用產(chǎn)品的可包含在本發(fā)明組合物中的調(diào)味劑和增味劑包括麥芽酚、香草醛、乙基香草醛、薄荷醇、檸檬酸、富馬酸、乙基麥芽酚和酒石酸。還可用任何藥學(xué)可接受著色劑對(duì)固體和液體組合物進(jìn)行染色以改善其外觀，和/或使患者便于鑒別產(chǎn)品和單位劑量水平。在用由本發(fā)明的方法生產(chǎn)的純吡美莫司制備的液體藥用組合物中，吡美莫司和任何其它固體賦形劑為溶于或懸浮于液體載體如水、植物油、醇、聚乙二醇、丙二醇或甘油中。液體藥用組合物可包含乳化劑，以使不溶于液體載體的活性成分或其它賦形劑均勻地分散于組合物中。可用于本發(fā)明液體組合物的乳化劑包括，例如，明膠、蛋黃、酪蛋白、膽固醇、阿拉伯膠、黃蓍樹(shù)膠、角叉菜膠、果膠、甲基纖維素、卡波姆、十八醇十六醇混合物和十六醇。液體藥用組合物還可包含增粘劑，以改善口感和/或覆蓋在胃腸道內(nèi)表面(coat the lining of the gastrointestinal tract)。這樣的試劑包括阿拉伯膠、海藻酸、膨潤(rùn)土、卡波姆、羧甲基纖維素鈣或鈉、十八醇十六醇混合物、甲基纖維素、乙基纖維素、明膠、瓜爾膠、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、麥芽糊精、聚乙烯醇、聚維酮、碳酸丙稀、海藻酸丙二醇酯、海藻酸鈉、淀粉羥乙酸鈉、淀粉、黃蓍樹(shù)膠和黃原膠。也可加入甜味劑如山梨醇、糖精、糖精鈉、蔗糖、阿司帕坦、果糖、甘露醇和轉(zhuǎn)化糖來(lái)改善口味。可在攝食安全水平加入防腐劑和螯合劑如醇、苯甲酸鈉、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基苯甲醚和乙二胺四乙酸以提高儲(chǔ)存穩(wěn)定性。液體組合物還可包含緩沖劑如葡萄糖酸(guconic acid)、乳酸、檸檬酸或乙酸、葡萄糖酸鈉(sodium guconate)、乳酸鈉、檸檬酸鈉或乙酸鈉。制劑科學(xué)家根據(jù)經(jīng)驗(yàn)并考慮本領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)程序和參考文獻(xiàn)可很容易確定賦形劑及所用量的選擇。本發(fā)明的固體組合物包括粉末、顆粒、聚集物和緊密組合物。劑量包括適于口服、口腔含化、直腸給藥、胃腸外給藥(包括皮下給藥、肌內(nèi)給藥和靜脈給藥)、吸入給藥和眼部給藥的劑量。盡管在任何情況下最適合的給藥方式取決于所治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性，但是本發(fā)明最優(yōu)選的途徑為口服。劑量可方便地以單位劑量形式存在，可用藥學(xué)領(lǐng)域中任何眾所周知的方法制備。劑型包括固體劑型如片劑、散劑、膠囊劑、栓劑、囊劑(sachets)、含片(troches)和錠劑以及液體糖漿、混懸劑和酏劑。本發(fā)明的口服劑型優(yōu)選為劑量為約10mg-約160mg，更優(yōu)選為約20mg-約80mg，最優(yōu)選為20、40、60和80mg的口服膠囊形式。日劑量可包括每天1、2或更多膠囊。本發(fā)明的劑型可為在硬或軟殼中包含組合物優(yōu)選本發(fā)明的粉末或顆粒固體組合物的膠囊。所述殼可由明膠制備，并任選包含增塑劑如甘油和山梨醇以及遮光劑或著色劑。用于壓片或填充膠囊的組合物可由濕法制粒制備。在濕法制粒中，將粉末形式的一些或全部的活性成分和賦形劑混合，然后再在液體通常為水的存在下混合，使粉末凝結(jié)成顆粒。將顆粒過(guò)篩和/或研磨、干燥，然后再過(guò)篩和/或研磨至所需粒徑。然后可將該顆粒壓片，或在壓片前加入其它賦形劑如助流劑和/或潤(rùn)滑劑?？赏ㄟ^(guò)干混合法常規(guī)制備壓片組合物。例如，可將活性成分和賦形劑的混合組合物壓成預(yù)壓片或片層，然后搗碎為緊密結(jié)合的顆粒。接著將該緊密結(jié)合的顆粒壓成片劑。作為干法制粒的替代，可采用直接壓片技術(shù)將混合組合物直接壓成劑型。直接壓片得到?jīng)]有顆粒的更均勻的片劑。特別適于直接壓片的賦形劑包括微晶纖維素，噴霧干燥的乳糖，磷酸氫鈣二水合物和膠體硅。在直接壓片中適當(dāng)使用這些和其它賦形劑對(duì)本領(lǐng)域中在直接壓片的特定制劑挑戰(zhàn)方面具有經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)的人員來(lái)說(shuō)為已知的。本發(fā)明填充的膠囊可包含任何上述混合物和在壓片中提到的顆粒，但是，其最后不經(jīng)壓片步驟?；钚猿煞趾唾x形劑可按照本領(lǐng)域已知的方法制入組合物和劑型中。已根據(jù)某些優(yōu)選的實(shí)施方案描述了本發(fā)明，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員會(huì)從說(shuō)明書(shū)中理解其它實(shí)施方案。本發(fā)明還通過(guò)參考下面詳細(xì)描述組合物制備和本發(fā)明使用方法的實(shí)施例來(lái)定義。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員會(huì)理解對(duì)材料和方法的許多修改都不偏離本發(fā)明的范圍。
儀器測(cè)定純度的色譜方法洗脫液正己烷∶丙酮∶乙腈20∶2∶1(按體積計(jì))流速20-40mL/min檢測(cè)TLC(UV，254nm)
樣品濃度400-500g/L樣品體積60-70mL柱溫25℃檢出限未確定實(shí)施例
下面的非限制性實(shí)施例僅用于示例本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，不應(yīng)被解釋為對(duì)本發(fā)明的限制，其范圍由所附權(quán)利要求定義。
實(shí)施例1
將3.0g粗子囊霉素樣品通過(guò)短硅膠柱純化。將所得3.0g漿液(syrup)溶于25ml無(wú)水二氯甲烷中。使干燥氮?dú)饬骶徛ㄈ朐撊芤?，將其冷?15℃。將5％重量的三氟甲磺酸酐的無(wú)水二氯甲烷溶液以每份6ml與每份0.3g 2，6-二甲基吡啶一起加入到上述溶液中?？偣布尤?4ml三氟甲磺酸酐溶液后，向反應(yīng)混合物中加入28g 10％重量的氯化鋰溶液，將反應(yīng)混合物升至室溫，即約21℃。然后將該反應(yīng)混合物攪拌4天。將反應(yīng)混合物用200ml乙酸乙酯和25ml水的混合物稀釋?zhuān)谷敕忠郝┒分?，振搖。萃取后，加入25ml 10％重量的KHSO4水溶液。再振搖后，移出水層，有機(jī)相用25ml 10％重量的KHSO4水溶液洗滌三次，用25ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，用25ml鹽水洗滌兩次。用無(wú)水MgSO4干燥有機(jī)相。過(guò)濾后，真空濃縮，最后在高真空下完全除去溶劑。粗無(wú)定形吡美莫司的產(chǎn)量為2.94g。將所得產(chǎn)物通過(guò)快速色譜法用正己烷/丙酮(2∶1，V/V作為洗脫液純化。無(wú)定形吡美莫司的產(chǎn)量為2.54g。
實(shí)施例2
將31.4g子囊霉素(測(cè)定含量為92.7％(assayed at 92.7percent))樣品溶于200ml甲苯中。將該溶液在40℃下濃縮至干(漿液)。加入無(wú)水甲苯得到230g溶液，然后加入275ml無(wú)水乙腈。用干燥氮?dú)饬骶徛ㄟ^(guò)溶液表面，使該溶液冷至-15℃的夾套(jacket)溫度。同時(shí)，同樣用干燥氮?dú)饬骶徛ㄟ^(guò)液體表面，將315ml無(wú)水甲苯在小反應(yīng)器中冷至-15℃的夾套溫度。當(dāng)甲苯的穩(wěn)定達(dá)到約-12.5℃時(shí)，逐滴加入13.85g三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)。大約同時(shí)向子囊霉素溶液中逐滴加入11.33g乙基二異丙基胺(EDIPA)。幾分鐘后，將三氟甲磺酸酐溶液轉(zhuǎn)移到子囊霉素溶液中。添加完成后，將夾套的溫度設(shè)定為26℃。當(dāng)反應(yīng)物質(zhì)的溫度達(dá)到約0℃時(shí)，加入300g 12.5％重量的芐基-三乙基氯化銨(″BnEt3NCl″)的無(wú)水乙腈溶液。當(dāng)反應(yīng)物質(zhì)的溫度升至約24℃-約25℃后45分鐘加入200ml水。在一段時(shí)間的劇烈攪拌后，移出水相，再加入200ml水，攪拌后再次移出水相。在40℃下濃縮有機(jī)相直至除去幾乎所有的乙腈。在攪拌下用等體積的甲苯稀釋該溶液。過(guò)濾沉淀的固體，用甲苯洗滌。濾液在40℃下濃縮至干。得到褐色泡沫狀粗無(wú)定形吡美莫司，產(chǎn)量為33g。
實(shí)施例3
按照實(shí)施例2將30g子囊霉素轉(zhuǎn)化為粗吡美莫司。將所得粗產(chǎn)物在甲苯中的濃溶液置入600g硅膠60(0,040-0,063mm)柱。用正己烷-丙酮-乙腈(20∶2∶1)混合物洗脫。合并包含由HPLC分析具足夠純度的吡美莫司的流分，用10V/V％乙腈萃取。移出包含吡美莫司的乙腈和丙酮混合物(有一些正己烷)溶液的下層，上層(主要為正己烷)用5V/V％乙腈萃取兩次。合并下層(乙腈-丙酮)，在40℃下濃縮，得到無(wú)色樹(shù)脂。然后在40℃將其溶于217ml丙酮中，濃縮。殘留物38,76g。在攪拌下將該殘留物用6ml蒸餾水稀釋。最后加入1ml丙酮。將該溶液緩慢加入到2L預(yù)冷的蒸餾水中，充分?jǐn)嚢?。加入完成后，將該混懸液?℃下攪拌20分鐘。然后濾出固體，在45℃下真空干燥過(guò)夜。產(chǎn)物15,65g淡黃色固體。無(wú)定形(XRD，DSC)。純度用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為95.75％。雖然本文公開(kāi)的本發(fā)明很好地達(dá)成了上述目標(biāo)，但應(yīng)了解本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可設(shè)計(jì)許多修改和實(shí)施方案。因此，所附的權(quán)利要求覆蓋所有落在本發(fā)明真實(shí)精神和范圍內(nèi)的這些修改和實(shí)施方案。
權(quán)利要求
1.一種制備吡美莫司的方法，所述方法包括a)將子囊霉素溶于有機(jī)溶劑中；b)將子囊霉素與堿和轉(zhuǎn)化試劑混合，得到活化的子囊霉素衍生物；c)將子囊霉素的活化衍生物與氯離子源反應(yīng)得到吡美莫司；并d)回收所得的吡美莫司。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜及其混合物。
3.權(quán)利要求2的方法，其中所述有機(jī)溶劑為甲苯、乙腈或其混合物。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述子囊霉素在至少約25℃的溫度下溶于有機(jī)溶劑中。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所得子囊霉素溶液在低于約25℃的溫度下攪拌。
6.權(quán)利要求5的方法，其中所得子囊霉素溶液在低于0℃的溫度下攪拌。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所得子囊霉素溶液在低于-20℃的溫度下攪拌。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述堿的量為約1-約4當(dāng)量。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(b)中的堿為逐滴、分批或一次性加入。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述堿選自三乙基胺、二異丙基乙基胺(EDIPA)、N-甲基-嗎啉、N，N-二甲基苯胺、吡啶和取代的吡啶衍生物如2，6-二甲基吡啶、2，4，6-三甲基吡啶和4-二甲基氨基吡啶。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述堿選自二異丙基乙基胺(EDIPA)、2，4，6-三甲基吡啶和2，6-二甲基吡啶。
12.權(quán)利要求1的方法，其中所述堿以溶液形式被加入，所述溶液包含選自下述的溶劑二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、正己烷、正庚烷、環(huán)己烷及其混合物。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述堿以溶液形式被加入，所述溶液包含甲苯。
14.權(quán)利要求1的方法，其中所述活化的子囊霉素衍生物選自磺酸酯、甲苯磺酸酯或甲磺酸酯和三氟甲基磺酸酯。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(a)中的轉(zhuǎn)化試劑選自氟磺酸酐、氟磺酰氯、三氟甲磺酸酐、三氟甲磺酰氯、甲磺酸酐、甲磺酰氯、苯基甲磺酸酐、苯基甲磺酰氯、對(duì)-甲苯磺酸酐、對(duì)-甲苯磺酰氯、苯磺酸酐和苯磺酰氯。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述轉(zhuǎn)化試劑選自三氟甲磺酸酐和三氟甲磺酰氯。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述轉(zhuǎn)化試劑以溶液形式被加入，所述溶液包含選自下述的溶劑二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、正己烷、正庚烷、環(huán)己烷及其混合物。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述轉(zhuǎn)化試劑以溶液形式被加入，所述溶液包含選自下述的溶劑甲苯、正己烷、正庚烷和環(huán)己烷。
19.權(quán)利要求1的方法，其中所述步驟(c)中的氯離子源選自氯化鋰、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、氯化鋁、氯化鐵(II)、氯化鐵(III)、氯化銨、有機(jī)堿的鹽酸鹽、季銨氯化物、季磷氯化物、四丁基氯化銨、芐基-三乙基氯化銨和類(lèi)似的季銨氯化物，和選自下述堿的鹽酸鹽三乙基胺、二異丙基乙基胺(EDIPA)、N-甲基-嗎啉、N，N-二甲基苯胺、吡啶和取代的吡啶衍生物如2，6-二甲基吡啶、2，4，6-三甲基吡啶和4-二甲基氨基吡啶。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述氯離子源為芐基三乙基氯化銨。
21.權(quán)利要求1的方法，其中所述氯離子源以溶液形式被加入，所述溶液包含選自下述的溶劑二氯甲烷、氯仿、乙醚、二異丙醚、甲基叔丁醚、甲苯、乙酸乙酯、乙酸異丁酯、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、正己烷、正庚烷、環(huán)己烷及其混合物。
22.權(quán)利要求1的方法，還包括在步驟d)之前攪拌反應(yīng)混合物。
23.權(quán)利要求1的方法，其中所述回收步驟包括將水與水不溶性有機(jī)溶劑一起加入，得到雙相系統(tǒng)；分離所述雙相系統(tǒng)；用KHSO4水溶液、NaHCO3水溶液和鹽水萃取有機(jī)相，濃縮有機(jī)相；并干燥。
24.權(quán)利要求1的方法，其中所述所述回收步驟包括向反應(yīng)混合物中加入水，得到雙相系統(tǒng)；分離所述雙相系統(tǒng)；并濃縮有機(jī)相。
25.權(quán)利要求1的方法，還包括通過(guò)柱色譜法純化所得吡美莫司，得到純化的吡美莫司。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述純化的吡美莫司用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％。
27.權(quán)利要求26的方法，其中所述純化的吡美莫司用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％。
28.吡美莫司，其用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約95％。
29.權(quán)利要求28的吡美莫司，其用HPLC峰面積法測(cè)定的純度為至少約98％。
30.一種藥用制劑，所述制劑包含治療有效量的權(quán)利要求28的吡美莫司。
31.一種治療患特應(yīng)性皮炎的患者的方法，所述方法包括給予所述患者權(quán)利要求30的藥用制劑的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供了從子囊霉素制備吡美莫司的方法，其中子囊霉素與轉(zhuǎn)化試劑反應(yīng)轉(zhuǎn)化為其活化的C－32位的衍生物?；罨淖幽颐顾厝缓笈c氯離子反應(yīng)。本發(fā)明的方法所需步驟少于現(xiàn)有技術(shù)方法，并且不需要保護(hù)子囊霉素C－24位的羥基或純化該活化的子囊霉素衍生物。
文檔編號(hào)C07H19/00GK101068818SQ200580041024
公開(kāi)日2007年11月7日 申請(qǐng)日期2005年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月1日
發(fā)明者V·捷萊, C·紹博 申請(qǐng)人:特瓦藥廠(chǎng)私人有限公司