專利名稱：用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)的鐵絡(luò)合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)的鐵絡(luò)合物，所述絡(luò)合物包括亞鐵或者三價鐵離子和含有五-或六元芳環(huán)或雜環(huán)的單、二、三或者六齒配體；包括這些鐵絡(luò)合物的組合物；這些鐵絡(luò)合物在提高鐵的生物利用率方面的用途和它們在治療和/或預(yù)防缺鐵癥紊亂和貧血癥中的用途。
背景技術(shù)：
由于亞鐵(Fe(II))和三價鐵(Fe(III))涉及于人體所必須的許多生物進(jìn)程中，因此它們是人體營養(yǎng)的主要成分。例如，鐵存在于酶的氧化還原-活性反應(yīng)中心。它還表現(xiàn)為血紅蛋白和肌紅蛋白中的關(guān)鍵協(xié)調(diào)原子，可以調(diào)節(jié)體內(nèi)氧的運(yùn)輸、存儲和利用。
缺鐵癥紊亂是全世界最普遍的營養(yǎng)失調(diào)之一。根據(jù)世界健康組織[WHO/UNICEF/Joint Committee有關(guān)健康策略的世界健康組織報告，30th Session.JCHP30/95/4.5.日內(nèi)瓦]和其它來源[見，例如，Hurrell、Nutr.Rev.55，210-222(1997)]，20-33％的世界人口、50％的發(fā)展中國家和10％的發(fā)達(dá)國家，正遭受主要由于營養(yǎng)不良引起的缺鐵癥。人的貧血癥主要是由于在膳食中缺乏或者缺少三價鐵或者二價鐵的生物利用率。
因為各種原因而含有大量蔬菜和少量紅色肉類的膳食，由于含有高肌醇磷酸和多酚可能使得這種情況更為惡化。缺鐵癥還會影響兒童行為和發(fā)育、工作績效和免疫力。因此，從公眾健康的角度來說，保持足夠的鐵含量是非常重要的。
輸送Fe(II)和Fe(III)離子到腸吸收位點的新方法有助于改善鐵在人體內(nèi)的狀態(tài)和有助于人口更為健康。使用鐵鹽例如硫酸亞鐵或者絡(luò)合物的食物營養(yǎng)強(qiáng)化就是其中一種方法。例如，WO 01/67897中描述了一種加強(qiáng)食品，該食品包括加強(qiáng)量的一種由亞鐵或者三價鐵源(例如硫酸亞鐵)、磷酸鹽和銨制備得到的無機(jī)化合物例如磷酸亞鐵銨。
EDTA已被用于各種飲食。例如，US 4,299,853中公開了EDTA作為酒精飲料例如啤酒、葡萄酒和蘋果汁防腐劑的用途。US 3,956,513中公開了一種用于食品或飲料的食用香精中的固態(tài)產(chǎn)品，該固態(tài)產(chǎn)品含有EDTA的二鈉鹽或二鉀鹽與EDTA的四鈉鹽或四鉀鹽的混合物。在US 4,820,520中公開了EDTA鹽和防腐劑共同使用從而提高飲食中防腐劑的抗真菌活性。US 4,937,085公開了一種食品保藏組合物，其防止蔬菜例如馬鈴薯變色，該組合物包括檸檬酸、半胱氨酸、抗壞血酸和痕量EDTA。
EDTA還已用于制造各種鐵強(qiáng)化食品和飲料。例如，US 5,667,825和US 5,534,275中公開了以乙二胺四乙酸(EDTA)鐵作為鐵源的即食谷類制品的食品強(qiáng)化。US 6,461,651中描述了無鈉的乙二胺四乙酸鐵(II)絡(luò)合物，其可用于鐵加強(qiáng)加工食品的制備。此外，WO 03/013283中公開了添加了作為鐵源的乙二胺四乙酸(EDTA)鐵的飲料和混合粉末狀飲料。
U.S.4,020,158、US 4,830,716和US 5,516,925提供了作為營養(yǎng)增補(bǔ)劑給藥于人及其他動物的金屬(包括鐵)氨基酸螯合物。另外，WO03/016332揭示了一種提高這些鐵氨基酸螯合物和鐵蛋白質(zhì)鹽的溶解度的方法。商品名為Ferrochel(TM)的含有一種鐵氨基酸螯合物的食品營養(yǎng)增補(bǔ)劑已經(jīng)由Albion Laboratories，Inc.(Clearfield，Utah)上市了。美國專利5,653,987公開了一種適于口服或鼻腔給藥的液態(tài)藥劑制劑，包括一種基于蛋白質(zhì)的藥劑、水和至少兩種吸收增強(qiáng)化合物，所述吸收增強(qiáng)化合物可以包括乙二胺四乙酸(EDTA)二鈉。
在小豬體內(nèi)進(jìn)行了口服有機(jī)亞鐵鹽的研究，以調(diào)查草酸鐵、間苯二酸鐵、鄰苯二甲酸鐵、對酞酸鐵和煙酸鹽鐵的抗貧血作用并將其與延胡索酸鐵的抗貧血作用相比較(F.Kratky，“The peroral application ofnew organic iron compounds as a prophylactic measure against pigletphysiological sideropenic anaemia”，Zivocisna Vyroba，(1972)，17(12)，pp.901-10)。在試驗的過程中，對苯二甲酸鐵和煙酸鐵顯示出與延胡索酸鹽鐵相似的抗貧血活性。
WO96/41627和WO02/24196中公開了含有三價鐵或亞鐵狀態(tài)的鐵和一個羥基吡喃酮的鐵絡(luò)合物，可用于增加患者血液中的鐵的水平。優(yōu)選羥基-4-吡喃酮和5-羥基吡喃酮，更優(yōu)選3-羥基-4-吡喃酮，例如麥芽酚和乙基麥芽酚。WO 03/097627還公開了一種形成這類化合物的方法，其中包括鐵的一種羧酸鹽和一種羥基吡喃酮在pH值大于7的水溶液中反應(yīng)。
WO 01/12163公開了一種營養(yǎng)增補(bǔ)劑，包括兩種不同的鐵化合物，即一種迅速溶解的鐵化合物和一種緩慢溶解的鐵化合物。所述鐵化合物可以選自已知的鐵化合物，例如鐵(II)鹽，鐵(III)鹽和微粒態(tài)鐵組合物。
很好地報道了由于在生理學(xué)的pH值二價鐵與三價鐵相比具有更為有利的各個氫氧-絡(luò)合物平衡，因此二價鐵比三價鐵具有更高的生物利用率。然而，迄今為止，還未有任何一種物質(zhì)已經(jīng)被確定在令人滿意地提高鐵的生物利用率的同時滿足食品、飲料和口服藥物制劑的感官性能的要求。
發(fā)明概述一方面，本發(fā)明提供了一種包括亞鐵的或三價鐵和單、雙、三或六齒配體的鐵絡(luò)合物，其特征在于所述配體為式I所示化合物 其中m為0或1；n為1或2；X為CR或O；每個R都獨立地表示一個氫原子、氧代基團(tuán)、任選取代的烷基或-OR3，其中R3表示氫原子或一個任選取代的烷基；R1表示一個任選取代的烷基或-CO-R4，其中R4表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；并且R2表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；
條件是，當(dāng)X為O時，m為0，該鐵絡(luò)合物用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)。
第二方面，本發(fā)明提供了一種如上文所定義的醫(yī)藥上使用的鐵絡(luò)合物，特別是用于增加患者血液中鐵的水平。
第三方面，本發(fā)明提供了一種如上文所定義的用于治療和/或預(yù)防缺鐵癥紊亂和/或貧血癥的鐵絡(luò)合物。
第四方面，本發(fā)明提供了如上文所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)的藥物中的用途。
第五方面，本發(fā)明提供了如上文所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于增加患者血液中鐵的水平的藥物中的用途。
第六方面，本發(fā)明提供了如上文所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/或預(yù)防缺鐵癥紊亂和/或貧血癥的藥物中的用途。
第七方面，本發(fā)明提供了一種食品或飲料組合物，包括如上文所定義的鐵絡(luò)合物和食品可接受的或可飲用的載體。
第八方面，本發(fā)明提供了一種鐵加強(qiáng)食品或鐵加強(qiáng)飲料，包括加強(qiáng)量的如上文所定義的鐵絡(luò)合物。
第九方面，本發(fā)明提供了食物添加劑，包括如上文所定義的鐵絡(luò)合物。
第十方面，本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，包括如上文所定義的鐵絡(luò)合物和藥學(xué)上可接受的載體。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及鐵絡(luò)合物的改進(jìn)，所述鐵絡(luò)合物適于摻入在食品、飲料、食物添加劑和藥物組合物中。所述鐵絡(luò)合物包括亞鐵或三價鐵和含有五-或六-元芳環(huán)或雜環(huán)的二齒配位體。具體地，所述配位體是式I所示的化合物
其中m為0或1；n為1或2；X為CR或O；每個R都獨立地表示一個氫原子、氧代基團(tuán)、任選取代的烷基或-OR3，其中R3表示氫原子或一個任選取代的烷基；R1表示一個任選取代的烷基或-CO-R4，其中R4表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；并且R2表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；條件是，當(dāng)X為O時，m為0，該物質(zhì)用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)。
配體更優(yōu)選為二齒配位體。
任何一個烷基，除非另作說明，可以為最多含有12個碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選最多含有6個碳原子，特別優(yōu)選最多含有4個碳原子。優(yōu)選烷基為甲基、乙基、丙基和丁基，特別是甲基和乙基，并且更特別優(yōu)選甲基。當(dāng)烷基為另一基團(tuán)中的組成部分時，例如烷氧基中的烷基，優(yōu)選最多含有6個碳原子的烷基，特別是最多含有4個碳原子的烷基。這部分烷基片斷優(yōu)選甲基和乙基，特別優(yōu)選甲基。
當(dāng)指任何一個上述取代基被任選取代時，任選存在的取代基可以為那些通常用于改進(jìn)食品、飲料和/或藥物組合物和/或修飾這類化合物對它們的結(jié)構(gòu)/活性、穩(wěn)定性、生物利用率或其它性質(zhì)造成影響的基團(tuán)中的任何一個或多個。這類取代基的具體例子包括，例如，鹵素原子、硝基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、甲?；⑼檠豸驶?、羧基和烷酰基。
當(dāng)上述任何一個任選取代基表示或含有一個烷基取代基時，該烷基可以為直鏈或支鏈烷基并且最多可以含有6個碳原子，優(yōu)選最多含有4個碳原子。優(yōu)選的任選取代基包括鹵素原子、羥基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基和二-(C1-4烷基)氨基。特別優(yōu)選的任選取代基包括鹵素原子、羥基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和氨基，更特別優(yōu)選鹵素原子和羥基。
優(yōu)選R1表示C1-4烷基，特別是乙基或者，更特別為甲基，或-CO-R4。更優(yōu)選R1為-CO-R4。優(yōu)選R4表示氫原子、羥基或C1-4烷氧基。更優(yōu)選R4表示氫原子或羥基、甲氧基或乙氧基。
X可以是CR或O。因此，當(dāng)X是CR時，五或六元環(huán)的全部位置都可以被取代。然而，五-或六-元環(huán)也可以僅在一個位置被取代或者某幾個位置被取代。當(dāng)X是O時，該O-原子上不被取代，但是剩余還原子中的一個、一些或全部剩余環(huán)原子可以被取代。
雖然m可以為0或1，但是當(dāng)X是CR時，優(yōu)選m為1。優(yōu)選R2表示氫原子或羥基或C1-4烷氧基。更優(yōu)選R2表示氫原子或羥基或甲氧基，特別是羥基。
優(yōu)選，每個R都獨立地表示氫原子或羥基、C1-4烷基或C1-4烷氧基。更優(yōu)選每個R都獨立地表示氫原子或羥基、甲基或甲氧基。
當(dāng)X為O時，R還可以表示氧代基團(tuán)。優(yōu)選氧代基團(tuán)位于化合物的2-或3-位，也就是說，為呋喃-2-酮和呋喃-3-酮，特別是呋喃-3-酮。
在優(yōu)選的化合物亞組中，m是1，n是1，X是CR，每個R各自獨立地表示氫原子或羥基或甲氧基，R1是-CO-R4，其中R4表示氫原子或羥基、特別是氫原子，并且R2表示氫原子或羥基。特別優(yōu)選二-或三-取代的苯基。優(yōu)選的取代型式包括1，2-、1，2，3-、1，2，4-、1，3，4-和1，2，5-位取代的苯環(huán)。特別優(yōu)選在-CO-R4基團(tuán)鄰位具有羥基的化合物。
特別優(yōu)選的化合物亞組包括2-羥基苯甲醛、2-羥基-3-甲氧基苯甲醛(o-香草醛)、2，5-二羥基苯甲醛、2-羥基-4-甲氧基苯甲醛和3-羥基-4-甲氧基苯甲酸。
在另一個優(yōu)選的化合物亞組中，m是0，n是1，X是O，R表示氫原子、氧代基團(tuán)或甲基或乙基，R1是甲基或-CO-R4其中R4表示氫原子，并且R2表示氫原子。特別優(yōu)選二-取代的呋喃基團(tuán)。優(yōu)選的取代型式為2，5-取代。
特別優(yōu)選的化合物亞組包括5-甲基-2-呋喃甲醛、2-乙基-4-羥基-5-甲基-3(2H)-呋喃酮、2，5-二甲基-4-羥基-3(2H)-呋喃酮和4-羥基-5-甲基-3(2H)-呋喃酮。
該鐵絡(luò)合物可溶于水是其一項特別的優(yōu)點。
二價鐵或三價鐵可以由任何適當(dāng)?shù)膩碓刺峁?。二價鐵來源可以為任何食品或藥物級別的亞鐵鹽，例如硫酸亞鐵、硫酸亞鐵銨、氯化亞鐵、蘋果酸亞鐵、乙酸亞鐵、葡萄糖酸亞鐵、硝酸亞鐵、乳酸亞鐵、富馬酸亞鐵、琥珀酸亞鐵、氧化亞鐵、氫氧化亞鐵或它們的混合物。特別優(yōu)選硫酸亞鐵。
三價鐵來源可以是任何食品或藥物級別的鐵鹽，例如硫酸鐵、氯化鐵、硝酸鐵、乙酸鐵、蘋果酸鐵、乙酸鐵銨、甲酸鐵、三氧化二鐵、氫氧化鐵或它們的混合物。特別優(yōu)選硫酸鐵。
制備如上文所定義的鐵絡(luò)合物的方法包括二價鐵或三價鐵鹽與如上文所定義的式I化合物在溶劑中反應(yīng)。優(yōu)選鐵鹽與式I化合物的摩爾比為1∶1-1∶6，更優(yōu)選1∶2-1∶3，特別是1∶2。
如上文所定義的鐵絡(luò)合物可以用于提高鐵的生物利用率。因此本發(fā)明鐵絡(luò)合物便于以組合物的形式給藥。因此本發(fā)明還提供了一種組合物，包括如上文所定義的鐵絡(luò)合物和載體。
所述組合物可以為食品組合物，而在這種情況下的載體可以為食品可接受的載體。合適的食品可接受的載體包括蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、糖等等。所述組合物可以為飲料組合物，在這種情況下所述載體可以為適于飲用的載體。適當(dāng)?shù)倪m于飲用的載體包括水、牛奶及其他合適的液體。飲料組合物包括立即可飲的飲料和混合粉末狀飲料，混和粉末狀飲料在加入適當(dāng)?shù)囊后w后可以再構(gòu)成。
本發(fā)明還包括含有加強(qiáng)量的如上文所定義的鐵絡(luò)合物的鐵加強(qiáng)食品，和含有加強(qiáng)量的如上文所定義的鐵絡(luò)合物和適于飲用的液體的鐵加強(qiáng)飲料。這種鐵加強(qiáng)飲料包括立即可飲的飲料以及混合粉末狀飲料。優(yōu)選的食品包括谷類和面粉以及由谷類和/或面粉制作的產(chǎn)品例如粥和營養(yǎng)性糕點。還優(yōu)選乳制品，例如牛奶制品。病人和老年人食用的食品還可以用根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行鐵加強(qiáng)。
這些食品或飲料組合物中鐵的含量可以為1-200ppm，優(yōu)選5-100ppm，更優(yōu)選10-75ppm。理想地，鐵的量應(yīng)當(dāng)為每天不多于3次給藥達(dá)到40mg每天的每日建議攝取量(RDA)。
本發(fā)明進(jìn)一步包括一種食物添加劑，包括如上文所述的鐵絡(luò)合物。這種食物添加劑可以單獨給藥或加入到食品或飲料中給藥。
本發(fā)明組合物還可以為藥物組合物形式，在這種情況下載體可以為藥學(xué)上可接受的載體。
藥學(xué)上可接受的載體可以為任何材料，鐵絡(luò)合物和這種材料一起配制可以促進(jìn)給藥。載體可以為固體或液體，包括普通氣態(tài)材料但是該氣態(tài)材料已經(jīng)壓縮形成液態(tài)，并且可以使用常用于配制藥物混合物的任何載體。優(yōu)選本發(fā)明組合物含有0.5-95％重量的活性成分。
本發(fā)明的鐵絡(luò)合物可以配制成例如片劑、膠囊、栓劑或溶液。這些制劑可以通過已知的方法使用常規(guī)的固體載體例如乳糖、淀粉或滑石粉或者液體載體例如水、油脂或液體石蠟制造?？梢允褂玫钠渌妮d體包括來源于動物或者植物蛋白的材料，例如白明膠、糊精和大豆、小麥和車前草種子蛋白；樹膠例如阿拉伯樹膠、瓜耳膠、瓊脂和黃原膠(xanthan)；多糖；藻朊酸鹽；羧甲基纖維素；卡拉膠；右旋糖酐；果膠；合成聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮；多肽/蛋白質(zhì)或者多糖復(fù)合物例如白明膠-阿拉伯膠復(fù)合物；糖例如甘露醇、葡萄糖、半乳糖和海藻糖；環(huán)狀糖例如環(huán)糊精；無機(jī)鹽例如磷酸鈉、氯化鈉和硅酸鋁；和具有2-12個碳原子的氨基酸例如甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-羥脯氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸和L-苯丙氨酸。
組合物的組分還可以包括輔料例如片劑崩解劑、增溶劑、防腐劑、抗氧化劑、表面活性劑、粘度增強(qiáng)劑、著色劑、調(diào)味劑、pH調(diào)節(jié)劑、增甜劑或者味道掩蔽劑。合適的著色劑包括紅色、黑色和黃色氧化鐵和FD & C染料例如從Ellis & Everard得到的FD & C藍(lán)No.2和FD & C紅No.40。合適的調(diào)味劑包括薄荷、覆盆子、甘草、橙、檸檬、葡萄柚、焦糖、香草、櫻桃和葡萄食用香精和它們的組合。合適的pH調(diào)節(jié)劑包括鈉碳酸氫鹽、檸檬酸、酒石酸、磷酸、鹽酸和馬來酸。合適的增甜劑包括阿斯巴特、乙酰舒泛K和非洲竹芋甜素。合適的味道掩蔽劑包括鈉碳酸氫鹽、離子交換樹脂、環(huán)糊精包藏復(fù)合物、吸附劑或者微囊密封的或者微囊密封的活性物質(zhì)。
如上所述，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)如上文所定義的鐵絡(luò)合物能夠提高鐵的生物利用率并且增加患者血液中鐵的水平。因此，本發(fā)明還提供一種用于醫(yī)藥的如上文所定義的鐵絡(luò)合物，特別是用于治療和/和預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)，優(yōu)選缺鐵癥紊亂和，特別是，貧血癥。本發(fā)明還包括如上文所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/和預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)藥物中的用途，特別是缺鐵癥紊亂和，尤其是，貧血癥。本發(fā)明進(jìn)一步提供了如上文所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于增加患者血液中鐵的水平的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)、特別是缺鐵癥紊亂和尤其是貧血癥的方法，包括給予患者治療有效量的或者預(yù)防有效量的如上文所定義的鐵絡(luò)合物。
通過下列實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實施例材料和方法化學(xué)制劑來自Sigma-Aldrich。水為去離子過濾水(MiIIi-Q)。
使用天然化合物測定鐵絡(luò)合作用一體積的0.1mM FeSO4溶液與一體積含有0.3mM潛在鐵絡(luò)合劑的溶液混和。接著，加入一體積0.2mM三聯(lián)吡啶溶液。三聯(lián)吡啶-鐵絡(luò)合物生成在555nm波長具有最大吸收的紅色溶液。為了模擬腸道的pH范圍，在pH7、pH 4.5和pH 2條件下進(jìn)行該試驗。
絡(luò)合物的制備在氮保護(hù)恒定攪拌下，在FeSO4(0.899mol)的去離子(MiIIi-Q)和脫氣水(680ml)溶液中加入溶于足夠量絕對乙醇中的三倍摩爾量過量的(2.7mol)各個絡(luò)合劑。通過從輕微的綠色到黛綠/綠-紅色的迅速的變色，能夠觀察到自發(fā)的絡(luò)合物形成。
生面團(tuán)(dough)的制備面粉(100g，Pelikan，Meneba，NL)與該先前制備的溶液(68mL)逐漸地混和直到獲得均質(zhì)的生面團(tuán)。將得到的粗面團(tuán)均分成小塊(10g±0.5g)，用于鐵透析(dialysability)試驗。
鐵透析(dialysability)試驗用10％HNO3清洗全部的玻璃儀器和攪拌棒(24h)，并且用MiIIi-Q水漂清五次。使用Braun Blender Type 4142，在水平1攪拌1s、水平2攪拌1s、水平3攪拌10s，使1g生面團(tuán)均勻分散在40mlMiIIi-Q水中。將得到的懸浮液傾倒入VanKel Vial中，并且用MiIIi-Q水(20ml)沖洗攪拌器燒杯兩次，將洗液合并到懸浮液中。攪拌棒的攪拌的速度調(diào)節(jié)為200rpm，37℃(VanKel VK700，Varian)。使用6N HCl調(diào)節(jié)懸浮液pH至2.0，加入胃蛋白酶HCl溶液(5mL)。保溫15分鐘后，使用0.5N NaOH調(diào)節(jié)pH至2.0，加入MiIIi-Q水使懸浮液達(dá)到90mL。繼續(xù)攪拌105分鐘。均勻等分為大約每份20g的三份樣品，(i)其中一份在-20℃下儲藏，(ii)另一份加入到5ml胰腺膽汁溶液中，并用0.5N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.5，和(iii)第三份樣品移入錐形瓶(20mL)中。樣品(ii)保溫30分鐘，然后用0.5N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.5(如果必要的話)，NaOH的量用來決定調(diào)節(jié)模擬胃溶液到pH 7.5所需的NaCO3的量。在一個潔凈的滲析膜(20cm，Spectra/Por7，分子量小于等于(cut-off)8kD)中充滿確定量的0.1M NaCO3溶液，并加入MiIIi-Q水調(diào)節(jié)總體積為25mL。將該滲析袋置于含有等分部分(iii)的錐形瓶中，在監(jiān)視其pH值的同時，在37℃以100下/分鐘的速度震動30分鐘。剛一完成，就在燒瓶中加入5ml胰腺/膽汁-提取物，并且連續(xù)振蕩2小時。上述操作結(jié)束后，回收滲析袋內(nèi)的物質(zhì)，用于鐵含量的定量分析。
鐵總含量的測定通過感應(yīng)耦合等離子體原子發(fā)射光譜法測定酵母和小麥粉的鐵總含量。簡要地，微波爐中高溫高壓(110bar)下，在密閉容器中用5ml65％硝酸和0.5ml 30％過氧化氫消化樣品。消化后，用軟化水調(diào)節(jié)溶液體積到50ml，并且噴到等離子體發(fā)射光譜儀(Perkin Elmer 3300 DV感應(yīng)電偶等離子體光學(xué)發(fā)射光譜儀)的感應(yīng)耦合等離子體中。在特定波長測定單個元素的發(fā)射，并使用標(biāo)準(zhǔn)溶液定量濃度。
透析液中鐵離子的測量使用Roche/Hitachi分析器和以FerroZine鐵溶劑(即3-(2-吡啶基)-5，6-二苯基-1，2，4-三嗪-p，p′-二磺酸，單鈉鹽水合水合物)為基礎(chǔ)分析人血清中的鐵的試劑測定可透析的鐵離子(Fe2+和Fe3+的總和)。根據(jù)試劑供應(yīng)者的指導(dǎo)(Roche Diagnostics Nederland BV)，使用離體鐵利用率試驗的滲析液代替血清進(jìn)行分析。
實施例鐵絡(luò)合表1分子的鐵結(jié)合特征在pH 7.0、4.5和2.0，評定分子的溶解度和鐵絡(luò)合作用。數(shù)值為555nm波長與乙二胺四乙酸鈉鐵的相對吸光率。值越高，鐵與指定化合物的結(jié)合越強(qiáng)，以及絡(luò)合劑越好。數(shù)據(jù)為單次測量的結(jié)果。

食物的鐵透析表2計算得出鐵含量和離體可透析鐵的百分比，并且得出的鐵含量和離體可透析鐵的百分比用于計算由添加了50mg/kg不同的化合物鐵的整粒小麥粉得到的生面團(tuán)的相對鐵利用率，正如顯示的那樣。結(jié)果為4-5次實驗的平均數(shù)±SD。

*相對于由添加了硫酸亞鐵的整粒小麥粉制得的生面團(tuán)的鐵利用率進(jìn)行歸一化的。
**顯著不同于硫酸亞鐵(ANOVA、p＜0.05)。
權(quán)利要求
1.一種包括亞鐵的或三價鐵、和單、雙、三或六齒配體的鐵絡(luò)合物，其特征在于，所述配體為式I所示化合物 其中m為0或1；n為1或2；X為CR或O；R各自獨立地表示氫原子、氧代基團(tuán)、任選取代的烷基或-OR3，其中R3表示氫原子或一個任選取代的烷基；R1表示一個任選取代的烷基或-CO-R4，其中R4表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；并且R2表示氫原子或-OR3，其中R3如上文所定義；條件是，當(dāng)X為O時，m為0，該絡(luò)合物用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的鐵絡(luò)合物，其中配體為二齒配體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的鐵絡(luò)合物，其中R1表示C1-4烷基或-CO-R4。
4.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中R1表示-CO-R4。
5.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中R4表示氫原子、羥基或C1-4烷氧基。
6.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中R2表示氫原子、羥基或C1-4烷氧基。
7.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中R各自獨立地表示氫原子或羥基、C1-4烷基或C1-4烷氧基。
8.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中X為CR。
9.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中m為1。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項的鐵絡(luò)合物，其中X為O。
11.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其中n為1。
12.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的鐵絡(luò)合物，其可溶于水。
13.如權(quán)利要求1-12中任一項所定義的的鐵絡(luò)合物，用于醫(yī)藥。
14.如權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物，用于增加患者血液中鐵的水平。
15.如權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物，用于治療和/或預(yù)防缺鐵癥紊亂。
16.權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物，用于治療和/或預(yù)防貧血癥。
17.權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)的藥物中的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于增加病人血液中鐵的水平的藥物中的應(yīng)用。
19.權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/或預(yù)防缺鐵性疾病的藥物中的應(yīng)用。
20.權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物在制備用于治療和/或預(yù)防貧血癥的藥物中的應(yīng)用。
21.食品組合物，包含權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物和食品可接受載體。
22.鐵加強(qiáng)食品，包含加強(qiáng)量的權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物。
23.飲料組合物，包含權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物和可飲用載體。
24.鐵加強(qiáng)飲料，包含加強(qiáng)量的權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物和可飲用液體。
25.食品添加劑，包含權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物。
26.藥物組合物，包含權(quán)利要求1-12中任一項所定義的鐵絡(luò)合物和可藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及某些用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)的鐵絡(luò)合物，所述絡(luò)合物包括亞鐵或者三價鐵和含有五－或六元芳環(huán)或雜環(huán)的單、二、三或者六齒配體；含有這些鐵絡(luò)合物的組合物。這些鐵絡(luò)合物提高了鐵的生物利用率，并且特別是用于治療和/或預(yù)防營養(yǎng)失調(diào)、缺鐵癥紊亂和貧血癥。
文檔編號C07C47/565GK101043824SQ200580034119
公開日2007年9月26日 申請日期2005年9月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月8日
發(fā)明者S·L·阿布拉哈姆塞, B·N·M·范布倫, W·克拉弗克, W·J·克盧茨 申請人:荷蘭聯(lián)合利華有限公司