專利名稱：用作丙型肝炎病毒ns3絲氨酸蛋白酶抑制劑的取代脯氨酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的丙型肝炎病毒(“HCV”)蛋白酶抑制劑、含有一種或多種所述抑制劑的藥物組合物、制備所述抑制劑的方法以及應(yīng)用所述抑制劑治療丙型肝炎和相關(guān)疾病的方法。本發(fā)明還公開了在P2位含有新的脯氨酸部分作為HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的化合物。本申請(qǐng)要求2004年5月20日申請(qǐng)的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)60/573,191的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(HCV)是一種(+)-有義單鏈RNA病毒，它是非甲非乙型肝炎(NANBH)、尤其是血液相關(guān)性NANBH(BB-NANBH)的主要病原體(參見國際專利申請(qǐng)公布WO89/04669和歐洲專利申請(qǐng)公布EP381216)。NANBH既不同于其它類型的病毒誘導(dǎo)性肝疾病，例如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丁型(δ)肝炎病毒(HDV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)和埃-巴二氏病毒(EBV)，也不同于其它形式的肝病，例如酒精中毒性肝病和原發(fā)性膽汁性肝硬化。
最近，已經(jīng)鑒定、克隆并表達(dá)了多肽加工和病毒復(fù)制所必需的HCV蛋白酶(參見例如美國專利5,712,145)。這種約3000個(gè)氨基酸的多蛋白從氨基端至羧基端包含核殼蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)以及幾種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、NS2、NS3、NS4a、NS5a和NS5b)。NS3為約68kda的蛋白，由HCV基因組的約1893個(gè)核苷酸編碼，并且具有2個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域(a)由約200個(gè)N端氨基酸組成的絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域；(b)蛋白C端RNA依賴性ATP酶結(jié)構(gòu)域。由于蛋白質(zhì)序列、整體三維結(jié)構(gòu)和催化機(jī)制的相似性，NS3蛋白酶被認(rèn)為是胰凝乳蛋白酶家族的一個(gè)成員。其它胰凝乳蛋白樣酶有彈性蛋白酶、因子Xa、凝血酶、胰蛋白酶、纖溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3絲氨酸蛋白酶與所述多肽(多蛋白)于NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接點(diǎn)水解有關(guān)，因此在病毒復(fù)制期間負(fù)責(zé)生成四種病毒蛋白。這使HCV NS3絲氨酸蛋白酶成為抗病毒化學(xué)治療的令人關(guān)注的目標(biāo)。本發(fā)明化合物可以抑制這類蛋白酶。它們還可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
已經(jīng)確定約6kda多肽的NS4a蛋白是NS3絲氨酸蛋白酶活性的輔因子。NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶對(duì)NS3/NS4a接點(diǎn)的自動(dòng)切割在分子內(nèi)(即順式)進(jìn)行，而其它的切割位點(diǎn)在分子間(即反式)進(jìn)行。
對(duì)HCV蛋白酶的天然切割位點(diǎn)的分析揭示，P1存在半胱氨酸，而P1’存在絲氨酸，并且這些殘基在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接點(diǎn)中是嚴(yán)格保守的。NS3/NS4a接點(diǎn)包含P1的蘇氨酸和P1’的絲氨酸。NS3/NS4a上的Cys→Thr取代被認(rèn)為是該接點(diǎn)需要順式而不是反式加工的原因。參見例如Pizzi等(1994)Proc.Nat1.Acad.Sci(USA)91888-892，F(xiàn)ailla等(1996)Folding&Design135-42。NS3/NS4a切割位點(diǎn)也比其它位點(diǎn)更耐受誘變。參見例如Kollykhalov等(1 994)J.Virol.687525-7533。還發(fā)現(xiàn)，切割位點(diǎn)上游區(qū)的酸性殘基是有效切割所需要的。參見例如Komoda等(1994)J.Virol.687351-7357。
已報(bào)道的HCV蛋白酶抑制劑包括抗氧化劑(參見國際專利申請(qǐng)公布WO98/14181)、某些肽類和肽類似物(參見國際專利申請(qǐng)公布WO98/17679，Landro等(1997)Biochem.369340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.378906-8914，Llinàs-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.81713-1718)、基于70個(gè)氨基酸的多肽水蛭蛋白酶抑制劑c的抑制劑(Martin等(1998)Biochem.3711459-11468)、選自人胰腺分泌型胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)和微型抗體庫(minibody repertoire)(MBip)的抑制劑親和性(Dimasi等(1997)J.Virol.，717461-7469)、cVHE2(“camelized”可變區(qū)抗體片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10607-614)和αl-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等)(1997)J.Hepat.2742-28)。最近公開了設(shè)計(jì)用來選擇性破壞丙型肝炎病毒RNA的核酶(參見BioWorld Today9(217)4(1998年11月10日))。
另外參見1998年4月30日公開的PCT公布WO98/17679(VertexPharmaceuticals Incorporated)、1998年5月28日公開的WO98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)和1999年2月18日公開的WO99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)。
HCV與肝硬化有關(guān)，而且誘發(fā)肝細(xì)胞癌。目前HCV感染者的預(yù)后很差。由于缺乏免疫性或者與HCV感染有關(guān)的豁免性(remission)，HCV感染比起其它形式的肝炎更難以治療。目前的資料表明，肝硬化診斷后四年的存活率低于50％。診斷為患有局灶性可切除性肝細(xì)胞癌的患者的五年存活率為10-30％，而局灶性不可切除性肝細(xì)胞癌的患者的五年存活率低于1％。
參見WO00/59929(US6,608,027，受讓人Boehringer Ingelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日公布)，它公開了下式的肽衍生物
參見A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)，它介紹了HCV NS3蛋白酶抑制劑的雙環(huán)類似物的合成方法。其中公開了具有下式結(jié)構(gòu)的化合物 參見W.Han等，Bioorganic&Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，它介紹某些含烯丙基和乙基官能團(tuán)的α-酮酰胺類、α-酮酯類和α-二酮類化合物的制備方法。
參見WO00/09558(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公布)，它公開了下式的肽衍生物
式中各個(gè)變量已在該文獻(xiàn)中定義。下面是該系列化合物的一個(gè)實(shí)例 參見WO00/09543(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公布)，它公開了下式的肽衍生物
式中各個(gè)變量已在該文獻(xiàn)中定義。下面是該系列化合物的一個(gè)實(shí)例 參見U.S.6,608,027(Boehringer Ingelheim，加拿大)，它公開了以下類型的NS3蛋白酶抑制劑 式中各個(gè)變量已在該文獻(xiàn)中定義。
丙型肝炎的當(dāng)前療法包括干擾素-α(INFα)以及使用利巴韋林和干擾素的聯(lián)合療法。參見例如Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。這些療法存在低持續(xù)應(yīng)答率并時(shí)常發(fā)生副作用的缺陷。參見例如Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336347。目前，對(duì)于HCV感染沒有疫苗可用。
參見2001年10月11日公布的WO01/74768(受讓人VertexPharmaceuticals Inc)，它公開了作為丙型肝炎病毒NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑的部分具有下列通式的化合物(R如該文獻(xiàn)中定義) 上述WO01/74768公開的一個(gè)具體化合物具有下列結(jié)構(gòu)式 PCT公布WO01/77113、WO01/081325、WO02/08198、WO02/08256、WO02/08187、WO02/08244、WO02/48172、WO02/08251以及2002年1月18日申請(qǐng)的等待批準(zhǔn)的美國專利申請(qǐng)10/052,386，公開了各種類型的作為丙型肝炎病毒NS-3絲氨酸蛋白酶抑制劑的肽和/或其它化合物。這些申請(qǐng)公開的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
對(duì)于HCV感染需要新的治療方法。需要可用于治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的化合物。
需要治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。
需要用本文提供的化合物調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶活性、尤其是HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的方法。
需要用本文提供的化合物調(diào)節(jié)HCV多肽加工的方法。
發(fā)明概述在許多實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一類新型HCV蛋白酶抑制劑、包含一種或多種所述化合物的藥物組合物、包含一種或多種所述化合物的藥物制劑的制備方法以及使用一種或多種所述化合物或者一種或多種所述制劑治療或預(yù)防HCV或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。還提供調(diào)節(jié)HCV多肽與HCV蛋白酶相互作用的方法。本發(fā)明提供的化合物中，優(yōu)選抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的化合物。本發(fā)明公開了具有以下通式I結(jié)構(gòu)的化合物 式I其中Z選自雜環(huán)基、-N(H)(烷基)、-N(烷基)2、-N(H)(環(huán)烷基)、-N(環(huán)烷基)2、-N(H)(芳基)、-N(芳基)2、-N(H)(雜環(huán)基)、-N(雜環(huán)基)2、-N(H)(雜芳基)和-N(雜芳基)2；R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-和雜芳基烷基，或者NR9R10中的R9和R10相互連接，使得NR9R10構(gòu)成4-8元雜環(huán)基，同樣，CHR9R10中的R9和R10也可相互連接，使得CHR9R10構(gòu)成4-8元環(huán)烷基；R2和R3可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；
Y選自下列部分 其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19、R20和R21可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；其中各個(gè)所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在上述定義中，優(yōu)選1-10個(gè)碳原子的烷基，優(yōu)選2-10個(gè)碳原子的烯基或炔基，優(yōu)選3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基，優(yōu)選具有1-6個(gè)氧、氮、硫或磷原子的雜烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基(雜環(huán)基)。
式I化合物本身或者聯(lián)合一種或多種本文公開的其它合適藥物可用于治療多種疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)以及相關(guān)疾病，還可用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性、預(yù)防HCV、或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。既可以用本發(fā)明化合物，也可以用包含這類化合物的藥物組合物或制劑完成所述調(diào)節(jié)、治療、預(yù)防或改善。盡管不局限于理論，但是相信HCV蛋白酶可能是NS3或NS4a蛋白酶。本發(fā)明化合物可以抑制這類蛋白酶。它們還可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
發(fā)明詳述在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式I代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，其中各個(gè)部分如上定義。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物存在以下的立體異構(gòu)形式
其中各個(gè)部分如式I中定義。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Z選自下列部分 -N(甲基)2， 其中k＝0-4，m＝0-4，k和m可以相同或不同，R26和R27可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為NR9R10，R9為H，R10為H或R14，其中R14為烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R14選自下列部分 和
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2選自下列部分 和
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3選自下列部分
其中R31為OH或O-烷基；R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3選自下列部分 和 在另一個(gè)實(shí)施方案中，G為NH。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y選自下列部分 其中R15、R16、R17、R18、R19、R20和R21各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；其中各個(gè)所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，以下部分 選自 和 其中Y32選自下列基團(tuán) 和
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y選自
和
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Z選自具有以下結(jié)構(gòu)的部分 -N(甲基)2， 其中k＝0-4，m＝0-4，k和m可以相同或不同，R26和R27可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Z選自下列部分 在另一個(gè)實(shí)施方案中，Z選自下列部分 在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為NH2或NHR14，其中R14選自下列部分
和 R2選自下列部分
和 R3選自下列部分 和
Z選自 和 Y選自
本發(fā)明另一實(shí)施方案公開了表1所列舉的化合物。
表1
下列術(shù)語在說明書上下文中使用時(shí)，除非另有說明，否則應(yīng)當(dāng)理解具有下述含義“患者”包括人和動(dòng)物。
“哺乳動(dòng)物”是指人和其它哺乳動(dòng)物。
“烷基”是指可以為直鏈或支鏈的脂族烴基，并且鏈中包含約1個(gè)至約20個(gè)碳原子。優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1個(gè)至約12個(gè)碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1個(gè)至約6個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低基烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性烷基鏈?！暗图?jí)烷基”是指鏈中具有約1個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈基團(tuán)。術(shù)語“取代的烷基”是指被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的取代基取代的烷基，各個(gè)取代基獨(dú)立選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合適烷基的非限制性實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。
“烯基”是指含至少一個(gè)碳碳雙鍵的脂族烴基，它可以是直鏈或支鏈并且在鏈中含約2個(gè)至約15個(gè)碳原子。優(yōu)選的烯基在鏈中含約2個(gè)至約12個(gè)碳原子；更優(yōu)選在鏈中含約2個(gè)至約6個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性烯基鏈?！暗图?jí)烯基”是指鏈中含約2個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基。術(shù)語“取代的烯基”是指被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的取代基取代的烯基，各個(gè)取代基獨(dú)立選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合適烯基的非限制性實(shí)例包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基和癸烯基。
“炔基”是指含至少一個(gè)碳碳三鍵的脂族烴基，它可以是直鏈或支鏈并且在鏈中含約2個(gè)至約15個(gè)碳原子。優(yōu)選的炔基在鏈中含約2個(gè)至約12個(gè)碳原子；更優(yōu)選在鏈中含約2個(gè)至約4個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接到線性炔基鏈?！暗图?jí)炔基”是指鏈中含約2個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈炔基。合適炔基的非限制性實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。術(shù)語“取代的炔基”是指被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的取代基取代的炔基，各個(gè)取代基獨(dú)立選自烷基、芳基和環(huán)烷基。
“芳基”是指含約6個(gè)至約14個(gè)碳原子、優(yōu)選約6個(gè)至約10個(gè)碳原子的芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系。芳基可以任選被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。合適芳基的非限制性實(shí)例包括苯基和萘基。
“雜芳基”是指含約5個(gè)至約14個(gè)環(huán)原子、優(yōu)選約5個(gè)至約10個(gè)環(huán)原子的芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子不是碳原子，例如為單獨(dú)的氮、氧、硫原子或它們的組合。優(yōu)選的雜芳基包含約5個(gè)至約6個(gè)環(huán)原子?！半s芳基”可以任選被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。雜芳基根名稱前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個(gè)氮、氧或硫原子為環(huán)原子。雜芳基的氮原子可以任選被氧化為相應(yīng)的N氧化物。合適雜芳基的非限制性實(shí)例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N取代的吡啶酮)、異_唑基、異噻唑基、_唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3二氮雜萘基、羥吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語“雜芳基”也指部分飽和的雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。
“芳烷基”或“芳基烷基”是指芳基-烷基-，其中芳基和烷基如上定義。優(yōu)選的芳烷基包含低級(jí)烷基。合適芳烷基的非限制性實(shí)例包括芐基、2-苯乙基和萘基甲基。通過烷基連接至母體部分。
“烷基芳基”是指烷基-芳基-，其中烷基和芳基如上定義。優(yōu)選的烷基芳基包含低級(jí)烷基。合適烷基芳基的非限制性實(shí)例為甲苯基。通過芳基連接至母體部分。
“環(huán)烷基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，包含約3個(gè)至約10個(gè)碳原子，優(yōu)選約5個(gè)至約10個(gè)碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)包含約5個(gè)至約7個(gè)環(huán)原子。環(huán)烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。合適單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括1-十氫萘基、降冰片烷基、金剛烷基等，也包括部分飽和的多環(huán)環(huán)烷基，例如茚滿基、四氫萘基等。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯和溴。
“環(huán)系取代基”是指連接至芳族或非芳族環(huán)系的取代基，例如，它可置換所述環(huán)系上的有效氫。各環(huán)系取代基可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自以下基團(tuán)烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、烷基雜芳基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、?；⒎减；?、鹵素、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺?；⒎蓟酋；㈦s芳基磺?；?、烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳烷基硫基、雜芳烷基硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以相同或不同，并且獨(dú)立選自氫、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基?！碍h(huán)系取代基”也可指同時(shí)置換環(huán)系上兩個(gè)相鄰碳原子的兩個(gè)有效氫(每個(gè)碳上一個(gè)H)的一個(gè)部分。這類環(huán)系取代基的實(shí)例有亞甲二氧基、亞乙二氧基、-C(CH3)2-等，它們構(gòu)成例如以下的部分 和 “雜環(huán)基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)飽和環(huán)系，包含約3個(gè)至約10個(gè)碳原子，優(yōu)選約5個(gè)至約10個(gè)碳原子，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子不是碳原子，例如為單獨(dú)的氮、氧、硫原子或它們的組合。環(huán)系中沒有相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包含約5個(gè)至約6個(gè)環(huán)原子。雜環(huán)基根名稱前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個(gè)氮、氧或硫原子為環(huán)原子。雜環(huán)基環(huán)中任何-NH可以是被保護(hù)形式，例如-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)等；這樣的保護(hù)也被認(rèn)為是本發(fā)明的組成部分。雜環(huán)基可以任選被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的“環(huán)系取代基”取代，環(huán)系取代基如本文中定義。雜環(huán)基的氮或硫原子可以任選被氧化為相應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適單環(huán)雜環(huán)基的非限制性實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑烷基、1，4-二_烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等。
應(yīng)當(dāng)注意的是，在本發(fā)明含雜原子的環(huán)系中，在與N、O或S相鄰的碳原子上沒有羥基，在與另一個(gè)雜原子相鄰的碳原子上也沒有N或S基團(tuán)。因此，例如在以下環(huán)中 沒有-OH直接連接在2位和5位的碳原子上。
還應(yīng)當(dāng)注意的是，互變異構(gòu)體形式，例如下列部分 和 在本發(fā)明某些實(shí)施方案中被認(rèn)為是等同的。
“炔基烷基”是指炔基-烷基-，其中炔基和烷基如上定義。優(yōu)選的炔基烷基包含低級(jí)炔基和低級(jí)烷基。通過烷基連接至母體部分。合適炔基烷基的非限制性實(shí)例包括炔丙基甲基。
“雜芳烷基”是指雜芳基-烷基-，其中雜芳基和烷基如上定義。優(yōu)選的雜芳烷基包含低級(jí)烷基。合適芳烷基的非限制性實(shí)例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通過烷基連接至母體部分。
“羥基烷基”是指HO-烷基-，其中烷基如上定義。優(yōu)選的羥基烷基包含低級(jí)烷基。合適羥基烷基的非限制性實(shí)例包括羥基甲基和2-羥基乙基。
“?；笔侵窰-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-，烷基和環(huán)烷基如上定義。通過羰基連接至母體部分。優(yōu)選的?；图?jí)烷基。合適酰基的非限制性實(shí)例包括甲?；⒁阴；捅；?。
“芳酰基”是指芳基-C(O)-，其中芳基如上定義。通過羰基連接至母體部分。合適芳?；姆窍拗菩詫?shí)例包括苯甲酰基和1-萘甲?；?。
“烷氧基”是指烷基-O-，其中烷基如上定義。合適烷氧基的非限制性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“芳氧基”是指芳基-O-，其中芳基如上定義。合適芳氧基的非限制性實(shí)例包括苯氧基和萘氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“芳烷基氧基”是指芳烷基-O-，其中芳烷基如上定義。合適芳烷基氧基的非限制性實(shí)例包括芐氧基和1-萘甲氧基或2-萘甲氧基。通過醚氧連接至母體部分。
“烷硫基”是指烷基-S-，其中烷基如上定義。合適烷硫基的非限制性實(shí)例包括甲硫基和乙硫基。通過硫連接至母體部分。
“芳硫基”是指芳基-S-，其中芳基如上定義。合適芳硫基的非限制性實(shí)例包括苯硫基和萘硫基。通過硫連接至母體部分。
“芳烷基硫基”是指芳烷基-S-，其中芳烷基如上定義。合適芳烷基硫基的非限制性實(shí)例為芐硫基。通過硫連接至母體部分。
“烷氧基羰基”是指烷基-O-CO-。合適烷氧基羰基的非限制性實(shí)例包括甲氧基羰基和乙氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“芳氧基羰基”是指芳基-O-C(O)-。合適芳氧基羰基的非限制性實(shí)例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“芳烷氧基羰基”是指芳烷基-O-C(O)-。合適芳烷氧基羰基的非限制性實(shí)例為芐氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。
“烷基磺?；笔侵竿榛?S(O2)-。優(yōu)選的烷基磺?；型榛堑图?jí)烷基。通過磺?；B接至母體部分。
“芳基磺?；笔侵阜蓟?S(O2)-。通過磺?；B接至母體部分。
術(shù)語“取代(的)”是指在指定原子上的一個(gè)或多個(gè)氫被所選的指定基團(tuán)取代，前提條件是不超過現(xiàn)有情況下指定原子的正?；蟽r(jià)，并且這種取代得到穩(wěn)定化合物。取代基和/或變量的組合只有在這種組合得到穩(wěn)定化合物的情況下才被允許?！胺€(wěn)定化合物”或“穩(wěn)定結(jié)構(gòu)”是指化合物足夠穩(wěn)固，能夠從反應(yīng)混合物中分離達(dá)到可實(shí)用的純凈度，并可配制為有效的治療藥物。
當(dāng)術(shù)語“一種或多種”或“至少一種”用來指出取代基、化合物、聯(lián)合藥物等的數(shù)量時(shí)，是指存在或加上至少一種取代基、化合物、聯(lián)合藥物等，最多可達(dá)化學(xué)和物理上允許的最大數(shù)量，具體數(shù)量取決于上下文。這類技術(shù)和知識(shí)是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。
術(shù)語“任選取代的”是指任選被指定基團(tuán)或部分取代。
有關(guān)化合物的術(shù)語“分離的”或“分離形式(的)”是指所述化合物從合成過程、天然來源或這兩種情況下分離后的物理狀態(tài)。有關(guān)化合物的術(shù)語“純化(的)”或“純化形式(的)”是指所述化合物經(jīng)過本文介紹的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一個(gè)或多個(gè)純化過程獲得的物理狀態(tài)，并且具有足夠的純度，以便通過本文介紹的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)來表征。
還應(yīng)當(dāng)注意的是，在本申請(qǐng)正文、流程、實(shí)施例和表格中不滿足化合價(jià)的任何碳原子或雜原子由氫原子來滿足化合價(jià)。
當(dāng)化合物中某個(gè)官能團(tuán)是“保護(hù)的”時(shí)，這是指該基團(tuán)為修飾形式，從而在化合物進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，防止在被保護(hù)位置發(fā)生不需要的副發(fā)應(yīng)。合適的保護(hù)基是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的，也可參考標(biāo)準(zhǔn)教科書，例如T.W.Greene等，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York。
任何變量(例如芳基、雜環(huán)、R2等)在任何成分或式I中出現(xiàn)超過一次時(shí)，在各個(gè)位置的變量定義獨(dú)立于所有其它位置的變量定義。
本文所用術(shù)語“組合物”包括含規(guī)定劑量的規(guī)定成分的產(chǎn)品以及由規(guī)定劑量的規(guī)定成分直接或間接地組合而獲得的任何產(chǎn)品。
本發(fā)明化合物的前藥和溶劑合物也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本文所用術(shù)語“前藥”是指為藥物前體的化合物，一旦在給予患者后，經(jīng)過代謝過程或化學(xué)過程發(fā)生化學(xué)轉(zhuǎn)化，得到式I化合物或其鹽和/或溶劑合物。前藥的闡述參見T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs asNovel Delivery Systems(1987)，A.C.S.Symposium Series，第14卷；Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，這兩篇文獻(xiàn)都通過引用結(jié)合到本文中。
“溶劑合物”是指與一個(gè)或多個(gè)溶劑分子物理結(jié)合的本發(fā)明化合物。這種物理結(jié)合涉及不同程度的離子鍵結(jié)合和共價(jià)鍵結(jié)合，包括氫鍵結(jié)合。在某些情況下，溶劑合物能夠被分離，例如當(dāng)一個(gè)或多個(gè)溶劑分子結(jié)合到結(jié)晶固體的晶格時(shí)?！叭軇┖衔铩卑ㄈ芤合嗪涂煞蛛x的溶劑合物。合適溶劑合物的非限制性實(shí)例包括乙醇合物、甲醇合物等?！八衔铩笔侨軇┓肿訛镠2O的溶劑合物。
“有效量”或“治療有效量”是指本發(fā)明化合物或組合物的用量可有效抑制絲氨酸蛋白酶，并由此得到所需的治療、改善、抑制或預(yù)防效果。
式I化合物可以形成也屬于本發(fā)明范圍的鹽。除非另有說明，否則提及式I化合物時(shí)應(yīng)當(dāng)理解為包括它的鹽。本文所用術(shù)語“鹽”是指與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸式鹽以及與無機(jī)堿和/或有機(jī)堿形成的堿式鹽。此外，當(dāng)式I化合物既包含堿性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)又包含酸性部分(例如但不限于羧酸)時(shí)，可以形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)，兩性離子也包括在本文所用術(shù)語“鹽”內(nèi)。盡管其它鹽也是有用的，但是優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(即無毒、生理上可接受的)鹽。式I化合物的鹽可以通過例如以下方式生成使式I化合物與一定量的酸或堿(例如1當(dāng)量)反應(yīng)，介質(zhì)使用例如所述鹽在其中沉淀的介質(zhì)，或者使用水溶液介質(zhì)并且隨后冷凍干燥。
示例性的酸加成鹽包括包括醋酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽等。此外，通常認(rèn)為適合與堿性藥用化合物生成藥用鹽的酸在例如以下的文獻(xiàn)中有闡述P.Stahl等，Camille G.(編輯)Handbook ofPharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use.(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33201-217；Anderson等，The Practice of Medicinal Chemistry(1996)，AcademicPress，New York；The Orange Book(在Food & Drug Administration，Washington，D.C.網(wǎng)站上)。上述文獻(xiàn)的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
示例性堿式鹽包括銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽、鋰鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)、與有機(jī)堿(例如有機(jī)胺，例如二環(huán)己基胺、叔丁胺)形成的鹽、以及與氨基酸(例如精氨酸、賴氨酸等)形成的鹽。堿性含氮基團(tuán)可以用例如以下試劑季銨化低級(jí)烷基鹵(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙脂和硫酸二丁酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、十二烷基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵(例如芐基溴和苯乙基溴)以及用其它試劑季銨化。
所有這樣的酸式鹽和堿式鹽都是本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽，并且認(rèn)為對(duì)于本發(fā)明目的來講，所有酸式鹽和堿式鹽都等同于相應(yīng)化合物的游離形式。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和前藥可能以它們的互變異構(gòu)體形式存在(例如為酰胺或亞氨醚)。所有這類互變異構(gòu)體形式都是本發(fā)明的組成部分。
本發(fā)明化合物(包括本發(fā)明化合物的鹽、溶劑合物和前藥以及所述前藥的鹽和溶劑合物)的所有立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等)包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，例如由于不同取代基的不對(duì)稱碳而存在的立體異構(gòu)體，包括對(duì)映異構(gòu)體形式(甚至沒有不對(duì)稱碳也可能存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體形式，還包括位置異構(gòu)體(例如4-吡啶基和3-吡啶基)。本發(fā)明化合物的各立體異構(gòu)體可以是例如基本沒有其它異構(gòu)體的形式，或者可以混合為例如外消旋物，或者與所有其它立體異構(gòu)體或所選的其它立體異構(gòu)體混合。本發(fā)明的手性中心可具有IUPAC 1974 Recommendations定義的S或R構(gòu)型。在使用“鹽”、“溶劑合物”、“前藥”等術(shù)語時(shí)，同樣適用于本發(fā)明化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋體或前藥的鹽、溶劑合物和前藥。
本發(fā)明還包括式I化合物及其鹽、溶劑合物和前藥的多晶型物。
應(yīng)當(dāng)理解的是，用于本文所述治療用途的式I化合物的應(yīng)用適用于各個(gè)化合物本身，或者一種或多種式I化合物的一種或多種組合，如下一段示例說明的那樣。同樣的理解也適用于含這類化合物的藥物組合物或涉及這類化合物的治療方法。
本發(fā)明化合物可具有藥理學(xué)特性；式I化合物特別可用作HCV蛋白酶抑制劑，各個(gè)化合物本身或者一種或多種式I化合物可以與選自式I的一種或多種化合物組合。本發(fā)明化合物可用于治療多種疾病，例如HCV、HIV(AIDS，獲得性免疫缺陷綜合征)以及相關(guān)疾病，也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性、預(yù)防HCV或者改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。
式I化合物可用于制備用于治療HCV蛋白酶相關(guān)疾病的藥物，例如所述制備方法包括使式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體緊密接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，該組合物包含作為活性成分的一種或多種本發(fā)明化合物。通常，藥物組合物還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體稀釋劑、賦形劑或載體(本發(fā)明統(tǒng)稱為載體材料)。因?yàn)檫@類藥物組合物具有HCV抑制活性，所以它們可用于治療丙型肝炎及其相關(guān)疾病。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了制備包含本發(fā)明化合物作為活性成分的藥物組合物的方法。在本發(fā)明的藥物組合物和方法中，活性成分通常在與合適的載體材料混合后給藥，根據(jù)需要的給藥形式適當(dāng)?shù)剡x擇載體材料，即口服片劑、膠囊劑(固體填充、半固體填充或液體填充)、重配用散劑、口服凝膠劑、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿劑、混懸劑等，并且符合常規(guī)藥學(xué)實(shí)踐。舉例來說，對(duì)于以片劑或膠囊劑形式口服給藥，活性藥物成分可與任何口服無毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體混合，例如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石粉、甘露糖醇、乙醇(液態(tài)形式)等。此外，當(dāng)要求或者需要時(shí)，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻合到混合物中。散劑和片劑可包含約5％至約95％的本發(fā)明組分。
合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖、玉米甜味劑、天然及合成樹膠(如阿拉伯樹膠)、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟?？捎糜谏鲜鰟┬偷臐櫥瑒?shí)例有硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。
合適的情況下也可包含甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。在下文更詳細(xì)地闡述以上提及的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑等。
另外，本發(fā)明的組合物可配制成持續(xù)釋放形式，從而控制任何一種或者多種成分或活性成分的釋放速率以達(dá)到最優(yōu)化的治療效果，即HCV抑制活性等。持續(xù)釋放的合適劑型包括多層片劑，它包含多個(gè)不同崩解速率的層或者控釋聚合物基質(zhì)，活性成分浸漬在聚合物基質(zhì)中，加工成片劑形式，或者包含所述浸漬或包裹多孔聚合物基質(zhì)的膠囊劑。
液體制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。例如用于腸胃外注射的水溶液劑或者水-丙二醇溶液劑或者加入甜味劑和遮光劑(pacifiers)的口服溶液劑、混懸劑和乳劑。液體制劑還可包括鼻內(nèi)給藥用溶液劑。
適于吸入的氣霧制劑可包含溶液和粉末形式的固體，它們可以與藥學(xué)上可接受的載體例如惰性壓縮氣體(如氮?dú)?聯(lián)合應(yīng)用。
制備栓劑時(shí)，首先熔融低熔點(diǎn)的蠟，例如脂肪酸甘油酯(如可可油)的混合物，并且通過攪拌或者類似的混合方法使活性成分均勻分散于其中。然后將熔融的均勻混合物倒入適當(dāng)大小的模具中，使之冷卻，由此固化。
也包括這樣的固體制劑可在臨用前配制成口服或腸胃外給藥用液體制劑。所述液體制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。
本發(fā)明化合物也可透皮給藥。透皮給藥用組合物可采用乳膏劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑形式，所述組合物可包含在骨架型或者貯庫型透皮貼劑中，這是本領(lǐng)域中用于此目的常規(guī)技術(shù)。
本發(fā)明化合物還可口服、靜脈內(nèi)、鞘內(nèi)、鼻內(nèi)或皮下給藥。
本發(fā)明化合物還包括單位劑型的制劑。在這類劑型中，制劑被細(xì)分為包含適量(例如達(dá)到所需目的的有效量)活性成分的適當(dāng)大小的單位劑量。
根據(jù)具體的應(yīng)用，單位劑量制劑中本發(fā)明活性成分的劑量通常是可以調(diào)整的，約1.0毫克至約1,000毫克，優(yōu)選約1.0毫克至約950毫克，更優(yōu)選約1.0毫克至約500毫克，典型劑量為約1毫克至約250毫克。實(shí)際使用劑量可根據(jù)患者的年齡、性別、體重以及所治療的病情嚴(yán)重程度而變化。這種技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。
通常，可以每天給予1次或2次包含活性成分的人用口服劑型。給藥量和給藥頻率需要根據(jù)主治醫(yī)師的判斷加以調(diào)整?？诜o藥的一般推薦日劑量范圍從約1.0毫克/天到約1,000毫克/天，可以一次或分次給藥。
一些有用的術(shù)語說明如下膠囊劑是指特殊容器或者包封物，它們由甲基纖維素、聚乙烯醇、或者變性明膠或淀粉制成，用于保留或容納包含活性成分的組合物。硬殼膠囊一般由相對(duì)高強(qiáng)度的明膠骨架和豬皮明膠的摻合物制成。膠囊本身可包含少量染料、不透明劑、增塑劑和防腐劑。
片劑是指包含活性成分以及合適稀釋劑的壓制或模制固體劑型。通過壓縮混合物或經(jīng)濕法制粒、干法制粒或壓縮獲得的顆粒制備片劑。
口服凝膠劑是指活性成分分散于或溶于親水性半固體基質(zhì)中。
重配用散劑是指包含活性成分和合適稀釋劑的粉末摻合物，它可用懸浮于水或果汁中。
稀釋劑是指通常構(gòu)成組合物或者劑型主要部分的物質(zhì)。合適的稀釋劑包括糖類，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇；從小麥、玉米、大米和馬鈴薯獲得的淀粉；纖維素，例如微晶纖維素。組合物中稀釋劑含量占總組合物的重量百分比從約10％到約90％，優(yōu)選約25％到約75％，更優(yōu)選約30％到約60％，再更優(yōu)選約12％到約60％。
崩解劑是指加入到組合物中以便促使其分開(崩解)并釋放出藥物的物質(zhì)。合適的崩解劑包括淀粉；“冷水可溶性”改性淀粉，例如羧甲基淀粉鈉；天然和合成樹膠類，如槐樹豆膠、梧桐膠、瓜爾膠、黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，例如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；藻酸鹽，例如藻酸和藻酸鈉；粘土，例如膨潤土；以及泡騰混合物。組合物中崩解劑含量占組合物的重量百分比從約2％到約15％，更優(yōu)選約4％到約10％。
粘合劑是指使粉末粘合或者“膠著”在一起并使它們粘聚形成顆粒的物質(zhì)，因此在配制時(shí)用作“膠粘劑”。粘合劑增加稀釋劑或增量劑已有的粘性強(qiáng)度。合適的粘合劑包括糖類如蔗糖；從小麥、玉米、大米和馬鈴薯獲得的淀粉；天然樹膠類，例如阿拉伯樹膠、明膠和黃蓍膠；海藻衍生物，例如藻酸、藻酸鈉和藻酸鈣銨；纖維素材料，例如甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和羥丙基甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；以及無機(jī)物例如硅酸鋁鎂。組合物中粘合劑含量可占組合物的重量百分比從約2％到約20％，更優(yōu)選約3％到約10％，再更優(yōu)選約3％到約6％。
潤滑劑是指加入到片劑、顆粒劑等劑型中，以便在壓制后通過減少摩擦或磨損使制劑從模具或者沖模中脫出的物質(zhì)。合適的潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點(diǎn)蠟；以及水溶性潤滑劑，例如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d’l-亮氨酸。潤滑劑通常在壓制前的最后步驟加入，因?yàn)樗鼈儽仨毚嬖谟陬w粒的表面并介于顆粒與壓片機(jī)組件之間。組合物中潤滑劑含量可占組合物重量百分比從約0.2％到約5％，優(yōu)選約0.5％到約2％，更優(yōu)選約0.3％到約1.5％。
助流劑(glident)-防止結(jié)塊并改善顆粒的流動(dòng)性以使流動(dòng)平滑均勻的物質(zhì)。合適的助流劑包括二氧化硅和滑石粉。組合物中助流劑含量可占組合物的總重量百分比從約0.1％到約5％，優(yōu)選約0.5％到約2％。
著色劑-使組合物或者劑型著色的賦形劑。這類賦形劑可包括食品級(jí)染料和吸附到合適吸附劑(例如粘土或氧化鋁)上的食品級(jí)染料。著色劑含量可占組合物的重量百分比從約0.1％到約5％，優(yōu)選約0.1％到約1％。
生物利用度是指與標(biāo)準(zhǔn)物或者對(duì)照物相比，所給予劑型的活性藥物成分或者治療部分吸收進(jìn)入體循環(huán)的速率和程度。
制備片劑的常規(guī)方法是人們已知的。這類方法包括干法(例如直接壓制和壓制通過壓縮產(chǎn)生的顆粒)、濕法或其它特殊方法。制備其它給藥劑型(例如膠囊劑、栓劑等)的常規(guī)方法也是人們熟知的。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案公開了上文公開的本發(fā)明化合物或藥物組合物在治療疾病(例如丙型肝炎等)中的用途。該方法包括給予患有一種或多種所述疾病并需要這種治療的患者治療有效量的本發(fā)明化合物或藥物組合物。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以用于治療人類HCV，其治療方式可以是單一療法或聯(lián)合療法(例如雙重聯(lián)合、三重聯(lián)合等)，例如聯(lián)合應(yīng)用抗病毒藥和/或免疫調(diào)節(jié)藥。這類抗病毒藥和/或免疫調(diào)節(jié)藥的實(shí)例包括利巴韋林(Schering-Plough Corporation，Madison，NewJersey)和LevovirinTM(ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS14803TM(ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，Califbrnia)、HeptazymeTM(Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497TM(VertexPharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、ThymosinTM(SciClonePharmaceuticals，San Mateo，California)、MaxamineTM(MaximPharmaceuticals，San Diego，California)、麥考酚酸嗎乙酯(Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干擾素(例如干擾素α、聚乙二醇-干擾素α綴合物)等?！熬垡叶?干擾素α綴合物”為共價(jià)連接聚乙二醇分子的干擾素α分子。聚乙二醇-干擾素α綴合物的實(shí)例包括加入聚乙二醇的干擾素α-2a形式(例如以商品名PegasysTM銷售)的干擾素α-2a(RoferonTM，Hoffman La-Roche，Nutley，New Jersey)、加入聚乙二醇的干擾素α-2b形式(例如以商品名PEG-IntronTM銷售)的干擾素α-2b(IntronTM，Schering-Plough Corporation)、干擾素α-2c(BeroforAlphaTM，Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)或通過測(cè)定天然干擾素α的共有序列定義的共有干擾素(InfergenTM，Amgen，Thousand Oaks，California)。
如上所述，本發(fā)明也包括本發(fā)明化合物的互變異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體和其它立體異構(gòu)體。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，本發(fā)明的一些化合物可能以適當(dāng)?shù)漠悩?gòu)體形式存在。這樣的變化形式也屬于本發(fā)明范圍。
本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施方案公開了本發(fā)明化合物的制備方法。所述化合物可通過本領(lǐng)域已知的幾種技術(shù)制備。以下反應(yīng)流程概要說明了示例性方法。這些示例說明不應(yīng)該解釋為對(duì)所附權(quán)利要求書定義的本發(fā)明范圍的限制。其它機(jī)制的途徑和類似結(jié)構(gòu)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，是顯而易見的。
應(yīng)當(dāng)理解的是，雖然以下的示例性流程介紹了少量本發(fā)明代表性化合物的制備方法，但是適當(dāng)替換任何天然及非天然氨基酸將會(huì)形成基于所述替換的所需化合物。這類變化也屬于本發(fā)明范圍。
縮寫詞在以下流程、制備例和實(shí)施例的描述中使用如下的縮寫詞THF 四氫呋喃DMF N，N-二甲基甲酰胺EtOAc乙酸乙酯AcOH 乙酸HOOBt3-羥基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽NMM N-甲基嗎啉ADDP 1，1’-(偶氮二羰基(azodicarbobyl))二哌啶DEAD 偶氮二甲酸二乙酯MeOH 甲醇EtOH 乙醇Et2O 乙醚DMSO 二甲亞砜HOBt N-羥基苯并三唑PyBrOP 六氟磷酸溴-三-吡咯烷基轔DCM 二氯甲烷DCC 1，3-二環(huán)己基碳二亞胺TEMPO2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基Phg 苯基甘氨酸Chg 環(huán)己基甘氨酸Bn 芐基Bzl 芐基Et 乙基Ph 苯基iBoc 異丁氧基羰基
iPr 異丙基tBu或But叔丁基Boc 叔丁氧基羰基Cbz 芐氧基羰基Cp 環(huán)戊二烯基Ts 對(duì)甲苯磺?；鵐e 甲基HATU六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲_DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶BOP 苯并三唑-1-基-氧-三(二甲基氨基)六氟磷酸鹽PCC 氯鉻酸吡啶_KHMDS 六甲基二硅基氮烷鉀或雙(三甲基硅基)氨基鉀NaHMDS 六甲基二硅基氮烷鈉或雙(三甲基硅基)氨基鈉LiHMDS 六甲基二硅基氮烷鋰或雙(三甲基硅基)氨基鋰10％Pd/C10％披鈀碳(以重量計(jì))。
TG 硫代甘油實(shí)施例中間體的制備制備中間體1.01
步驟1 向4-羥基脯氨酸衍生物1.02(1.0g，4.1mmol)和二氯甲烷(50ml)的0℃溶液中，依次加入氯甲酸4-硝基苯酯(2.46g，12.2mmol)、吡啶(0.987ml，12.2mmol)。在該溫度下保持15分鐘后，將反應(yīng)燒瓶放在冰箱(-20℃)中過夜(16小時(shí))。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(100ml)稀釋，用飽和氯化銨溶液(2×100ml)、鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜法純化(20/80至50/50 EtOAc/己烷)，得到1.03(1.5g)。
步驟2 向脯氨酸衍生物1.03(1.5g，3.66mmol)和二氯甲烷(30ml)的0℃攪拌溶液中，加入1，2，3，4-四氫異喹啉(0.55ml，4.39mmol)和DIPEA(2.02ml，10.98mmol)。在該溫度下保持15分鐘后，將反應(yīng)燒瓶放在冰箱(-20℃)中過夜(16小時(shí))。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(70ml)稀釋，用飽和氯化銨溶液(100ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(3×100ml)、鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜法純化(5/95至25/75 EtOAc/二氯甲烷)，得到1.4g所需產(chǎn)物1.04。LC-MS405.1(M+H)+。
步驟3 向以上獲得的產(chǎn)物1.04(1.4g)中加入4M HC1/二_烷(25ml)。將反應(yīng)物在室溫下放置1小時(shí)，然后濃縮，以定量產(chǎn)量得到所需中間體1.01，直接使用無需再純化。
制備中間體10.11和10.12步驟1 在氮?dú)夥障?，將酮亞?0.01(50g，187.1mmol)和無水THF(400ml)的攪拌溶液冷卻至-78℃，用1M叔丁醇鉀(K-tBuO)(220ml，1.15eq.)的THF溶液處理。將反應(yīng)混合物升至0℃，攪拌1小時(shí)，用溴甲基環(huán)丁烷(28ml，249mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌48小時(shí)，真空濃縮。將殘余物溶于乙醚(300ml)，用HCl水溶液(2M，300ml)處理，將所得溶液在室溫下攪拌5小時(shí)，用乙醚(1L)萃取。水層用NaOH(50％水溶液)堿化至pH～12-14，用CH2Cl2(3×300ml)萃取。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾后濃縮，得到無色油狀純的胺(10.02，18g)。
步驟2 胺10.02(18g，105.2mmol)和CH2Cl2(350ml)的0℃溶液用二碳酸二叔丁酯(23g，105.4mmol)處理，在室溫下攪拌12小時(shí)。在完全反應(yīng)后(TLC)，真空濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于THF/H2O(200ml，1∶1)，用LiOH·H2O(6.5g，158.5mmol)處理，在室溫下攪拌3小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，堿性水層用Et2O萃取。水層用濃鹽酸酸化至pH～1-2，用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮，得到無色粘性油狀物10.03，直接用于下一步驟無需再純化。
步驟3 酸10.03(15.0g，62mmol)的CH2Cl2(250ml)溶液用BOP試劑(41.1g，93mmol)、N-甲基嗎啉(27ml)、N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(9.07g，93mmol)處理，在室溫下攪拌過夜。反應(yīng)混合物用1N HCl水溶液(250ml)稀釋，分離出各層，水層用CH2Cl2(3×300ml)萃取。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，用色譜法純化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到無色固體酰胺10.04(15.0g)。
步驟4 在0℃，向酰胺10.04(15g，52.1mmol)的無水THF(200ml)溶液中滴加LiAlH4(1M，93ml，93mmol)溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，在0℃用KHSO4溶液(10％水溶液)小心猝滅，攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用HCl水溶液(1M，150ml)稀釋，用CH2Cl2(3×200ml)萃取，合并的有機(jī)層用HCl水溶液(1M)、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾混合物，真空濃縮，得到無色粘性油狀物10.05(14g)。
步驟5 醛10.05(14g，61.6mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液用Et3N(10.73ml，74.4mmol)和丙酮氰醇(10.86g，127.57mmol)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。濃真空縮反應(yīng)混合物，用HCl水溶液(1M，200ml)稀釋，萃取到CH2Cl2(3×200ml)中。合并的有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，用色譜法純化(SiO2，EtOAc/己烷1∶4)，得到無色液體10.06(10.3g)。
步驟6 HCl的飽和甲醇溶液*(通過在0℃向CH3OH(700ml)通入HCl氣體而制備)用氰醇10.06處理，加熱至回流24小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)物，得到10.07，直接用于下一步驟無需再純化。
*也可使用向無水甲醇加入AcCl制備得到的6M HCl。
步驟7 胺鹽酸鹽10.07的CH2Cl2(200ml)溶液用Et3N(45.0ml，315mmol)和Boc2O(45.7g，209mmol)在-78℃處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，用HCl(2M，200ml)稀釋，萃取到CH2Cl2中。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，用色譜法純化(EtOAc/己烷1∶4)，得到羥基酯10.08。
步驟8 甲基酯10.08(3g，10.5mmol)的THF/H2O(1∶1)溶液用LiOH·H2O(645mg，15.75mmol)處理，在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用鹽酸水溶液(1M，15ml)酸化，真空濃縮。真空干燥殘余物，以定量產(chǎn)量得到10.09。
步驟9 上述步驟得到的酸10.09、CH2Cl2(50ml)和DMF(25ml)的溶液用NH4Cl(2.94g，55.5mmol)、EDCI(3.15g，16.5mmol)、HOOBt(2.69g，16.5mmol)和NMM(4.4g，44mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3天。真空除去溶劑，殘余物用HCl水溶液(250ml)稀釋，用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮，得到10.10，直接用于下一步驟。(或者，也可通過10.06(4.5g，17.7mmol)與H2O2水溶液(10ml)、LiOH·H2O(820mg，20.8mmol)在50ml CH3OH中于0℃反應(yīng)0.5小時(shí)，直接得到10.10)。
步驟10 將前一步驟得到的10.10的溶液溶于4N HCl/二_烷，在室溫下攪拌2小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，得到固體中間體10.11，無需再純化直接使用。
步驟11 基本上按照上述步驟9、10中描述的方法，用化合物10.09和適當(dāng)試劑得到所需中間體10.12。
制備中間體11.01步驟1 向4-戊炔-1-醇11.02(4.15g；Aldrich)的溶液中加入Dess-Martin過碘烷(Periodinane)(30.25g；Aldrich)，攪拌所得混合物45分鐘，然后加入(叔丁氧基羰基亞甲基)三苯基正膦(26.75g；Aldrich)。攪拌所得黑色反應(yīng)物過夜，用EtOAc稀釋，用亞硫酸鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、水、鹽水洗滌，干燥。減壓除去揮發(fā)物，殘余物用硅膠柱色譜法純化(用1％EtOAc/己烷作為洗脫劑)，得到所需化合物11.03(3.92g)。還得到一些不純流分，但是暫時(shí)放在一邊。
步驟2
使用烯烴11.03(1.9g)的正丙醇(20ml；Aldrich)溶液、氨基甲酸芐酯(4.95g；Aldrich)的正丙醇(40ml)溶液、NaOH(1.29g)的水(79ml)溶液、次氯酸叔丁酯(3.7ml)、(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)的正丙醇(37.5ml)溶液和鋨酸鉀脫水物(0.1544g；Aldrich)，按照Angew.Chem.Int.Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，第2813-7頁中描述的方法，得到粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化(EtOAc∶己烷1∶5)，得到所需氨基醇11.04(1.37g，37％，白色固體)。
步驟3 向酯11.04(0.700g)中加入4M HCl/二_烷(20ml；Aldrich)，所得混合物在室溫下靜置過夜。減壓除去揮發(fā)物，得到酸11.05(0.621g，白色固體)。
步驟4 在室溫下，依次將BOP試劑(3.65g；Sigma)、三乙胺(3.45ml)加入到羧酸11.05(2.00g)和烯丙胺(0.616ml)的二氯甲烷(20ml)溶液中，攪拌所得混合物過夜。使反應(yīng)混合物在EtOAc和10％HCl水溶液之間分配。分離出有機(jī)相，用飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗制反應(yīng)產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化(用EtOAc∶己烷；70∶30作為洗脫劑)，得到所需酰胺11.01(1.73g，黃色粘性油狀物)。
制備中間體12.03和12.04步驟1 基本上按照中間體10.11步驟3-8中描述的方法，將化合物12.01轉(zhuǎn)化為所需物質(zhì)12.02。
步驟2 基本上按照中間體10.11步驟9、10中描述的方法，將化合物12.02轉(zhuǎn)化為所需中間體12.03。
步驟3 基本上按照中間體10.12步驟11中描述的方法，將化合物12.02轉(zhuǎn)化為所需中間體12.03。
制備中間體13.01和13.06
步驟1 在0-5℃，在2小時(shí)內(nèi)向1-硝基丁烷13.02(16.5g，0.16mol)、乙醛酸的水(28.1g，0.305mol)和MeOH(122ml)的攪拌溶液中滴加三乙胺(93ml，0.667mol)。將溶液升至室溫，攪拌過夜，濃縮至干，得到油狀物。將油狀物溶于水，用10％HCl酸化至pH＝1，然后用EtOAc萃取。合并的有機(jī)溶液用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮至干，得到產(chǎn)物13.03(28.1g，收率99％)。
步驟2 向化合物13.03(240g，1.35mol)和乙酸(1.25L)的攪拌溶液中加入10％Pd/C(37g)。在59psi氫化所得溶液3小時(shí)，然后在60psi氫化過夜。蒸發(fā)乙酸，與甲苯共沸3次，然后用MeOH和乙醚研磨。過濾溶液，與甲苯共沸2次，得到灰白色固體13.04(131g，0.891mol，66％)。
步驟3 向氨基酸13.04(2.0g，13.6mmol)、二_烷(10ml)和水(5ml)的0℃攪拌溶液中加入1N NaOH溶液(4.3ml，14.0mmol)。攪拌所得溶液10分鐘，然后加入二碳酸二叔丁酯(0.110g，14.0mmol)，在0℃攪拌15分鐘。然后將溶液升至室溫，攪拌45分鐘，在冰箱中保存過夜，濃縮至干，得到粗產(chǎn)物。向粗產(chǎn)物的EtOAc(100ml)和冰溶液中加入KHSO4(3.36g)和水(32ml)，攪拌4-6分鐘。分離出有機(jī)層，水層用EtOAc萃取兩次，合并的有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮至干，得到產(chǎn)物13.05(透明樹膠狀物，30g，收率89％)。
步驟4 基本上按照中間體10.12步驟11中描述的方法，將化合物13.05轉(zhuǎn)化為所需中間體13.01。
步驟5 基本上按照中間體10.12步驟11中描述的方法，在偶合反應(yīng)中使用環(huán)丙胺(替代烯丙胺)，將化合物13.05轉(zhuǎn)化為所需中間體13.06。
制備中間體14.01
步驟1 基本上按照中間體13.01步驟1-3中描述的方法，將化合物14.02轉(zhuǎn)化為所需產(chǎn)物14.03。
步驟2 基本上按照中間體10.12步驟11中描述的方法，將化合物14.03轉(zhuǎn)化為所需中間體14.01。
制備中間體15.01步驟1 通過加液漏斗向亞硝酸銀(9g，58.5mmol)和乙醚(25ml)的0℃懸浮液中，緩慢(約15分鐘)加入4-碘-1，1，1-三氟丁烷15.02(10g，42.0mmol)的乙醚(25ml)溶液。所得混合物在0℃劇烈攪拌，升至室溫。在50小時(shí)后，通過硅藻土墊濾出固體物質(zhì)。真空濃縮所得乙醚溶液，得到15.03無色油狀物，無需再純化直接使用。
步驟2 基本上按照中間體13.01步驟1-3中描述的方法，將化合物15.03轉(zhuǎn)化為所需物質(zhì)15.04。
步驟3 基本上按照中間體10.12步驟11中描述的方法，將化合物15.04轉(zhuǎn)化為所需中間體15.01。
制備中間體16.01 酸16.02(Winkler，D.；Burger，K.，Synthesis，1996，1419)按照上述方法(制備中間體10.12)加工，得到需要的中間體16.01。
制備中間體50.01步驟1
向50.02(15g)的MeOH(150ml)溶液中加入濃鹽酸(3-4ml)，將混合物回流16小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，濃縮。將殘余物溶于乙醚(250ml)，用冷的飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮，得到甲酯50.03(12.98g)，直接用于下一步無需再純化。
步驟2 在氮?dú)夥障拢瑢⑸鲜霾襟E得到的甲酯50.03溶于二氯甲烷(100ml)，冷卻至-78℃。在2小時(shí)內(nèi)滴加DIBAL(1.0M二氯甲烷溶液，200ml)。將反應(yīng)混合物在16小時(shí)內(nèi)升至室溫。冷卻反應(yīng)混合物至0℃，滴加MeOH(5-8ml)。在攪拌下緩慢加入10％酒石酸鈉鉀水溶液(200ml)。用二氯甲烷(100ml)稀釋，分離出有機(jī)層(伴隨部分白色沉淀)。有機(jī)層用1N HCl(250ml)、鹽水(200ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮，得到醇50.04(11.00g，澄清油狀物)。
步驟3 將以上得到的醇50.04溶于二氯甲烷(400ml)，在氮?dú)夥障吕鋮s至0℃。分批加入PCC(22.2g)，將反應(yīng)混合物在16小時(shí)內(nèi)緩慢升至室溫。反應(yīng)混合物用乙醚(500ml)稀釋，通過硅藻土墊過濾。濃縮濾液，將殘余物溶于乙醚(500ml)。使其通過硅膠墊，濃縮濾液，得到醛50.05，直接用于下一步無需再純化。
步驟4 基本上按照Chakraborty等(Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)的方法，將以上得到的醛50.05轉(zhuǎn)化為所需物質(zhì)50.01。
制備中間體51.01 按照文獻(xiàn)中描述的方法(T.K.Chakraborty等，Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)，用醛51.02得到所需中間體51.01。
制備中間體60.01步驟1 向鄰苯二甲酰亞胺(1.01g)的50ml無水THF溶液中，加入三苯基膦(3eq)和N-叔丁氧羰基亮氨醇60.02(1eq)。將混合物在冰水浴中冷卻，滴加偶氮二甲酸二異丙酯(2.5eq)。在0℃攪拌所得混合物10分鐘，升至室溫，攪拌約2.5小時(shí)，直到TLC(乙酸乙酯/己烷；3∶7)檢測(cè)不到任何原料為止。減壓濃縮混合物。將殘余物懸浮于80ml二氯甲烷。濾出固體。濃縮濾液至一半體積，加入己烷(30ml)。濾出固體。減壓濃縮濾液，殘余物用硅膠色譜法純化(梯度∶乙酸乙酯/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物60.03。
步驟2 將N-Boc保護(hù)的胺60.03(1.4g)溶于20ml 4M HCl的二_烷溶液。攪拌混合物2小時(shí)。真空除去所有揮發(fā)物。無需進(jìn)一步純化，原樣使用所需產(chǎn)物60.04。
步驟3 胺鹽酸鹽60.04(1.14g)、20ml二氯甲烷和20ml飽和碳酸氫鈉水溶液的0℃混合物用光氣(10ml，15％甲苯溶液)處理，攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用100ml二氯甲烷稀釋，用30ml飽和碳酸氫鈉冷水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，再用10ml甲苯稀釋。濃縮混合物，將產(chǎn)物60.01作為0.2M甲苯溶液保存。
制備中間體61.01步驟1 按照上述用于中間體60.01的方法，用60.02和4，4-二甲基戊二酰亞胺得到所需產(chǎn)物61.01。
合成中間體62.01步驟1 在0℃，向酰胺62.02(0.5g，1eq)的THF溶液中加入環(huán)丙基溴化鎂(4eq，7.68mmol)。15分鐘后將反應(yīng)物升至室溫，在室溫下攪拌反應(yīng)物5小時(shí)，然后通過加入1N HCl猝滅。反應(yīng)物用EtOAc稀釋，用鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，用柱色譜法純化(10％EtOAc/己烷)，得到0.2g產(chǎn)物62.03。收率43.1％。
步驟2 向N-Boc保護(hù)的胺62.03(0.2g)中加入4M HCl的二_烷溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)物50分鐘，TLC顯示反應(yīng)已經(jīng)完成。濃縮混合物至干，得到0.162g所需產(chǎn)物62.04。
步驟3 在0℃，向光氣的CH2Cl2溶液(2eq，1.65mmol)、碳酸氫鈉(5ml飽和水溶液)的混合物中加入62.04。在室溫下攪拌混合物2.5小時(shí)。分離出有機(jī)層，經(jīng)無水硫酸鈉干燥。用冷卻浴濃縮至一半體積。稀釋至10ml，得到所需異氰酸酯62.01，為0.083M二氯甲烷溶液。
合成中間體63.01步驟1 在-78℃、氮?dú)夥障?，將KHMDS(200ml 0.5M甲苯溶液)滴加到環(huán)己烷甲酸甲酯63.02(11.1g；78mmol)和無水THF(200ml)的攪拌溶液。加入完畢后，將反應(yīng)物繼續(xù)維持在該溫度0.5小時(shí)。然后加入芐基氯甲基醚(18.6ml；134mmol)。讓反應(yīng)物升至室溫過夜，加入水(100ml)。水法后處理，得到殘余物，再用硅膠柱色譜法純化(用EtOAc∶己烷1∶10作洗脫劑)，得到所需的含雜質(zhì)中間體醚(14.98g，無色油狀物)。
在室溫下，將10％Pd/C(0.5g)、上述粗制醚(4.1g和MeOH(80ml)的黑色懸浮液暴露于氮?dú)夥障?氣罐)過夜。通過硅藻土墊過濾反應(yīng)物，將固體用甲醇充分洗滌。減壓濃縮合并的濾液，粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化(EtOAc∶己烷1∶5)，得到伯醇(63.03；0.62g，無色油狀物)。
步驟2 在0℃、氮?dú)夥障拢来螌⒓谆酋Ｂ?0.31ml)和三乙胺(0.75ml)加入到伯醇(63.03，0.62g)的攪拌溶液中。將所得混合物在該溫度下攪拌0.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物萃取到EtOAc，用1M HCl、飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮。得到黃色油狀殘余物(甲磺酸酯63.04，0.74g)，將其直接用于下一步無需再純化。
步驟3 和 在冰浴中冷卻以及氮?dú)夥障拢瑢⒍谆柞０?20ml；無水的；Aldrich)加入到氫化鈉(0.56g；Aldrch)中，再將叔丁硫醇加入懸浮液中。一旦加入完畢，加入甲磺酸酯(63.04；用2.00g醇按照以上方法制備；63.03)，將所得混合物在室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物在EtOAc和水之間分配，分離出有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥。硅膠柱色譜(EtOAc∶己烷2∶98)處理，得到甲酯-硫化物(63.05；1.75g)。
將EtOAc加入水相中，加入10％HCl水溶液直到水層pH＝1。分離出有機(jī)層，用水洗滌，干燥，減壓濃縮，得到硫化物-甲酸(63.06；0.747g，白色固體)。
步驟4 向硫化物(63.06；2.287g)的甲醇(75ml)溶液中加入過硫酸氫鉀制劑溶液(18.00g；Aldrich)，在室溫下攪拌所得白色懸浮液過夜。減壓除去揮發(fā)物，使白色固體在EtOAc和水之間分配。分離出有機(jī)相，干燥，濃縮，得到砜(63.07；2.52g；包含部分溶劑)。
步驟5 酸63.07(1.6lg)的50ml甲苯溶液用DPPA(1eq，1.33ml，d1.270)和三乙胺(1eq，0.85ml，d0.726)處理。將混合物加熱至100℃2小時(shí)。反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋，用二氯甲烷(2×100ml)萃取。合并的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮直到剩下約20ml溶劑。將產(chǎn)物63.01的溶液用甲苯調(diào)節(jié)為0.2M濃度的異氰酸酯。
合成中間體64.01步驟1 向鄰苯二甲酰亞胺60.03(g)的100ml MeOH溶液中加入肼(0.9ml，28.68mmol，1.4eq)，將混合物回流(在氮?dú)夥障?6小時(shí)。TLC證實(shí)還存在部分原料，再加入肼(0.45ml)，在室溫下繼續(xù)攪拌過夜。有白色沉淀生成。濾出固體，濃縮濾液，得到白色固體產(chǎn)物64.02(4.48)。
步驟2
將胺64.02(2.16g，10mmol)的100ml二氯甲烷溶液冷卻至0℃，用三乙胺(2eq，2.8ml)處理。滴加甲磺酰氯(1.2eq，0.93ml)。攪拌非均勻混合物過夜(在0-25℃)。濾出固體，濾液用飽和氯化銨水溶液(100ml)和鹽水(100ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。將殘余物溶于最少量的二氯甲烷/乙酸乙酯(約10ml)，濾出不溶的白色固體。濾液用硅膠柱色譜法純化，得到產(chǎn)物64.03(2.7g，粘稠半固體)。
步驟3 將磺酰胺64.03(2.2g，7.5mmol)的50ml無水DMF溶液冷卻至0℃，用碳酸銫(3eq，7.34g)處理。滴加碘甲烷(5eq，2.34ml)，攪拌混合物45分鐘。撤去冷卻浴，再攪拌混合物4小時(shí)。通過加入飽和氯化銨水溶液(100ml)猝滅反應(yīng)物，用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并的有機(jī)層用水(200ml)、鹽水(200ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。將有機(jī)層過濾后濃縮。殘余物用硅膠色譜處理，得到產(chǎn)物64.04(2.16g)。
步驟4 在室溫下，將N-Boc保護(hù)的胺64.04(2.1g，6.82mmol)溶于20ml4M HCl/二_烷。攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后減壓除去所有的揮發(fā)物，以定量產(chǎn)量得到產(chǎn)物64.05。
步驟5 將胺鹽酸鹽64.05、二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液的0℃混合物用光氣(15％甲苯溶液)處理，攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，用冷的飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，再用甲苯稀釋。濃縮混合物，調(diào)節(jié)產(chǎn)物64.01，作為0.2M甲苯溶液保存。
合成中間體65.01步驟1 將異氰酸酯65.01按照用于異氰酸酯64.01的方法制備，在磺酰胺合成步驟中用2-噻吩磺酰氯替代甲磺酰氯。
制備實(shí)施例的合成合成實(shí)施例101步驟1
向脯氨酸衍生物1.01(3.66mmol，按照上述方法制備)、二氯甲烷(20ml)和DMF(15ml)的0℃攪拌溶液中，加入L-叔丁氧羰基-叔亮氨酸(930mg，4.03mmol)、DIPEA(2.02ml，10.98mmol)和HATU(1.8g，4.76mmol)。在該溫度下保持15分鐘后，將反應(yīng)燒瓶放在冰箱(-20℃)中過夜(16小時(shí))。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(80ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液(80ml)、10％檸檬酸水溶液(80ml)、鹽水(80ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜法純化(25/75至50/50 EtOAc/己烷)，得到1.77g所需產(chǎn)物101a。LC-MS518.1(M+H)+。
步驟2 向甲酯101a(1.21g，2.34mmol)、THF(10ml)和MeOH(5ml)的溶液中加入1M LiOH水溶液(5ml)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。然后濃縮，用水(50ml)稀釋，在析出白色固體物質(zhì)后，用固體檸檬酸酸化(pH約為3)。濾出固體，用水洗滌，真空干燥，得到970mg101b。LC-MS504.1(M+H)+。
步驟3
基本上按照以上的方法(步驟1，制備101a)，將酸101b(503mg，1mmol)與中間體13.06(334mg，1.5mmol)偶合，得到101c，直接使用無需純化。MS672.37(M+H)+。
步驟4 向以上的羥基化合物101c和二氯甲烷(15ml)的溶液中加入Dess-Martin過碘烷(periodinane)(848mg，2mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。這時(shí)，反應(yīng)混合物用二氯甲烷(30ml)稀釋，用10％硫代硫酸鈉水溶液和飽和碳酸氫鈉溶液的1∶1混合物(2次，每次25ml)、鹽水(50ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜法純化(15/85至50/50丙酮/己烷)，得到410mg所需產(chǎn)物101d。LC-MS670.2(M+H)+。
步驟5 按照用于中間體1.01步驟3的方法(反應(yīng)時(shí)間＝2小時(shí))，脫去101d中N-boc官能團(tuán)的保護(hù)，得到所需物質(zhì)101e。LC-MS570.1(M+H)+。
步驟6 向胺鹽101e(60mg，0.1mmol)和二氯甲烷(2ml)的0℃溶液中，依次加入DIPEA(0.06ml，0.3mmol)、異氰酸酯中間體65.01(0.25M甲苯溶液，0.8ml，0.2mmol)。在該溫度下保持15分鐘后，將反應(yīng)燒瓶放在冰箱(-20℃)中過夜(16小時(shí))。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(20ml)稀釋，用飽和氯化銨溶液(20ml)、鹽水(20ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜法純化(15/85至50/50丙酮/己烷)，得到所需化合物101(53mg)；LC-MS872.2(M+H)+。
合成實(shí)施例102步驟1 按照實(shí)施例101步驟6的方法，用101e和中間體63.01制備所需化合物102。102的LC-MS829.2(M+H)+。
合成實(shí)施例103步驟1 按照實(shí)施例101步驟6的方法，用101e和中間體64.01制備所需化合物103。103的LC-MS804.2(M+H)+。
按照上述的類似方法，制備表2中的其它化合物。另外，表1中的化合物也可類似地制備。
本發(fā)明涉及新的HCV蛋白酶抑制劑。這種效用可通過它們抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力加以證明。用于所述證明的一般方法通過以下的體外測(cè)定法舉例說明。
HCV蛋白酶抑制活性試驗(yàn)分光光度測(cè)定法按照R.Zhang等(Analytical Biochemistry，270(1999)268-275，其公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中)描述的方法，對(duì)本發(fā)明化合物進(jìn)行HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度測(cè)定?；诘鞍姿怙@色酯底物的測(cè)定適合連續(xù)監(jiān)測(cè)HCV NS3蛋白酶活性。底物衍生自NS5A-NS5B連接序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P側(cè)，其C端羧基被4個(gè)不同發(fā)色醇(3-硝基酚、4-硝基酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮酚)之一酯化。下面介紹這些新的分光光度測(cè)定用酯底物的合成、表征及其在高通量篩選中的應(yīng)用，并且詳細(xì)介紹HCV NS3蛋白酶抑制劑的動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)。
材料與方法材料測(cè)定用相關(guān)緩沖液中的化學(xué)試劑購自Sigma ChemicalCompany(St.Louis，Missouri)。肽合成用試劑購自Aldrich Chemicals、Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。人工合成肽，或者用自動(dòng)ABI 431A型合成儀(Applied Biosystems)合成肽。LAMBDA 12型UV/VIS分光計(jì)購自Perkin Elmer(Norwalk，Connecticut)，96孔UV板購自Corning(Corning，New York)。預(yù)熱板(prewarming block)購自USA Scientific(Ocala，F(xiàn)lorida)，96孔板渦旋器購自Labline Instruments(Melrose Park，Illinois)。Spectramax Plus微量滴定板讀數(shù)儀(帶有單色計(jì))購自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。
酶制備使用以前公開的方法(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)，制備重組HCV NS3/NS4A異源二聚體蛋白酶(菌株la)。使用預(yù)先通過氨基酸分析定量的重組HCV蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)品，通過Biorad染料方法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。開始測(cè)定前，采用Biorad Bio-Spin P-6預(yù)填充柱，使酶貯存緩沖液(50mM磷酸鈉pH8.0、300mM氯化鈉、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷和10mM DTT)交換為測(cè)定緩沖液(25mMMOPS pH6.5、300mM氯化鈉、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)。
底物合成與純化根據(jù)R.Zhang等(同上)報(bào)道合成底物，合成開始時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)方法(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，使Fmoc-Nva-OH錨定在2-氯三苯甲基氯樹脂上。隨后或者人工進(jìn)行或者采用自動(dòng)ABI 431型肽合成儀，利用Fmoc化學(xué)裝配肽。N-乙?；彝耆Ｗo(hù)的肽片段經(jīng)過10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)的二氯甲烷(DCM)溶液處理30分鐘，或者經(jīng)過2％三氟乙酸(TFA)的DCM溶液處理10分鐘后與樹脂斷開。共沸蒸發(fā)合并的濾液和DCM洗滌液(或者重復(fù)用碳酸鈉水溶液萃取)，以除去裂解時(shí)使用的酸。DCM相經(jīng)硫酸鈉干燥后蒸發(fā)。
所述酯底物用標(biāo)準(zhǔn)酸-醇偶合方法(K.Holmber等，Acta Chem.Scand，B33(1979)410-412)進(jìn)行裝配。肽片段溶解于無水吡啶(30-60mg/ml)，向其中加入10摩爾當(dāng)量發(fā)色團(tuán)和催化量(0.1eq.)對(duì)甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，3eq.)啟動(dòng)偶合反應(yīng)。用HPLC監(jiān)測(cè)產(chǎn)物形成，證實(shí)在室溫下反應(yīng)12-72小時(shí)后反應(yīng)完畢。吡啶溶劑通過真空蒸發(fā)除去，進(jìn)一步與甲苯共沸除去。肽酯用95％TFA的DCM溶液脫保護(hù)2小時(shí)，用無水乙醚萃取3次以去除過量發(fā)色團(tuán)。脫保護(hù)底物在C3或C8柱上通過反相HPLC純化，用30％-60％乙腈梯度洗脫(用6個(gè)柱體積)。HPLC純化后的總收率約為20-30％。電噴霧離子化質(zhì)譜證實(shí)分子量。底物以干粉形式防潮保存。
底物及產(chǎn)物的光譜用pH6.5測(cè)定緩沖液獲得底物和相應(yīng)的發(fā)色團(tuán)產(chǎn)物的光譜。利用多個(gè)稀釋度，1cm比色杯，最優(yōu)非高峰波長(3Np和HMC為340nm，PAP為370nm，4-Np為400nm)，測(cè)定消光系數(shù)。最優(yōu)非高峰波長的定義為底物和產(chǎn)物之間產(chǎn)生最大吸光度分?jǐn)?shù)差((產(chǎn)物OD-底物OD)/底物OD)的波長。
蛋白酶測(cè)定在96孔微量滴定板中，用200μl反應(yīng)混合物，于30℃進(jìn)行HCV蛋白酶測(cè)定。對(duì)NS3/NS4A異源二聚體，優(yōu)化測(cè)定緩沖條件(25mM MOPS pH6.5、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)(D.L.Sali等，出處同上)。通常，將緩沖劑、底物和抑制劑的150μl混合物加入各孔中(DMSO終濃度≤4％v/v)，在30℃預(yù)保溫約3分鐘。然后用50μl在測(cè)定緩沖液中的蛋白酶預(yù)熱溶液(12nM，30℃)啟動(dòng)反應(yīng)(終體積為200μl)。用配備有單色器的Spectromax Plus微量滴定板讀數(shù)儀(采用截止濾光片型板讀數(shù)儀可獲得可接受的結(jié)果)，在合適波長(3Np和HMC為340nm，PAP為370nm，4-Np為400nm)，測(cè)定時(shí)間(60分鐘)范圍內(nèi)監(jiān)測(cè)各板的吸光度變化。相對(duì)于作為無酶水解對(duì)照的無酶空白，在合適波長監(jiān)測(cè)Nva和發(fā)色團(tuán)之間的酯鍵的蛋白水解。在30倍底物濃度范圍內(nèi)(約6-200μM)評(píng)價(jià)底物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。用線性回歸求出初速度，采用非線性回歸分析(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合到Michaelis-Menten方程，得出動(dòng)力學(xué)常數(shù)。計(jì)算酶轉(zhuǎn)換率(kcat)，假定酶具有完全活性。
抑制劑和滅活劑的評(píng)價(jià)對(duì)竟?fàn)幮砸种苿〢c-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH，根據(jù)用于竟?fàn)幮砸种苿?dòng)力學(xué)的重排Michaelis-Menten方程vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，其中vo為未抑制時(shí)的初速度，vi為任何已知抑制劑濃度([I]o)抑制劑存在時(shí)的初速度，[S]o為所使用的底物濃度；用vo/vi對(duì)抑制劑濃度([I]o)作圖，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)測(cè)定固定濃度的酶和底物的抑制常數(shù)(Ki)。用線性回歸擬合獲得的數(shù)據(jù)，用所得出的斜率1/(Ki(1+[S]o/Km)，計(jì)算Ki值。表2中給出了本發(fā)明部分化合物的Ki*值(單位nM)。
表2
盡管結(jié)合上述具體實(shí)施方案闡明了本發(fā)明，但是對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，本發(fā)明的許多替換、修改及其它變化方案是顯而易見的。所有這樣的替換、修改及變化方案均落入本發(fā)明精神和范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種化合物、或者所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，所述化合物具有以下通式I的結(jié)構(gòu) 式I其中Z選自雜環(huán)基、-N(H)(烷基)、-N(烷基)2、-N(H)(環(huán)烷基)、-N(環(huán)烷基)2、-N(H)(芳基)、-N(芳基)2、-N(H)(雜環(huán)基)、-N(雜環(huán)基)2、-N(H)(雜芳基)和-N(雜芳基)2；R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳基烷基-和雜芳基烷基，或者NR9R10中的R9和R10相互連接，使得NR9R10構(gòu)成4-8元雜環(huán)基，同樣，CHR9R10中的R9和R10也相互連接，使得CHR9R10構(gòu)成4-8元環(huán)烷基；R2和R3可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；R15、R16、R17、R18、R19、R20和R21可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；其中各個(gè)所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中各個(gè)部分如權(quán)利要求1中定義。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NR9R10，R9為H，R10為H或R14，其中R14為烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R14選自下列部分
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自下列部分
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自下列部分 其中R31為OH或O-烷基；R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R3選自下列部分
8.權(quán)利要求1的化合物，其中G為NH。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中Y選自下列部分 其中R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25各自獨(dú)立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，或者(i)R17和R18彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成3-8元環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)R15和R19彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iii)R15和R16彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；(iv)R15和R20彼此獨(dú)立地連接構(gòu)成4-8元雜環(huán)基；其中各個(gè)所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的或者任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中下列部分 選自 和 其中Y32選自下列基團(tuán) 和
11.權(quán)利要求9的化合物，其中Y選自 或
12.權(quán)利要求1的化合物，其中Z選自下列部分 其中k＝0-4，m＝0-4，k和m可以相同或不同，R26和R27可以相同或不同，并且各自獨(dú)立選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺酰基、芳基磺?；喕酋０被?、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、氧代、羧基、烷酯基、甲酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵素、氰基和硝基。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中Z選自下列部分
14.權(quán)利要求13的化合物，其中Z選自下列部分
15.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NH2或NHR14，其中R14選自下列部分 和 R2選自下列部分 R3選自下列部分 Z選自 Y選自
16.一種藥物組合物，該組合物包含作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
17.權(quán)利要求16的藥物組合物，該組合物用于治療丙型肝炎病毒(HCV)相關(guān)疾病。
18.權(quán)利要求17的藥物組合物，該組合物還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
19.權(quán)利要求18的藥物組合物，該組合物還包含至少一種抗病毒藥。
20.權(quán)利要求19的藥物組合物，該組合物還包含至少一種干擾素。
21.權(quán)利要求20的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒藥是利巴韋林，所述至少一種干擾素是α干擾素或加入聚乙二醇的干擾素。
22.治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療丙型肝炎病毒(“HCV”)相關(guān)疾病的藥物中的用途。
23.權(quán)利要求22的用途，其中所述藥物適合口服或皮下給藥。
24.一種具有HCV蛋白酶抑制活性的化合物、或者所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，所述化合物選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物
25.一種具有HCV蛋白酶抑制活性的化合物、或者所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，所述化合物選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物
26.一種治療HCV相關(guān)疾病的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求24的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
27.權(quán)利要求26的藥物組合物，該組合物還包含至少一種抗病毒藥。
28.權(quán)利要求27的藥物組合物，該組合物還包含至少一種干擾素或聚乙二醇(PEG)-干擾素α綴合物。
29.權(quán)利要求28的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒藥是利巴韋林，所述至少一種干擾素是α干擾素或加入聚乙二醇的干擾素。
30.治療有效量的至少一種權(quán)利要求24的化合物在制備用于治療丙型肝炎病毒相關(guān)疾病的藥物中的用途。
31.治療有效量的至少一種權(quán)利要求24的化合物在制備用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的藥物中的用途。
32.治療有效量的至少一種權(quán)利要求24的化合物在制備用于治療、預(yù)防或改善丙型肝炎病毒的一種或多種癥狀的藥物中的用途。
33.權(quán)利要求31的用途，其中所述HCV蛋白酶是NS3/NS4a蛋白酶。
34.權(quán)利要求33的用途，其中所述一種或多種化合物抑制HCVNS3/NS4a蛋白酶。
35.治療有效量的至少一種權(quán)利要求24的化合物在制備用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽加工的藥物中的用途。
36.治療有效量的藥物組合物在制備用于治療HCV相關(guān)疾病的藥物中的用途，所述藥物組合物包含治療有效量的至少一種化合物、或者所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋體、或者所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，所述化合物選自下列化合物
37.純化形式的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性的式(I)化合物以及制備這類化合物的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了包含這類化合物的藥物組合物以及使用它們治療HCV蛋白酶相關(guān)疾病的方法。
文檔編號(hào)C07K5/06GK1984922SQ200580024074
公開日2007年6月20日 申請(qǐng)日期2005年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月20日
發(fā)明者A·阿拉薩潘, F·G·恩約洛吉, V·M·吉里亞瓦拉布漢 申請(qǐng)人:先靈公司