專利名稱：雌激素受體調(diào)節(jié)劑的制作方法
背景技術(shù)：
天然存在和合成的雌激素具有廣泛的治療效用，其包括緩解絕經(jīng)期癥狀、治療痤瘡、治療痛經(jīng)和功能障礙性子宮出血、治療骨質(zhì)疏松、治療多毛癥、治療前列腺癌、治療潮熱和預(yù)防心血管疾病。由于雌激素是非常有治療價(jià)值的，因此人們已經(jīng)對開發(fā)在雌激素響應(yīng)組織中具有模擬雌激素樣作用的化合物產(chǎn)生極大興趣。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)雌激素受體有兩種類型ERα和ERβ。配體與這兩種類型有不同的結(jié)合，每個類型都有不同的組織特異性去結(jié)合配體。這樣，就可能有對ERα和ERβ有選擇性的化合物，因此就對特定的配體有一定程度的組織特異性。
本領(lǐng)域需要的是與雌激素替代療法一樣能產(chǎn)生陽性反應(yīng)但沒有不良副作用的化合物。還需要對機(jī)體的不同組織發(fā)揮選擇性作用的雌激素樣化合物。
本發(fā)明的化合物是雌激素受體的配體，并可以用于治療或預(yù)防與雌激素功能有關(guān)的各種疾病，其包括骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱(hot flashes)、LDL膽固醇水平增高、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損(impairment of cognitive functioning)、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、由雌激素缺乏產(chǎn)生的抑郁、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性和癌癥，尤其是乳腺、子宮和前列腺癌。
發(fā)明總述本發(fā)明涉及治療或預(yù)防與雌激素功能有關(guān)的各種疾病的方法。本發(fā)明的一個實(shí)施方案說明了用式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體治療或預(yù)防與雌激素有關(guān)的疾病
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及治療或預(yù)防與雌激素功能有關(guān)的各種疾病的方法。本發(fā)明的一個實(shí)施方案說明了用式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體治療或預(yù)防與雌激素有關(guān)的疾病 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R2是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R3是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R4是氫或C(1-3)烷基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(1-5)?；(2-5)烯基或C(2-5)炔基；及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體；其中所述疾病是骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、抑郁、絕經(jīng)性抑郁、產(chǎn)后精神抑郁、月經(jīng)前期綜合征、燥狂憂郁、焦慮、癡呆、強(qiáng)迫性強(qiáng)迫行為(obsessive compulsive behavior)、注意力缺陷障礙、睡眠障礙、應(yīng)激性、沖動、易怒(anger management)、多發(fā)性硬化、帕金森病、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性或雌激素依賴性癌癥。
在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，
R1是氫、鹵素、甲基或氰基；R2是氫、鹵素、甲基或氰基；R3是氫、鹵素、甲基或氰基；R4是氫或C(1-3)烷基；R17是氫、C(1-3)烷基、C(2-3)?；?、C(2-3)烯基或C(2-3)炔基；及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有下式化合物 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R2是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R3是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(1-5)酰基、C(2-5)烯基或C(2-5)炔基；及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體；和另一種藥劑，其選自有機(jī)雙膦酸鹽(bisphosphonates)、組織蛋白酶K抑制劑、雌激素、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨細(xì)胞合成代謝劑、降鈣素、維生素D、合成的維生素D類似物，或選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、芳香酶抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或混合物。
本發(fā)明還涉及式II化合物 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基或氰基；
R4是氫或C(1-3)烷基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(2-5)烯基或C(2-5)炔基；附加條件是R1和R4不能都為氫，及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的非限制性實(shí)例包括，但不限于19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-乙烯基-3β-羥基-17β-甲氧基-雄-5-烯(R1＝R2＝R3＝R17＝H；R4＝CH3)；17α-乙炔基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝R4＝H；R17＝CCH)；17α-乙烯基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝R4＝H；R17＝CHCH2)；17α-甲基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝R4＝H；R17＝CH3)；19-去甲-10β-(1-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝CH3；R2＝R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(順-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝H；R3＝CH3；R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(反-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝H；R2＝CH3；R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(1-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝CH2CH3；R2＝R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(順-2-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝H；R3＝CH2CH3；R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(反-2-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝H；R2＝CH2CH3；R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(1-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝Cl；R2＝R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(順-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝H；R3＝Cl；R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(反-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝H；R2＝Cl；R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(1-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝F；R2＝R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(順-2-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝H；R3＝F；R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(反-2-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝H；R2＝F；R3＝R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(2，2-二氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝H；R2＝R3＝F；R4＝R17＝H)；19-去甲-10β-(三氟乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝F；R4＝R17＝H)；17α-乙炔基-19-去甲-10β-三氟乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(R1＝R2＝R3＝F；R4＝R17＝CCH)；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的范圍還包括含有上述式I化合物和藥學(xué)上可接受載體的藥物組合物。本發(fā)明還預(yù)期包括含有藥學(xué)上可接受的載體和本申請中具體公開的任意化合物的藥物組合物。本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明藥物組合物的方法。本發(fā)明還涉及能用于制備本發(fā)明化合物和藥物組合物的方法和中間體。由包含在本文中的教導(dǎo)中能明顯地看出本發(fā)明的這些和其它方面。
應(yīng)用本發(fā)明的化合物是雌激素受體的選擇性調(diào)節(jié)劑，并因此能用于在哺乳動物、優(yōu)選在人類中治療或預(yù)防與雌激素受體功能有關(guān)的各種疾病。
與雌激素受體功能有關(guān)的各種疾病和狀況包括但不限于，骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、LDL膽固醇水平增高、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、由雌激素缺乏產(chǎn)生的抑郁、絕經(jīng)性抑郁、產(chǎn)后精神抑郁、月經(jīng)前期綜合征、燥狂憂郁、焦慮、癡呆、強(qiáng)迫性強(qiáng)迫行為、注意力缺陷障礙、睡眠障礙、應(yīng)激性、沖動、易怒、多發(fā)性硬化和帕金森病、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性和癌癥，尤其是乳腺、子宮和前列腺癌。在應(yīng)用本發(fā)明主張的化合物治療這樣的疾病時(shí)，所需的治療量將根據(jù)具體的疾病而變化，并能由本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易地確定。盡管治療和預(yù)防都能通過本發(fā)明的范圍而被預(yù)期，但是對這些疾病的治療是優(yōu)選的用途。
本發(fā)明還涉及在有需要的哺乳動物中通過給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物而產(chǎn)生雌激素受體調(diào)節(jié)作用的方法。
本發(fā)明還涉及在有需要的哺乳動物中通過給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物而產(chǎn)生雌激素受體拮抗作用的方法。雌激素受體拮抗作用可以是對ERα的拮抗作用、對ERβ的拮抗作用或?qū)Rα和ERβ的混合拮抗作用。
本發(fā)明還涉及在有需要的哺乳動物中通過給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物而產(chǎn)生雌激素受體激動(agonizing)作用的方法。雌激素受體激動作用可以是對ERα的激動作用、對ERβ的激動作用或?qū)Rα和ERβ的混合激動作用。本發(fā)明的優(yōu)選方法是產(chǎn)生Erβ激動作用。
本發(fā)明還涉及在有需要的哺乳動物中通過給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物來治療或預(yù)防與雌激素功能有關(guān)的疾病、包括骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、LDL膽固醇水平增高、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、由雌激素缺乏產(chǎn)生的抑郁、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性和癌癥，尤其是乳腺、子宮和前列腺癌的方法。本發(fā)明可用治療或預(yù)防抑郁的方法舉例說明。本發(fā)明可用治療或預(yù)防焦慮的方法舉例說明。本發(fā)明可用治療或預(yù)防潮熱的方法舉例說明。本發(fā)明也可用治療或預(yù)防癌癥的方法舉例說明。本發(fā)明還可用治療或預(yù)防心血管疾病的方法舉例說明。
本發(fā)明的一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物來治療或預(yù)防癌癥，尤其是乳腺、子宮或前列腺癌的方法。使用SERMs治療乳腺、子宮或前列腺癌在文獻(xiàn)中是已知的，參見T.J.Powles，″乳腺癌的預(yù)防″Oncologist 2002；7(1)60-4；Park，W.C.和Jordan，V.C.，″選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMS)及其在乳腺癌預(yù)防中的作用″Trends Mol Med.2002年2月；8(2)82-8；Wolff，A.C.等，″使用SERMs輔助治療早期乳腺癌″Ann N Y Acad Sci.2001 Dec；94980-8；Steiner，M.S-et al.，″選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑用于化學(xué)預(yù)防前列腺癌″Urology 2001年4月；57(4Suppl 1)68-72。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防轉(zhuǎn)移性骨病的方法。使用SERMS治療轉(zhuǎn)移性骨病在文獻(xiàn)中是已知的，參見Campisi，C等″通過使用β-干擾素和他莫昔芬完全消退(resoultion)乳腺癌的骨轉(zhuǎn)移?！錏ur J Gynaecol Oncol 1993；14(6)479-83。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防男子女性型乳房的方法。使用SERMS治療男子女性型乳房在文獻(xiàn)中是已知的，參見Ribeiro，G.和Swindell R.，″佐藥他莫昔芬用于男性乳癌?！錌rJ Cancer 1992；65252-254；Donegan，W.，″男性乳癌″JGSM Vol.3，Issue 4，2000。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防閉經(jīng)后骨質(zhì)疏松、糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松、惡性血鈣過多、骨丟失和骨折的方法。使用SERMs治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松、惡性血鈣過多、骨丟失或骨折在文獻(xiàn)中是已知的，參見Jordan，V.C.等′選擇性的雌激素受體調(diào)節(jié)并降低乳腺癌、骨質(zhì)疏松和冠心病的危險(xiǎn)″Natl Cancer Inst 2001 Oct；93(19)1449-57；Bjarnason，NH等，″在用雷洛昔芬治療絕經(jīng)性骨質(zhì)疏松的3年中骨更新的六個和十二個月的變化與降低椎骨骨折的危險(xiǎn)性有關(guān)″Osteoporosis Int 2001；12(11)922-3；Fentiman I.S.，″他莫昔芬防止甾類化合物誘導(dǎo)的骨丟失″Eur J Cancer 28684-685(1992)；Rodan，G.A.等，″骨病的治療方法″Science Vol 289，1 Sept.2000。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防牙周病或牙喪失的方法。使用SERMs在哺乳動物中治療牙周病或牙喪失在文獻(xiàn)中是已知的，參見Rodan，G.A.等，″骨病的治療方法″Science Vol289，1 Sept.2000pp.1508-14。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防佩吉特病的方法。使用SERMs在哺乳動物中治療佩吉特病在文獻(xiàn)中是已知的，參見Rodan，G.A.等，″骨病的治療方法″Science Vol 289，1 Sept.2000pp.1508-14。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防子宮纖維瘤疾病的方法。使用SERMs治療子宮纖維瘤疾病在文獻(xiàn)中是已知的，參見Palomba，S.等″雷洛昔芬對絕經(jīng)后婦女子宮平滑肌瘤的治療作用″Fertil Steril.2001 Jul；76(1)38-43。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防肥胖的方法。使用SERMs治療肥胖在文獻(xiàn)中是已知的，參見Picard，F(xiàn).等，″雌激素拮抗劑EM-652.HCl對切除卵巢大鼠的能量平衡和脂代謝的作用″Int J Obes Relat Metab Disord.2000 Jul；24(7)830-40。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防軟骨退化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎的方法。使用SERMs治療軟骨退化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎在文獻(xiàn)中是已知的，參見Badger，A.M.等，″艾多昔芬，新型選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，在佐劑誘發(fā)關(guān)節(jié)炎大鼠模型中是有效的?！錔 Pharmacol Exp Ther.1999 Dec；291(3)1380-6。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防子宮內(nèi)膜異位的方法。使用SERMs治療子宮內(nèi)膜異位在本領(lǐng)域中是已知的，參見Steven R.Goldstein，″SERMs對子宮內(nèi)膜的作用″Annals of theNew York Academy of Sciences 949237-242(2001)。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防尿失禁的方法。使用SERMs治療尿失禁在本領(lǐng)域中是已知的，參見Goldstein，S.R.，″雷洛昔芬對骨盆底舒張手術(shù)的頻率的影響″Obstet Gynecol.2001 Jul；98(1)91-6。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防心血管疾病、再狹窄、降低LDL膽固醇水平和抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖的方法。雌激素看來對膽固醇的生物合成和心血管健康有影響。從統(tǒng)計(jì)上說，心血管疾病的發(fā)生率在絕經(jīng)后的女性和男性中大致相等；然而，絕經(jīng)前女性的心血管疾病發(fā)病率比男性低很多。由于絕經(jīng)后女性缺乏雌激素，因此據(jù)信雌激素在預(yù)防心血管疾病中發(fā)揮了有益作用。這個機(jī)理還不是很清楚，但是有證據(jù)表明雌激素上調(diào)肝中的低密度脂質(zhì)(LDL)膽固醇受體以除去多余的膽固醇。使用SERMs治療或預(yù)防心血管疾病、再狹窄、降低LDL膽固醇水平和抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖在本領(lǐng)域中是已知的，參見Nuttall，ME等，″艾多昔芬新型選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑能預(yù)防切除卵巢大鼠的骨丟失并降低膽固醇水平以及降低未受損大鼠的子宮重量″Endocrinology 1998 Dec；139(12)5224-34；Jordan，V.C.等，″選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)并降低乳腺癌、骨質(zhì)疏松和冠心病的危險(xiǎn)性″Natl Cancer Inst 2001 Oct；93(19)1449-57；GuzzoJA.，″選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑一心血管疾病中雌激素的新紀(jì)元？″Clin Cardiol 2000 Jan；23(1)15-7；Simoncini T，Genazzani AR.，″雌激素和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑的直接血管作用″Curr Opin ObstetGynecol 2000 Jun；12(3)181-7。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防認(rèn)知功能缺損或大腦退化疾病的方法。在模型中，雌激素已經(jīng)顯示對認(rèn)知活動具有有益的作用，例如緩解焦慮和抑郁以及治療或預(yù)防阿爾茨海默氏病。雌激素通過提高膽堿能的功能、神經(jīng)營養(yǎng)因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子受體的表達(dá)對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮作用。雌激素還能提高谷酰胺能(glutamergic)突觸傳遞，改變淀粉樣前體蛋白的加工(processing)并提供神經(jīng)保護(hù)。這樣，本發(fā)明的雌激素受體調(diào)節(jié)劑就能有益地改善認(rèn)知功能或治療輕度認(rèn)知缺損、注意力缺陷障礙、睡眠障礙、應(yīng)激性、沖動、易怒、多發(fā)性硬化和帕金森病。參見Sawada，H和Shimohama，S，″雌激素與帕金森病神經(jīng)保護(hù)的新方法″Endocrine.2003年6月；21(1)77-9；McCullough LD，和Hum，PD，″雌激素和局部缺血的神經(jīng)保護(hù)綜述″Trends Endocrinol Metab.2003 Jul；14(5)228-35，在此將其全部內(nèi)容引入作為參考。使用SERMs預(yù)防認(rèn)知功能缺損在本領(lǐng)域中是已知的，參見Yaffe，K.，K.Krueger，S.Sarkar，等2001.用雷洛昔芬治療的絕經(jīng)后婦女的認(rèn)知功能。N.Eng.J.Med.3441207-1213。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防抑郁的方法。使用雌激素來預(yù)防抑郁在本領(lǐng)域中已有記載，參見Carranza-Liram S.，Valentino-Figueroa ML，″在絕經(jīng)后婦女中用雌激素治療抑郁″Int J Gynnaecol Obstet 1999 Apr；65(1)35-8。具體為，雌激素受體β(ERβ)選擇性激動劑可用于治療焦慮或抑郁癥，包括抑郁、更年期抑郁、產(chǎn)后抑郁、月經(jīng)前綜合征、躁狂憂郁、焦慮、癡呆和強(qiáng)迫性強(qiáng)迫行為，其可作為單獨(dú)的藥劑或與其它藥劑聯(lián)用。臨床研究已經(jīng)證實(shí)天然雌激素，17β-雌二醇，用于治療各種形式抑郁癥的功效，參見Schmidt PJ，Nieman L，Danaceau MA，Tobin MB，Roca CA，Murphy JH，Rubinow DR.在與更年期有關(guān)的抑郁中的雌激素替代初步報(bào)告。AmJ Obstet Gynecol 183414-20，2000；和Soares CN，Almeida OP，Joffe H，Cohen LS.雌二醇在更年期婦女中治療抑郁癥的功效雙盲、隨機(jī)、安慰劑對照實(shí)驗(yàn)。Arch Gen Psychiatry.58537-8，2001；在此將其引入作為參考。Bethea等(Lu NZ，Shlaes TA，Gundlah C，Dziennis SE，LyleRE，Bethea CL.在豚鼠的中腦中卵巢類固醇對色氨酸羥化酶蛋白質(zhì)和5-羥色胺的作用，與局部卵巢類固醇受體的位置進(jìn)行比較。Endocrine11257-67，1999，在此引入作為參考)已經(jīng)提出，雌激素的抗抑郁劑活性可能是通過對濃縮于背縫神經(jīng)核中的包含5-羥色胺的細(xì)胞中的5-羥色胺合成進(jìn)行調(diào)節(jié)而介導(dǎo)。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是在有需要的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的任何上述化合物或藥物組合物來治療或預(yù)防焦慮的方法。雌激素受體在調(diào)節(jié)情緒過程例如焦慮中的作用在本領(lǐng)域中已有記載，參見Krezel，W.，等″在缺乏雌激素受體β的小鼠中增強(qiáng)的焦慮和突觸可塑性″Proc Natl Acad Sci USA 2001 Oct 9；98(21)12278-82。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防炎癥或炎性腸疾病的方法。炎性腸疾病，包括節(jié)段性回腸炎(Crohn’s Disease)和潰瘍性結(jié)腸炎，是其中腸變得發(fā)炎的慢性疾病，這通常會引起復(fù)發(fā)的腹部痛性痙攣和腹瀉。使用雌激素受體調(diào)節(jié)劑治療炎癥和炎性腸疾病在本領(lǐng)域中已有記載，參見Harris，H.A.等″在人類疾病的動物模型中評價(jià)雌激素受體-β激動劑″Endocrinology，Vol.144，No.104241-4249。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防高血壓的方法。已經(jīng)報(bào)道雌激素受體β具有調(diào)節(jié)血管功能和血壓的作用，參見Zhu，等″缺乏雌激素受體β的小鼠中的異常血管功能和高血壓″Science，Vol 295，Issue5554，505-508，2002年1月18日。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防男性或女性性功能障礙的方法。使用雌激素受體調(diào)節(jié)劑治療性功能障礙在本領(lǐng)域中已有記載，參見Baulieu，E.等″脫氫表雄酮(DHEA)、DHEA硫酸鹽和老化DHEAge研究對廣泛的生物醫(yī)學(xué)問題的貢獻(xiàn)″PNAS，April 11，2000，Vol.97，No.8，4279-4282；Spark，Richard F.，″脫氫表雄酮女性性特征的起動激素(springboard hormone)″Fertility and Sterility，Vol.77，No.4，Suppl 4，April 2002，S19-25。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防視網(wǎng)膜變性的方法。雌激素已經(jīng)顯示出對降低與年齡有關(guān)的晚期黃斑病的危險(xiǎn)性具有有益作用，參見Snow，K.K.，等″絕經(jīng)后婦女中生殖及激素因素和與年齡有關(guān)的黃斑病的聯(lián)系″Americal Journal of Ophthalmology，Vol.134，Issue 6，2002年12月，第842-48頁。
本發(fā)明舉例說明的是任意上述化合物來制備用于在有需要的哺乳動物中治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松的藥物方面的應(yīng)用，本發(fā)明進(jìn)一步舉例說明的是任意上述化合物在制備用于治療或預(yù)防骨丟失、骨吸收、骨折、轉(zhuǎn)移性骨病或與雌激素功能有關(guān)疾病的藥物方面的應(yīng)用。
本發(fā)明的化合物可以給予哺乳動物，優(yōu)選人類，可單獨(dú)給予或優(yōu)選與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑，任選根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的制藥習(xí)慣與已知輔劑例如明礬聯(lián)合，在藥物組合物中給予?；衔锝?jīng)口服給予或經(jīng)非胃腸道包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、直腸和局部途徑給予。
在用于口服的片劑中，通常加入一般使用的載體包括乳糖和玉米淀粉，以及潤滑劑例如硬脂酸鎂。對膠囊形式的口服給藥來說，可用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。對根據(jù)本發(fā)明的治療化合物的口服使用來說，被選化合物可以以例如片劑或膠囊的形式，或作為水溶液或混懸液而被給予。對片劑或膠囊形式的口服給藥來說，活性藥物成分能與口服、無毒、藥學(xué)上可接受的惰性載體組合，載體例如有乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露醇、山梨醇等；對液體形式的口服給藥來說，口服藥物成分能與任意的口服、無毒、藥學(xué)上可接受的惰性載體例如乙醇、甘油、水等組合。此外，當(dāng)期望或需要時(shí)，還能在混合物中加入適宜的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑。適宜的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味劑、天然和合成的樹膠例如阿拉伯膠、西黃蓍膠或海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。這些劑型中使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。當(dāng)水性混懸液需要口服使用時(shí)，可將活性成分與乳化劑和混懸劑組合。如果希望的話，可以加入某些甜味劑或矯味劑。對肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)使用來說，通常制備成活性成分的無菌溶液，溶液的pH應(yīng)該被適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)和緩沖。對靜脈內(nèi)使用來說，應(yīng)該控制溶質(zhì)的總濃度以使制劑是等滲的。
本發(fā)明的化合物還能以脂質(zhì)體給藥系統(tǒng)的形式例如小型單層囊泡、單層大囊泡和多層囊泡的形式給予。脂質(zhì)體可由各種磷脂例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿形成。
本發(fā)明的化合物還可以通過使用單克隆抗體作為單獨(dú)載體而給予，其中化合物分子是被偶聯(lián)的。本發(fā)明的化合物還可以與作為目標(biāo)藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。這類聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羥基-乙基天冬酰胺-苯酚或被棕櫚?；〈木垩趸蚁?聚賴氨酸。此外，本發(fā)明的化合物可以與一類可生物降解的用于實(shí)現(xiàn)藥物控釋的聚合物偶聯(lián)，所述聚合物有例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯類、聚縮醛類、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩性嵌段共聚物。
本發(fā)明的化合物還可與已知的可用于治療或預(yù)防以下疾病的藥劑組合使用骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、LDL膽固醇水平增高、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、由雌激素缺乏產(chǎn)生的抑郁、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性和癌癥，尤其是乳腺、子宮和前列腺癌。目前公開的化合物與可用于治療或預(yù)防在此公開疾病的藥劑的聯(lián)合也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員基于藥物的特性和有關(guān)疾病將能夠分辨出哪種藥劑的聯(lián)合將是有用的。這樣的藥劑包括以下物質(zhì)有機(jī)雙膦酸鹽；組織蛋白酶K抑制劑；雌激素或雌激素受體調(diào)節(jié)劑；雄激素受體調(diào)節(jié)劑；破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；整聯(lián)蛋白受體拮抗劑；成骨細(xì)胞合成代謝劑例如PTH；降鈣素；維生素D或合成的維生素D類似物；選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs)；芳香酶抑制劑；及其藥學(xué)上可接受的鹽和混合物。優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和有機(jī)雙膦酸鹽。另一個優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和組織蛋白酶K抑制劑。另一個優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和雌激素。另一個優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和雄激素受體調(diào)節(jié)劑。另一個優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和成骨細(xì)胞合成代謝劑。
“有機(jī)雙膦酸鹽”包括但不限于具有以下化學(xué)式的化合物 其中n是0到7的整數(shù)，其中A和X獨(dú)立地選自H、OH、鹵素、NH2、SH、苯基、C1-30烷基、C3-30支鏈或環(huán)烷基、含有兩個或三個N的二環(huán)結(jié)構(gòu)、C1-30取代的烷基、C1-10烷基取代的NH2、被C3-10支鏈或環(huán)烷基取代的NH2、被C1-10二烷基取代的NH2、C1-10烷氧基、被C1-10烷基取代的硫基(thio)、苯硫基、鹵代苯硫基、被C1-10烷基取代的苯基、吡啶基、呋喃基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑并吡啶基和芐基，要求當(dāng)n是0時(shí)，A和X不能都選自H或OH；或者A和X與碳原子或與它們連接的原子一起形成C3-10環(huán)。
在上述化學(xué)式中，烷基可以是直鏈、支鏈或環(huán)的形式，如果化學(xué)式中有足夠的原子可供選擇。C1-30被取代的烷基可包括各種取代基，非限制性實(shí)例包括選自以下的基團(tuán)苯基、吡啶基、呋喃基、吡咯烷基、咪唑基(imidazonyl)、NH2、C1-10烷基或二烷基取代的NH2、OH、SH和C1-10烷氧基。
上述化學(xué)式還包括把復(fù)雜的碳環(huán)的、芳族的和雜原子結(jié)構(gòu)用作A或X的取代基，非限制性實(shí)例包括萘基、喹啉基、異喹啉基、金剛烷基和氯苯硫基。
雙膦酸鹽的藥學(xué)上可接受的鹽類和衍生物在此也是有用的。鹽的非限制性實(shí)例包括選自以下的物質(zhì)堿土金屬、堿金屬、銨和一、二、三、四-C1-30烷基取代的銨。優(yōu)選的鹽選自鈉、鉀、鈣、鎂和銨鹽。更優(yōu)選的是鈉鹽。衍生物的非限制性實(shí)例包括選自以下的物質(zhì)酯類、水合物類以及酰胺類。
應(yīng)該指出，本文使用的涉及本發(fā)明治療劑的術(shù)語“雙膦酸鹽(bisphosphonate)”和“雙膦酸鹽類(bisphosphonates)”還意味著包含二膦酸鹽類(diphosphonate)、二磷酸類(biphosphonic acids)和二膦酸類(diphosphonic acids)，以及這些物質(zhì)的鹽和衍生物。使用的涉及雙膦酸鹽或雙膦酸鹽類的具體名稱并不意味著限制本發(fā)明的范圍，除非另有指明。
雙膦酸鹽的非限制性實(shí)例包括阿倫膦酸鹽(alendronate)、西瑪膦酸鹽(cimadronat)、氯屈膦酸鹽(clodronate)、羥乙二膦酸鹽(etidronate)、伊班膦酸鹽(ibandronate)、伊卡膦酸鹽(incadronate)、米諾膦酸鹽(minodronate)、奈立膦酸鹽(neridronate)、奧帕膦酸鹽(olpadronate)、氨羥二磷酸二鈉(pamidronate)、吡膦酸鹽(piridronat)、利塞膦酸鹽(risedronate)、替魯膦酸鹽(tiludronate)和唑侖膦酸鹽(zolendronate)，及其藥學(xué)上可接受的鹽類和酯類。特別優(yōu)選的雙膦酸鹽是阿倫膦酸鹽，尤其是阿倫膦酸的鈉、鉀、鈣、鎂或銨鹽。舉例說明的優(yōu)選雙膦酸鹽是阿倫膦酸的鈉鹽，尤其是阿倫膦酸的水合鈉鹽。該鹽能被整摩爾數(shù)的水或非整摩爾數(shù)的水水合。另一個示例說明的優(yōu)選雙膦酸鹽是阿倫膦酸的水合鈉鹽，尤其水合鹽為阿倫膦酸一鈉的三水合物。
有機(jī)雙膦酸鹽化合物的精確劑量將隨給藥方案、所選的特定雙膦酸鹽化合物、哺乳動物或人類的年齡、體重、性別和狀況、受治疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及其它相關(guān)的醫(yī)學(xué)和物理因素而變化。對于人類，雙膦酸鹽化合物的有效口服劑量一般為約1.5到約6000μg/kg體重，優(yōu)選約10到約2000μg/kg體重。在另一個給藥方案中，雙膦酸鹽化合物可以不是以每天一次的時(shí)間間隔給予，例如每周給藥一次、每周給藥兩次、每兩周給藥一次和每兩個月給藥一次。在每周給藥一次的方案中，阿倫膦酸一鈉的三水合物將以35mg/周或70mg/周的劑量給予。雙磷酸鹽化合物還可以每月、每六個月、每年或甚至更低的頻率給予，參見WO01/97788(公開于2001年12月27日)和WO01/89494(公開于2001年11月29日)。
“雌激素”包括但不限于天然存在的雌激素[7-雌二醇(E2)、雌酮(E1)和雌三醇(E3)]，合成的結(jié)合雌激素，口服避孕藥和硫酸化雌激素。參見Gruber CJ，Tschugguel W，Schneeberger C，Huber JC.，″雌激素的制備和作用″N Engl J Med 2002 Jan 31；346(5)340-52。
“雌激素受體調(diào)節(jié)劑”指的是干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的物質(zhì)，不管機(jī)理如何。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于雌激素、孕激素、雌二醇、屈洛昔芬(droloxifene)、雷洛昔芬、拉索昔芬、TSE-424、他莫昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟維司群(fulvestrant)、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸鹽(propanoate)、4，4′-二羥基二苯甲酮-2，4-二硝基苯腙和SH646。
“組織蛋白酶K抑制劑”指的是能干擾半胱氨酸蛋白酶組織蛋白酶K活性的化合物。組織蛋白酶K抑制劑的非限制性實(shí)例能在以下文獻(xiàn)中找到PCT公開文本W(wǎng)O00/55126，Axys Pharmaceuticals和WO01/49288，Merck Frosst Canada & Co.和Axys Pharmaceuticals。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”指的是能干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物，不論機(jī)理如何。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括非那雄胺和其它的5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和阿比特龍醋酸鹽(abiraterone acetate)。
“破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑”指的是質(zhì)子ATP酶的抑制劑，其能在破骨細(xì)胞的頂膜上找到，并且已經(jīng)報(bào)道其在骨的再吸收過程中發(fā)揮了顯著作用。這種質(zhì)子泵表示了用于設(shè)計(jì)骨再吸收抑制劑的引人注目的靶標(biāo)，其可潛在地用于治療和預(yù)防骨質(zhì)疏松和相關(guān)的代謝疾病。參見C.Farina等″作為新穎的骨抗再吸收藥劑的破骨細(xì)胞空泡質(zhì)子ATP酶選擇性抑制劑″DDT，4163-172(1999)，在此全文引入作為參考。
“HMG-CoA還原酶抑制劑”指的是3-羥基-3-甲基戊二酰基-CoA還原酶的抑制劑。對HMG-CoA還原酶具有抑制活性的化合物能用本領(lǐng)域已知的測定法容易地確定。例如，參見美國專利4,231,938第6欄，和WO84/02131，第30-33頁所記載或引用的測定法。本文使用的術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”和“HMG-CoA還原酶的抑制劑”具有相同的含義。
可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實(shí)例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR；參見美國專利4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR；參見美國專利4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL；參見美國專利4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL參見美國專利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀(LIPITOR；參見美國專利5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)和西立伐他汀(也被稱為rivastatin和BAYCHOL參見美國專利5,177,080)?？捎迷诒痉椒ㄖ械倪@些和其它HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式記載于M.Yalpani，″降低膽固醇的藥物″，Chemistry & Industry，第85-89頁(1996年2月5日)的第87頁和美國專利4,782,084和4,885,314中。本文使用的術(shù)語HMG-CoA還原酶抑制劑包括具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的所有藥學(xué)上可接受的內(nèi)酯和開放酸的形式(即其中的內(nèi)酯環(huán)是開放的以形成游離酸)以及鹽和酯的形式，因此使用這種鹽、酯、開放的酸和內(nèi)酯形式都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。下列結(jié)構(gòu)I和II顯示出對內(nèi)酯部分和其相應(yīng)開放酸形式的舉例說明。
在能夠存在開放酸的形式的HMG-CoA還原酶抑制劑中，可以優(yōu)選由開放酸形成的鹽和酯的形式，所有這些形式都包括在這里使用的術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”的含義內(nèi)。優(yōu)選的是，HMG-CoA還原酶抑制劑選自洛伐他汀和辛伐他汀，最優(yōu)選辛伐他汀。在此，關(guān)于HMG-CoA還原酶抑制劑的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”將指的是用在本發(fā)明中的化合物的無毒鹽，其通常是通過將游離酸與適宜的有機(jī)或無機(jī)堿反應(yīng)來制備，尤其是由陽離子例如鈉、鉀、鋁、鈣、鋰、鎂、鋅和四甲銨形成的鹽類，以及由胺類例如氨、乙二胺、N-甲基葡糖胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、1-對-氯芐基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪和三(羥甲基)氨基甲烷形成的鹽類。HMG-CoA還原酶抑制劑的鹽形式的其它實(shí)例可以包括但不限于醋酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、依地酸鈣、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、依地酸鹽、乙二磺酸鹽、丙酸酯月桂硫酸鹽(estolate)、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽(gluceptate)、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽(glycollylarsanilate)、己基間苯二酚鹽(hexylresorcinate)、哈胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥基萘甲酸鹽(hydroxynapthoate)、碘化物、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲基磺酸鹽(mesylate)、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamaote)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽(panthothenate)、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式醋酸鹽(subacetate)、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽(teoclate)、甲苯磺酸鹽、三乙基碘化物(triethiodide)和戊酸鹽。
所描述的HMG-CoA還原酶抑制劑化合物的酯衍生物可以作為前藥，當(dāng)其被吸收入溫血動物的血流中時(shí)，可以以這樣一種方式斷裂，該方式能釋放藥物形式并允許藥物提供改進(jìn)的治療效果。
如以上所用，“整聯(lián)蛋白受體拮抗劑”指的是能選擇性拮抗、抑制或?qū)股韺W(xué)配體與αvβ3整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物，能選擇性拮抗、抑制或?qū)股韺W(xué)配體與αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物，能選擇性拮抗、抑制或?qū)股韺W(xué)配體與αvβ3整聯(lián)蛋白和αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物，能選擇性拮抗、抑制或?qū)姑?xì)管上皮細(xì)胞表達(dá)的特定整聯(lián)蛋白的活性的化合物。該術(shù)語還指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語還指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任意組合的拮抗劑。在發(fā)表于PNAS USA 961591-1596(1999)的論文中，H.N.Lode及同事已經(jīng)觀察到抗血管原性αv整聯(lián)蛋白拮抗劑和腫瘤-特定抗體-細(xì)胞因子(白介素-2)融合蛋白在根除自發(fā)性腫瘤轉(zhuǎn)移瘤中有協(xié)同效果。他們的結(jié)果提示，這種聯(lián)合在治療癌癥和轉(zhuǎn)移瘤的生長中具有潛力。αvβ3整聯(lián)蛋白受體拮抗劑可通過新穎的不同于所有目前所用藥物的機(jī)制來抑制骨的再吸收。整聯(lián)蛋白是雜二聚跨細(xì)胞膜粘著受體，其能調(diào)節(jié)細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)間的相互作用。α和β整聯(lián)蛋白的亞單元間是非共價(jià)結(jié)合的，并以依賴二價(jià)陽離子的方式與細(xì)胞外基質(zhì)配體結(jié)合。破骨細(xì)胞上最多的整聯(lián)蛋白是αvβ3(＞107/破骨細(xì)胞)，其似乎在細(xì)胞支架的構(gòu)建中發(fā)揮了限速作用，這對細(xì)胞的遷移和極化很重要。拮抗αvβ3的作用選自抑制骨再吸收、抑制再狹窄、抑制黃斑變性、抑制關(guān)節(jié)炎和抑制癌癥及轉(zhuǎn)移生長。
“成骨細(xì)胞合成代謝劑”指的是能構(gòu)建骨的藥劑，例如PTH。間歇給予甲狀旁腺素(PTH)或其氨基端片段和類似物已經(jīng)顯示能在動物和人類中預(yù)防、停止、部分逆轉(zhuǎn)骨丟失并刺激骨生成。對此的討論可參看D.W.Dempster等″甲狀旁腺素對骨的合成代謝作用″EndocrRev 14690-709(1993)。研究已經(jīng)證實(shí)，甲狀旁腺素對刺激骨形成有臨床益處并能由此提高骨的質(zhì)量和強(qiáng)度。結(jié)果由RM Neer等在New EngJ Med 344 1434-1441(2001)中報(bào)道。
另外，與甲狀旁腺素有關(guān)的蛋白片段或類似物，例如PTHrP-(1-36)已經(jīng)被證明有效力的抗鈣尿(anticalciuric)作用[參見M.A.Syed等″與甲狀旁腺素有關(guān)的蛋白-(1-36)刺激正常人志愿者中腎管的鈣重吸收暗示了惡性體液血鈣過多的發(fā)病機(jī)制″JCEM 861525-1531(2001)]，還可能具有作為合成代謝劑用于治療骨質(zhì)疏松的潛力。
降鈣素是主要通過甲狀腺產(chǎn)生的32個氨基酸的肽，已知其能參與鈣和磷的代謝。降鈣素能通過抑制破骨細(xì)胞的活性來抑制骨的重吸收。這樣，降鈣素就能使造骨細(xì)胞更有效地工作并構(gòu)建骨。
“維生素D”包括但不限于維生素D3(膽鈣化醇)和維生素D2(麥角鈣化醇)，它們是維生素D的羥基化生物學(xué)活性代謝物的天然存在的、生物學(xué)失活前體1α-羥基維生素D、25-羥基維生素D和1α，25-二羥基維生素D。維生素D2和D3在人類中具有相同的生物功效。當(dāng)維生素D2或D3進(jìn)入循環(huán)時(shí)，其被細(xì)胞色素P450-維生素D-25-羥化酶羥基化，得到25-羥基維生素D。25-羥基維生素D的代謝物是生物惰性的并能在腎中通過細(xì)胞色素P450-單氧合酶、25(OH)D-1α-羥化酶進(jìn)一步羥化得到1，25-二羥基維生素D。當(dāng)血清鈣減少時(shí)，甲狀旁腺素(PTH)的生成就增加，其能調(diào)節(jié)鈣的體內(nèi)平衡并通過增加25-羥基維生素D向1，25-二羥基維生素D的轉(zhuǎn)化而增加血漿鈣的水平。
1，25-二羥基維生素D被認(rèn)為是維生素D對鈣和骨代謝發(fā)揮作用的原因。1，25-二羥基代謝物是需要保持鈣吸收和骨胳完整性的活性激素。鈣的體內(nèi)平衡通過1，25-二羥基維生素D來維持，其通過降低單核細(xì)胞干細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞并通過將鈣保持在正常范圍內(nèi)來維持，這通過羥磷灰石在骨表面的沉積而致使骨礦化，參見Holick，MF，維生素D的光生物學(xué)、代謝和臨床應(yīng)用，參見DeGroot L，Besser H，Burger HG，eg al.，_eds.Endocrinology，3rded.，990-1013(1995)。然而，提高的1α，25-二羥基維生素D3水平能通過骨代謝致使血中鈣濃度增加并使得鈣的濃度被異?？刂?，以致導(dǎo)致血鈣過多。1α，25-二羥基維生素D3還能間接調(diào)節(jié)骨代謝中破骨細(xì)胞的活性，而且提高的水平可以預(yù)期能增加骨質(zhì)疏松中過度的骨重吸收。
“合成的維生素D類似物”包括作用類似維生素D的非天然存在的化合物。
選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑通過增加腦中5-羥色胺的數(shù)量而發(fā)揮作用。SSRIs已經(jīng)在美國成功使用了十年用以治療抑郁癥。SSRIs的非限制性實(shí)例包括氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、西酞普蘭和氟伏沙明。SSRIs也能用于治療與雌激素功能有關(guān)的疾病，例如月經(jīng)前期綜合征和月經(jīng)前的畸形疾病。參見Sundstrom-Poromaa I，Bixo M，Bjorn I，Nordh0.，″用于治療月經(jīng)前期綜合征的抗抑郁藥物療法的依從性″JPsychosom Obstet Gynaecol 2000 Dec；21(4)205-11。
本文使用的術(shù)語“芳香酶抑制劑”包括能抑制芳香酶的化合物，例如可商購的抑制劑如氨魯米特(aminoglutemide)(CYTANDREN)、Anastrazole(ARIMIDEX)、來曲唑(FEMARA)、福美坦(LENATRON)、依西美坦(AROMASIN)、阿他美坦(1-甲基雄-1，4-二烯-3，17-二酮)、法倔唑(4-(5，6，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]吡啶-5-基)-氰苯，單鹽酸鹽)、氟羅唑(4-(3-(4-氟苯基)-2-羥基-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丙基)-芐腈)、伏氯唑(6-[(4-氯苯基)-1H-1，2，4-三唑-1-基甲基]-1-甲基-1H-苯并三唑)、YM-511(4-[N-(4-溴芐基)-N-(4-氰基苯基)氨基]-4H-1，2，4-三唑)等。
如果配制成固定劑量，那么這種組合產(chǎn)品就能使用在以下記載的劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和在其被認(rèn)可劑量范圍內(nèi)的其它藥學(xué)上的活性劑。當(dāng)組合制劑是不合適的時(shí)侯，本發(fā)明的化合物還可以與已知的藥學(xué)上可接受的藥劑相繼使用。
有關(guān)本發(fā)明化合物的術(shù)語“給予”及其變體(例如“給予”化合物)的意思是將化合物或化合物的前藥引入需要治療的動物系統(tǒng)中。當(dāng)本發(fā)明的化合物或其前藥與一種或多種其它活性劑(例如雙膦酸鹽化合物等)組合提供時(shí)，“給予”及其變體都可以被理解為包括同時(shí)和相繼引入化合物或其前藥以及其它藥劑。本發(fā)明包括在其范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物的前藥。通常，這種前藥將是本發(fā)明化合物的官能衍生物，其在體內(nèi)易于轉(zhuǎn)變?yōu)樗璧幕衔?。這樣，在本發(fā)明的治療方法中，術(shù)語“給予”將包含用具體公開的化合物或可能未被具體公開的化合物，但是其能在給予患者后于體內(nèi)轉(zhuǎn)化為特定的化合物，以治療所述的各種疾病。用于選擇和制備適宜的前藥衍生物的常規(guī)方法記載于例如″前藥的設(shè)計(jì)(Design of Prodrugs)，″ed.H.Bundgaard，Elsevier，1985中，在此全文引入作為參考。這些化合物的代謝物包括將本發(fā)明的化合物引入生物環(huán)境后產(chǎn)生的活性物質(zhì)。
本發(fā)明還包含可用于治療骨質(zhì)疏松或其它骨病的藥物組合物，治療包括給予治療有效量的本發(fā)明化合物，該組合物含有或不含藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。本發(fā)明的適宜組合物包括含有本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受載體例如鹽水的水溶液，pH在一定水平上，例如為7.4。溶液可以通過局部推注(local bolus injection)而被引入到患者的血流中。
當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的化合物被給予人類受試者中時(shí)，日劑量將通常由處方醫(yī)師確定，劑量一般根據(jù)患者個體的年齡、體重和反應(yīng)以及患者癥狀的嚴(yán)重程度而變化。
在一個示例性應(yīng)用中，將適宜量的化合物給予接受治療的哺乳動物。當(dāng)用于所指示的作用時(shí)，本發(fā)明的口服劑量將為約0.01mg每kg體重每天(mg/kg/天)到約100mg/kg/天，優(yōu)選0.01到10mg/kg/天，最優(yōu)選0.1到5.0mg/kg/天。對口服給藥來說，組合物優(yōu)選以片劑的形式被提供，其中片劑包含0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100和500毫克的活性成分，用于調(diào)節(jié)受治患者癥狀的劑量。藥物一般包含約0.01mg到約500mg的活性成分，優(yōu)選約1mg到約100mg活性成分。對于靜脈注射，在恒速輸注期間，最優(yōu)選的劑量將為約0.1到約10mg/kg/分鐘。有利的是，本發(fā)明的化合物可以以每日一次的劑量給予，或者是可以將每日總劑量分為每日兩次、三次或四次的劑量給予。此外，本發(fā)明的優(yōu)選化合物可以以鼻內(nèi)藥物的形式通過局部使用適宜的鼻內(nèi)載體，或通過經(jīng)皮途徑，使用那些本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的經(jīng)皮貼劑形式而給予。對于以經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的形式進(jìn)行的給藥來說，劑量給藥在整個給藥方案中當(dāng)然將是連續(xù)的而不是間斷的。
本發(fā)明的化合物能與其它可用于治療雌激素介導(dǎo)的狀況的藥劑組合使用。這種組合的各個成分能在治療期間以不同的次數(shù)分別或同時(shí)以分開的形式或單一組合的形式給予。因此本發(fā)明能被理解為包含所有這樣的同時(shí)或交替治療的方案，而且術(shù)語“給予”也相應(yīng)地按此解釋。應(yīng)該理解，本發(fā)明化合物與其它可用于治療組織蛋白酶介導(dǎo)狀況的藥劑的組合的范圍，原則上包括與能用于治療與雌激素功能有關(guān)疾病的任意藥物組合物的任意組合。
因此本發(fā)明的范圍包括與第二種藥劑組合的本發(fā)明主張的化合物的使用，其中第二種藥劑選自有機(jī)雙磷酸鹽化合物、組織蛋白酶K抑制劑、雌激素、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨細(xì)胞合成代謝劑、降鈣素、維生素D、合成的維生素D類似物、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、芳香酶抑制劑，及其藥學(xué)上可接受的鹽和混合物。
本發(fā)明的這些和其它方面能從本文包含的教導(dǎo)中明顯地看出。
定義本文使用的術(shù)語“組合物”指的是包含含有具體量的具體成分的產(chǎn)品，以及可直接或間接由具體量的具體成分的組合所產(chǎn)生的任意產(chǎn)品。
本文使用的術(shù)語“治療有效量”指的是能在組織、系統(tǒng)、動物或人類中產(chǎn)生生物或藥物反應(yīng)的活性化合物或藥劑的量，其能由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)學(xué)博士或其它臨床醫(yī)師找出。
本文使用的術(shù)語“治療”疾病或?qū)膊〉摹爸委煛卑A(yù)防疾病，即使得哺乳動物的疾病臨床癥狀不發(fā)展，其中動物可以是患病的或者是或易患病的，但還沒有經(jīng)受或顯示出疾病癥狀；抑制疾病，即阻止或降低疾病或其臨床癥狀的發(fā)展；或緩解疾病，即使得疾病或其臨床癥狀消退。
本文使用的術(shù)語“骨再吸收”指的是破骨細(xì)胞降解骨的過程。
術(shù)語“烷基”將指取代的一價(jià)基團(tuán)，其來自直鏈或支鏈非環(huán)式飽和脂肪烴的一個氫原子在概念上的離去(即CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)2、-C(CH3)3等)。
術(shù)語“烯基”將指取代的一價(jià)基團(tuán)，其來自直鏈或支鏈非環(huán)式不飽和脂肪烴的一個氫原子在概念上的離去(即-CH＝CH2、-CH＝CHCH3、-C＝C(CH3)2、-CH2CH＝CH2等)。
術(shù)語“炔基”將指取代的一價(jià)基團(tuán)，其來自包含碳-碳三鍵的直鏈或支鏈非環(huán)式不飽和脂肪烴的一個氫原子在概念上的離去(即-C≡CH、-C≡CCH3、-C≡CCH(CH3)2、-CH2C≡CH等)。
術(shù)語“?；睂⒅溉〈囊粌r(jià)基團(tuán)，其來自用羰基取代連接在上述“烷基”基團(tuán)碳上的兩個氫(即-COH、-COCH3、-COCH2CH3、-COCH2CH2CH3、-COCH(CH3)2、-COCH2CH2CH2CH3、-COCH2CH(CH3)2、-COC(CH3)3等)。
術(shù)語“鹵素”將包括碘、溴、氯和氟。
術(shù)語“取代”將被認(rèn)為包括被指定取代基的多重取代。當(dāng)公開或主張多個取代部分時(shí)，被取代的化合物能獨(dú)立地被一個或多個公開或主張的取代基部分單獨(dú)或多次取代。就獨(dú)立取代來說，其指的是(兩個或多個)取代基可以是相同或不同的。
本發(fā)明還包括式I化合物的N-氧化物衍生物和被保護(hù)的衍生物。例如，當(dāng)式I化合物包含可氧化的氮原子時(shí)，該氮原子就能通過本領(lǐng)域已知的方法轉(zhuǎn)化為N-氧化物。還有，當(dāng)式I化合物包含諸如羥基、羧基、巰基或包含氮原子的任意基團(tuán)時(shí)，這些基團(tuán)能被適宜的保護(hù)基保護(hù)起來。在T.W.Greene，有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protective Groups inOrganic Synthesis)，John Wiley & Sons，Inc.1981中能找到適宜保護(hù)基團(tuán)的詳盡目錄，在此將其全文引入作為參考。式I化合物的被保護(hù)衍生物能通過本領(lǐng)域已知的方法制備。
本發(fā)明的化合物可以具有不對稱中心、手性軸和手性平面(如E.L.Eliel和S.H.Wilen，在“碳化合物的立體化學(xué)”(Stereo-chemistry ofCarbon Compounds，)John Wiley & Sons，New York，1994，pages1119-1190所述)，并以外消旋化合物、外消旋混合物和作為單獨(dú)的非對映異構(gòu)體存在，具有所有可能的異構(gòu)體及其混合物，包括旋光異構(gòu)體，這將被包括在本發(fā)明內(nèi)。此外，本文公開的化合物可以以互變異構(gòu)體的形式存在，且兩個互變異構(gòu)體形式都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，即使僅描述了一個互變異構(gòu)體結(jié)構(gòu)。例如，對下面化合物A的任何權(quán)利要求都被理解為包括互變異構(gòu)體結(jié)構(gòu)B，反之亦然，還有其混合物。
當(dāng)任何變量(例如R1、R2、R3等)在任何成分中出現(xiàn)不止一次時(shí)，在每次出現(xiàn)時(shí)其定義都獨(dú)立于其它次出現(xiàn)時(shí)的定義。還有，僅允許取代基和變量的組合，如果這種組合能產(chǎn)生穩(wěn)定化合物的話。由線型取代基形成環(huán)系統(tǒng)指的是所指出的鍵可以連接到任意可取代的環(huán)碳原子上。如果環(huán)系統(tǒng)是多環(huán)，那么其指的是該鍵僅可連接到鄰近環(huán)的適宜碳原子上。
應(yīng)該理解，本發(fā)明化合物的取代基和取代型式能由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員進(jìn)行選擇，以提供具有化學(xué)穩(wěn)定性、并能從易于得到的起始物、用本領(lǐng)域已知的技術(shù)以及下述方法容易地合成的化合物。如果取代基本身被不止一個基團(tuán)取代時(shí)，應(yīng)該理解，這些多個基團(tuán)可以在相同的碳原子上或不同的碳原子上，只要能得到穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)就行。短語“任選被一個或多個取代基取代”將等價(jià)于短語“任選被至少一個取代基取代”，在這種情況下，優(yōu)選的實(shí)施方案將具有零到三個取代基。
在選擇本發(fā)明的化合物時(shí)，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)能認(rèn)識到，不同的取代基，即R1、R2、R3、R4和R17要在符合化學(xué)結(jié)構(gòu)連接性的已知原理上進(jìn)行選擇。
本發(fā)明有代表性的化合物典型地對α和/或β雌激素受體顯示亞微摩爾(submicromolar)的親合力，優(yōu)選能激動(agonize)β雌激素受體。因此本發(fā)明的化合物能用于治療患有與雌激素功能有關(guān)的疾病的哺乳動物。
本發(fā)明的化合物可以是外消旋的形式或單個對映體。為方便起見，用圖表示了一些單個對映體的結(jié)構(gòu)，但是除非另有指明，這都意指包括外消旋的和純對映體的形式。當(dāng)用順式和反式立體化學(xué)來表示本發(fā)明的化合物時(shí)，應(yīng)注意該立體化學(xué)將被解釋為相對關(guān)系，除非另有指明。例如，(+)或(-)名稱將被解釋為表示具有所示絕對立體化學(xué)的所指化合物。
外消旋混合物能通過眾多常規(guī)方法中的任意一種被拆分為單個對映體。這些包括但不限于手性色譜法、用手性輔劑衍生化然后經(jīng)色譜或結(jié)晶法分離，以及非對映異構(gòu)體鹽的分步結(jié)晶。也可以使用去外消旋的步驟例如前手性中間物陰離子的對映體質(zhì)子化等。
本發(fā)明的化合物能與其它可用于治療由雌激素介導(dǎo)的狀況的藥劑組合使用。這種組合的每個成分都能在治療期間以不同的次數(shù)分別給予或同時(shí)以分開的形式或單一組合的形式給予。因此本發(fā)明應(yīng)被理解為包含所有這樣的同時(shí)或交替治療的方案，而且術(shù)語“給予”也應(yīng)按此解釋。應(yīng)該理解，本發(fā)明化合物與其它可用于治療雌激素介導(dǎo)狀況的藥劑的組合的范圍原則上包括與能用于治療與雌激素功能有關(guān)疾病的任意藥物組合物的任意組合。
使用本發(fā)明化合物的劑量方案將根據(jù)多種因素進(jìn)行選擇，這包括患者的類型、種屬、年齡、體重、性別和醫(yī)學(xué)狀況；受治狀況的嚴(yán)重程度；給藥途徑；患者的腎和肝功能；以及所用的特定化合物或其鹽。普通技術(shù)醫(yī)師、獸醫(yī)或臨床醫(yī)師能容易地確定和開具需要預(yù)防、抗擊或阻止?fàn)顩r發(fā)展的有效藥量。
在本發(fā)明的方法中，在此詳細(xì)描述的化合物能形成活性成分，并根據(jù)給藥形式即口服片劑、膠囊、酏劑、糖漿劑等而與適當(dāng)選擇的適宜的藥學(xué)稀釋劑、賦形劑或載體(在此統(tǒng)稱為′載體′物質(zhì))混合，并符合常規(guī)的藥學(xué)習(xí)慣而被典型地給予。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽類包括由無機(jī)或有機(jī)酸形成的本發(fā)明化合物的常規(guī)無毒鹽。例如常規(guī)的無毒鹽包括源自無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的鹽，以及由有機(jī)酸例如醋酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、反丁烯二酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸(ethane disulfonic acid)、草酸、羥乙磺酸、三氟醋酸等制備的鹽類。Berg等″藥用鹽″J.Pharm.Sci.，1977661-19中更全面地記載了上述藥學(xué)上可接受的鹽類和其它典型的藥學(xué)上可接受鹽類的制備，在此引入作為參考。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽類能由包含酸性或堿性部分的本發(fā)明化合物經(jīng)常規(guī)的化學(xué)方法合成。通常，堿性化合物的鹽類能通過離子交換色譜法制備，或?qū)⒂坞x堿與化學(xué)計(jì)算量或過量的所期望的成鹽無機(jī)或有機(jī)酸在適宜的溶劑或溶劑的各種組合中進(jìn)行反應(yīng)來制備。類似地，酸性化合物的鹽類可通過與適宜的無機(jī)或有機(jī)堿進(jìn)行反應(yīng)來形成。
本發(fā)明的化合物能根據(jù)以下的一般方案使用適宜的物質(zhì)來制備，并由通過隨后的具體實(shí)施例進(jìn)一步地舉例說明。然而，實(shí)施例中例舉的化合物并不被解釋為形成了本發(fā)明唯一認(rèn)可的一類物質(zhì)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將能很容易地明白，以下制備步驟的條件和方法的各種已知變化也能用于制備這些化合物。所有的溫度均為攝氏度，除非另有指明。
盡管本發(fā)明的化合物能通過全合成來制備，但是一般更實(shí)際的是對可商購的類固醇類進(jìn)行修飾。脫氫表雄酮和雄烯二醇是特別方便的起始物，盡管也可以使用其它可商購的類固醇。C-19上的官能化能通過許多本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來完成。一種方便的方法，其在以下流程圖中有說明，使用雄烯二醇的5，6-烯烴作為一種手段來在C-19上進(jìn)行氧化。雄烯二醇的C-3和C-17羥基首先被保護(hù)，成為醋酸酯、甲硅烷基醚、THP醚或用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的標(biāo)準(zhǔn)步驟制成的其它適宜保護(hù)基。5，6-烯烴的官能化通過存在酸、例如高氯酸等的水溶液情況下，用溴源例如N-溴乙酰胺、N-溴代琥珀酰亞胺等處理被保護(hù)的二醇中間物來完成。這個反應(yīng)的產(chǎn)物具有位于甾核C-6上的直鍵羥基，其作為一種手段用于對C-19甲基進(jìn)行氧化?？梢酝瓿蛇@個過程的一種方法是對在烴類溶劑例如環(huán)己烷中的醇、碘苯雙乙酸鹽(iodobenzenediacetate)和碘的混合物進(jìn)行光分解。用活化的鋅粉還原得到的環(huán)醚則重新生成了5，6-雙鍵并提供了19-羥基甾體。19-羥基甾體能通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的一些氧化方法而被氧化成關(guān)鍵的醛中間物A。完成這個轉(zhuǎn)化的一種有用的方法包括將該醇與過釕酸四丙基銨(TPAP)和N-甲基嗎啉N-氧化物(NMO)在溶劑例如二氯甲烷或氯仿等中，在存在分子篩的情況下進(jìn)行反應(yīng)。這個醛能作為底物用于許多烯化反應(yīng)，例如本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的Wittig，Peterson或Tebbe反應(yīng)。然后利用標(biāo)準(zhǔn)的條件除去羥基保護(hù)基就得到了最終的產(chǎn)物，如流程圖所示。
通過將醛中間物A與碳親核試劑例如格氏試劑或烷基鋰試劑進(jìn)行反應(yīng)，可以在C-19(R1)上引入碳取代基，如以下流程圖所示。隨后使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的許多可用于氧化的試劑中的一種對得到的仲醇進(jìn)行氧化，得到酮中間物B。對酮B進(jìn)行烯化后除去羥基保護(hù)基得到C-19取代的類似物。
通過先前流程圖的產(chǎn)物(C)的進(jìn)一步反應(yīng)，可以在C-17(R17)上引入碳取代基，如以下流程圖所示。用適宜的保護(hù)基例如甲硅烷基醚、THP醚等對C的C-3位的較少空阻的羥基進(jìn)行選擇性保護(hù)，然后使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的許多可用于氧化的試劑中的一種對C-17羥基進(jìn)行氧化，得到酮中間物D。將C-17酮與適宜的碳親核試劑例如格氏試劑或烷基鋰試劑進(jìn)行反應(yīng)而引入R17基團(tuán)。隨后使用標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)除去C-3的羥基保護(hù)基得到C-17取代的類似物E。

實(shí)施例制備13β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯 步驟1. 3β，17β-雄-5-烯二醇將硼氫化鈉(3.28g，0.0867mol)分四等份(約隔2分鐘)加入到脫氫表雄酮(25.0g，0.0867mol)的甲醇(870mL)冷(0℃)溶液中。除去冰水浴并在室溫下攪拌該混濁的白色混合物90分鐘。隨著逐滴加入2N HCI(173mL，0.346mol)，在冰浴中冷卻反應(yīng)混合物。在真空下將得到的混合物濃縮為潮濕的白色固體。加入水(500mL)并對混合物進(jìn)行超聲和過濾。用水(100mL)洗滌收集到的固體并在真空干燥器中干燥過夜，得到白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟2. 3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯將醋酸酐(19.5mL，0.2mol)加入到3β，17β-雄-5-烯二醇(15.0g，0.05165mol)的吡啶(200mL)溶液中(注意該加入是輕度放熱的)，然后加入4-二甲氨基-吡啶(0.63g，0.00516mol)。在室溫下攪拌得到的黃色溶液5.5小時(shí)，然后在真空下除去大部分溶劑。在乙酸乙酯(450mL)和1N HCI(450mL)之間分配殘留的黃-白色淤渣。有機(jī)層用5％的碳酸氫鈉水溶液(200mL)洗滌然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾，并蒸發(fā)，得到灰白色的固體。在己烷(500mL)中對這個粗產(chǎn)物進(jìn)行重結(jié)晶得到白色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物。將重結(jié)晶母液進(jìn)行濃縮得到灰白色的固體，其能被重結(jié)晶而得到第二次收獲的產(chǎn)物。
制備219-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯 步驟1. 5α-溴-6β-羥基-3β，17β-雄甾烷二醇二乙酸酯在5℃下將在水(6.8ml)中的70％高氯酸(0.79mL)溶液加入到在二烷(56mL)和水(3.4mL)中的3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯的溶液(4.17g，0.011mol)內(nèi)。在20分鐘內(nèi)將N-溴乙酰胺(2.25g，0.016mol)分成小部分加入。得到的混合物在5℃下攪拌30分鐘，再在室溫下攪拌30分鐘，然后倒入包含0.5mL 1％硫代硫酸鈉溶液的水中。加入飽和的碳酸氫鈉水溶液將混懸液調(diào)至pH為8，然后用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到白色泡沫狀物。剩余物與0.296g來自較早批次的粗產(chǎn)物合并，并在丙酮/己烷中重結(jié)晶純化，得到白色固體狀的包含約20％異構(gòu)體5β，6α副產(chǎn)物的標(biāo)題化合物。
步驟2. 5α-溴-6β，19-環(huán)氧-3β，17β-雄甾烷二醇二乙酸酯將碘苯雙乙酸鹽(iodobenzene diacetate)(1.23g，0.0057mol)加入到在環(huán)己烷(250mL)中的步驟1產(chǎn)物(1.8g，0.0038mol)的混懸液中，然后加入碘(0.97g，0.0038mol)。得到的混合物用200W日光燈照射45分鐘(說明混合物的溫度在此期間升高到約80℃)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并倒入冰/水中。得到的混合物用醚提取。有機(jī)層用2％硫代硫酸鈉水溶液和水洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。剩余物在己烷中重結(jié)晶得到灰白色固體。
步驟3. 3β，17β，19-雄-5-烯二醇3，17-二乙酸酯將在四氫呋喃(75mL)和水(7.5mL)中的活性鋅粉(11.1g，0.17mol；使用前用HCl水溶液進(jìn)行簡單處理而激活，然后用水和丙酮連續(xù)洗滌并在真空下干燥)和步驟2產(chǎn)物(1.50g，0.0032mol)的混合物于65℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并過濾。收集到的固體用醚洗滌，然后用水洗滌合并的濾出液，經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到淺黃色泡沫。剩余物在丙酮/己烷中重結(jié)晶得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物。對母液進(jìn)行濃縮和重結(jié)晶得到淺黃色固體狀的第二次收獲的不太純的產(chǎn)物。
步驟4. 19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯將活化的4A分子篩(4.2g)加到在二氯甲烷(10mL)中的步驟3產(chǎn)物(0.500g，0.00128mol)和N-甲基嗎啉N-氧化物(NMO，2.43g，0.0207mol)的冷(0℃)溶液中。得到的混合物在0℃下攪拌15分鐘然后加入過釕酸四丙基銨鹽(0.030g，0.0000854mol)。得到的混合物在0℃下攪拌90分鐘然后用醚稀釋并過濾。用醚洗滌收集到的固體。合并的濾出液連續(xù)用亞硫酸鈉水溶液和硫酸銅水溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到白色固體。剩余物經(jīng)快速色譜在硅膠上用95∶5的二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物。
制備319-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇3，17-二-O-四氫吡喃醚 步驟119-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇在室溫下將在甲醇(20mL)中的19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯(0.40g，0.00103mol)和10％氫氧化鉀的混合物攪拌6小時(shí)。真空下除去大部分溶劑，剩余物在水和含5％甲醇的二氯甲烷之間分配。水層用二氯甲烷提取(2X)，合并的有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到灰白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟219-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇3，17-二-O-四氫吡喃醚將在四氫呋喃(12mL)中的19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇(0.292g，0.00096mol)、二氫吡喃(1.0mL，0.011mol)和甲苯磺酸吡啶鹽(0.061g，0.00024mol)的混合物在室溫下攪拌過夜。真空下除去大部分溶劑，剩余物在水和二氯甲烷之間分配。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。剩余物在甲醇/水中重結(jié)晶得到黃色固體狀標(biāo)題化合物。NMR分析表明是非對映體的混合物。
實(shí)施例119-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇 步驟1.19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯將正丁基鋰(0.80mL，1.63M的己烷溶液，0.0013mmol)加入到在四氫呋喃(5mL)中的甲基三苯基溴化(0.503g，0.0014mol)的冷(0℃)混懸液中。得到的混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后加入在四氫呋喃(2mL)中的19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯溶液(0.182g，0.000469mol)。混合物在0℃下攪拌4小時(shí)，然后加入飽和的氯化銨水溶液終止反應(yīng)。得到的混合物用乙酸乙酯提取(2X)，合并的提取物經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到粘性琥珀色固體。NMR分析表明是產(chǎn)物和脫乙?；a(chǎn)物的混合物。為了有助于純化，對粗產(chǎn)物混合物進(jìn)行再乙?；?溶解在二氯甲烷(2mL)中然后加入4-二甲氨基吡啶(少許結(jié)晶)、吡啶(0.020mL)和醋酸酐(0.074mL，0.00074mol)，在室溫下攪拌過夜然后用乙酸乙酯稀釋，用稀HCl水溶液、水和鹽水連續(xù)洗滌然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到粘性茶色固體。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用9∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到無色油狀的標(biāo)題化合物。
步驟2.19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇將在甲醇(5mL)中的步驟1產(chǎn)物(0.193g，0.0005mol，幾個批次的合并產(chǎn)物)和1N氫氧化鈉(2mL，0.002mol)的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后加入1N HCl中和。真空下除去大部分溶劑，剩余物用水稀釋并過濾。用水洗滌收集到的固體然后溶解在甲醇中，并過濾以除去不溶物。真空下除去甲醇，剩余物在丙酮/己烷中重結(jié)晶得到白色固體的標(biāo)題化合物。對母液進(jìn)行濃縮和重結(jié)晶得到白色固體狀第二次收獲的標(biāo)題化合物。選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ5.65(1H，dd，J＝11，17Hz)，5.28(1H，dd，J＝2，11Hz)，4.95(1H，dd，J＝2，17Hz)，3.61(1H，t，J＝9Hz)，0.65(3H，s)實(shí)施例219-去甲-10β-(順-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇 步驟1. 19-去甲-10β-(順-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯將正丁基鋰(0.60mL，1.63M的己烷溶液，0.00096mmol)加入到在四氫呋喃(6mL)中的乙基三苯基溴化(0.373g，0.001mol)的冷(0℃)混懸液中。得到的混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后加入在四氫呋喃(2mL)中的19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯(0.130g，0.000335mol)溶液?；旌衔镌?℃下攪拌4小時(shí)，然后加入飽和的氯化銨水溶液終止反應(yīng)。得到的混合物用乙酸乙酯提取(2X)，合并的提取物經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到粘性褐色固體。NMR分析表明是產(chǎn)物和脫乙酰化產(chǎn)物的混合物。為了有助于純化，對粗產(chǎn)物混合物進(jìn)行再乙?；?溶解在二氯甲烷(2mL)中然后加入4-二甲氨基吡啶(少許結(jié)晶)、吡啶(0.050mL)和醋酸酐(0.053mL，0.00053mol)，在室溫下攪拌過夜然后用乙酸乙酯稀釋，用稀HCl水溶液、水和鹽水依次洗滌然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到粘性琥珀色固體。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用9∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到灰白色固體狀標(biāo)題化合物。分離出了少量不純的反式異構(gòu)體作為副產(chǎn)物。
步驟2.19-去甲-10β-(順-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇將在甲醇(1mL)中的步驟1產(chǎn)物(0.025g，0.0000625mol)和1N氫氧化鈉(0.25mL，0.00025mol)的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)然后加入1NHCl中和。真空下除去大部分溶劑，剩余物用水稀釋并過濾。用水洗滌收集到的固體然后溶解在甲醇中并過濾以除去不溶物。真空下除去甲醇，剩余物在丙酮/己烷中重結(jié)晶得到白色固體狀標(biāo)題化合物。選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ5.61(1H，dq，J＝12，7Hz)，5.08(1H，dq，J＝12，2Hz)，3.63(1H，t，J＝9Hz)，1.70(3H，dd，J＝2，7Hz)，0.70(3H，s)實(shí)施例319-去甲-10β-(順-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇和19-去甲-10β-(反-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇 步驟1. 19-去甲-10β-(順-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯和19-去甲-10β-(反-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯
將正丁基鋰(0.30mL，1.63M的己烷溶液，0.000489mmol)加入到在四氫呋喃(7mL)中的氯甲基三苯基溴化(0.170g，0.00049mol)的冷(-45℃)混懸液中。得到的混合物在-45℃下攪拌1小時(shí)，然后加入在四氫呋喃(2mL)中的19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇二乙酸酯(0.050g，0.000129mol)溶液?；旌衔镌?45℃下攪拌10分鐘，然后暖至室溫。得到的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)然后加入飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)。得到的混合物用乙酸乙酯提取(2X)，合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到粘性褐色固體。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上最初用9∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫，然后用逐漸變化到3∶2的己烷∶乙酸乙酯洗脫(梯度洗脫)純化，得到無色油狀的標(biāo)題化合物，它是4∶1的順反烯烴異構(gòu)體的混合物。
步驟2. 19-去甲-10β-(順-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇和19-去甲-10β-(反-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇將在甲醇(1mL)中的步驟1產(chǎn)物(0.038g，0.00009mol)和1N氫氧化鈉(0.50mL，0.0005mol)的混合物在室溫下攪拌過夜然后加入1N HCl中和。真空下除去大部分溶劑，剩余物混懸在水中并用二氯甲烷提取(3X)。合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到無色油狀物。將粗產(chǎn)物與其它三個批次的產(chǎn)物混合并經(jīng)快速色譜在硅膠上用4∶1的二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到標(biāo)題化合物，它是烯烴異構(gòu)體的混合物。該烯烴異構(gòu)體經(jīng)制備型HPLC在Chiralcel OJ柱上用91∶9的庚烷∶乙醇洗脫進(jìn)一步純化，得到作為單一烯烴異構(gòu)體的標(biāo)題化合物(烯烴的幾何異構(gòu)經(jīng)NMR分析確定)。順式異構(gòu)體選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ6.28(1H，d，J＝8Hz)，5.56(1H，d，J＝8Hz)，3.55(1H，t，J＝9Hz)，0.70(3H，s)；反式異構(gòu)體選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ5.87(1H，d，J＝14Hz)，5.84(1H，d，J＝14Hz)，3.55(1H，t，J＝9Hz)，0.66(3H，s)
實(shí)施例419-去甲-10β-(順-2-溴-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇 (未分離的混合物)步驟1. 19-去甲-10β-(順-2-溴-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇-3，17-二-O-四氫吡喃醚和19-去甲-10β-(反-2-溴-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇-3，17-二-O-四氫吡喃醚將叔丁醇鉀(14.0mL 1M的THF溶液，14mmol)加入到在四氫呋喃(6mL)中的溴甲基三苯基溴化(6.45g，14.8mol)的冷(0℃)混懸液中。得到的混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后加入19-氧-3β，17β-雄-5-烯二醇13，17-二-O-四氫吡喃醚(1.0g，2.0mmol)。將混合物在回流下攪拌過夜然后冷卻至室溫并加入飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)。得到的混合物用乙酸乙酯提取(3X)，合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到深琥珀色膠狀物。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上最初用9∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫，然后用逐漸變化到4∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫(梯度洗脫)純化，得到無色油狀的標(biāo)題化合物，它是順式和反式烯烴異構(gòu)體的混合物。分離出了另一物質(zhì)單-THP醚，并且如果希望的話，其能被再造成二-THP醚。
步驟2. 19-去甲-10β-(順-2-溴-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇將在甲醇(5mL)中的步驟1產(chǎn)物(300mg，0.55mmol，若干批次的合并產(chǎn)物)和甲苯磺酸吡啶鹽(360mg，1.4mol)的溶液在室溫下攪拌過夜然后用乙酸乙酯稀釋，用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌。合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮得到褐色固體。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶2的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到標(biāo)題化合物(烯烴的幾何異構(gòu)經(jīng)NMR分析確定)。選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ6.34(1H，d，J＝8Hz)，5.90(1H，d，J＝8Hz)，3.63(1H，t，J＝9Hz)，0.72(3H，s).
盡管需要衍生化和大量色譜工作，但也能從粗產(chǎn)物中分離出活性較小的反式產(chǎn)物。
實(shí)施例519-去甲-10β-乙烯基-17α-甲基-3β，17β-雄-5-烯二醇 步驟1. 3-β-叔-丁基二甲基甲硅烷氧基-19-去甲-10β-乙烯基-17β-羥基-雄-5-烯將在二甲基甲酰胺(3mL)中的19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇(119mg，0.39mmol)、咪唑(170mg，2.5mmol)和叔-丁基二甲基甲硅烷基氯化物(219mg，1.4mmol)的溶液于室溫下攪拌30分鐘，然后在乙酸乙酯和水之間分配。水相用乙酸乙酯提取，合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到白色固體狀標(biāo)題化合物。
步驟2. 3-β-叔-丁基二甲基甲硅烷氧基-19-去甲-10β-乙烯基-17-氧-雄-5-烯將在二氯甲烷(3mL)中的步驟1產(chǎn)物(74mg，0.18mmol)和N-甲基嗎啉-N-氧化物(330mg，2.8mol)的溶液在室溫下隨著過釕酸四-丙基銨鹽(5.9mg，0.017mmol)的加入與活化的4A分子篩一起攪拌。得到的混合物在室溫下攪拌過夜然后用醚稀釋并過濾。真空下濃縮濾出液，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用9∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到白色固體狀標(biāo)題化合物。
步驟3. 3-O-叔-丁基二甲基甲硅烷氧基-19-去甲-10β-乙烯基-17-α-甲基-17-β-羥基-雄-5-烯將在四氫呋喃(0.6mL)中的步驟2產(chǎn)物(26mg，0.062mmol)的溶液加入到甲基碘化鎂溶液(0.2mL，在四氫呋喃中的3M溶液，0.6mmol)中。得到的混合物在室溫下攪拌過夜，然后用水終止反應(yīng)并在乙酸乙酯和飽和氯化鈉水溶液之間分配。水層用乙酸乙酯提取(2X)，合并的有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到白色固體狀標(biāo)題化合物。
步驟4. 19-去甲-10β-乙烯基-17-α-甲基-3-β，17-β-雄-5-烯二醇將在四氫呋喃(0.4mL)中的步驟3產(chǎn)物(14mg，0.032mmol)和氟化四丁銨(O.2mL，在四氫呋喃中的1M溶液，0.2mmol)的溶液在室溫下攪拌過夜。真空下除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到標(biāo)題化合物。選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ5.67(1H，dd，J＝11，18Hz)，5.29(1H，dd，J＝2，11Hz)，4.96(1H，dd，J＝2，18Hz)，1.20(3H，s)，0.77(3H，s).
實(shí)施例619-去甲-10β-乙烯基-17α-乙炔基-3β，17β-雄-5-烯二醇 步驟1. 3-叔-丁基二甲基甲硅烷氫基-19-去甲-10β-乙烯基-17-α-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)-17-β-羥基-雄-5-烯將叔丁基鋰(0.37mL的1.7M戊烷溶液，0.63mmol)加入到在干燥的四氫呋喃(0.2mL)中的三甲基甲硅烷基乙炔(0.1mL，0.71mmol)溶液中。然后加入在四氫呋喃(0.6mL)中的3-β-叔-丁基二甲基甲硅烷氧基-19-去甲-10β-乙烯基-17-氧-雄-5-烯(見實(shí)施例5的步驟2)(26mg，0.062mmol)溶液。得到的混合物在室溫下攪拌過夜，然后用水終止反應(yīng)，用含5％甲醇的二氯甲烷洗滌(3X)。合并的有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)NMR確認(rèn)且沒有進(jìn)行純化就在接下來的步驟中使用。
步驟2. 19-去甲-10β-乙烯基-17-α-乙炔基-3-β，17-β-雄-5-烯二醇將在四氫呋喃(2mL)中的步驟1產(chǎn)物(32mg，0.062mmol)和氟化四丁銨(0.3mL，在四氫呋喃中的1M溶液，0.3mmol)的溶液在室溫下攪拌兩小時(shí)，然后加入另外的氟化四丁銨(0.6mL，在四氫呋喃中的1M溶液，0.6mmol)，溶液在室溫下攪拌過夜。真空下除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到標(biāo)題化合物。選擇的1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3，600MHz)δ5.66(1H，dd，J＝11，18Hz)，5.28(1H，dd，J＝2，11Hz)，4.96(1H，dd，J＝2，18Hz)，2.56(1H，s)，0.76(3H，s).
實(shí)施例73β-羥基-17β-甲氧基-19-去甲-10β-乙烯基-雄-5-烯 步驟1. 3-β-叔-丁基二甲基甲硅烷氧基-17β-甲氧基-19-去甲-10β-乙烯基-雄-5-烯將氫化鈉(14mg，60％的油分散液，0.36mmol)加入到在干燥二甲基甲酰胺(2mL)中的3β-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-17β-羥基-19-去甲-10β-乙烯基-雄-5-烯(75mg，0.18mmol)溶液中。得到的混合物在室溫下攪拌10分鐘然后加入碘甲烷(255mg，1.8mmol)。得到的混合物在55℃下攪拌過夜然后在乙酸乙酯和水之間分配。水相用乙酸乙酯提取，合并的提取液經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空下濃縮。粗產(chǎn)物不進(jìn)行純化就在接下來的步驟中使用。
步驟2. 3β-羥基-17β-甲氧基-19-去甲-10β-乙烯基-雄-5-烯將在四氫呋喃(1.5mL)中的3-O-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-17β-甲氧基-19-去甲-10β-乙烯基-雄-5-烯(43mg，0.1mmol)和氟化四丁銨(0.5mL，在四氫呋喃中的1M溶液，0.5mmol)的溶液在室溫下攪拌過夜。真空下除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜在硅膠上用3∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫純化，得到標(biāo)題化合物。
雌激素受體結(jié)合測定該雌激素受體的配體結(jié)合測定是根據(jù)閃爍親近測定法而設(shè)計(jì)的，使用了氚化的雌二醇和表達(dá)雌激素受體的重組體。全長重組體人類ER-α和ER-β蛋白在桿狀病毒屬的(bacculoviral)表達(dá)系統(tǒng)中生成。在包含6mMα-單硫代甘油的磷酸鹽緩沖鹽水中將ER-α或ER-β的提取物稀釋到1∶400。將被稀釋的受體制劑的200μL等分試樣加入到96孔閃爍板中的每個孔內(nèi)。用Saran Wrap覆蓋該板并在4℃下孵育過夜。
第二天早晨，將包含10％牛血清白蛋白的磷酸緩沖鹽水的20ul等分試樣加入到96孔板中的每個孔內(nèi)并在4℃下孵育2小時(shí)。然后用200ul緩沖液洗滌該板，其中緩沖液包含20mM Tris(pH 7.2)、1mMEDTA、10％甘油、50mM KCI和6mM α-單硫代甘油。為了在這些包含受體的板中進(jìn)行測定，在96孔板的每個孔中都加入178ul同樣的緩沖液。然后在板的每個孔中加入20ul 10nM的3H-雌二醇溶液。
受試化合物在0.01nM到1000nM的濃度范圍內(nèi)進(jìn)行評價(jià)。受試化合物的母液應(yīng)該由100％ DMSO形成，終濃度為100X，這是實(shí)驗(yàn)中測定所需的濃度。96孔板實(shí)驗(yàn)孔中的DMSO量不應(yīng)超過1％。最后向測定板中加入受試化合物的2ul等分試樣，其中受試化合物已經(jīng)被形成于100％ DMSO中。對板進(jìn)行封閉并讓它們在室溫下平衡3小時(shí)。在用于對96孔板進(jìn)行計(jì)數(shù)的閃爍計(jì)數(shù)器中對板進(jìn)行計(jì)數(shù)。
實(shí)施例1-3的化合物表現(xiàn)出結(jié)合親合力，對雌激素受體α-亞型，IC50的范圍＝75到＞10000nm，對雌激素受體-β亞型的IC50范圍＝5到250nm。
藥物組合物作為本發(fā)明的具體實(shí)施方案，將25mg的實(shí)施例1化合物用充分細(xì)分的乳糖進(jìn)行配制以提供580到590mg的總量，填充到0號硬明膠膠囊中。
權(quán)利要求
1.在需要治療的哺乳動物中通過給予哺乳動物治療有效量的下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體來治療疾病的方法 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R2是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R3是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R4是氫或C(1-3)烷基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(1-5)?；?、C(2-5)烯基或C(2-5)炔基；其中所述疾病是骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、焦慮、抑郁、絕經(jīng)性抑郁、產(chǎn)后精神抑郁、月經(jīng)前期綜合征、燥狂憂郁、焦慮、癡呆、強(qiáng)迫性強(qiáng)迫行為、注意力缺陷障礙、睡眠障礙、應(yīng)激性、沖動、易怒、多發(fā)性硬化和帕金森病、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性或雌激素依賴性癌癥。
2.權(quán)利要求1的方法，其中R1是氫、鹵素、甲基或氰基；R2是氫、鹵素、甲基或氰基；R3是氫、鹵素、甲基或氰基；R4是氫或甲基；R17是氫、C(1-3)烷基、C(2-3)酰基、C(2-3)烯基或C(2-3)炔基。
3.權(quán)利要求1的方法，其中疾病是潮熱。
4.權(quán)利要求1的方法，其中疾病是抑郁。
5.權(quán)利要求1的方法，其中疾病是雌激素依賴性癌癥。
6.權(quán)利要求1的方法，其中化合物選自19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-乙烯基-3β-羥基-17β-甲氧基-雄-5-烯；17α-乙炔基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇；17α-乙烯基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇；17α-甲基-19-去甲-10β-乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(1-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(順-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(反-2-甲基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(1-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(順-2-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(反-2-乙基-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(1-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(順-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(反-2-氯-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(l-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(順-2-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(反-2-氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(2，2-二氟-乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；19-去甲-10β-(三氟乙烯基)-3β，17β-雄-5-烯二醇；17α-乙炔基-19-去甲-10β-三氟乙烯基-3β，17β-雄-5-烯二醇；或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
7.藥物組合物，其含有下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R2是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R3是氫、鹵素、C(1-3)烷基、CO2C(1-3)烷基或氰基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(1-5)酰基、C(2-5)烯基或C(2-5)炔基；和另外的藥劑，其選自有機(jī)雙膦酸鹽、組織蛋白酶K抑制劑、雌激素、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨細(xì)胞合成代謝劑、降鈣素、維生素D、合成的維生素D類似物、或選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、芳香酶抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或混合物。
8.權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步包含另外的藥劑，其選自有機(jī)雙膦酸鹽、組織蛋白酶K抑制劑、雌激素、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨細(xì)胞合成代謝劑、降鈣素、維生素D、合成的維生素D類似物、或選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、芳香酶抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或混合物。
9.式II化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中R1是氫、鹵素、C(1-3)烷基或氰基；R4是氫或C(1-3)烷基；R17是氫、C(1-5)烷基、C(2-5)烯基或C(2-5)炔基；附加條件是R1和R4不能都為氫。
10.含有權(quán)利要求9化合物的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及化合物及其衍生物、它們的合成和作為雌激素受體調(diào)節(jié)劑的用途。本發(fā)明的化合物是雌激素受體的配體，因此可以用于治療或預(yù)防各種與雌激素功能有關(guān)的狀況，其包括骨丟失、骨折、骨質(zhì)疏松、轉(zhuǎn)移性骨病、佩吉特病、牙周病、軟骨退化、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維瘤疾病、潮熱、LDL膽固醇水平升高、心血管疾病、認(rèn)知功能缺損、大腦退化疾病、再狹窄、男子女性型乳房、血管平滑肌細(xì)胞增殖、肥胖、失禁、炎癥、炎性腸疾病、性功能障礙、高血壓、視網(wǎng)膜變性或雌激素依賴性癌癥，特別是乳腺、子宮和前列腺癌。
文檔編號C07J1/00GK1886418SQ200480034804
公開日2006年12月27日 申請日期2004年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月24日
發(fā)明者T·A·布利扎德, C·古德, J·D·摩甘二世 申請人:默克公司