專利名稱：一種從生姜中分離6－姜酚的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及化工醫(yī)藥技術領域，具體地說，是涉及一種從生姜中分離6-姜酚的方法。
背景技術：
傳統(tǒng)中醫(yī)學認為生姜性溫，辛重于溫，偏于走表，能散風寒而解表，和胃氣而止呃。生姜可鎮(zhèn)咳怯痰，治惡心嘔吐、腸疝痛等，食用生姜及其制品，能刺激胃黏膜，增加胃液分泌，促進食物的消化吸收。本草綱目中說姜，久服去臭氣，通神明，歸五臟，干姜溫中逐寒，回陽通脈，治心腹冷痛，吐瀉，肢冷脈微，寒飲喘咳，風寒濕痹，陽虛，下血，有發(fā)表散寒，溫中止呃，解毒之功效?，F代科學研究表明生姜具有抗血小板凝集、升壓強心、降血脂和抗動脈粥樣硬化、保護胃黏膜和抗胃潰瘍、保肝利膽、消炎、抗氧化、鎮(zhèn)咳、防暈止吐、抗腫瘤、對中樞神經抑制等多種功效，6-姜酚作為姜辣素中的主要組分，是生姜中的主要藥物活性功能因子之一。
關于生姜的研究，目前國內外對姜油與姜油樹脂提取、姜油組分分析、生姜藥理的研究較多，但是對生姜中藥物活性成分的分離提取研究較少，國內采用的制備及分離方法所得到的是多種組分組成的混合物，最好的也只能做到分離出同系物，至于單一組分的成功分離，從文獻查新結果看，至今尚沒有6-姜酚單體制備的報導。6-姜酚化學性質不穩(wěn)定，見光受熱易分解，且在姜中含量低，不易分離，因此同其它植物藥如紫杉醇已形成工業(yè)化生產并已應用于臨床相比，6-姜酚的研制開發(fā)要相對滯后得多，所以盡快解決從普通生姜中高效單體分離提取藥物活性功能因子離6-姜酚的問題，是本技術領域面臨的重要課題。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是克服現有技術中的不足，提供一種操作簡便、工藝簡單且分離效率和分離純度高的從生姜中分離6-姜酚的方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案，一種從生姜中分離6-姜酚的方法，其具體工藝流程步驟如下(1)制備姜油樹脂將鮮生姜低溫烘干并粉碎至100目以上，并以丙酮浸泡得到姜油樹脂；(2)硅膠柱色譜分離以姜油樹脂為分離對象，層析用硅膠為固定相，洗脫劑1、2用正己烷和乙醚混合成不同極性的溶液做流動相，在流速≤3.0mL/min下依次用不同極性的上述洗脫劑及甲醇淋洗色譜柱，收集2中含有6-姜酚的餾份段；(3)制備粗姜酚將上述含有6-姜酚的餾份段置于旋轉蒸發(fā)儀上蒸發(fā)去除溶劑后得到粗姜酚；(4)液相色譜分離用高效液相色譜儀，以粗姜酚溶液為進樣樣品，以C18(十八烷基硅烷鍵合相，簡稱ODS)做固定相，以洗脫劑3做流動相，在流動相流速≤15mL/min下，收集6-姜酚色譜餾份；(5)去除溶劑采用柱色譜技術，以AB-8大孔吸附樹脂做固定相，把收集到的6-姜酚色譜餾份做料液，使其在3.0BV/h(BV為柱床體積，以下同)的流速下流經色譜柱，然后用去離子水洗去甲醇和冰醋酸，再用2BV體積的乙醚將6-姜酚解析下來，放入旋轉蒸發(fā)儀上使有機溶劑揮發(fā)干凈，得到6-姜酚濃縮液；(6)制備6-姜酚將6-姜酚濃縮液轉移至冷凍干燥機上冷凍干燥后得6-姜酚純品。
上述所述的步驟(2)所述硅膠柱色譜分離中不同極性的洗脫劑依次為1(正己烷∶乙醚)＝2∶3、2(正己烷∶乙醚)＝1∶4溶液。
上述所述的步驟(4)中的洗脫劑3為甲醇-水-冰醋酸。
上述所述步驟(4)中洗脫劑3的含量為甲醇體積比為30％～70％，冰醋酸積比為0.5-1.5％。
在硅膠柱色譜分離工藝中，用洗脫劑1、2及甲醇淋洗色譜柱，收集2餾份段，是由于6-姜酚存留在2餾份段，而甲醇淋洗色譜柱是以甲醇使色譜柱再生。
在冷凍干燥機上冷凍干燥后得到的6-姜酚純品，經過聯合UV、FT-IR、GC-MS、NMR技術對產品進行綜合定性后可知該產品是6-姜酚，利用HPLC技術對6-姜酚進行定量分析后可知產品純度為99％以上。
由于本發(fā)明采用上述柱色譜分離提純技術，用硅膠為固定相、不同極性的洗脫劑為流動相及甲醇淋洗色譜柱收集6-姜酚餾份段，經去溶劑后得粗姜酚，再使用高效液相色譜分離技術，以C18為固定相，以水-甲醇-冰醋酸為流動相，收集6-姜酚色譜餾份，經大孔吸附樹脂吸附、水洗去雜、乙醚解析、冷凍干燥后得到6-姜酚工藝步驟，使得本發(fā)明分離得到的6-姜酚純度高，同時本發(fā)明操作簡便、工藝簡單且分離效率高。


圖1為本發(fā)明的工藝流程示意框圖
具體實施例方式下面結合附圖以實施例詳述本發(fā)明，圖1清楚的顯示出本發(fā)明工藝流程一種從生姜中分離6-姜酚的方法，其工藝流程步驟如下實施例1(1)制備姜油樹脂將鮮生姜低溫烘干并粉碎至100目，以丙酮浸泡得姜油樹脂；(2)硅膠柱色譜粗分離柱色譜規(guī)格15mm×300mm；固定相層析用硅膠，160～200目。以姜油樹脂為樣品，固定相用量13.0g，樣品量0.3g。在流速0.8mL/min下，依次用流動相1(正己烷∶乙醚)＝2∶3、2(正己烷∶乙醚)＝1∶4、甲醇各35mL淋洗色譜柱。收集2(正己烷∶乙醚)＝1∶4餾份段；(3)制備粗姜酚將上述含有6-姜酚的餾份段置于旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑后得粗姜酚；(4)液相色譜分離將粗姜酚用乙醚溶解，配制成6-姜酚濃度為2.0mg/mL的樣品溶液。高效液相色譜柱規(guī)格3.9mm×300mm(μBondpak)，以粒徑10μm的C18做固定相，以3(甲醇∶水∶冰醋酸)＝35∶64∶1做流動相，最佳進樣量0.4mg，在1.0mL/min的流速下，收集61min～66min的6-姜酚色譜餾份；(5)去除溶劑柱色譜規(guī)格20mm×400mm，以AB-8大孔吸附樹脂做固定相，把收集到的6-姜酚色譜餾份做料液，使其在3.0BV/h(BV為柱床體積，以下同)的流速下流經色譜柱，然后用去離子水洗去甲醇和冰醋酸，再用2BV體積的乙醚將6-姜酚解析下來，放入旋轉蒸發(fā)儀上，待有機溶劑揮發(fā)干凈后，得到6-姜酚濃縮液；(6)制備6-姜酚將6-姜酚濃縮液轉移至冷凍干燥機上冷凍干燥后得6-姜酚純品。
對實施例1的產品用紫外光譜(UV)、傅立葉紅外光譜(FT-IR)、氣象色譜-質譜(GC-MS)、核磁共振(NMR)技術對產品進行綜合定性后可知該產品是6-姜酚，利用高效液相色譜(HPLC)技術對6-姜酚進行定量分析后可知產品純度為99.82％。
實施例2(1)制備姜油樹脂將鮮生姜低溫烘干并粉碎至100目，以丙酮浸泡得姜油樹脂；(2)硅膠柱色譜粗分離柱色譜規(guī)格20mm×400mm，固定相層析用硅膠，160～200目。以姜油樹脂為樣品，固定相用量35.0g，樣品量0.8g。在流速1.5mL/min下，依次用流動相1(正己烷∶乙醚)＝2∶3、2(正己烷∶乙醚)＝1∶4、甲醇各110mL淋洗色譜柱，收集2(正己烷∶乙醚)＝1∶4餾份段；(3)制備粗姜酚將上述含有6-姜酚的餾份段置于旋轉蒸發(fā)儀上蒸去溶劑后得粗姜酚；(4)液相色譜分離將粗姜酚用乙醚溶解，配制成6-姜酚濃度為75.0mg/mL的樣品溶液，色譜柱25mm×300mm，15μm，以粒徑15μm的C18做固定相，以3(甲醇∶水∶冰醋酸)＝60∶39∶1做流動相，最佳進樣量30mg，在10.0mL/min的流速下，收集77.5min～87.5in的色譜餾份；(5)去除溶劑柱色譜規(guī)格20mm×400mm，以AB-8大孔吸附樹脂做固定相，把收集到的6-姜酚色譜餾份做料液，使其在3.0BV/h流速下流經色譜柱，然后用去離子水洗去甲醇和冰醋酸，再用2.0BV體積的乙醚將6-姜酚解析下來，放入旋轉蒸發(fā)儀上，待有機溶劑揮發(fā)干凈后，得到6-姜酚濃縮液；(6)制備6-姜酚將6-姜酚濃縮液轉移至冷凍干燥機上冷凍干燥后得6-姜酚純品。
再次對實施例2的產品用紫外光譜(UV)、傅立葉紅外光譜(FT-IR)、氣象色譜-質譜(GC-MS)、核磁共振(NMR)技術對產品進行綜合定性后可知該產品是6-姜酚，利用高效液相色譜(HPLC)技術對6-姜酚進行定量分析后可知產品純度為99.82％。
權利要求
1.一種從生姜中分離6-姜酚的方法，其工藝流程步驟如下(1)制備姜油樹脂將鮮生姜低溫烘干并粉碎至100目以上，并以丙酮浸泡得到姜油樹脂；(3)硅膠柱色譜分離以姜油樹脂為分離對象，層析用硅膠為固定相，洗脫劑1、2用正己烷和乙醚混合成不同極性的溶液做流動相，在流速≤3.0mL/min下依次用不同極性的上述洗脫劑及甲醇淋洗色譜柱，收集2中含有6-姜酚的餾份段；(3)制備粗姜酚將上述含有6-姜酚的餾份段置于旋轉蒸發(fā)儀上蒸發(fā)去除溶劑后得到粗姜酚；(4)液相色譜分離用高效液相色譜儀，以粗姜酚溶液為進樣樣品，以C18做固定相，以洗脫劑3做流動相，在流動相流速≤15mL/min下，收集6-姜酚色譜餾份；(5)去除溶劑采用柱色譜技術，以大孔吸附樹脂做固定相，把收集到的6-姜酚色譜餾份做料液，使其在3.0BV/h的流速下流經色譜柱，然后用去離子水洗去甲醇和冰醋酸，再用2BV體積的乙醚將6-姜酚解析下來，放入旋轉蒸發(fā)儀上使有機溶劑揮發(fā)干凈，得到6-姜酚濃縮液；(6)制備6-姜酚將6-姜酚濃縮液轉移至冷凍干燥機上冷凍干燥后得6-姜酚純品。
2.根據權利要求1所述的從生姜中分離6-姜酚的方法，其特征在于上述所述的步驟(2)所述硅膠柱色譜分離中不同極性的洗脫劑依次為1＝正己烷∶乙醚＝2∶3、2＝正己烷∶乙醚＝1∶4溶液。
3.根據權利要求1所述的從生姜中分離6-姜酚的方法，其特征在于上述所述的步驟(4)中的洗脫劑3為甲醇-水-冰醋酸。
4.根據權利要求1所述的從生姜中分離6-姜酚的方法，其特征在于上述所述步驟(4)中洗脫劑3的含量為甲醇體積比為30％～70％，冰醋酸積比為0.5-1.5％。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從生姜中分離6－姜酚的方法，其工藝經過制備姜油樹脂、硅膠柱色譜分離、制備粗姜酚、液相色譜分離、去除溶劑、制備6－姜酚純品等步驟，使得本發(fā)明分離提純得到的6－姜酚純度高，同時本發(fā)明操作簡便、工藝簡單且分離效率高。
文檔編號C07C45/00GK1616391SQ20041007454
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月8日 優(yōu)先權日2004年9月8日
發(fā)明者李華昌, 符斌, 張雪紅, 李萬春, 湯淑芳 申請人:北京礦冶研究總院