專利名稱：地黃莖葉總苷提取物的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有多種醫(yī)藥用途的地黃莖葉總苷提取物及其提取工藝，地黃莖葉總苷提取物能有效地預(yù)防和治療哮喘病、過(guò)敏病癥和慢性阻塞性肺病(COPD)等。
背景技術(shù)：
地黃莖葉是玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libsch.的地上部分的新鮮品或干燥品。地黃是多年生草本，主要為栽培品，亦野生于海拔50-1100米的山坡及路旁荒地。分布于遼寧、內(nèi)蒙古、河北、河南、山西、陜西、山東、安徽、浙江、湖北、湖南、四川等地。文獻(xiàn)記載，地黃莖葉中含有環(huán)烯醚萜苷類、單萜及其苷、黃酮及其苷、有機(jī)酸、多糖、氨基酸、甾醇等多種化學(xué)成分，及鈣、鎂、鉀、鐵、鋅、錳等二十種金屬元素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供地黃莖葉總苷提取物的制備方法。地黃莖葉總苷提取物是從中藥地黃莖葉中提取的，地黃莖葉總苷提取物主要由以下化學(xué)成分組成梓醇(catalpol)、地黃苷A，B，C，D(rehmannioside A，B，C，D)、乙酰梓醇(acetylcatalpol)、二氫梓醇(dihydrocatalpol等，以及其它微量的環(huán)烯醚萜類成分和其它微量成分，并以梓醇為主要有效成分。所述地黃莖葉總苷提取物環(huán)烯醚萜苷總苷含量應(yīng)不低于50％，梓醇含量應(yīng)大于20％。
本發(fā)明提供了地黃莖葉總苷提取物的提取、分離、純化的方法。該方法是1、取地黃莖葉，用水、或水與甲醇、乙醇、丙酮等溶劑組成的二種及多種混合溶劑提取，提取液在真空中70℃以下濃縮并蒸去有機(jī)溶劑(如無(wú)有機(jī)溶劑時(shí)也可以直接上柱)，加水至合適的體積，去除沉淀(如有沉淀)。
2、上述水溶液通過(guò)活性炭分離柱。
3、用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，為了提高地黃莖葉總苷的含量，可以再用3-10％的稀乙醇，或5-15％的稀甲醇或3-10％的稀丙酮洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)。
4、用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或者10％以上的丙酮水溶液洗脫。收集洗脫液并且濃縮至干，即得地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物。
對(duì)上述提取物進(jìn)行TLC分析，點(diǎn)上相應(yīng)的對(duì)照品，能很容易檢測(cè)出梓醇，也能檢出地黃莖葉苷A，B，C，D、乙酰梓醇、二氫梓醇等。檢測(cè)條件是用煙臺(tái)市芝罘黃務(wù)硅膠開發(fā)試驗(yàn)廠生產(chǎn)的高效硅膠板HSGF254板。展開劑用以下系統(tǒng)，1、乙酸乙酯-甲乙酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)；2、氯仿-甲醇-水(15∶10∶1)；3、氯仿∶甲醇∶水∶甲酸(30∶10∶1∶1)。顯色劑用碘蒸汽顯色，也可以用2％的硫酸香草醛溶液噴霧顯色。
本發(fā)明的創(chuàng)造性在于通過(guò)科學(xué)可行的方法從地黃莖葉中提取分離出了用于治療哮喘病和其它過(guò)敏性疾病的地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物。如前所述，本發(fā)明提供的用于治療哮喘病和其它過(guò)敏性疾病的藥物的有效成分是包括含有梓醇、地黃苷A，D、乙酰梓醇、二氫梓醇等的地黃莖葉總苷提取物。為達(dá)到發(fā)明的目的，地黃莖葉總苷提取物中梓醇的含量應(yīng)大于20％，環(huán)烯醚萜苷總苷含量大于50％。
為保證地黃莖葉總苷的質(zhì)量，在生產(chǎn)過(guò)程中需要對(duì)洗脫液和最終提取物中的有效成分的含量進(jìn)行檢測(cè)，用于檢測(cè)梓醇和環(huán)烯醚萜苷總苷含量的方法可以借助任何可行的檢測(cè)手段和公知的方法，本發(fā)明參照有關(guān)文獻(xiàn)在此提出一套可行的檢測(cè)方法。
(一)地黃莖葉總苷提取物梓醇的含量測(cè)定梓醇的含量測(cè)定方法用高壓液相色譜法(HPLC)，色鋪柱KYWG-C18，10μm，25cm×4.6mm ID(北京分析儀器廠，流動(dòng)相0.8％的乙腈，柱溫30℃，流速1毫升/分鐘，測(cè)定波長(zhǎng)210nm。
標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取梓醇對(duì)照品10mg，置于10ml的容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別取稀釋液0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml置于1ml的容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，備用。分別取2ml容量瓶中的溶液各10μl，進(jìn)行測(cè)定，以峰面積值(X)對(duì)含量(Y)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
回歸方程Y＝5.15×10-5X+6.33×10-4相關(guān)系數(shù)R＝0.9997含量測(cè)定精密稱取地黃莖葉環(huán)烯醚萜苷總苷提取物約10mg，置于10ml的容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。取2溶液10μl，進(jìn)行測(cè)定，以峰面積值代入回歸方程計(jì)算出梓醇的含量。
(二)地黃莖葉總苷提取物的環(huán)烯醚萜苷總苷的含量測(cè)定1、梓醇標(biāo)準(zhǔn)溶液精密稱取梓醇0.05克，置于50ml容量瓶中，用85％的乙醇溶解并稀釋至刻度。
2、顯色劑0.5ml10％的三氯化鐵水溶液加到100ml50％(V/V)的硫酸溶液中。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別取梓醇的標(biāo)準(zhǔn)溶液10，20，30，40，50，60μl，置于具塞試管中，于水浴上蒸干后各加顯色劑5ml，于85℃水浴加熱三分鐘，溶液呈棕黃色。于400nm波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性范圍10-60μg；回歸方程Y＝64.54X+0.086；相關(guān)系數(shù)R＝0.99984、總苷的測(cè)定精密稱取地黃莖葉總苷提取物0.100克，置于50ml容量瓶中，用85％的乙醇溶解并稀釋至刻度。取30μl，置于具塞試管中，于水浴上蒸干后各加顯色劑5ml，于85℃水浴加熱三分鐘，溶液呈棕黃色。于400nm波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，以吸收度計(jì)算含量。
具體實(shí)施例方式
用以下的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作具體說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于下列實(shí)施例包含的內(nèi)容。
取地黃莖葉的干燥品500g，用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的甲醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(1kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用5％的稀甲醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用70％的甲醇5000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的甲醇8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)甲醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(500g活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀甲醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用50％的甲醇3000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入異丙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物31.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量57.8％。
取地黃莖葉的干燥品2kg，用30％的甲醇16升加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的甲醇16升加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的甲醇16升ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)甲醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(2kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用13％的稀甲醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用60％的甲醇10000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至600ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇1800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物55.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量60.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用60％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(5kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀丙酮洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用30％的丙酮25000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物18.4克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量51.8％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用45％的丙酮8000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(10kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀丙酮洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用50％的丙酮50000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物29.9克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量54.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的丙酮4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)丙酮味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(500g活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀丙酮洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用70％的丙酮3000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物15.2克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。地黃莖葉總苷含量55.3％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用70％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(3kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用20％的乙醇15000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物164克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用50％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(6kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇30000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量53.4％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用30％的乙醇4000ml加熱回流提取1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，提取液在真空中70℃以下濃縮至1000ml，并且無(wú)乙醇味，加水1000ml，去除沉淀，上已處理好的活性炭(8kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇40000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物16.5克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。地黃莖葉總苷含量53.8％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過(guò)活性炭(1kg活性炭105℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用4％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇5000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物16.3克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量50.5％。
取地黃莖葉的干燥品1kg，用水6000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水4000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過(guò)活性炭(1kg活性炭110℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用7％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至300ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇800ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物32.3克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.9％。
取地黃莖葉的干燥品2kg，用水12升加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水8升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水8升加熱煎煮小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過(guò)活性炭(1kg活性炭120℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用10％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至600ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇1600ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，，即得地黃莖葉總苷提取物61.5克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量53.5％。
取地黃莖葉的干燥品500g，用水4000ml加熱煎煮0.5小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水3000ml加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀(如有沉淀)，通過(guò)活性炭(1kg活性炭130℃活化4小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，，用40％的乙醇4000ml洗脫。40％的乙醇洗脫液真空濃縮至150ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇400ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物48.6克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量36.5％。
取地黃莖葉的干燥品10kg，用水60升加熱煎煮30小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水50升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，藥渣再用水50升加熱煎煮1小時(shí)，傾取提取液，合并三次提取液，去除沉淀，上已處理好的活性炭(10kg活性炭140℃加熱烘烤4.5小時(shí))分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)，續(xù)用5％的稀乙醇洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性(molish反應(yīng)陰性)后，用40％的乙醇50000ml洗脫。洗脫液真空濃縮至3000ml，在攪拌下緩慢加入95％的乙醇8000ml，靜置12小時(shí)以上后，取上清液，減壓濃縮后，真空干燥，即得地黃莖葉總苷提取物335克。將地黃莖葉總苷提取物進(jìn)行檢驗(yàn)，其化學(xué)成分主要是環(huán)烯醚萜苷類化合物，并以梓醇為主要有效成分。環(huán)烯醚萜苷總苷含量52.7％。
權(quán)利要求
1.一種地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過(guò)活性炭吸附分離地黃莖葉總苷。
2.按照權(quán)利要求1中所述地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過(guò)活性炭吸附分離地黃莖葉總苷，中藥地黃莖葉與活性炭的重量之比為1∶0.5～1∶20。
3.按照權(quán)利要求1中所述地黃莖葉總苷提取物的提取方法，其特征是中藥地黃莖葉經(jīng)提取所得的地黃莖葉提取液通過(guò)活性炭吸附分離地黃莖葉總苷，所用的活性炭是40目以上的活性炭顆粒。
4.按照權(quán)利要求1中所述的地黃莖葉總苷提取物的提取方法。其特征是以地黃莖葉為原料，(1)用極性溶劑提??；(2)必要時(shí)70℃以下真空濃縮，并除去有機(jī)溶劑，制成水溶液，濾除沉淀；(3)地黃莖葉提取水溶液通過(guò)活性炭分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(4)用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或10％以上的丙酮水溶液洗脫；(5)收集含有機(jī)溶劑的洗脫液，濃縮洗脫液至小體積，加有機(jī)溶劑沉淀后，取上清液減壓濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物主要含有環(huán)烯醚萜苷類成分，并以梓醇為主要有效成分。
5.按照權(quán)利要求1中所述的地黃莖葉總苷提取物的提取方法。其特征是以地黃莖葉為原料，(1)用極性溶劑提??；(2)必要時(shí)70℃以下真空濃縮，并除去有機(jī)溶劑，制成水溶液，濾除沉淀；(3)地黃莖葉提取水溶液通過(guò)活性炭分離柱，用水常規(guī)洗去雜質(zhì)，至近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(4)用低于10％的乙醇水溶液，或者低于15％的甲醇水溶液，或者低于10％的丙酮水溶液洗至洗脫液近無(wú)色，并且糖反應(yīng)試驗(yàn)陰性；(5)用10％以上的乙醇水溶液，或甲醇或者15％以上的甲醇水溶液，或者10％以上的丙酮水溶液洗脫；(6)收集有機(jī)溶劑濃度較高的溶劑洗脫的洗脫液，濃縮洗脫液至小體積，加有機(jī)溶劑沉淀，上清液減壓濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物主要含有環(huán)烯醚萜苷類成分50％以上，并以梓醇為主要有效成分。
6.按照權(quán)利要求4或5中所述的有機(jī)溶劑沉淀，其特征是有機(jī)溶劑是乙醇。
7.一種地黃莖葉總苷提取物，其特征是主要含有梓醇，其中，梓醇含量大于20％，環(huán)烯醚萜總苷含量大于50％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種地黃莖葉總苷提取物的制備方法，該方法是將地黃莖葉的提取物的水溶液用活性炭吸附處理后，用水，或者水與低濃度有機(jī)溶劑的混合溶劑洗脫糖和其它雜質(zhì)，再用濃度較高有機(jī)溶劑的水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后，用乙醇沉淀，上清液真空濃縮至干，即得地黃莖葉總苷提取物。地黃莖葉總苷提取物的主要有效成分是環(huán)烯醚萜苷類化合物，其中梓醇的含量最高。地黃莖葉總苷提取物總苷含量可達(dá)50％以上。
文檔編號(hào)C07H17/04GK1715285SQ20041006224
公開日2006年1月4日 申請(qǐng)日期2004年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月2日
發(fā)明者羅何生 申請(qǐng)人:羅何生