專利名稱：黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥材黃芪的兩種有效成分的提取分離方法，即將黃芪中的多糖和皂甙同時(shí)提取分離，屬于藥用植物有效成分的提取分離技術(shù)領(lǐng)域。
黃芪(Radix Astragali)是豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.Var.mongholicus(Bge)Hsiao.或膜莢黃芪A.membranaceus(Fisch)Bge.的干燥根，屬補(bǔ)益藥，味甘，性微溫，補(bǔ)氣固表，利水托瘡，藥用歷史悠久，藥用廣泛，在我國產(chǎn)量很大，且暢銷國內(nèi)外。近代藥理研究證明，黃芪多糖和黃芪皂甙為黃芪的主要成分，有著廣泛的藥理作用。目前，黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法主要有水提醇沉法，沉淀用于分離多糖，上清液用于分離皂甙；也可先以醇類有機(jī)溶劑提取，再水提藥渣，醇提液用于分離皂甙，如需精制，再用正丁醇萃取，想得到單體再過硅膠柱層析，再醇沉水提液得多糖粗品。采用這兩種方法，黃芪多糖和皂甙的得率及純度都較低。
本發(fā)明的目的是要提供黃芪多糖和皂甙的得率及純度都較高的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法。
為了達(dá)到本發(fā)明的目的所采取的一種黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征是采用了過樹脂柱工藝，具體步驟如下1、黃芪原料經(jīng)乙醇回流提取得醇提液和藥渣，分離醇提液得到上清液A、沉淀物A；2、水提揮去溶劑后的藥渣得水提液，濃縮水提液，然后用醇沉法得上清液B和沉淀物B；3、合并上清液A和上清液B，回收乙醇后，加水稀釋、過濾，然后過樹脂柱得到流出液，再水洗該樹脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脫該樹脂柱得洗脫液，真空濃縮該洗脫液回收乙醇，再經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪皂甙粉；4、合并由步驟1和步驟2得到的沉淀物A和沉淀物B，經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪多糖粉；5、合并步驟3中得到的樹脂柱流出液和水洗液，經(jīng)濃縮、干燥、粉碎得到黃芪多糖粉。
上述步驟1中的乙醇回流提取可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-8倍重量的乙醇，回流提取2-3小時(shí)，得醇提液A，第二次，將藥渣加4-8倍重量的乙醇，回流提取1-2小時(shí)，得醇提液B，合并醇提液A和B得醇提液；上述步驟2中的水提也可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-10倍重量的水，水提2-3小時(shí)，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水提1-2小時(shí)，得水提液B，合并水提液A和B得水提液。
上述步驟4和5可合并。步驟3中所用樹脂柱為AB-8型樹脂柱。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的所采取的另一種黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征是采用了超濾、過樹脂柱工藝，具體步驟是1、將黃芪原料經(jīng)水回流提取得水提液，絮凝水提液，然后超濾，超濾膜為1000-10000道爾頓，得到濾渣和濾出液；2、將濾出液過樹脂柱，得到流出液，再水洗該樹脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脫該樹脂柱得洗脫液，濃縮該洗脫液回收乙醇，再經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪皂甙粉；3、干燥、粉碎由步驟1得到的濾渣，即得黃芪多糖粉；4、合并步驟2中得到的樹脂柱流出液和水洗液，經(jīng)濃縮、干燥、粉碎得到黃芪多糖粉。
上述步驟1中的水回流提取可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-10倍重量的水，水回流提取2-3小時(shí)，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水回流提取1-2小時(shí)，得水提液B，合并水提液A和B得水提液；上述步驟3和4可合并。步驟2中所用超濾膜可為3000-6000道爾頓，樹脂柱為AB-8型樹脂柱。
本發(fā)明具有黃芪多糖和黃芪皂甙的提取率和純度都比較高、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明通過AB-8型樹脂柱吸附法，超濾法及合并提取分離過程中同類成分等手段，最大限度地將黃芪中的多糖和皂甙分離出來，并可得到純度較高的多糖和皂甙精粉。由于AB-8樹脂是一種球形弱極性聚合物吸附劑，結(jié)構(gòu)上該樹脂是一個(gè)交聯(lián)聚合物，在其骨架結(jié)構(gòu)中附加了親水基團(tuán)，且具有相當(dāng)大的比表面和適宜的孔徑，并且由于該樹脂對(duì)皂甙有特殊的選擇性，適合從水溶液中提取皂甙和某些有機(jī)物質(zhì)。由于吸附樹脂柱可通過再生反復(fù)使用，所得皂甙純度較高，是一種產(chǎn)業(yè)化容易且經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便的提取分離方法。另外，研究表明黃芪多糖的分子量多在1萬以上，而黃芪皂甙的分子量在1千以下，故此可選擇截留分子量為1000-10000的超濾膜根據(jù)超濾膜的截留分子量將水提液分為富集多糖和富含甲甙的部分，再利用樹脂吸附法精制皂甙，故多糖和皂甙的得率都較高。在本發(fā)明中還通過確定提取分離各部分產(chǎn)物的主體成分，采用將同類成分合并的處理方法，進(jìn)一步提高得率，避免資源浪費(fèi)。
下面結(jié)合實(shí)施例和工藝流程對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明采用本發(fā)明的工藝流程(一)1、將粉碎(約20目)的黃芪原料經(jīng)乙醇回流提取(微沸)，第一次(加6-10倍重量的乙醇，2-3小時(shí))→得醇提液A→第二次(加4-8倍重量的乙醇，1-2小時(shí))→得醇提液B(藥渣，揮去溶劑后備用)→合并醇提液A、B→靜置12-24小時(shí)得沉淀物A和上清液A；2、水提揮去溶劑后的藥渣，第一次(6-10倍重量的水，2-3小時(shí))→得水提液A→第二次(4-8倍重量的水，1-2小時(shí))→得水提液B→合并水提液A、水提液B→真空濃縮至1∶1→醇沉(加2-4倍量95％乙醇)得上清液B和沉淀物B
3、合并上清液A和上清液B，真空濃縮回收乙醇→加3-5倍量水稀釋→過濾→過AB-8樹脂柱得流出液→乙醇洗脫樹脂柱得洗脫液→真空濃縮洗脫液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪皂甙粉；4、合并由步驟1和2得到的沉淀物A和沉淀物B→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪多糖粉；5、合并步驟3中得到的樹脂柱流出液和水洗液→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪多糖粉。
工藝流程(一)的特點(diǎn)是通過醇提、過樹脂柱、水提、醇沉將黃芪中的多糖和皂甙充分提取出來，并分別得到黃芪多糖和黃芪皂甙粉，可直接作為藥用，也可作為免疫增強(qiáng)劑、保健品等的原料。成品貯存、運(yùn)輸、使用方便。
采用本發(fā)明的工藝流程(二)1、粉碎(約20目)的黃芪原料→水回流提取，第一次(6-10倍重量的水，2-3小時(shí))→得水提液A→第二次(4-8倍重量的水，1-2小時(shí))→得水提液B→合并水提液A和水提液B→絮凝→超濾(1000-10000道爾頓)得濾渣和濾出液；2、將濾出液過AB-8樹脂柱得流出液→水洗樹脂柱得水洗液→乙醇洗脫樹脂柱得洗脫液→真空濃縮洗脫液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪皂甙粉；3、由步驟1得到的濾渣→干燥→粉碎(80目)→黃芪多糖粉；4、合并步驟2中得到的樹脂柱流出液和水洗液→濃縮、干燥→粉碎(80目)→黃芪多糖粉；工藝流程(二)的特點(diǎn)是多糖提取不需要醇沉，通過超濾，根據(jù)截留分子量的大小可得到含量較高的黃芪多糖精粉。超濾的濾出液中富含皂甙，通過樹脂柱(AB-8型)的吸附作用，可得到純度較高的黃芪皂甙。
實(shí)施例1黃芪投料量100公斤，采用本發(fā)明的第一種提取分離方法1、經(jīng)粉碎約20目的黃芪原料→75％乙醇回流提取(微沸)，第一次(10倍重量的乙醇，2小時(shí))→得醇提液A→第二次(8倍重量的乙醇，1小時(shí))→得醇提液B(藥渣揮去溶劑后備用)→合并醇提液A、醇提液B→靜置12小時(shí)得沉淀物A和上清液A；2、水提揮去溶劑后的藥渣，第一次(10倍量水，2小時(shí))→得水提液A→第二次(8倍量水，1小時(shí))得水提液B→合并水提液A和水提液B →真空濃縮至1∶1 →醇沉(加3倍量95％乙醇)→靜置12小時(shí)→分離得上清液B和沉淀B；3、合并上清液A和上清液B→真空濃縮回收乙醇→加5倍量水溶解→過濾→過AB-8型樹脂柱，得流出液→水洗該樹脂柱，得水洗液→3倍量95％乙醇洗脫樹脂柱得洗脫液→真空濃縮洗脫液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪皂甙粉；4、合并由步驟1和步驟2得到的沉淀物A和沉淀物B→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪多糖粉；5、合并由步驟3得到的樹脂柱流出液和水洗液→濃縮、干燥→粉碎(80目以上)→黃芪多糖粉。
上述實(shí)施例提取的結(jié)果為黃芪多糖18.9公斤，含量54％(以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，分光光度法測(cè)定)；黃芪皂甙2.1公斤，含量83％(以黃芪甲甙為標(biāo)準(zhǔn)品，分光光度法測(cè)定)。實(shí)施例2黃芪投料量2公斤，采用本發(fā)明的第二種提取分離方法1、經(jīng)粉碎約20目的黃芪原料→水回流提取(微沸)，第一次提取(10倍重量的水，2小時(shí))，得水提液A→第二次提取(8倍重量的水，1.5小時(shí))，得水提液B→合并水提液A和水提液B→絮凝→上清液超濾(6000道爾頓)，得濾渣和濾出液；2、將濾出液過AB-8樹脂柱，得流出液→水洗該樹脂柱，得水洗液→95％乙醇洗脫得洗脫液→真空濃縮該洗脫液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黃芪皂甙粉；3、由步驟1得到濾渣→干燥→粉碎(80目)→黃芪多糖粉；合并由步驟2得到的樹脂柱流出液和水洗液→濃縮至1∶1、干燥→粉碎(80目)→黃芪多糖粉。
上述實(shí)施例提取的結(jié)果為黃芪多糖483克，含量64％(以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，分光光度法測(cè)定)；黃芪皂甙24.6克，含量89％(以黃芪甲甙為標(biāo)準(zhǔn)品，分光光度法測(cè)定)。
權(quán)利要求
1.一種黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法的特征是采用了過樹脂柱工藝，其具體步驟如下1)黃芪原料經(jīng)乙醇回流提取得醇提液和藥渣，分離醇提液得到上清液A、沉淀物A；2)水提揮去溶劑后的藥渣得水提液，濃縮水提液，然后用醇沉法得上清液B和沉淀物B；3)合并上清液A和上清液B，回收乙醇后，加水稀釋、過濾，然后過樹脂柱得到流出液，再水洗該樹脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脫該樹脂柱得洗脫液，濃縮該洗脫液回收乙醇，再經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪皂甙粉；4)合并由步驟1和步驟2得到的沉淀物A和沉淀物B，經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪多糖粉；5)合并步驟3中得到的樹脂柱流出液和水洗液，經(jīng)濃縮、干燥、粉碎得到黃芪多糖粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，其步驟1)中的乙醇回流提取可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-8倍重量的乙醇，回流提取2-3小時(shí)，得醇提液A，第二次，將藥渣加4-8倍重量的乙醇，回流提取1-2小時(shí)，得醇提液B，合并醇提液A和B得醇提液；其步驟2)中的水提也可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-10倍重量的水，水提2-3小時(shí)，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水提1-2小時(shí)，得水提液B，合并水提液A和B得水提液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，其步驟4)和步驟5)可合并。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，步驟3)中所用樹脂柱為AB-8型樹脂柱。
5.另一種黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法的特征是采用了超濾、絮凝、過樹脂柱工藝，其具體步驟是1)將黃芪原料經(jīng)水回流提取得水提液，絮凝水提液，然后超濾，超濾膜為1000-10000道爾頓，得到濾渣和濾出液；2)將濾出液過樹脂柱，得到流出液，再水洗該樹脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脫該樹脂柱得洗脫液，濃縮該洗脫液回收乙醇，再經(jīng)干燥、粉碎得到黃芪皂甙粉；3)干燥、粉碎由步驟1得到的濾渣，即得黃芪多糖粉；4)合并步驟2中得到的樹脂柱流出液和水洗液，經(jīng)濃縮、干燥、粉碎得到黃芪多糖粉。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，其步驟1)中的水回流提取可以由兩次構(gòu)成第一次，加6-10倍重量的水，水回流提取2-3小時(shí)，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水回流提取1-2小時(shí)，得水提液B，合并水提液A和B得水提液；
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，其步驟3和步驟4可以合并。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法，其特征在于，步驟1中所用超濾膜為3000-6000道爾頓；步驟2中所用的樹脂柱為AB-8型樹脂柱。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黃芪多糖和黃芪皂甙的提取分離方法,其特征是采用了過樹脂柱工藝或采用超濾、過樹脂柱工藝,加上合并提取分離過程中同類成份等手段,最大限度地將黃芪中的多糖和皂甙分離出來,并可得到純度較高的多糖和皂甙精粉。本發(fā)明具有黃芪多糖和黃芪皂甙的提取率和純度都比較高、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07H15/256GK1330082SQ00109690
公開日2002年1月9日 申請(qǐng)日期2000年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月21日
發(fā)明者韓魯加, 閻巧娟, 江正強(qiáng), 劉向陽 申請(qǐng)人:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)