一種專門用于茭白生態(tài)種植的微生物生長促進劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體涉及一種微生物生長促進劑，尤其涉及一種專門用于茭白生態(tài)種植的微生物生長促進劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茭白是一種無性繁殖的水生宿根禾本科作物，俗稱:茭筍、茭瓜，其肉質(zhì)莖含糖4%，蛋白質(zhì)1.5%，而且還富含多種維生素，因此，深受消費者的喜愛。茭白原產(chǎn)中國及東南亞，是一種較為常見的水生蔬菜，為禾本科植物菰的嫩莖桿被菰黑粉菌刺激而形成的紡錘形肥大部分。目前，把茭白作為蔬菜栽培的只有中國和越南，其中又以中國栽培最早。茭白分布于我國南北各地，河北、江蘇、浙江、安徽、江西、福建、臺灣、香港、河南、湖南、湖北、海南、廣東、廣西、四川、云南、黑龍江等地均有種植。其中，余姚茭白以河姆渡鎮(zhèn)最為聞名，現(xiàn)年產(chǎn)茭白5萬噸，河姆渡鎮(zhèn)萬畝無公害茭白基地先后被列為寧波市二級蔬菜基地、上海蔬菜集團茭白供應(yīng)基地、浙江省優(yōu)質(zhì)高效農(nóng)業(yè)示范基地。
[0003]茭白的生育期較長、適應(yīng)性強、不擇土壤，因此，一般的水田、低洼地、淺水塘、溝河邊有水的地方皆可種植。盡管茭白對土質(zhì)要求不高，但不宜連作，而且最好以耕作層深、富含有機質(zhì)的粘土和粘質(zhì)土壤種植。進一步地，由于茭白植株高大、生長期長、需肥量大，因此，還需要多施基肥，分次追肥，要求有充足的氮肥和適當(dāng)?shù)牧租浄省Ａ硗?，在茭白的生長發(fā)育過程中，溫暖濕潤的生長發(fā)育環(huán)境也是必要條件。
[0004]本申請發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，由于茭白的根系發(fā)達、需水量多，因此適宜水源充足、灌水方便、土層深厚松軟、土壤肥沃、富含有機質(zhì)、保水保肥能力強的黏壤土或壤土。但是在茭白傳統(tǒng)的種植方法中，由于人們大量使用化學(xué)肥料，從而導(dǎo)致土壤結(jié)塊、板結(jié)等問題格外嚴重，進而導(dǎo)致土壤土質(zhì)惡化、茭白產(chǎn)量低、經(jīng)濟效益差等問題的產(chǎn)生。事實上，土壤通氣的好壞直接影響到根部的生長與養(yǎng)分的吸收。與大氣比較，土壤中的空氣特點是含氧量較低，一氧化碳含量高，據(jù)報道，土壤表層的含氧量比大氣中少1_2%，而二氧化碳則比大氣中高6-30倍，這是由蔬菜根系呼吸和土壤微生生物活動所致。
[0005]進一步地通過研究，本申請發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，蔬菜根系的正常生命活動，要求土壤空氣中含氧量大于10%，當(dāng)含氧量低于10%時，生長量就急劇下降，養(yǎng)分吸收也受到影響;而且，蔬菜對氮、磷、鉀的吸收也與土壤含氧量有關(guān)系，當(dāng)土壤空氣中含氧量在10-20 %時，氮、磷、鉀的吸收幾乎沒有差異，而當(dāng)土壤含氧量降到5%時，氮、磷、鉀的吸收也急劇下降，其吸收量甚至下降到2 %。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于上述的現(xiàn)有技術(shù)以及本申請發(fā)明人的研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供了一種專門用于茭白生態(tài)種植的微生物生長促進劑及其制備方法。其中，以茭白廢棄物為主要原料，就地全量還田，是一種養(yǎng)分含量高的高效生物有機肥，其特殊的基質(zhì)載體可以保證土壤透氣疏松，便于有益菌生長，而且可以抑制土傳病害，改善土壤其它交換及形成穩(wěn)定的有益菌生態(tài)土壤系統(tǒng)等，從而全面地解決或預(yù)防土壤連作難題，是一種新型微生物農(nóng)業(yè)技術(shù)產(chǎn)品。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案包括一種專門用于茭白生態(tài)種植的微生物生長促進劑的制備方法，其特征在于，包括:
[0008]1)從茭白種植土壤中分別初步篩選出假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌，并通過進一步篩選分別得到生長速度快的菌種；
[0009]2)將步驟1)中得到的菌種在液體培養(yǎng)基中進行混合培養(yǎng)，得到混合菌液；
[0010]3)將步驟2)得到的混合菌液在固體擴大培養(yǎng)基中進行固體擴大培養(yǎng)，得到發(fā)酵初
τ?: 口廣PR ；
[0011]4)將步驟3)得到的發(fā)酵初產(chǎn)品進行干燥、添加基質(zhì)載體、過篩、分裝，得到所述微生物生長促進劑。
[0012]在本發(fā)明的一個實施例中，所述初步篩選的具體步驟為:用無菌水浸泡茭白種植土壤得到浸出液;從浸出液中分別用光合細菌培養(yǎng)基篩選出假單胞菌，用固氮培養(yǎng)基篩選出原褐固氮菌，用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基篩選出枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌，用馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基篩選出鏈霉菌，從而分別得到所述的假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌。
[0013]更加優(yōu)選地，選用生長良好的種植土壤，并采用常規(guī)方法進行微生物滅菌，將滅菌后的土壤中加入其10倍重量份的無菌水浸泡24-26小時，在浸出液中分別用光合細菌培養(yǎng)基篩選出假單胞菌，用固氮培養(yǎng)基篩選出原褐固氮菌，用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基篩選出枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌，用馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基篩選出鏈霉菌，從而分別得到所述的假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌。
[0014]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述進一步篩選具體為:將初步篩選得到的所述菌種分別稀釋至10—5-10—7，然后分別在營養(yǎng)瓊脂平板中倒置培養(yǎng)，選出生長速度快的菌落，然后分別進行搖瓶實驗，篩選出生長速度更快的菌種;進一步地，然后將各個菌種分別轉(zhuǎn)接入裝有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的茄子瓶進行培養(yǎng)，待茄子瓶表面菌苔布滿并白中帶黃時，取出待用。
[0015]更加優(yōu)選地是，將初步篩選得到的所述菌種分別用質(zhì)量濃度為0.9%的生理鹽水稀釋至10—5-10—7，得到的菌懸液分別在營養(yǎng)瓊脂平板中于35°C條件下倒置培養(yǎng)48小時，選出生長速度快的菌落，然后進行搖瓶實驗，觀察菌種生長速度，篩選出數(shù)量高于50億/ml的菌種;將假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌、鏈霉菌分別轉(zhuǎn)接入裝有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的茄子瓶中，在35-40°C條件下培養(yǎng)45-50小時，待茄子瓶表面菌苔布滿并白中帶黃時，即可取出，然后放入2-6°C的冰箱中保存，待用。
[0016]其中，篩選得到的所述假單胞菌為熒光假單胞菌。
[0017]進一步地，在一個實施例中，步驟2)中的所述混合培養(yǎng)具體為:將步驟1)中得到的菌種在液體培養(yǎng)基中進行混合培養(yǎng)，當(dāng)活菌總數(shù)達到50億/ml，pH值達到7.5-8.0時停止發(fā)酵，得到發(fā)酵初產(chǎn)品。
[0018]更加優(yōu)選的是，按以下重量配比稱取各菌種:假單胞菌10-13份、原褐固氮菌20-23份、枯草芽孢桿菌30-33份、甲基單胞菌10-13份、鏈霉菌18-30份;進一步地，所述混合培養(yǎng)是將稱取的以上菌種的混合菌苔按照1:25-30的重量比例接種于經(jīng)過120-130°C、30-40min高溫滅菌的液體培養(yǎng)基中，在發(fā)酵罐中攪拌培養(yǎng)，其轉(zhuǎn)速為220-240r/min，發(fā)酵通氣量維持在1:1，溫度為30-32°C ；發(fā)酵24小時后每隔2小時監(jiān)測發(fā)酵液pH值和活菌總數(shù)，當(dāng)活菌總數(shù)達到50億/ml，pH值達到7.5-8.0時停止發(fā)酵。
[0019]在另一個實施例中，步驟3)中的所述固體擴大培養(yǎng)為將步驟2)中的所述混合菌液接入固體擴大培養(yǎng)基中進行密封發(fā)酵培養(yǎng)，待水分為30-40%，pH值為7—8.5時停止發(fā)酵。
[0020]更加優(yōu)選地，將步驟2)中得到的混合培養(yǎng)的混合菌液按1:25—30的比例接入經(jīng)過120-130°C，30-45min高溫滅菌的固體擴大培養(yǎng)基中，攪拌30_45min至均勻，倒入消毒雙層塑封袋中密封發(fā)酵，溫度25-35°C，時間8-15天;發(fā)酵7天后每隔6小時取樣，測定水分和pH值，待水分為30-40%，pH值為7—8.5時停止發(fā)酵。
[0021 ]在其中一個實施例中，所述干燥是在培養(yǎng)箱中干燥，溫度控制在35_45°C，時間12_18小時，干燥完成的發(fā)酵初產(chǎn)品的水分控制在20%以下。
[0022]進一步地，添加基質(zhì)載體，按照干燥后的發(fā)酵初產(chǎn)品45-50份、基質(zhì)載體50-55份的重量比例進行混合，其中，所述基質(zhì)載體為滅菌木肩與滅菌茭白廢棄物。
[0023]進一步地，進行過篩并裝入帶有內(nèi)袋的桶或者塑封袋中，扎緊袋口，系好標示牌，轉(zhuǎn)入成品庫中有序堆放。
[0024]優(yōu)選地，所述制備方法還包括取樣檢測，主要檢測參數(shù)為:水分<11.8 %，活菌數(shù)25-30億/g，物理性狀為棕色粉末狀固體。
[0025]進一步地，優(yōu)選地，所述液體培養(yǎng)基為無菌水再加玉米漿、大麥淀粉、硫酸氫銨、糖蜜、磷酸鉀、硫酸鉀、微量元素溶液中至少三種混合物的組合，優(yōu)選地，其組分及其重量配比為玉米漿2-3份、大麥淀粉1-2份、硫酸氫銨0.1-0.3份、糖蜜10-14份、磷酸鉀1.2_2份、硫酸鉀0-0.8份、微量元素溶液0.3-0.5份、無菌水75-85份。
[0026]優(yōu)選地，所述固體擴大培養(yǎng)基為無菌水再加清糠、豆柏粉、酵母粉、玉米粉、磷酸二氫鉀、硫酸錳、大蒜汁中至少四種混合物的組合，優(yōu)選地，其組分及其重量配比為:清糠40-40份、豆柏粉10-12份、酵母粉1-1.2份、玉米粉8-10份、磷酸二氫鉀0.8-1份、硫酸錳0-0.4份、大蒜汁1_1.2份、無菌水32.3~39.2份。
[0027]進一步地，所述的基質(zhì)由滅菌木肩、滅菌茭白廢棄物組成，其重量配比為:木肩55-60、茭白廢棄物40-45。
[0028]本發(fā)明的技術(shù)方案還包括一種上述所述的制備方法制備得到的微生物生長促進劑。
[0029]申請發(fā)明人對現(xiàn)有茭白種植方法進行改進，根據(jù)茭白生長過程中對肥料的需求規(guī)律，設(shè)計種