顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置及其使用方法
【專利摘要】提供能夠?qū)⒀b入培養(yǎng)液中的細(xì)胞等試樣維持在恒定的溫度的同時，以高倍率有效地實施顯微鏡觀察的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置。該顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，為具備收納裝有培養(yǎng)液(A)和試樣(B)的容器的收納單元(3)、和封閉收納單元(3)的上表面?zhèn)乳_口的蓋體(53)，設(shè)置在顯微鏡的載物臺(S)上用于對試樣(B)進(jìn)行顯微鏡觀察的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，具有設(shè)置在蓋體(53)中對應(yīng)于觀察范圍的部分上的透明面狀頂部加熱器，和細(xì)線狀的檢測部(31)進(jìn)入到收納單元(3)的內(nèi)部、進(jìn)而進(jìn)入到孔板(W)內(nèi)、由此直接測定供給到其中的培養(yǎng)液(A)的溫度的溫度檢測設(shè)備(29)，控制器(65)基于源自溫度檢測設(shè)備(29)的溫度信息，通過反饋方式對透明面狀頂部加熱器進(jìn)行溫度控制。
【專利說明】顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置及其使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及適于觀察細(xì)胞等試樣的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]作為這種顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，典型的例子如專利文獻(xiàn)I或圖8所示的裝置。該顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置100由收納單元103和封閉其上表面?zhèn)乳_口的蓋體107構(gòu)成。在收納單元103內(nèi)沿著其內(nèi)邊緣側(cè)設(shè)置有水槽105，由此內(nèi)方形成收納空間，在該收納空間收納了裝有培養(yǎng)液A和細(xì)胞等試樣B的容器、例如孔板W的狀態(tài)下，設(shè)置在顯微鏡載物臺S上來使用。
[0003]然而，為了在適于觀察裝入培養(yǎng)液A中的細(xì)胞等試樣B的條件下保持，對于溫度而言，有必要維持恒定、例如維持在37°C左右。因此，以往在收納單元103的下表面?zhèn)乳_口載置由導(dǎo)熱性高的鋁的薄板形成的加溫板109，在其上載置孔板W而由下方對培養(yǎng)液A進(jìn)行加溫。
[0004]在加溫板109上，以不會妨礙顯微鏡觀察的方式，在孔板W的情況下，在與各孔w相對的部分開孔孔111用作透光部。
[0005]而最近為了以高倍率進(jìn)行顯微鏡觀察，利用倒立型顯微鏡時，存在物鏡R與以往相比更接近收納單元103的下表面的趨勢，若如上所述插入加溫板109，則使顯微鏡載物臺S在X-Y方向上二維移動、將觀察對象由孔w變更為其鄰接的孔w時，如箭頭所示，需要暫且使物鏡R后退后、使顯微鏡載物臺S移動，然后再次使物鏡R接近的動作，即使自動操作，其程序設(shè)計也復(fù)雜化。另 外，若形成多孔型則各孔w的尺寸減小，最近甚至出現(xiàn)96個型，若形成這種類型則加溫板109的邊緣互相非常接近，因此，物鏡R對收納單元103的下表面的接近本身變得無法保證。
[0006]進(jìn)而，為了以高倍率清晰地觀察試樣B，有時用油或水充滿裸露了的容器的下表面與物鏡R之間、而使物鏡R形成油浸或水浸透鏡，但是由于如上所述重復(fù)物鏡R的后退-接近動作，因此液珠容易破裂。
[0007]另一方面，若欲在加溫板109上以包圍全部孔w的方式開一個大的孔，通過源自包圍周圍的加溫板109的傳熱對各孔w進(jìn)行加溫，則由于從加溫板109到各孔w為止的距離產(chǎn)生差異，因此孔w彼此之間產(chǎn)生溫度梯度。另外，即使是一個孔W，在其邊緣側(cè)與內(nèi)側(cè)之間也會產(chǎn)生溫度梯度。
[0008]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn) 專利文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)1:日本特開2008-259430號公報。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]因此，本發(fā)明的目的在于，提供將裝入培養(yǎng)液中的細(xì)胞等試樣維持在恒定溫度下的同時，能夠以高倍率有效地實施顯微鏡觀察的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置及其一例的使用方法。
[0010]本發(fā)明是為了解決上述問題而提出的，權(quán)利要求1的發(fā)明為顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其為具備收納裝有培養(yǎng)液和試樣的容器的收納單元、和封閉前述收納單元的上表面?zhèn)乳_口的蓋體，設(shè)置在顯微鏡的載物臺上用于對前述試樣進(jìn)行顯微鏡觀察的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，具有設(shè)置在前述蓋體中對應(yīng)于觀察范圍的部分的透明面狀頂部加熱器，和細(xì)線狀的檢測部進(jìn)入到前述收納單元的內(nèi)部、進(jìn)而進(jìn)入到所收納的容器內(nèi)、由此直接測定供給到其中的培養(yǎng)液的溫度的溫度檢測設(shè)備，基于源自前述溫度檢測設(shè)備的溫度信息，通過反饋方式對前述透明面狀頂部加熱器進(jìn)行溫度控制。
[0011]權(quán)利要求2的發(fā)明為，如權(quán)利要求1中記載的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，具備長度自如地將溫度檢測設(shè)備的檢測部導(dǎo)入到收納單元內(nèi)的導(dǎo)入設(shè)備。
[0012]權(quán)利要求3的發(fā)明為，如權(quán)利要求1或2中記載的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，具備專用的容器的蓋體，溫度檢測設(shè)備的檢測部通過安裝在前述蓋體的導(dǎo)入設(shè)備而被導(dǎo)入到容器內(nèi)。
[0013]權(quán)利要求4的發(fā)明為，如權(quán)利要求3中記載的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，容器的蓋體由透明玻璃形成。
[0014]權(quán)利要求5的發(fā)明為使用方法，其為權(quán)利要求1~4中任一項記載的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的使用方法，其特征在于，將被多個部分劃分的容器或多個容器收納在單元內(nèi)，使溫度檢測設(shè)備的檢測部進(jìn)入到任意一個部分或容器中，用于檢測溫度用，將剩余的部分或容器用于顯微鏡觀察用。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，能夠?qū)⒀b入培養(yǎng)液中的細(xì)胞等試樣維持在恒定的溫度的同時，以高倍率有效地實施顯微鏡觀察。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0016][圖1]為本發(fā)明的實施方式中的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的分解透視圖。
[0017][圖2]為從圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的上方觀察得到的透視圖。
[0018][圖3]為從圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的下方觀察得到的透視圖。
[0019][圖4]為圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的蓋體的截面圖。
[0020][圖5]為圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的溫度控制設(shè)備中的收納單元側(cè)的一部分放大透視圖。
[0021][圖6]為圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的溫度控制設(shè)備中的容器側(cè)的一部分放大透視圖。
[0022][圖7]為使用圖1的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置時的物鏡的動作說明圖。
[0023][圖8]為使用以往的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置時的物鏡的動作說明圖。
【具體實施方式】
[0024]根據(jù)圖1~圖7對本發(fā)明的實施方式中的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置I進(jìn)行說明。
[0025]顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置I由收納單元3、蓋體53等構(gòu)成。
[0026]首先對收納單元3的結(jié)構(gòu)進(jìn)行說明。
[0027]圖1中，符號5表示形成為大致長方形的框狀的主體部，在該主體部5中分別形成上表面?zhèn)乳_口 ?和下表面?zhèn)乳_口 9。在下表面?zhèn)乳_口 9側(cè)形成內(nèi)部凸緣(inward flange)11，下表面?zhèn)乳_口 9小于上表面?zhèn)乳_口 7。
[0028]在主體部5的下表面?zhèn)乳_口 9的邊緣嵌入而固定接合器13的側(cè)面。該接合器13也形成為大致長方形的框狀，在其下端側(cè)開口 15側(cè)形成內(nèi)部凸緣17。符號19表示按壓彈簧，該按壓彈簧19的基底部分別與接合器13的上端面的四個部位連接，在接合器13內(nèi)自如旋轉(zhuǎn)。該接合器13用于孔板W，若拆裝自如地嵌入孔板W，則通過上述按壓彈簧10的彈性力，穩(wěn)定地將該孔板W固定在接合器13。
[0029]接合器13的下端側(cè)從收納單元3向下方突出，在與收納單元3之間形成臺階部21。
[0030]在主體部5的內(nèi)側(cè)面、接合器13的外側(cè)面和主體部5的內(nèi)部凸緣11的上表面之間劃定的凹狀的空間發(fā)揮水槽23的功能。
[0031]在主體部5安裝供水用軟管25和供給氣體用軟管27，各自的前端進(jìn)入到水槽23內(nèi)，供給氣體用軟管27的前端延伸至其底面附近。
[0032]在它們之間設(shè)置用于溫度檢測設(shè)備29的細(xì)線狀的熱電偶型檢測部31的、作為導(dǎo)入收納部內(nèi)的設(shè)備的檢測部支架33。如圖5所示，該檢測部支架33的底座35固定在主體部5的外側(cè)面，在該底座35形成一對螺紋孔37、37和對應(yīng)于檢測部31的淺的槽39。該槽39與形成在主體部5的上端面的槽41連通，槽39、41形成檢測部31向主體部5內(nèi)的導(dǎo)入路徑。
[0033]對應(yīng)于底座35設(shè)置按壓座43，在該按壓座43也對應(yīng)于底座35側(cè)的一對螺紋孔37、37形成一對孔45、45。
[0034]由底座35的槽39跨過主體部5的槽41插入檢測部31的適當(dāng)部位，將按壓座43以其下表面?zhèn)韧徊壳度氲降鬃?5的槽39的方式從上側(cè)接合，使按壓螺紋47裝入并緊固到連通了的孔45和螺紋孔37，由此檢測部31以導(dǎo)入到主體部5的狀態(tài)被固定。
[0035]通過上述結(jié)構(gòu)，對于檢測部31而言，通過改變插入到槽39、41的部位，可以調(diào)整導(dǎo)入到主體部5內(nèi)的長度，可以進(jìn)入至充分的長度以能夠到達(dá)孔板W的規(guī)定的孔w內(nèi)。
[0036]另外，在主體部5還具備一對用于安裝灌注用軟管的支架51，從而也能夠進(jìn)行灌注培養(yǎng)。
[0037]相對于上述結(jié)構(gòu)的收納單元3，以封閉其上端側(cè)開口 7的方式設(shè)置蓋體53。
[0038]如圖4所示，該蓋體53形成大致長方形，其框體55保持長方形的透明的透光部57。在該透光部57隔著間隙配置兩塊透明玻璃板59，在下側(cè)的透明玻璃板59的上表面形成透明導(dǎo)電膜61。通過電線63對該透明導(dǎo)電膜61通電使其發(fā)熱，而使其發(fā)揮作為透明面狀頂部加熱器的功能。需要說明的是，由于在兩塊透明玻璃板59、59之間夾著空氣層，能夠期待絕熱效果。
[0039]上述蓋體53側(cè)的電線63和溫度檢測設(shè)備29都與控制器65連接，控制器65基于源自溫度檢測設(shè)備29的溫度信息和目標(biāo)溫度，通過反饋方式調(diào)整對透明導(dǎo)電膜61的通電量。
[0040]需要說明的是，安裝在接合器13的孔板W可以有蓋體，也可以無蓋體，該實施方式中所安裝的孔板W有蓋體67，為了將溫度檢測設(shè)備29的檢測部31導(dǎo)入到規(guī)定的孔W內(nèi)，在該蓋體67設(shè)置導(dǎo)入孔板內(nèi)的設(shè)備。[0041]蓋體67為了抑制熒光顯色而為透明玻璃制。另外，如圖6所示，蓋體67形成箱狀，被嵌入到形成在孔板W的外側(cè)面的臺階部而封閉孔板W的上表面開口。在該蓋體67的上壁部的一側(cè)壁部側(cè)形成小的矩形孔69，在露出的側(cè)壁部的上端面形成一對螺紋孔71、71。另外，在其之間形成對應(yīng)于檢測部31的淺的槽(省略圖示)。
[0042]以嵌入到矩形孔69的尺寸設(shè)置矩形的按壓板73，在該按壓板73中也對應(yīng)于一對螺紋孔71、71形成一對螺紋孔75、75。
[0043]向上述槽插入檢測部31，將按壓板73由上側(cè)嵌入到矩形孔69，通過在其上將按壓螺紋77緊固到螺紋孔75、71，由此以檢測部31被導(dǎo)入到孔板W內(nèi)的狀態(tài)進(jìn)行固定。
[0044]需要說明的是，檢測部31能夠彎曲，在孔板W內(nèi)延伸至規(guī)定的孔w后，能夠彎曲而降下至該孔w的底面附近。
[0045]對該顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置I的使用方法進(jìn)行說明。
[0046]在收納單元3的主體部5預(yù)先安裝接合器13。在該接合器13中嵌入模擬用的孔板W(已經(jīng)被蓋體67封閉)，用蓋體53封閉而劃定培養(yǎng)空間后，由供給氣體用軟管27供給二氧化碳(CO2),由供水用軟管25向水槽23供給水的同時，通過電線63對透明面狀頂部加熱器的透明導(dǎo)電膜61進(jìn)行通電使其發(fā)熱。另外，雖然省略圖示，在水槽23的底部側(cè)也設(shè)置加熱器，通過該加熱器的加熱使水槽23內(nèi)的水蒸發(fā)而使培養(yǎng)空間內(nèi)為所需要的濕度。上述供給氣體用軟管27、供水用軟管25、加熱器也處于控制器65的控制下，從而將培養(yǎng)空間維持恒定。
[0047]在該狀態(tài)下，將收納單元3設(shè)置在顯微鏡載物臺S上。此時，收納單元3的主體部5的下表面?zhèn)鹊呐_階部21搭架而載置在顯微鏡載物臺S的孔的邊緣。
[0048]另一方面，預(yù)先準(zhǔn).備顯微鏡觀察用的孔板W。預(yù)先向各孔w裝入培養(yǎng)液A或試樣B,孔板W的外邊緣側(cè)的一個孔w作為溫度檢測的專用孔，僅預(yù)先裝入培養(yǎng)液A。然后，向該溫度檢測專用的孔w內(nèi)插入溫度檢測設(shè)備29的檢測部31的由保護(hù)管裸露的的前端，使其降下至其底面附近而形成浸潰在培養(yǎng)液A中的狀態(tài)，然后用蓋體67封閉孔板W的上表面?zhèn)乳_口的同時，通過導(dǎo)入孔板內(nèi)的設(shè)備預(yù)先固定檢測部31。
[0049]若結(jié)束使用模擬用的孔板W的一定時間的預(yù)備運轉(zhuǎn)，則打開收納單元3的蓋體53取出模擬用的孔板W，嵌入顯微鏡觀察用的孔板W，通過檢測部支架33固定溫度檢測設(shè)備29的檢測部31后，用蓋體53再次封閉收納單元3。
[0050]由此，將裝入培養(yǎng)空間內(nèi)的孔板W的各孔w中的裝有試樣的培養(yǎng)液保持在適于培養(yǎng)的規(guī)定的濕度、溫度等環(huán)境下，而進(jìn)入能夠觀察的模式。
[0051]對于顯微鏡觀察而言,一邊移動顯微鏡載物臺S，一邊對裝入到多個孔w內(nèi)的試樣B進(jìn)行觀察。
[0052]孔板W中配置各孔w的部位，其全部下方側(cè)裸露，孔w彼此之間也為裸露的狀態(tài)而形成同一水平面。因此，可以在維持物鏡最接近于用于觀察的孔w的狀態(tài)下，在XY方向上移動顯微鏡載物臺S。
[0053]另外，由于透明面狀頂部加熱器隔著相等距離與各孔w對置，因而能夠均勻地對裝入到任意一個孔w內(nèi)的培養(yǎng)液A或試樣B進(jìn)行加溫。
[0054]進(jìn)而，由于基于培養(yǎng)液A的直接的溫度信息利用透明面狀頂部加熱器進(jìn)行加溫，因此可以沒有延遲地逐步追從微小的溫度變動，可以以高的精度將培養(yǎng)液A、進(jìn)而裝入到其中的試樣B總是維持在目標(biāo)的加溫溫度。
[0055]以上對本發(fā)明的實施方式進(jìn)行了具體說明，但是具體的構(gòu)成不被這些實施方式限定，即使存在不脫離本發(fā)明的要旨的范圍的設(shè)計的變更等，也包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0056]例如，孔板等容器并非本發(fā)明的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的專用，也可以與其它銷售品組合來使用，但是欲用蓋體封閉容器時，若該蓋體使用上述實施方式中記載的蓋體，則可以順利地將溫度檢測設(shè)備的檢測部導(dǎo)入到容器內(nèi)。
[0057]容器不限于孔板，也可以為碟子等。此時，例如可以使用兩個碟子，并且將一個碟子用于溫度檢測專用。
[0058]需要說明的是，準(zhǔn)備溫度檢測的專用的容器時，有時擔(dān)心在觀察操作時形成障礙或由于檢測部而產(chǎn)生污染，但是檢測部能夠滅菌，不擔(dān)心這些時，也可以將試樣裝入到插入有檢測部的孔等來用于顯微鏡觀察。
[0059]產(chǎn)業(yè)上的利用性
本發(fā)明的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置可以用作顯微鏡的附屬品。
[0060]符號說明
I…顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置3…收納單元5…主體部
7…上表面?zhèn)乳_口 9…下表面?zhèn)乳_口 11…內(nèi)部凸緣
13…接合器15…下端側(cè)開口 17…內(nèi)部凸緣
19…按壓彈簧21…臺階部23… 水槽
25…供水用軟管27…供給氣體用軟管
29…溫度檢測設(shè)備31…檢測部33…檢測部支架
35…底座37…螺紋孔39…槽41…槽
43…按壓座45…螺紋孔47…按壓螺紋
51…用于安裝灌注用軟管的支架53…蓋體55…框體
57…透光部59…透明玻璃板61…透明導(dǎo)電膜
63…電線65...控制器
67...(孔板)的蓋體69…矩形孔71…螺紋孔 73…按壓板75…螺紋孔77…按壓螺紋 W…孔板w…孔A…培養(yǎng)液B…試樣 S…顯微鏡載物臺R…物鏡
【權(quán)利要求】
1.顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其為具備收納裝有培養(yǎng)液和試樣的容器的收納單元、和封閉所述收納單元的上表面?zhèn)乳_口的蓋體，設(shè)置在顯微鏡的載物臺上用于對所述試樣進(jìn)行顯微鏡觀察的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于， 具有設(shè)置在所述蓋體中對應(yīng)于觀察范圍的部分上的透明面狀頂部加熱器，和 細(xì)線狀的檢測部進(jìn)入到所述收納單元的內(nèi)部、進(jìn)而進(jìn)入到所收納的容器內(nèi)、由此直接測定供給到其中的培養(yǎng)液的溫度的溫度檢測設(shè)備； 基于源自所述溫度檢測設(shè)備的溫度信息，通過反饋方式對所述透明面狀頂部加熱器進(jìn)行溫度控制。
2.如權(quán)利要求1所述的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，具備長度自如地將溫度檢測設(shè)備的檢測部導(dǎo)入到收納單元內(nèi)的導(dǎo)入設(shè)備。
3.如權(quán)利要求1或2所述的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于， 具備專用的容器的蓋體， 溫度檢測設(shè)備的檢測部通過安裝在所述蓋體的導(dǎo)入設(shè)備而被導(dǎo)入到容器內(nèi)。
4.如權(quán)利要求3所述的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置，其特征在于，容器的蓋體由透明玻璃形成。
5.使用方法，其為權(quán)利要求1~4中任一項所述的顯微鏡觀察用培養(yǎng)裝置的使用方法，其特征在于，將劃分成多個部分的容器或多個容器收納在單元內(nèi)，使溫度檢測設(shè)備的檢測部進(jìn)入到任意一個部分或 容器中，用于檢測溫度，將剩余的部分或容器用于顯微鏡觀察。
【文檔編號】G02B21/30GK103476919SQ201180046154
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2011年3月22日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月22日
【發(fā)明者】土屋秀治 申請人:株式會社東海希多