本發(fā)明屬于中藥學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種藥物組合物及其制備方法和在制備治療高血壓的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

高血壓(hypertension)是指以體循環(huán)動(dòng)脈血壓(收縮壓和/或舒張壓)增高為主要特征(收縮壓≥140毫米汞柱，舒張壓≥90毫米汞柱)，可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質(zhì)性損害的臨床綜合征。高血壓是最常見的慢性病，也是心腦血管病最主要的危險(xiǎn)因素。

南方紅豆杉(taxuschinensisvar.mairei)又稱美麗紅豆杉，系裸子植物亞門松杉綱紅豆杉目紅豆杉科紅豆杉屬植物，特產(chǎn)于我國(guó)，主要分布于長(zhǎng)江流域、南嶺山脈山區(qū)以及河南、陜西(秦嶺)、甘肅等省的山地或溪谷，是紅豆杉屬中生長(zhǎng)最快、分布最廣的植物。

南方紅豆杉葉中除含紫杉醇等小分子活性物質(zhì)外，還發(fā)現(xiàn)南方紅豆杉葉中含有的活性黃酮成分具有抗氧化、抗菌活性，但目前尚未有葉中黃酮治療高血壓的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種藥物組合物及其制備方法和在制備治療高血壓的藥物中的應(yīng)用，所述藥物組合物有治療高血壓的作用，對(duì)細(xì)胞的毒副作用小，具有廣泛的應(yīng)用前景。

為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包括曼地亞紅豆杉葉提取物和藥學(xué)上可接受的載體，其中，所述曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為0.1-99.9％，例如可以是0.1％、0.2％、0.3％、0.5％、0.8％、1％、2％、5％、8％、10％、13％、15％、18％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、92％、95％、98％、99％或99.9％。

優(yōu)選地，所述曼地亞紅豆杉葉提取物含有黃酮類成分，不含有紫杉烷類成分。

本發(fā)明中，曼地亞紅豆杉葉提取物化學(xué)成分眾多，主要富含黃酮類成分，幾乎無紫杉烷類成分，有著傳統(tǒng)中藥復(fù)方配伍使用的效果，作為一種天然藥，相比于單一的藥物，毒副作用小。首次發(fā)現(xiàn)本發(fā)明所述曼地亞紅豆杉提取物具有治療高血壓的作用。

優(yōu)選地，所述曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為1-90％，優(yōu)選為20-85％，進(jìn)一步優(yōu)選為40-80％。

優(yōu)選地，所述曼地亞紅豆杉葉提取物為醇提取物和/或中藥浸膏。

優(yōu)選地，所述藥學(xué)上可接受的載體為甘露醇、山梨醇、山梨酸、山梨酸鉀、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素a、維生素c、維生素e、維生素d、氮酮、edta二鈉、edta鈣鈉、一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、一價(jià)堿金屬的醋酸鹽、一價(jià)堿金屬的磷酸鹽、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、土溫60-80、司班-80、蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒食子酸酯類、瓊脂、三乙醇胺、堿性氨基酸、尿素、尿囊素、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、植物油、磷脂、聚乙二醇磷脂、聚乙二醇磷脂衍生物、油酸、油酸鹽、抗氧化劑、或離子絡(luò)合劑中的任意一種或至少兩種的混合物。

優(yōu)選地，所述植物油為大豆油、中鏈油、橄欖油、茶油、棕櫚油、當(dāng)歸油、沙棘油、莪術(shù)油、川芎油、薏米仁油、紅花油、花椒油或大蒜油中的任意一種或至少兩種的混合物。

優(yōu)選地，所述磷脂為蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆磷脂或人工合成磷脂中的任意一種或至少兩種的混合物。

優(yōu)選地，所述聚乙二醇磷脂為聚乙二醇-腦磷脂、聚乙二醇-膽固醇、聚乙二醇-二-脂肪酸甘油酯、聚乙二醇-脂肪酸酯、聚乙二醇-脂肪胺或聚乙二醇-脂肪醇中的任意一種或至少兩種的混合物。

優(yōu)選地，所述抗氧化劑為維生素e。

優(yōu)選地，所述藥物組合物的劑型為片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑或貼劑中的任意一種或至少兩種的組合。

優(yōu)選地，所述曼地亞紅豆杉葉提取物的提取方法為醇提、層析、真空提取、超臨界流體萃取法、超聲提取法、酶法提取、微波提取法、荷電提取法或半仿生提取法中的任意一種或至少兩種的組合，優(yōu)選為醇提與層析組合。

優(yōu)選地，所述曼地亞紅豆杉葉提取物的提取方法包括以下步驟：取曼地亞紅豆杉葉進(jìn)行粗粉碎，加醇煎煮，冷卻至室溫，減壓回收至干；對(duì)提取物粗品以大孔樹脂柱層析，先以水洗脫去除糖類成分，再以乙醇洗脫；利用聚酰胺柱對(duì)乙醇洗脫濃縮物進(jìn)行層析分離，分別以水、30％乙醇、60％乙醇、90％乙醇的洗脫梯度進(jìn)行洗脫。取90％乙醇洗脫液，減壓濃縮，真空干燥，即得所述曼地亞紅豆杉葉提取物。

優(yōu)選地，所述加醇煎煮時(shí)，曼地亞紅豆杉葉與醇的重量比為1:(5-15)，例如可以是1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14或1:15，優(yōu)選為1:(9-12)，使用過少的醇對(duì)曼地亞紅豆杉葉進(jìn)行提取，不利于有效成分的浸出，而過多的醇也并不能繼續(xù)顯著增加有效成分的浸出，反而可能使得其他成分的浸出量增多，從而影響提取物中各成分的配比關(guān)系，進(jìn)而影響其作用效果。

優(yōu)選地，所述煎煮的次數(shù)為2-5次，例如可以是2次、3次、4次或5次，優(yōu)選為3次。

優(yōu)選地，所述每次煎煮的時(shí)間為1-3h，例如可以是1h、1.3h、1.5h、1.8h、2h、2.2h、2.5h、2.8h或3h，優(yōu)選為2h，煎煮時(shí)間太短會(huì)使得有效成分不能浸出，影響提取物的作用效果，而煎煮時(shí)間太長(zhǎng)會(huì)破壞有效成分，也會(huì)影響各成分的配比關(guān)系，從而影響提取物中各成分之間的君臣佐使的配合關(guān)系，進(jìn)而影響到對(duì)高血壓的治療效果。

優(yōu)選地，所述加醇煎煮中醇為甲醇、甲醇水溶液、乙醇或乙醇水溶液中的任意一種或至少兩種的混合物，優(yōu)選甲醇、乙醇、80％甲醇水溶液或70％乙醇水溶液，進(jìn)一步優(yōu)選為70％乙醇水溶液；

優(yōu)選地，所述每個(gè)洗脫梯度的洗脫體積為3-7倍柱體積，例如可以是3倍柱體積、3.5倍柱體積、4倍柱體積、4.5倍柱體積、5倍柱體積、5.5倍柱體積、6倍柱體積、6.5倍柱體積或7倍柱體積，優(yōu)選為5倍柱體積。

優(yōu)選地，所述真空干燥的溫度為20-80℃，例如可以是20℃、21℃、22℃、23℃、25℃、26℃、28℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃或80℃，優(yōu)選為30-60℃，進(jìn)一步優(yōu)選為50℃。

第二方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的藥物組合物的制備方法，所述制備方法為：將曼地亞紅豆杉葉提取物和藥學(xué)上可接受的載體進(jìn)行混合，使得所述曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為0.1-99.9％，得到所述藥物組合物。

在本發(fā)明中，可以將所述藥物組合物經(jīng)過本領(lǐng)域已知的制劑工藝制備得到相應(yīng)的劑型。

第三方面，本發(fā)明提供一種如第一方面所述的藥物組合物在制備治療高血壓的藥物中的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)本發(fā)明利用曼地亞紅豆杉葉提取物與藥學(xué)上可接受的載體配合得到藥物組合物，對(duì)高血壓具有良好的治療效果。

(2)本發(fā)明提取的曼地亞紅豆杉葉提取物相比于曼地亞紅豆杉其他部位的提取物具有特定的治療高血壓的作用，經(jīng)過特定的提取工藝，使得提取物中有效成分以及其他輔助成分具有較佳的配合關(guān)系，使得各成分之間很好地發(fā)揮君臣佐使的配合關(guān)系，從而達(dá)到對(duì)高血壓的良好治療效果。

(3)本發(fā)明的藥物制備工藝簡(jiǎn)單，藥效顯著，為高血壓的臨床治療提供了更多選擇，具有廣闊的應(yīng)用前景。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施方式來進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，所述實(shí)施例僅僅是幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對(duì)本發(fā)明的具體限制。

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

實(shí)施例1

在本實(shí)施例中，通過以下方法來制備藥物組合物：

(1)曼地亞紅豆杉提取物的提取

取曼地亞紅豆杉葉粗粉500g，每次加10倍量70％乙醇煎煮，每次1h，煎煮3次。煎煮后，冷卻至室溫，減壓回收至干。對(duì)提取物粗品以大孔樹脂柱層析，先以5倍柱體積水洗脫去除糖類成分，再以5倍柱體積乙醇洗脫。乙醇洗脫濃縮物再以聚酰胺進(jìn)行柱層析分離，分別以水、30％乙醇、60％乙醇、90％乙醇進(jìn)行洗脫，每個(gè)梯度的洗脫體積為5倍柱體積。取90％乙醇洗脫液，減壓濃縮，50℃真空干燥，即得所述曼地亞紅豆杉葉提取物。

(2)將提取得到的曼地亞紅豆杉葉提取物與聚乙二醇混合，使得曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為60％，后制作成膠囊劑藥物，得到所述藥物組合物。

實(shí)施例2

在本實(shí)施例中，通過以下方法來制備藥物組合物：

(1)曼地亞紅豆杉提取物的提取

取曼地亞紅豆杉葉粗粉500g，每次加15倍量80％甲醇煎煮，每次1h，煎煮3次，煎煮后，冷卻至室溫，減壓回收至干。對(duì)提取物粗品以大孔樹脂柱層析，先以5倍柱體積水洗脫去除糖類成分，再以5倍柱體積乙醇洗脫。乙醇洗脫濃縮物再以聚酰胺進(jìn)行柱層析分離，分別以水、30％乙醇、60％乙醇、90％乙醇進(jìn)行洗脫，每個(gè)梯度的洗脫體積為7倍柱體積。取90％乙醇洗脫液，減壓濃縮，50℃真空干燥，即得所述曼地亞紅豆杉葉提取物。

(2)將提取得到的曼地亞紅豆杉葉提取物與山梨醇混合，使得曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為80％，而后制作成膠囊劑藥物，得到所述藥物組合物。

實(shí)施例3

在本實(shí)施例中，通過以下方法來制備藥物組合物：

(1)曼地亞紅豆杉提取物的提取

取曼地亞紅豆杉葉粗粉500g，每次加5倍量70％乙醇煎煮，每次2h，煎煮2次，煎煮后，冷卻至室溫，減壓回收至干。對(duì)提取物粗品以大孔樹脂柱層析，先以5倍柱體積水洗脫去除糖類成分，再以5倍柱體積乙醇洗脫。乙醇洗脫濃縮物再以聚酰胺進(jìn)行柱層析分離，分別以水、30％乙醇、60％乙醇、90％乙醇進(jìn)行洗脫，每個(gè)梯度的洗脫體積為3倍柱體積。取90％乙醇洗脫液，減壓濃縮，50℃真空干燥，即得所述曼地亞紅豆杉葉提取物。

(2)將提取得到的曼地亞紅豆杉葉提取物與甘露醇混合，使得曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為90％，而后制作成膠囊劑藥物，得到所述藥物組合物。

實(shí)施例4

在本實(shí)施例中，通過以下方法來制備藥物組合物：

(1)曼地亞紅豆杉提取物的提取

取曼地亞紅豆杉葉粗粉500g，每次加8倍量70％乙醇煎煮，每次3h，煎煮3次，煎煮后，冷卻至室溫，減壓回收至干。對(duì)提取物粗品以大孔樹脂柱層析，先以5倍柱體積水洗脫去除糖類成分，再以5倍柱體積乙醇洗脫。乙醇洗脫濃縮物再以聚酰胺進(jìn)行柱層析分離，分別以水、30％乙醇、60％乙醇、90％乙醇進(jìn)行洗脫，每個(gè)梯度的洗脫體積為6倍柱體積。取90％乙醇洗脫液，減壓濃縮，50℃真空干燥，即得所述曼地亞紅豆杉葉提取物。

(2)將提取得到的曼地亞紅豆杉葉提取物與聚乙二醇磷脂混合，使得曼地亞紅豆杉葉提取物的重量百分比為20％，后制作成膠囊劑藥物，得到所述藥物組合物。

實(shí)施例5

在本實(shí)施例中對(duì)本發(fā)明實(shí)施例1的藥物組合物的降血壓活性進(jìn)行驗(yàn)證，方法如下：

實(shí)驗(yàn)正式開始前，先將大鼠常規(guī)飼養(yǎng)一周后，分為兩部分，第一部分將60只大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只。分別設(shè)為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、卡托普利陽性對(duì)照組(0.005g/kg·d^-1)、紅豆杉葉提取物高劑量組(4g/kg·d^-1)、紅豆杉葉提取物中劑量組(2g/kg·d^-1)、紅豆杉葉提取物低劑量組(1g/kg·d^-1)。按體重灌胃，灌胃體積1ml/100g，空白組灌胃1.5％的羧甲基纖維素鈉溶液，模型組灌胃10％果糖水，其余組灌胃相應(yīng)藥物和10％果糖水，連續(xù)灌胃4周，每周測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈血壓。

表1高、中、低劑量提取物對(duì)大鼠尾動(dòng)脈血壓的影響(x±sd,單位mmhg)

^a代表與空白組比較，p<0.05；^b代表與模型組比較，p<0.05。

表1結(jié)果顯示，從第2周開始，空白組的大鼠血壓與模型組相比，差異顯著(p<0.05)，說明造模成功。到第2周，給以高、中劑量的大鼠血壓呈現(xiàn)下降趨與模型組的大鼠血壓相比有顯著性差異(p<0.05)。由此可知，高、中劑量紅豆杉葉提取物組合物可以有效降低大鼠高血壓。

分別對(duì)實(shí)施例2-4制備得到的組合物的降血壓活性進(jìn)行如上所述的試驗(yàn)，結(jié)果同樣表明高、中劑量紅豆杉葉提取物藥物組合物可以有效降低大鼠高血壓。

綜上所述，本發(fā)明的紅豆杉葉提取物作為一種天然藥物，顯著改善降低血壓，為高血壓的臨床治療提供了更多選擇，具有廣闊的應(yīng)用前景。

申請(qǐng)人聲明，本發(fā)明通過上述實(shí)施例來說明本發(fā)明的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用，但本發(fā)明并不局限于上述實(shí)施例，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述實(shí)施例才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)，對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。