專利名稱：漆酶反應的增強作用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及酶的活化，更具體地說，本發(fā)明涉及能增強漆酶和相關酶活性的試劑。
本發(fā)明還涉及在漆酶以及增強劑存在下氧化底物的方法。更具體地說，本發(fā)明涉及在溶液中漂白染料的方法，涉及當幾種織物在洗滌液中一起洗滌時能抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移的方法，涉及含木質素材料的漂白方法，特別是漂白紙張生產用紙漿的方法，涉及紙漿制造中的廢水處理方法，以及涉及木質素或含木質素材料的酶聚合和/或改性的方法。
漆酶(E.C.1.10.3.2)是一種能催化底物(電子或氫質子)和氧的氧化作用的酶。已知這些酶可來自微生物、植物體或動物體，如真菌。它們是典型的銅蛋白，即其中含有一個或多個銅原子作可輔基。
現有人建議將漆酶用于例如紙張生產中紙漿的漂白，用于紙漿生產中廢水的處理，用于洗滌劑漂白的改進，用于洗滌中抑制染料的轉移，以及用于木質素的改性，例如用于刨花膠合板的生產。
由Boehringer Mannheim供應的化合物2,2’-連氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸鹽)，ABTS是發(fā)色底物，是常用的過氧化物酶和酚氧化酶試劑。這些酶可催化分別由過氧化氫和分子氧進行的ABTS氧化作用，得到綠蘭色，此工藝可由光度分析控制。
已知當ABTS被漆酶(多酚氧化酶，EC 1.10.3.2)氧化時形成穩(wěn)定的陽離子團，人們認為其作用為非酚木質素類化合物氧化作用的氧化還原介體(Bourbonnais R．和Paice M.G.,FEBS lett,(1990),267,99-102)。
在ABTS存在下就漆酶對牛皮紙漿的去甲基作用和去木質作用進行研究表明在ABTS存在下漆酶的部分去甲基作用的程度提高了(Bourbonnais,R.and Paice,M.G；Microbiol.Biotechol.,(1992),36,823-827)。
已有報導說某些可氧化的底物如金屬離子和酚類化合物如7-羥基香豆素(7HCm)、香草醛(VAN)和對羥基苯磺酸鹽(PHBS)能增強漂白作用，可作為加速劑或增強子〔參見例如WO 92/18683,WO 92/18687，以及Kato M和Shlmizu S,Plant cell Physiol.,1985,26(7),pp1291-1301(特別是表1)，或Sannders B.C.等人，Peroxi-dase,London,1964,P141ff)。
現出人意料地發(fā)現由至少兩上芳環(huán)組成的有機化合物能夠增強漆酶的活性，在上述芳環(huán)中至少有一個環(huán)由一個或多個氮、氧和硫原子取代，并且所述芳環(huán)還可進一步稠合。
相應的，第一方面，本發(fā)明提供了增強漆酶活性的試劑，該試劑是由至少兩個芳環(huán)組成的有機化合物，在所述芳環(huán)中至少有一個環(huán)由一個或多個氮、氧和硫原子取代；以及所述芳環(huán)可進一步的稠合。
就更具體的方面而言，本發(fā)明提供了增強漆酶活性的試劑，該試劑是通過Ⅰ的有機化合物 其中A表示單鍵或下述基團之一(-CR11=CR15-)n、(-CR11=N-N=CR15-)、(-NR11-)、(-CR12=N-)n、(-NR11-CR12=N-N=CR15-)、(-NR11-CR12=N-)、(-CR12=N-NR11)、(-NR11-CR12=CR13-)、(-N=N-)，在上述基團中n表示1至6的整數；或者A表示碳、羰基、氮、硫、氧、硒或磷，其中碳、磷和氮可以是未取代的或是由取代基R11的取代的；該通式中的取代基R1-R13和R15可以相同或不同，各獨立地表示下述任一基團氫、羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺?；⒍趿谆?、膦酰基、膦酰氧基、硫烷二基(sulfandiyl)、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中的氨基甲酰基、氨磺?；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步被一或二個取代基R14所取代；其中的苯基可以進一步是未取代的或由一個或多個取代基R14所取代的；以及其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，以及可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R14所取代的；其中的取代基R14表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、氨基烷基、哌啶子基、哌嗪基、吡咯烷基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲酰基、氨磺酰基和氨基可以是未取代的或進一步由羥基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代；羥基、氨基、甲酰基、羥基和其酯和鹽、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；黄渲械腃1-C5烷基和C1-C5烷氧基可進一步是飽和的或不飽和的，支鏈的或直鏈的，以及可進一步地由下述任意基團一取代或二取代羥基、氨基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}，以及氨磺?；?；或通式中的R5和R6一起形成基團-B-，而B表示單鍵、基團(-CH=CH-)n或基團(-CH=N-)n，其中n表示1-6的整數；或者B表示碳、氮、硫、氧、硒或碲，其中碳和氮可以是未取代的或由上文定義的取代基R14取代；或通式中的取代基R1-R10之中的二個基團一起形成基團-C-,C表示任一下述基團(-CHR11-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n，其中n表示2-4的整數，以及其中的R11如上文定義或當上式中的n為1時，通式中的R5和R12，和/或R6和R13一起形成基團-D-，其中D表示下述基團(-CHR11-)(-NR11-)(-CR11=CR15-)(-CR11=N-)(-N=CR11-)(-O-)(＞C=O)或(-S-)，以及其中R11和R15如上文定義的取代基。
本另一具體的方面，本發(fā)明提供了增強漆酶活性的試劑，該試劑是通過Ⅱ的有機化合物 其中取代基R1-R8可以相同或不同，各自獨立地表示任一下述基團氫、羥基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中氨基甲?；被酋；?、以及氨基可進一步是未取代的或由取代基R9一取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或進一步由取代基R9一取代或多取代；其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R9所取代；其中取代基R9表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲?；被酋；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽以及氨磺?；?；以及其中的C1-C5烷基、C1-C5烷氧基可進一步是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈的，以及可進一步由下述基團一取代或二取代的羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；?；或通式中取代基R1-R8之中的二個基團一起形成基團-B-,B表示下述基團(-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n、(-N=CR9-NR10-)或(-N=N-CR9-)，其中n表示1-3的整數，R9如上文定義的取代基，以及R10定義如R9。
另一方面，本發(fā)明還提供了在氧和有本發(fā)明增強劑存在下，用漆酶或漆酶的相關酶氧化底物的方法。
在更具體的方面，本發(fā)明提供了在有氧和有發(fā)明增強劑存在下通過用漆酶或漆酶的相關酶處理在溶液中漂白染料的方法。
另一具體的方面，當幾種織物在一起洗滌時，本發(fā)明提供了抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移的方法，該方法包括在氧和本發(fā)明增強劑存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理洗滌液。
另一方面，本發(fā)明提供了漂白含木質素材料，特別是漂白造紙用紙漿的方法，該方法包括在氧和本發(fā)明增強劑存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理木質素或含木質素材料。
另一方面，本發(fā)明提供了木質素或含本質素材料的酶聚合和/或改性的方法，該方法包括在氧和本發(fā)明增強劑的存在下，用漆酶或漆酶的相關酶處理木質素或含木質素材料。
還有一方面，本發(fā)明提供了處理廢水的方法，特別是醫(yī)藥工業(yè)或化學工業(yè)廢水，例如染料制造廢水，紡織工業(yè)或造紙工業(yè)廢水的處理，該方法包括在氧和本發(fā)明增強劑存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理廢水。
在一個具體方面，本發(fā)明提供了一種洗滌劑的添加劑，幾種織物一起在洗滌液中洗滌時，該洗滌劑添加劑能抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移，洗滌劑添加劑含有具有漆酶活性的酶和氧以及本發(fā)明的增強劑。
另一方面，本發(fā)明提供了洗滌劑添加劑和洗滌劑組合物，當幾種織物一起在洗滌劑中洗滌時，它們能抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移，洗滌劑組合物含有具有漆酶活性的酶和氧以及本發(fā)明的增強劑。
通過參照附圖進一步說明本發(fā)明，其中，

圖1列出了某些本發(fā)明增強劑具體結構式(Ⅰ)6-羥基-2-萘甲酸；(Ⅱ)7-甲氧基-2-萘酚；(Ⅲ)7-氨基-2-萘磺酸；(Ⅳ)5-氨基-2-萘磺酸；(Ⅴ)1,5-二氨基萘；(Ⅵ)7-羥基-1,2-萘并咪唑；(Ⅶ)10-甲基吩噻嗪；(Ⅷ)10-吩噻嗪-丙酸；(Ⅸ)N-羥基琥珀酰亞胺-10-吩噻嗪-丙酸；(Ⅹ)聯苯胺；(Ⅺ)3,3’-二甲基聯基胺；(Ⅻ)3,3’-二甲氧基聯苯胺；(ⅩⅢ)3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺；(ⅩⅣ)4’-羥基-4-聯苯羧酸；(ⅩⅤ)4-氨基-4’-甲氧基茋；(ⅩⅥ)4,4’-二氨基茋-2,2’-二磺酸；(ⅩⅦ)4,4’-二氨基二苯胺；(ⅩⅧ)2,7-二氨基芴；(ⅩⅨ)4,4’-二羥基聯苯；(ⅩⅩ)三苯胺；(ⅩⅪ)10-乙基-4-吩噻嗪羧酸；(ⅩⅫ)10-乙基吩噻嗪；(ⅩⅩⅢ)10-丙基吩噻嗪；(ⅩⅩⅣ)10-異丙基吩噻嗪；(ⅩⅩⅤ)10-吩噻嗪丙酸甲酯；(ⅩⅩⅥ)10-苯基吩噻嗪；(ⅩⅩⅫ)10-烯丙烯吩噻嗪；(ⅩⅩⅧ)10-吩噁嗪丙酸；(ⅩⅩⅨ)10-(3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙基)吩噻嗪；(ⅩⅩⅩ)10-(2-吡咯烷基乙基)吩噻嗪；(ⅩⅩⅪ)10-甲基吩噁嗪；(ⅩⅩⅫ)亞氨基茋；(ⅩⅩⅩⅢ)2-(對氨基苯基)-6-甲基苯并噻唑-7-磺酸；(ⅩⅩⅩⅣ)N-亞芐基-4-聯苯胺；(ⅩⅩⅩⅤ)5-氨基-2-萘磺酸；(ⅩⅩⅩⅥ)7-甲基-2-萘酚；(ⅩⅩⅩⅦ)4,4’-二羥基二苯甲酮；(ⅩⅩⅩⅧ)N-(4-(二甲氨基)亞芐基)-對茴香醛；(ⅩⅩⅩⅨ)3-甲基-2-苯并噻唑啉酮(4-(二甲氨基)亞芐基)腙；(ⅩL)2-乙酰基-10-甲基吩噻嗪；(ⅩLⅠ)10-(2-羥乙基)吩噻嗪；(ⅩLⅡ)10-(2-羥乙基)吩噁嗪；(ⅩLⅢ)10-(3-羥丙基)吩噻嗪；(ⅩLⅣ)4,4’-二甲氧基-N-甲基-二苯胺；(ⅩLⅤ)香草醛連氮(Vanillin azine)。
圖2說明了用膽紅素氧化酶和10-甲基吩噻嗪(MPT)漂白直接蘭DB1(□0μM MPT；◆2.5μM MPT；■5.0μM MPT；◇10.0μM MPT)。增強劑本發(fā)明是關于能增強漆酶活性的化合物的應用，本發(fā)明提供了在下文稱作增強劑(enhancing agent)的，能增強漆酶活性的試劑。
本發(fā)明的增強劑是由至少二個芳環(huán)組成的有機化合物，其中所述芳環(huán)中至少有一個芳環(huán)被一個或多個氮、氧和/或硫原子取代，以及所述芳環(huán)可進一步是稠合環(huán)。
在一個更優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的增強劑是通式Ⅰ的有機化合物 其中A表示單鍵或下述基團之一(-CR11=CR15-)n、(-CR11=N-N=CR15-)、(-NR11-)、(-CR12=N-)n、(-NR11-CR12=N=N=CR15-)、(-NR11-CR12=N-)n、(-CR12=N-NR11)、(-NR11-CR12=CR13)、(-N=N-)，在上述基團中n表示1至6的整數；或者A表示碳、碳基、氮、硫、氧、硒或磷，其中碳、磷和氮可以是未取代的或是由取代基R11所取代的；通式中的取代基R1-R13和R15可以相同或不同，各獨立地表示下述任一基團氫、羥基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺酰基、二氧磷基、膦?；?、膦酰氧基、硫烷二基、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中的氨基甲酰基、氨磺酰基和氨基可以是未取代的或進一步被一或二個取代基R14所取代；其中的苯基可進一步是未取代的或被一個或多個取代基R14所取代；以及其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，以及可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R14所取代的；其中的取代基R14表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、氨基烷基、哌啶子基、哌嗪基、吡咯烷基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲?；?、氨磺酰基和氨基可以是未取代的或進一步由羥基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽，以及氨磺酰基；其中的C1-C5烷基和C1-C5烷氧基可進一步是飽和的或不飽和的，支鏈的或直鏈的，以及可進一步地由下述任一基團一取代或二取代羥基、氨基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽，以及氨磺酰基；或通式中的R5和R6一起形成基團-B-，而B表示單鍵、基團(-CH=CH-)n或基團(-CH=N-)n，其中n表示1-6的整數；或者B表示碳、氮、硫、氧、硒或碲，其中碳和氮可以是未取代的或由上文定義的取代基R14取代；或通式中的取代基R1-R10之中的二個基團一起形成基團-C-,C表示任一下述基團(-CHR11-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n，其中n表示2-4的整數，以及其中的R11如上文定義的取代基；或當上式中的n為1時，通式中的R5和R12，和/或R6和R13一起形成基團-D-，其中D表示下述基團(-CHR11-)(-NR11-)(-CR11=CR15-)(-CR11=N-)(-N=CR11-)(-O-)(＞C=O)或(-S-)，以及其中R11和R15為如上文定義的取代基。
在一具體實施方案中，增強劑是2-(對氨基苯基)-6-甲基-苯并噻唑-7-磺酸、N-(4-(二甲氨基)亞芐基-對茴香醛、3-甲基-2-苯并噻唑啉酮(4-(二甲氨基)亞芐基)腙或香草醛連氮。
在另一優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的增強劑是通式Ⅱ的有機化合物 其中取代基R1-R8可以相同或不同，各自獨立地表示任一下述基團氫、羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中氨基甲酰基、氨磺?；?、以及氨基可進一步是未取代的或由取代基R9一取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R9取代；其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R9所取代；其中取代基R9表示任一下述基團羥基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲酰基、氨磺?；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽以及氨磺?；?；以及其中的C1-C5烷基、C1-C5烷氧基可進一步是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈的，以及可進一步由下述基團一取代或二取代的羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；?；或通式中取代基R1-R8之中的二個基團一起形成基團-B-,B表示下述基團(-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n、(-N=CR9-NR10-)或(-N=N-CR9-)，其中n表示1-3的整數，R9為如上文定義的取代基，以及R10定義如R9。
在更具體的實施方案中，本發(fā)明的增強劑是如下通式的有機化合物。 式中的E表示單鍵、羰基或下述基團之一(CH=CH-)n、(CH=N-)n或(-NR11-)，其中的n表示1至2的整數；取代基R1-R11可以相同或不同，各自獨立地表示下述基團之一氫、羥基、甲?；?、羧基和其酶和鹽、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中的氨基甲酰基、氨磺?；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由取代基R14一取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或由一個或多個取代基R14所取代的；以及其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可進一步是飽和的或不飽和的、支鏈或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R14所取代的；其中的取代基R14表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中氨基甲酯基、氨磺?；桶被蛇M一步是未取代的或由羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代；羥基、氨基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}，以及氨磺?；灰约捌渲械腃1-C5烷基和C1-C5烷氧基可進一步是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的、和進一步由下述基團一取代或二取代羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}，以及氨磺酰基；或該式中的二個取代基R5和R6一起形成-B-,B表示基團(-CH=N-)n、(-CH=CH-)或(-CHR14-)，其中n表示1至2的整數；以及R14是如上文定義的取代基。
在具體實施方案中，增強劑是4-氨基-4’-甲氧基芪、4,4’-二氨基芪-2,2’-二磺酸、亞氨基芪、4,4’-二羥基二苯甲酮、N--亞芐基-4-聯苯胺、4,4’-二氨基二苯胺、4,4’-二甲氧基-N-甲基-二苯胺、2,7-二氨基芴、或三苯基胺。
在另一具體實施方案中，增強劑如下式所述 式中X表示下式基因之一(-O-)、(-S-)、(-NR15-)、(-CHR15-)、(＞C=O)、(-CH=CH-)、(-CH=N-)，取代基R1-9和R15可相同或不同，獨立地表示任一下述基團氫、羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺?；⑾趸?、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中氨基甲酰基、氨磺酰基、以及氨基可進一步是未取代的或由取代基R10-取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R10取代，其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R10所取代；
其中的取代基R10表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔推漉ズ望}、氨磺?；⑾趸?、氨基、苯基、氨基烷基、哌啶子基、哌嗪基、吡咯烷基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲?；被酋；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由羥基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；?；其中的C1-C5烷基和C1-C5烷氧基可進一步是飽和的或不飽和的，支鏈的或直鏈的，以及可進一步地由下述任一基團一取代或二取代羥基、氨基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；?；或通式中的取代基R1-R8中的二個基團一起形成基團-B-,其中B表示下述基團(-CHR10-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n或(-N=CR10-NR11-)，其中n表示1-3的整數，R10是如上文定義的取代基和R11如R10定義。
在具體實施方案中，增強劑是10-甲基吩噻嗪、10-吩噻嗪丙酸、N-羥基琥珀酰亞胺-10-吩噻嗪丙酸鹽或10-乙基-4-吩噻嗪-羧酸、10-乙基吩噻嗪、10-丙基吩噻嗪、10-異丙基吩噻嗪、10-吩噻嗪丙酸甲酯、10-苯基吩噻嗪、10-烯丙基吩噻嗪、10-(3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙基)吩噻嗪、10-(2-吡咯烷基乙基)吩噻嗪、2-乙酰基-10-甲基吩噻嗪、4-羧基-10-吩噻嗪丙酸、10-甲基吩惡嗪、10-乙基吩惡嗪、10-吩惡嗪丙酸、4-羧基-10-吩惡嗪丙酸、10-(2-羥基乙基)吩噻嗪、10-(2-羥基乙基)吩惡嗪或10-(3-羥基丙基)吩噻嗪。
在另一具體實施方案中，增強劑是下式的聯苯衍生物 其中取代基R1-R10可以相同或不同，各自獨立地表示任一下述基團氫、羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中氨基甲?；?、氨磺酰基、以及氨基可進一步是未取代的或由取代基R11一取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R11取代；其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R11所取代；其中取代基R11表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺?；⑾趸?、氨基、苯基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲?；被酋；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽以及氨磺?；灰约捌渲械腃1-C5烷基、C1-C5烷氧基可進一步是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈的，和可進一步由下述基團一取代或二取代的羥基、氨基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；辉诰唧w實施方案中，增強劑是聯苯胺、3,3’-二甲基聯苯胺、3,3’-二甲氧基聯苯胺、3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺、4’-羥基-4-聯苯羧酸，或4,4’-二羥基聯苯。
在另一具體實施方案中，增強劑是下式的萘衍生物 其中取代基R1-R8可以相同或不同，各自獨立地表示任一下述基團氫、羥基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；其中氨基甲?；被酋；?、以及氨基可進一步是未取代的或由取代基R9一取代或二取代；其中的苯基可以是未取代的或進一步由一個或多個取代基R9取代；其中的C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和的或不飽和的、支鏈的或直鏈的，和進一步是未取代的或由一個或多個取代基R9所取代；其中取代基R9表示任一下述基團羥基、甲?；?、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；其中的氨基甲?；?、氨磺?；桶被梢允俏慈〈幕蜻M一步由羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基一取代或二取代；其中的苯基可進一步由一個或多個下述基團取代羥基、氨基、甲酰基、羧基和其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基和其酯和鹽以及氨磺?；?；以及其中的C1-C5烷基、C1-C5烷氧基可進一步是飽和或不飽和的、支鏈或直鏈的，以及可進一步由下述基團一取代或二取代的羥基、氨基、甲?；Ⅳ然推漉ズ望}、氨基甲酰基、磺基和其酯和鹽，以及氨磺?；换蛲ㄊ街腥〈鵕1-R8之中的二個基團一起形成基團-B-,B表示任一下述基團(-N=N-)、(-CH=CH-)n、(-CH=N-)n、(-N=CR9-NR10-)或(-N=N-CR9-)，其中n表示1-3的整數，R9為如上文定義的取代基，以及R10定義如R9。
在具體實施方案中，增強劑是6-羥基-2-萘甲酸、7-甲氧基-萘酚、7-氨基-2-萘磺酸、5-氨基-2-萘磺酸、1,5-二氨基萘、7-羥基-1,2-萘并咪唑、5-氨基-2-萘磺酸或7-甲氧基-2-萘酚。氧化底物的方法另一方面，本發(fā)明提供了一種在增強劑存在下氧化底物的方法。
增強劑可以游離形式，也可以加成鹽的形式存在。
增強劑的濃度可以是0.01-500μM，更優(yōu)選0.1-250μM，最優(yōu)選0.5-100μM。
通常存在著有足夠量的來自空氣的分子氧。漆酶和相關酶本發(fā)明的增強劑是能提高漆酶和漆酶的相關酶的試劑。在本發(fā)明的范圍內，漆酶和漆酶的相關酶是指酶分類為EC 1.10.3.2之中所包括的漆酶，酶分類EC 1.10.3.1中包括的chatechol氧化酶，以及酶分類為EC 1.3.3.5中包括的膽紅素氧化酶或者酶分類EC1.14.99.1中包括的單酚單氧酶。
優(yōu)選的，本發(fā)明的方法中所用的漆酶是由真菌例如栓菌屬(Trametes)例如T.Versicolor或T.Villosa、金錢菌屬(Collybia)、層孔菌屬(Fomes)、香菇屬(Lentinus)、灰側耳菌屬(Pleurotus)、絲核菌屬(Rhizoctonia)如茄屬絲核菌(R.Solani)、曲霉屬(Aspergillus)、鏈孢菌屬(Neurospora)、束柄菌屬(Podospora)、射脈菌屬(Phlebia)如輻射射脈菌(P.radiata)(WO92/01046)革蓋菌屬(Coriolus)例如毛革蓋菌(C.hirstus)(JP2-238885)、毀絲霉屬(Myceliopthora)如M.thermophila、葡萄孢屬(Botrytis)衍生的，膽紅素氧化酶優(yōu)選由漆斑菌屬(Myrothecium)如M.Verrucaria衍生得到。
漆酶或漆酶的相關酶還可以是由下述方法生產的酶，該方法包括在漆酶表達允許條件下的培養(yǎng)介質中培養(yǎng)用重組DNA媒介動物轉化的宿主細胞，該媒介動物有給所述漆酶編碼的DNA序列以及使所述編碼漆酶的DNA序列表達具有編碼功能的DNA序列，以及從培養(yǎng)液中回收漆酶。漆酶活性(LACU)的測定漆酶活性在需氧條件下由丁香醛連氮的氧化作用測定。所產生的紫色在530mm顯色，分析條件是19μm丁香醛連氮，23.2mM乙酸鹽緩沖溶液，pH5.5,30℃，反應時間1分鐘。
1單位的漆酶(LACU)是指在此條件下，每分鐘能使1.0μM丁香醛連氮催化轉化的酶的量。膽紅素氧化酶活性(Sigma Units)的測定1σ單位(Sigma Unit)膽紅素氧化酶是指在PH8.4和30℃下每分鐘氧化1.0μM膽紅素需酶的量。工業(yè)應用在一優(yōu)選實施方案中，發(fā)現本發(fā)明的方法可用于溶液中染料的漂白。
在另一實施方案中，發(fā)現本發(fā)明的方法用于防止染料轉移，例如用于已染色織物的處理(參見例如WO92/18687)或用于洗滌過程中(參見例如WO91/05839)。
相應的，在一具體實施方案中，當幾種織物在洗滌液中一起洗滌時，本發(fā)明提供了一種抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移的方法，該方法包括在增強劑存在下用漆酶或與漆酶相關的酶處理洗滌液，所述織物染料可以是合成染料如偶氮染料，或是天然的或與天然的相同的染料。
在本發(fā)明的第三個實施方案中，發(fā)現本發(fā)明的方法可應用于造紙生產中紙漿的漂白。
與此相應，本發(fā)明提供了一種漂白含本質素材料的方法，特別是漂白造紙生產中的紙漿，該方法包括在本發(fā)明的增強劑存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理木質素或含木質素的材料。
在第四個實施方案中，發(fā)現本發(fā)明的方法可應用于木質素的改性，例如用于制造木材復合材料，如木纖維材料如粗紙板、纖維板，或刨花膠合板，或用于制造木制層壓產品，如層壓柱和層積膠合板。
相應的，本發(fā)明提供了木質素或含木質素材料的酶聚合方法和/或改性方法，該方法包括在本發(fā)明的增強劑存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理木質素或含木質素材料。
在第五個實施方案中，發(fā)現本發(fā)明的方法應用于廢水處理，例如化學工業(yè)和醫(yī)藥工業(yè)、染料制造業(yè)、染廠、紡織工業(yè)或紙漿生產中的廢水的處理(參見例如US4,623,465,或JP-A-2-31887)。
更具體地說，本發(fā)明提供了處理染料制造、染廠、紡織工業(yè)或紙漿制造中的廢水處理方法，該方法包括在本發(fā)明增強劑的存在下用漆酶或漆酶的相關酶處理廢水。洗滌劑組合物按照本發(fā)明，增強劑是作為洗滌劑的組分加入的，就此而論，它是以洗滌劑的添加劑形式包括于洗滌劑組合物之中。洗滌劑添加劑以及洗滌劑組合物中另外還可含有一種或多種洗滌劑中常用的其它酶，例如蛋白酶、脂酶、淀粉酶、角質酶(cutinases)、纖維素酶和過氧化物酶。
更具體的方面，本方面提供了洗滌劑添加劑。通過分別加入含有一種或多種酶的各種添加劑或者通過加入包含有所有這些酶的合并的添加劑使酶包含于洗滌劑組合物之中。本發(fā)明的添加劑，即分別加入或者合并加入的添加劑可制成例如顆粒、液體、漿液等，優(yōu)選的洗滌劑添加劑劑型是顆粒，特別是不起塵顆粒，液體，特別是穩(wěn)定化的液體，漿液，或保護的酶。
不起塵的顆粒可按例如US4,106,991和4,661,452(均為NoVoIndustriA/S專利)公開的方法生產，并且可按本領域已知的方法隨意進行包復，蠟狀包復材料的實例是平均分子量為1000至20000的聚環(huán)氧乙烷產品(聚乙二醇，PEG)；具有16至50環(huán)氧乙烷單元的乙氧基化壬基酚；其中醇含有15至20個碳原子且有15至80環(huán)氧乙烷單元的乙氧基化脂肪醇；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的一、二和三甘油酯。適用于流動床技術的成膜包復材料的實例見英國專利GB1483591。液體酶制劑例如可按給出的方法加入多羥基化合物如丙二醇、糖或糖醇、乳酸或硼酸穩(wěn)定化，其它的酶穩(wěn)定劑是本領域中已知的，保護的酶可按EP238,216公開的方法制備。
本發(fā)明的洗滌劑組合物可以是任何常規(guī)的形式，如粉末、顆粒、糊劑或液體。液體洗滌劑可以是含水的，通常含有高達70％的水和0-30％的有機溶劑，或者是無水的。
洗滌劑組合物含有一種或多種表面活性劑，它們之中的每一種可以是陰離子的、非離子的、陽離子的或兩性離子。洗滌劑中通常含有0-50％陰離子表面活性劑例如直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS)、α-烯烴磺酸鹽(AOS)、烷基硫酸鹽(脂肪醇硫酸鹽)(AS)、醇的乙氧基硫酸鹽(AEOS或AES)、仲烷基磺酸鹽(SAS)、α-磺基脂肪酸甲酯、烷基-或烯基琥珀酸或皂類。還可含有0-40％非離子表面活性劑如醇的乙氧基化物(AEO或AE)、羧化醇的乙氧基化物、壬基酚的乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二甲胺氧化物、乙氧基化脂肪酸單乙醇胺、脂肪酸單乙醇胺，或多羥基烷基脂肪酸酰胺(例如WO92/06154中所述)。
洗滌劑組合物中還可以包括一種或多種其它的酶，如淀粉酶、脂酶、角質酶(cutinases)、蛋白酶、纖維素酶和過氧化物酶。
該洗滌劑可含有1-65％洗滌劑助洗劑或配位劑，例如沸石、二磷酸鹽、二磷酸鹽、膦酸鹽、檸檬酸鹽、次氮基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTMPA)、烷基-或烯基琥珀酸、可溶性硅酸鹽或層狀硅酸鹽(如Hoechst的SKS-6)。洗滌劑也可是非組合的，也就是說基本不合洗滌劑助洗劑。
該洗滌劑可含有一種或多種聚合物，例如羧甲基纖維素(CMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚羧酸酯如聚丙烯酸酯、馬來酸/丙烯酸共聚物和月桂基甲基丙烯酸酯/丙烯酸共聚物。
該洗滌劑可含有漂白系統(tǒng)，它包括諸如過硼酸或過碳酸的H2O2源，它們可與能形成過酸的漂白活化劑如四乙?；叶?TAED)或壬酰氧基苯磺酸鹽(NOBS)結合使用。另外，漂白系統(tǒng)可包括諸如酰胺、酰亞胺或砜類的過氧酸。
本發(fā)明洗滌劑組合物中的酶可用常規(guī)穩(wěn)定劑穩(wěn)定化，穩(wěn)定劑例如多羥基化合物如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物，如芳基硼酸酯，以及該組合物可按例如WO92/19709和WO92/19708所述的制劑。
該洗滌劑還可含有其它常規(guī)的洗滌劑組分，如包括粘土的纖維調理劑、泡沫促進劑、抑泡劑、抗蝕劑、污垢懸浮劑、抗污垢再沉淀劑、染料、抗菌劑、熒光增白劑或香料。
PH值(在使用條件下的水溶液中測定)通常為中性或堿性，如7-11。
在本發(fā)明范圍內洗滌劑組合物的具體形式包括1)制成顆粒的洗滌劑組合物，堆積密度至少為600g/l，它含有-直鏈烷基本磺酸鹽(以酸計) 7-12％-醇的乙氧基硫酸酯(如C12-18醇，1-4％1-2EO)或烷基硫酸鹽(如C16-18)-醇的乙氧基化物 5-9％(如C14-15醇，7EO)-碳酸鈉(為Na2CO3) 14-20％-可溶性硅酸鹽(為Na2O,2SiO2) 2-6％-沸石(為NaAlSiO4) 15-22％-硫酸鈉(為Na2SO4) 0-6％-檸檬酸鈉/檸檬酸(為C6H5Na3O7/C6H8O7)) 0-15％-過硼酸鈉(為NaBO3·H2O) 11-18％-TAED 2-6％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG) 0-3％-酶 0-5％-較小組分(如抑泡劑、香料、熒光 0-5％增白劑、光致漂白劑2)制成顆粒的洗劑劑組合物，堆積密度至少為600g/l，它含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 6-11％-醇的乙氧基硫酸酯(如C12-18醇，1-2EO) 1-3％或烷基硫酸鹽(如C16-18)-醇的乙氧基化物(如C14-15醇，7EO) 5-9％-碳酸鈉(為Na2CO3) 15-21％-可溶性硅酸鹽(Na2O,2SiO2) 1-4％-沸石(為NaALSiO4) 24-34％-硫酸鈉(為Na2SO4) 4-10％-檸檬酸鈉/檸檬酸(為C6H5Na3O7/C6H8O7)) 0-15％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG) 1-6％-酶 0-5％-較小組分(如抑泡劑、香料) 0-5％3)制成顆粒的洗滌劑組合物，堆積密度至少為600g/l，它含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 5-9％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO) 7-14％-皂，如脂肪酸(如C16-22) 1-3％-碳酸鈉(為Na2CO3) 10-17％-可溶性硅酸鹽(為Na2O,2SiO2) 3-9％-沸石(為NaAlSiO4) 23-33％-硫酸鈉(為Na2SO4) 0-4％-過硼酸鈉(為NaBO3·H2O) 8-16％-TAED 2-8％-膦酸鹽(如EDTMPA) 0-1％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG) 1-3％-酶 0-5％-較小組分(如抑泡劑、香料、熒光增白劑) 0-5％4)制成顆粒的洗滌劑組合物，堆積密度至少為600g/l，它含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸汁) 8-12％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO)10-25％-碳酸鈉(為Na2CO3) 14-22％-可溶性硅酸鹽(為Na2O,2SiO2) 1-5％-沸石(為NaAlSiO4) 25-35％-硫酸鈉(為Na2SO4) 0-10％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG) 1-3％-酶 0-5％-較小組分(如抑泡劑、香料) 0-5％5)含水液體洗滌劑組合物，它含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 15-21％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO或C12-15醇，5EO) 12-18％-皂，如脂肪酸(如油酸) 3-13％-鏈烯基琥珀酸(C12-14) 0-13％-氨基乙醇 8-18％-檸檬酸 2-8％-膦酸鹽 0-3％-聚合物(如PVP、PEG) 0-3％-硼酸鹽(為B4O7) 0-2％-乙醇 0-3％-丙二醇 8-14％-酶 0-5％-較小組分(如分散劑，抑泡劑，香料，熒光增白劑 0-5％6)含水結構液體洗滌劑組合物，包括-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 15-21％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO
或C12-15醇，5EO) 3-9％-皂，為脂肪酸(如油酸) 3-10％-沸石(NaAlSiO4) 14-22％-檸檬酸鉀 9-18％-硼酸鹽(為B4O7) 0-2％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如PEG,PVP) 0-3％-粘合劑聚合物，如月桂基甲基丙烯酸酯/丙烯酸共聚物；摩爾比25∶1；MW3800 0-3％-甘油 0-5％-酶 0-5％-較小組分(如分散劑、抑泡劑、香料、 0-5％熒光增白劑)7)制成顆粒的洗滌劑組合物，堆積密度至少為600g/l，它含有-硫酸脂肪醇酯 5-10％-乙氧基化脂肪酸單乙醇酰胺 3-9％-皂，為脂肪酸 0-3％-碳酸鈉(為Na2CO3) 5-10％-可溶性硅酸鹽(為Na2O,2SiO2) 1-4％-沸石(為NaAlSiO4) 20-40％-硫酸鈉(為Na2SO4) 2-8％-過硼酸鈉(為NaBO4·H2O) 12-18％-TAED 2-7％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物、PEG) 1-5％-酶 0-5％-較小組分(如熒光增白劑、抑泡劑、香料) 0-5％8)制成顆粒的洗滌劑化合物，含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 8-14％-乙氧基化脂肪酸單乙醇酰胺 5-11％-皂，為脂肪酸 0-3％-碳酸鈉(為Na2CO3) 4-10％-可溶性硅酸鹽(為Na2O,2SiO2) 1-4％-沸石(為NaAlSiO4) 30-50％-硫酸鈉(為Na2SO4) 3-11％-檸檬酸鈉(C6H5Na3O7) 5-12％-聚合物(如PVP，馬來酸/丙烯酸共聚物、PEG) 1-5％-酶 0-5％-較小組分(如抑泡劑、香料) 0-5％9)制成顆粒的洗滌劑組合物，含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸汁) 6-12％-非離子表面活性劑 1-4％-皂，為脂肪酸 2-6％-碳酸鈉(為Na2CO3) 14-22％-沸石(為NaAlSiO4) 18-32％-硫酸鈉(為Na2SO4) 5-20％-檸檬酸鈉(為C6H5Na3O7) 3-8％-過硼酸鈉(NaBO3·H2O) 4-9％-漂白活化劑(如NOBS或TAED) 1-5％-羧甲基纖維素 0-2％-聚合物(如聚羧酸酯或PEG) 1-5％-酶 0-5％-較小組分(如熒光增白劑、香料) 0-5％10)含水液體洗滌劑組合物，含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 15-23％-醇的乙氧基硫酸酯(如C12-15醇，2-3EO) 8-15％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO或C12-15醇，5EO) 3-9％-皂，為脂肪酸(如月桂酸) 0-3％-氨基乙醇 1-5％-檸檬酸鈉 5-10％-水溶助長劑(如甲苯磺酸鈉) 2-6％-硼酸鹽(為B4O7) 0-2％-羧甲基纖維素 0-1％-乙醇 1-3％-丙二醇 2-5％-酶 0-5％-較小組分(如聚合物、分散劑、香料、熒光增白劑) 0-5％11)含水液體洗滌劑，含有-直鏈烷基苯磺酸鹽(以酸計) 20-32％-醇的乙氧基化物(如C12-15醇，7EO或C12-15醇，5EO) 6-12％-氨基乙醇 2-6％-檸檬酸 8-14％-硼酸鹽(為B4O7) 1-3％-聚合物(如馬來酸/丙烯酸共聚物，粘合劑聚合物如月桂基甲基丙烯酸酯/丙烯酸共聚物和CMC) 0-3％-甘油 3-8％-酶 0-5％-較小組分(如水溶助長劑、分散劑、香料、熒光增白劑) 0-5％12)制成顆粒的洗滌劑組合物，堆積密度至少600g/l，含有-陰離子表面活性劑(直鏈烷基苯磺酸鹽、烷基硫酸鹽、α-烯烴磺酸鹽、α-磺基脂肪酸甲酯、烷基苯磺酸鹽、皂類) 25-40％-非離子表面活性劑(如醇的乙氧基化物) 1-10％-碳酸鈉(Na2CO3) 8-25％-可溶性硅酸鹽(Na2O,2SiO2) 5-15％-硫酸鈉(Na2SO4) 0-5％-沸石(NaA1SiO4) 15-28％-過硼酸鈉(NaBO3·4H2O) 0-20％-漂白活化劑(TAED或NOBS) 0-5％-酶 0-5％-較小組分(如香料、熒光增白劑) 0-3％
13)上述1)～12)的洗滌劑配方，其中的直鏈烷基苯磺酸鹽的含量，或其部分含量被烷基硫酸鹽(C12-C18)代替。
14)上述1)～13)的洗滌劑配方，其中含有穩(wěn)定的或包膠的過酸，它或者作為附加的組分，或者作為已有特定漂白系統(tǒng)的替代物。15)上述3)、7)、9)和12)的洗滌劑組合物，其中過硼酸的含量用過碳酸代替。
16)配成非水洗滌劑液體的洗滌劑組合物，含有液體非離子表面活性劑如線性烷氧基化伯醇，助洗劑系統(tǒng)(如磷酸鹽)，酶和堿。該洗滌劑還可含有陰離子表面活性劑和/或漂白系統(tǒng)。
下面的實施例進一步說明本發(fā)明，并且不以任何形式限制本發(fā)明要求保護的范圍。
實施例1用膽紅素氧化酶和10-甲基吩噻嗪漂白直接蘭1用由Sigma得到的膽紅素氧化酶在有或沒有10-甲基吩噻嗪(MPT)的情況下漂白直接蘭1(DB1)，結果見附表2。使用的條件如下最后濃度緩沖液 50mM磷酸鹽，PH7MPT0,2.5,5,或10μMDB1 ≈Abs605nm=0.6膽紅素氧化酶 0.027Sigma單位/ml試驗由加入酶開始，在605nm測定吸收值5分鐘，溫度25℃。
沒有要求溶解氧保持常量濃度。
圖2證明隨著本發(fā)明增強劑濃度的增加漂白作用提高。
實施例2直接蘭1的漂白膽紅素氧化酶疣孢漆斑菌膽紅素氧化酶購自Sigma(B-0390)。配成含27Sigma單位/ml的儲備液，在使用前儲存在冷凍室。
由Trametes Villosa得到的漆酶800ml Trametes Villosa,CBS678.70肉湯培養(yǎng)基用過濾塞過濾得到澄清濾液，將其用6-8kDa截止閥(Cut-off)通過超濾膜濃縮和洗滌，將1ml濃縮過的樣品加到用0.1M磷酸鹽(PH7)溶液平衡過的Q-Sepharose(瓊脂糖凝膠)HP柱(Pharmacia,Sweden)上，以0.25M左右平緩梯度的NaCL洗出漆酶，將10次試驗的有漆酶活性的餾份合并，用超濾法濃縮至活性達到500LACU/ml。
增強劑化學品購自Sigma-Aldrich,Janssen Chimica,Kodak,Tokyo Kasai Organic Chemicals或Dailchi Pure Chemicals Co.。吩噻嗪和吩惡嗪的N-甲基化衍生物按Cornel Bodea和Ioan Silberg在“RecentAdvances in the Chemistry of Phenothiazines”(Advances in HeterocyclicChemistry,1968,Vol.9,pp321-460)中所述用甲基碘甲基化的方法制備。吩噻嗪和吩惡嗪丙酸按J.Org.Chem,15,1950,pp1125-1130)所述方法制備。吩噻嗪和吩惡嗪的羥乙基和羥丙基衍生物可按G.Cauquil,Bulletin de le Society Chemique de France,1960,P1049所述制備。
由于某些增強劑的溶解度低，在用水稀釋前將它們溶在小量乙醇中。
所用條件如下最后濃度400μl50mM Britton-Robison緩沖液各自為PH5.5和PH7.0 20mM200μlDB1～3.0Abs．單位(610nm)0.6(A610nm)200μl50μM增強劑 10μM200μl酶將各種試劑在30℃恒溫的1cm杯中混合，漂白由加入酶開始。
漂白作用以分光光度法在610nm測定，610nm為DB1的吸收峰，5秒鐘后開始，追蹤測定漂白作用4分鐘。
由列于下文表1-2的結果可知加入本發(fā)明的增強劑后與不加增強劑的試驗相比漂白作用快得多，所列酶的劑量最后培養(yǎng)混合物中的劑量。
表1用如上所述得到的Trametes Villosa漆酶漂白直接蘭DB1,PH5.5(0.1LACV/ml)和PH7.0(1LACV/ml)DB1漂白4分鐘(-4mAbs/4min)增強劑 PH5.5PH7.0無增強劑 0010-吩噻嗪丙酸387 18210-甲基吩噻嗪222 224’-羥基-4-聯苯羧酸 46 344,4’-二氨基茋-2,2’-二磺酸 3.5 66-羥基-2-萘甲酸 12 2010-甲基吩惡嗪364 29610-吩噁嗪丙酸 36426810-乙基-4-吩噻嗪丙酸41117510-(2-羥乙基)吩噻嗪 37318410-(2-羥乙基)吩惡嗪 42919210-(3-羥丙基)吩噻嗪 4282194,4’-二甲氧基-N-甲基二苯胺 210113香草醛連氮 1185表2用由上文所述得到的疣孢漆斑菌膽紅素氧化酶漂白DBl,PH5.5(0.00675 Sigma單位/ml)，和PH7.0(0.0675 Sigma單位/ml)。
DB1漂白4分鐘(-ΔmAbs/4min)增強劑PH5.5PH7.0無增強劑 68 20710-吩噻嗪丙酸 95 24410-甲基吩噻嗪 76 25010-甲基吩噁嗪 143 37410-吩噁嗪丙酸 96 34710-乙基-4-吩噻嗪丙酸 103 29權利要求
1．用酶氧化底物的方法，該酶選自下述一組酶漆酶，chatechol氧化酶，單酚單加氧酶和膽紅素氧化酶，其特征在于存在以下通式所示的增強劑 通式中的A表示單鍵，或下列基團之一(＞C=O),(-CH=CH-),(-CH=N-),(-CH=N-N=CH-),(-NR11-)；以及通式中的取代基R1-R11，可以相同或不同，各獨立地表示下列任何基團氫，羥基，羧基及其酯和鹽，磺基及其酯和鹽，甲氧基，氨基，C1-C5-烷基；該氨基可用甲基取代一次或兩次；而C1-C5-烷基可為飽和的或不飽和的，支鏈的或非支鏈的，非取代的或用一個或多個下列基團取代的羧基及其酯和鹽，和氨基。
2．權利要求1的方法，其中的增強劑是4-氨基-4′-甲氧基茋，4,4′-二氨基茋-2,2′-二磺酸，4,4′-二羥基二苯甲酮，4,4′-二氨基二苯胺，4,4′-二甲氧基-N-甲基-二苯胺，聯苯胺，3,3′-二甲基聯苯胺，3′,3′-二甲氧基聯苯胺，3,3′,5,5′-四甲基聯苯胺，4′-羥基-4-聯苯基羧酸，4,4′-二羥基亞聯苯基，或香草醛聯氮。
3．權利要求1的方法，其中該方法是在溶液中漂白染料的方法。
4．權利要求1的方法，該方法是在幾種織物一起在洗滌液中洗滌時，防止織物染料由著色織物向另一織物轉移的方法。
5．權利要求1的方法，該方法是漂白含木質素材料的方法，特別是漂白造紙生產中的紙漿的方法。
6．權利要求1的方法，該方法是木質素或含木質素材料的酶聚合和/或改性的方法。
7．權利要求6的方法在生產木材復合材料如粗紙板、纖維板和刨花板中的應用，或在制造木制層壓產品如層壓柱或層積膠合板中的應用。
8．權利要求1的方法，該方法是一種廢水處理方法，特別是制藥工業(yè)、化學工業(yè)如染料制造、紡織工業(yè)或紙漿制造中的廢水的處理方法。
9．權利要求1的方法，其中增強劑在該工藝的開始或在該工藝的過程之中加入。
10．權利要求1的方法，其中增強劑的量在0.01-500μM范圍內，更優(yōu)選0.1-250μM，最優(yōu)選0.5-100μM的范圍內。
11．權利要求1的方法，其中的漆酶是由栓菌屬(Trametes)例如T.Versicolor或T.Villosa、金錢菌屬(Collybia)、層孔菌屬(Fomes)、香菇屬(Lentinus)、灰側耳菌屬(Pleurotus)、絲核菌屬(Rhizoctonia)如茄屬絲核(R.Solani)、曲霉屬(Aspergillus)、鏈孢菌屬(Neurospora)、束柄菌屬(Podospora)、射脈菌屬(Phlebia)、毀絲霉屬(Myceliopthora)如M.thermophila、葡萄孢屬(Botrytis)衍生的，或者膽紅素氧化酶優(yōu)選由漆斑菌屬(Myrothecium)如M.Verrucaria衍生得到的。
12．洗滌劑添加劑，當幾種織物一起在洗滌液中洗滌時，它能抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移，該洗滌劑添加劑包括呈現漆酶活性的酶，其特征在于存在如下式所述的增強劑 通式中的A表示單鍵，或下列基團之一(＞C=O),(-CH=CH-),(-CH=N-),(-CH=N-N=CH-),(-NR11-)；以及通式中的取代基R1-R11，可以相同或不同，各獨立地表示下列任何基團氫，羥基，羧基及其酯和鹽，磺基及其酯和鹽，甲氧基，氨基，C1-C5-烷基；該氨基可用甲基取代一次或兩次；而C1-C5-烷基可為飽和的或不飽和的，支鏈的或非支鏈的，非取代的或用一個或多個下列基團取代的羧基及其酯和鹽，和氨基。
13．權利要求12的洗滌劑添加劑，其中的增強劑是4-氨基-4′-甲氧基茋，4,4′-二氨基茋-2,2′-二磺酸，4,4′-二羥基二苯甲酮，4,4′-二氨基二苯胺，4,4′-二甲氧基-N-甲基-二苯胺，聯苯胺，3,3′-二甲基聯苯胺，3′,3′-二甲氧基聯苯胺，3,3′,5,5′-四甲基聯苯胺，4′-羥基-4-聯苯基羧酸，4,4′-二羥基亞聯苯基，或香草醛聯氮。
14．權利要求12的洗滌劑添加劑，其形式為顆粒，優(yōu)選不起塵顆粒；液體，特別是穩(wěn)定的液體；漿液；或者是被保護的酶。
15．洗滌劑組合物，當幾種織物一起在洗滌液中洗滌時，它能抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移，該洗滌劑組合物包括呈現漆酶活性的酶，其特征在于存在一種表面活性劑和以下通式所示的增強劑 通式中的A表示單鍵，或下列基團之一(＞C=O),(-CH=CH-),(-CH=N-),(-CH=N-N=CH-),(-NR11-)；以及通式中的取代基R1-R11，可以相同或不同，各獨立地表示下列任何基團氫，羥基，羧基及其酯和鹽，磺基及其酯和鹽，甲氧基，氨基，C1-C5-烷基；該氨基可用甲基取代一次或兩次；而C1-C5-烷基可為飽和的或不飽和的，支鏈的或非支鏈的，非取代的或用一個或多個下列基團取代的羧基及其酯和鹽，和氨基。
16．權利要求15的洗滌劑組合物，其中的增強劑是4-氨基-4′-甲氧基茋，4,4′-二氨基茋-2,2′-二磺酸，4,4′-二羥基二苯甲酮，4,4′-二氨基二苯胺，4,4′-二甲氧基-N-甲基-二苯胺，聯苯胺，3,3′-二甲基聯苯胺，3′,3′-二甲氧基聯苯胺，3,3′,5,5′-四甲基聯苯胺，4′-羥基-4-聯苯基羧酸，4,4′-二羥基亞聯苯基，或香草醛聯氮。
17．權利要求15的洗滌劑組合物，進一步包括一種或多種其它酶，特別是蛋白酶，脂酶，淀粉酶，纖維素酶，和/或過氧化物酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及在漆酶或漆酶的相關酶和增強劑的存在下氧化底物的方法,更具體地說本發(fā)明涉及在溶液中漂白染料的方法,涉及幾種織物一起在洗滌液中洗滌時抑制織物染料由著色織物向另一織物轉移的方法,涉及漂白含木質素材料,特別是漂白紙張生產用紙漿的方法,涉及紙漿制造廢水的處理方法,以及涉及木質素或含木質素材料的酶聚合和/或改性的方法。
文檔編號D21C9/10GK1319657SQ0013093
公開日2001年10月31日 申請日期2000年11月10日 優(yōu)先權日1993年6月29日
發(fā)明者P·施奈德, A·H·皮德森 申請人:諾沃奇梅茲有限公司