專利名稱：利用化學(xué)發(fā)光的化妝美容方法,照射皮膚美容用的發(fā)光體及化妝、美容用品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用低功率的化學(xué)發(fā)光的美容、化妝方法，還涉及照射皮膚從而用于美容的發(fā)光體和化妝用品、美容用品。
背景技術(shù)：
以往，并沒有人提出以護(hù)膚或活化皮膚為目的而利用光的技術(shù)構(gòu)想。特別是在美容或化妝領(lǐng)域，一直沒有廣泛運(yùn)用到化學(xué)發(fā)光。
在化妝的技術(shù)領(lǐng)域中，其一的原因乃是，光被認(rèn)為會對皮膚產(chǎn)生傷害從而必須要避免其照射，故市面上有許多隔離光線或者防護(hù)的化妝品問世。唯一例外的運(yùn)用是，為了擁有麥色皮膚因而產(chǎn)生的日曬沙龍等場所。
又，在醫(yī)療使用方面，也有利用激光光對皮膚局部使用的方法。
關(guān)于利用激光之類強(qiáng)光的技術(shù)，內(nèi)容如以下所述。
專利文獻(xiàn)1(特開2004-733號公報)揭示一種激光除毛裝置；專利文獻(xiàn)2(特開2003-12487號公報)揭示一種將美容液涂抹在皮膚上，再以激光照射涂抹處進(jìn)行除毛等激光治療的技術(shù)專利文獻(xiàn)3(特開平11-342213號公報)揭示一種肌膚美白的激光吸收輔助帶及其美容方法，其使用在肌膚，特別是臉部肌膚著重之處，可以提高激光的吸收率且達(dá)到一定的吸收效果，可促進(jìn)新陳代謝而有極佳的美容效果。
除了有助于曬黑的目的外，大多數(shù)情況下光用于治療用途，而如陽光一樣的強(qiáng)光會造成皮膚癌、日曬后的色素沉淀或者加速皮膚老化，故一般很少用于美容或化妝用途。
專利文獻(xiàn)1特開2004-733號公報專利文獻(xiàn)2特開2003-12487號公報專利文獻(xiàn)3特開平11-342213號公報

發(fā)明內(nèi)容
本案發(fā)明人，在研究開發(fā)新的美容、化妝方法的過程中，發(fā)現(xiàn)通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚產(chǎn)生的作用，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。本發(fā)明提供一種利用化學(xué)發(fā)光的新型美容及化妝方法，且提供相關(guān)的美容用品、化妝用品、化妝劑、美容劑。
本發(fā)明將一種將兩種液體成分混合后能產(chǎn)生光達(dá)數(shù)分至數(shù)小時且無高溫發(fā)熱現(xiàn)象之化學(xué)發(fā)光體，靠近或者接觸皮膚，再利用此方法來施行美容、化妝作用。(這段話意思是否為本發(fā)明通過將兩種液體混合產(chǎn)生一種無高溫發(fā)熱現(xiàn)象的發(fā)光體，其可以在幾分鐘～幾小時內(nèi)產(chǎn)生光，將該發(fā)光體靠近或者接觸皮膚，從而利用此方法來進(jìn)行美容、化妝)(1)一種通過化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence)反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射的美容和化妝方法。
(2)如(1)所述的美容和化妝方法，該光波長為300～1200nm。
(3)如(1)或(2)所述的美容和化妝方法，所述皮膚是指臉部及軀體的皮膚。
(4)如(1)至(3)任一項(xiàng)所述的美容和化妝方法，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光是通過將兩種液體混合后而產(chǎn)生的。
(5)如(1)至(4)任一項(xiàng)所述的美容和化妝方法，在涂抹皮膚外用劑之后，或者在敷上涂敷劑(pack agent)的同時，以光照射涂抹之處。
(6)如(5)所述的美容和化妝方法，皮膚外用劑或者涂敷劑是指化妝用的組合物或美容組合物。
(7)一種照射皮膚從而美容和化妝用的發(fā)光體，其含有化學(xué)發(fā)光劑。
(8)如(7)所述的照射皮膚從而美容和化妝用的發(fā)光體，所述化學(xué)發(fā)光劑是混合后會發(fā)光的雙液性化學(xué)發(fā)光劑，其以互相隔離狀態(tài)收納于容器內(nèi)，使用時將其混合后再照射皮膚。
(9)如(7)或(8)所述的照射皮膚從而美容和化妝用的發(fā)光體，所述照射皮膚的光波長為300～1200nm。
(10)一種美容和化妝用品，由皮膚外用劑或口服劑，與(7)至(9)任一項(xiàng)所述的照射皮膚從而美容和化妝用的發(fā)光體組合而成。
(11)一種以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚照射的美白化妝和美白美容方法。
(12)如(141)所述的美白化妝及美白美容方法，其以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而抑制黑色素細(xì)胞增加和/或抑制黑色素合成。
(13)如(11)或(12)所述的美白化妝及美白美容方法，該化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光是藍(lán)熒光、黃熒光、綠熒光、橘熒光、紅熒光中的一種或由兩種以上組合而成的。
(14)一種美白用發(fā)光體，含有發(fā)光劑，能以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射。
(15)如(14)所述的美白用發(fā)光體，該發(fā)光劑能以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而抑制黑色素細(xì)胞增加和/或抑制黑色素合成。
(16)如(14)或(15)所述的發(fā)光體，該發(fā)光劑可發(fā)出藍(lán)熒光、黃熒光、綠熒光、橘熒光、紅熒光中的1種或2種以上的熒光。
(17)如(11)至(13)任一項(xiàng)所述的美白化妝及美白美容方法，將橄欖葉萃取物涂抹于皮膚表面，或作為涂敷劑敷用，亦或口服后，以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射。
(18)一種美白化妝及美白美容用品，由含有藍(lán)色化學(xué)發(fā)光反應(yīng)熒光劑(bluefluorescent light)的美白用發(fā)光體，與含有橄欖葉萃取物的皮膚外用劑或涂敷劑和/或口服劑組成。
(19)一種化妝及美容方法，以橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中的1種或多種化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而促進(jìn)纖維母細(xì)胞(fibroblast)增殖和/或膠原蛋白的合成。
(20)一種如(19)所述的化妝及美白方法，將抗壞血酸(ascorbic acid)或其鹽和/或抗壞血酸衍生物涂抹于皮膚表面，或作為涂敷劑敷用，亦或口服后，再以橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中的1種或多種化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖和/或膠原蛋白的合成。
(21)一種發(fā)光體，含有發(fā)光劑，其可發(fā)出橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中的1種或多種熒光的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光，對皮膚照射可促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖和/或膠原蛋白的合成，(22)一種化妝及美白用品，由(21)所述的發(fā)光體，與含有抗壞血酸或其鹽和/或抗壞血酸衍生物的皮膚外用劑，或涂敷劑及/或口服劑組成。
(23)一種以藍(lán)熒光照射皮膚的光老化(photoaging)抑制方法。
(24)如(23)所述的光老化抑制方法，以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而抑制吡啶二聚物(pyridine dimer)生成。
(25)如(23)或(24)所述的光老化抑制方法，以光解酶(photolyase)涂抹于皮膚表面，或者作為涂敷劑敷用和/或口服后，以藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射。
(26)一種抑制光老化用的發(fā)光體，含有能以藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射的化學(xué)發(fā)光劑。
(27)一種抑制光老化用的化妝及美容用品，是由含有能以藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射的化學(xué)發(fā)光劑與含有光解酶的皮膚外用劑或涂敷劑和/或口服劑組成。
(28)一種以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的熒光和/或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的近紅外線對皮膚照射從而增加血流量的方法。
(29)如(28)所述的增加血流量的方法，所述化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的熒光為橘熒光。
(30)一種增加血流量用的發(fā)光體，含有可發(fā)出熒光和/或近紅外線的化學(xué)發(fā)光劑。
(31)如(30)所述的增加血流量用的發(fā)光體，該熒光為橘熒光。
(32)一種化妝及美容用品，其由(30)或(31)所述的增加血流量用的發(fā)光體與皮膚外用劑組成。
(33)如(10)、(18)、(22)、(27)、(32)任一項(xiàng)所述的化妝及美容用品，該皮膚外用劑為護(hù)膚化妝料、臉部涂敷劑、熱敷劑、貼布和經(jīng)皮吸收劑中的任一項(xiàng)。
(34)一種皮膚覆蓋材料，如(7)、(8)、(9)、(10)、(14)、(15)、(16)、(18)、(21)、(22)、(26)、(27)、(30)、(31)、(32)所述的發(fā)光體、美容及化妝用品，其中任一項(xiàng)，是用于涂抹覆蓋臉部、身體。
本發(fā)明可達(dá)到以下效果(1)因?yàn)槭抢没瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光，由于其能量低，對皮膚或人體不會造成傷害且不會發(fā)熱，因此使用上相當(dāng)安全。
(2)使用雙液性的化學(xué)發(fā)光劑，可在使用時通過混含而發(fā)光，所以攜帶方便，不受使用地點(diǎn)或時間的限制，便利性高。
(3)能控制化學(xué)發(fā)光的波長，可利用從紫外線至紅外線之間寬廣波長范圍內(nèi)的特定波長。又，也可利用高亮度的發(fā)光。
(4)化學(xué)發(fā)光體可設(shè)計為涵蓋從點(diǎn)到面的尺寸，從而可隨適當(dāng)?shù)膱鏊?、面積而利用。
(5)可控制發(fā)光時間為數(shù)分鐘至10小時以上，應(yīng)用性廣。
(6)具有細(xì)胞活化作用、效果。
(7)可與化妝品、外部醫(yī)藥用品、經(jīng)皮吸收劑、口服劑(經(jīng)口口服劑)等組合使用，根據(jù)組合對象可達(dá)到倍增的作用、效果。
(8)與調(diào)配美容成分或化學(xué)成分的物品合并使用，可獲得倍增的效果。
(9)具有美白效果，特別是通過抑制黑色素產(chǎn)生細(xì)胞的增殖或黑色素合成的作用，可達(dá)到美白作用。藍(lán)熒光、綠熒光、黃熒光、橘熒光、紅熒光具有最佳的美白效果。
(10)即使皮膚暴露在陽光等紫外線的環(huán)境下，之后再以熒光對皮膚進(jìn)行照射，即可抑制黑色素的合成、皮膚變黑，以及抑制斑點(diǎn)、雀斑形成。
(11)將藍(lán)色熒光的照射與橄欖葉萃取液組合使用，對降低人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖率而言，效果是協(xié)調(diào)倍增的。
(12)通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，可達(dá)到抗老化的效果。尤其是用橘熒光、紅熒光、綠熒光進(jìn)行照射，可促進(jìn)纖維母細(xì)胞的增殖、膠原蛋白的合成，與抗壞血酸或其衍生物組合使用時，更可發(fā)揮倍增的改善效果。
(13)通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，可達(dá)到抑制光老化的效果。尤其是以藍(lán)色熒光進(jìn)行照射，可抑制紫外線對皮膚細(xì)胞DNA的損傷，從而抑制光老化。與光解酶組合使用時，其作用效果更好。
(14)通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚照射，具有改善血液流通的作用、效果。尤其是以近紅外線、橘熒光對皮膚進(jìn)行照射，可增加血液流通量。
(15)本發(fā)明化學(xué)發(fā)光體的重量輕、體積小，在形狀、大小、厚度、柔軟度方面可自由設(shè)計，使用的限制少。本發(fā)明的化學(xué)發(fā)光照射體可配合臉部或身體各部位所欲使用的部位來設(shè)計其形狀、大小。其可設(shè)計為重量輕體積小且具柔軟性的型態(tài)，可通過使用粘合劑從而貼附于皮膚上。


圖1(a)為紅熒光分光放射亮度的曲線圖。
圖1(b)為綠熒光分光放射亮度的曲線圖。
圖1(c)為藍(lán)熒光分光放射亮度的曲線圖。
圖1(d)為黃熒光分光放射亮度的曲線圖。
圖2為高亮度型熒光分光亮度放射亮度的曲線圖。
圖3為一般熒光型的照度變化曲線圖。
圖4為高亮度熒光型的照度變化曲線圖。
圖5為血管寬度的流通觀察曲線圖。
圖6為細(xì)胞增殖率的曲線圖。
圖7為熒光照射對B16細(xì)胞增殖的影響的曲線圖。
圖8為熒光照射對黑色素合成率的影響的曲線圖。
圖9為高亮度藍(lán)色熒光照射對三維皮膚模型黑色素合成抑制效果的長條圖。
圖10為高亮度藍(lán)色熒光照射對人體表皮黑色素細(xì)胞增殖率影響的曲線圖。
圖11為纖維母細(xì)胞增殖率的曲線圖。
圖12為膠原蛋白合成率的曲線圖。
圖13為各色熒光照射下纖維母細(xì)胞增殖率(含1％血清培養(yǎng)基)的曲線圖。
圖14為各色熒光照射下纖維母細(xì)胞增殖率(含5％血清培養(yǎng)基)的曲線圖。
圖15為高亮度熒光照射下纖維母細(xì)胞增殖率的曲線圖。
圖16為高亮度藍(lán)色熒光照射下促進(jìn)光解酶活化效果的曲線圖。
圖17為近紅外線(IR)化學(xué)發(fā)光體的發(fā)光譜曲線圖。
圖18為近紅外線(IR)化學(xué)發(fā)光體的功率曲線圖。
圖19為血流量的示意圖。
圖20為近紅外線(IR)熒光照射下血流量的曲線圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光進(jìn)行照射，具有美白、抗老化、抗光老化、改善血液流通、提高照射部位及周圍皮膚的溫度、細(xì)胞增殖的作用效果。另，根據(jù)照射波長或亮度的不同，上述作用效果也有隨之不同。
上述作用效果，也可單獨(dú)用于美容或化妝乃至于醫(yī)療用途，且可與經(jīng)皮吸收劑或口服劑組合從而有助于促進(jìn)其吸收。
化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光，是無發(fā)熱現(xiàn)象的光，因?yàn)榫哂袑τ谟行螤?、大小、凹凸的皮膚表面的適應(yīng)性，以及使用時間、保存性等特性，故十分安全、便利。此化學(xué)發(fā)光可配合發(fā)光劑，以及調(diào)整波長或強(qiáng)度、時間，進(jìn)而控制其作用效果。發(fā)出的光則有各種顏色的熒光、紅外線類型的光。
在美容用途上，對于解決老化現(xiàn)象而帶來的明顯班點(diǎn)、雀斑、膚色暗沉、黑眼圈、肌膚亮度減少、肌膚活性降低、細(xì)紋、皺紋、皮膚松弛這些問題相當(dāng)有成效。
關(guān)于老化現(xiàn)象的原因，有例如血液循環(huán)不良使膚色不夠紅潤、黑色素沉淀累積、肌膚彈性降低而造成皮膚表面凹凸不平產(chǎn)生陰影、角層肥厚使肌膚透明感降低、皮膚表面的不規(guī)則反射使光澤降低、隨年齡增長膚色發(fā)黃等。這些現(xiàn)象的直接表現(xiàn)即是出現(xiàn)“肌膚暗沉”的現(xiàn)象，在不了解其發(fā)生原因的情況下，僅僅通過化妝來掩飾有難度。
通過上述化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光進(jìn)行照射，可促進(jìn)血液流通而提高透明感及光澤、促進(jìn)新陳代謝，以及激活細(xì)胞，故能夠輕松應(yīng)對暗沉到老化現(xiàn)象的問題。
此化學(xué)發(fā)光對皮膚的照射，可應(yīng)用于化妝領(lǐng)域、醫(yī)藥外部用品、化妝劑、美容劑、化妝用品、美容用品、醫(yī)療用品、美容皮膚科、運(yùn)動傷害治療、肌肉疲勞治療等多方面。
在其它應(yīng)用方面，利用高亮度發(fā)光體，可用于調(diào)整日常節(jié)律(生理時鐘)及自律神經(jīng)；利用其促進(jìn)細(xì)胞增殖的優(yōu)點(diǎn)，可用于促進(jìn)傷口快速恢復(fù)的用品上；可應(yīng)用于發(fā)光創(chuàng)傷帶或治痘修護(hù)化妝用具等；其使皮膚溫度上升和改善血液流通的作用，具有促進(jìn)代謝、除去皮膚的老舊廢物、或促進(jìn)毛發(fā)生長的效果；另將此功能與經(jīng)皮吸收劑組合，可促進(jìn)經(jīng)皮吸收劑的效果。例如與面膜等護(hù)膚產(chǎn)品或熱敷貼藥等組合，可發(fā)揮極大效用。
此化學(xué)發(fā)光劑可存儲于輕薄柔軟的包裝體內(nèi)，包裝體一側(cè)設(shè)有發(fā)光面，其可與皮膚直接接觸，發(fā)光面以透光性的材質(zhì)為佳，且存儲化學(xué)發(fā)光劑的包裝體的體積大小可隨使用部位而制作。又，發(fā)光體的載體可使用無紡布或海綿，設(shè)定其整體或僅有其與皮膚的接觸面為柔軟材質(zhì)，使其能給皮膚好的觸感。對于柔軟性材質(zhì)，可使用硅樹脂等柔軟透明的合成樹脂薄膜。
認(rèn)為以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射可達(dá)到美白作用的效果。化學(xué)發(fā)光與紫外線不同，以熒光進(jìn)行照射并不會促進(jìn)黑色素合成，反而可抑制黑色素產(chǎn)生細(xì)胞的增殖，具有抑制細(xì)胞內(nèi)黑色素合成的功效。，例如藍(lán)熒光、黃熒光、綠熒光、橘熒光、紅熒光，進(jìn)行照射具有不同的效果。
藍(lán)色熒光與黃色熒光具有抑制黑色素合成的效果，尤其是只用藍(lán)色熒光照射，就可達(dá)到20％抑制黑色素合成的效果。
紅熒光、高亮度型的綠熒光、高亮度型的橘熒光則可以抑制黑色素細(xì)胞增殖，在細(xì)胞數(shù)目減少的時，黑色素整體的量也同時減少。
熒光的照射可選擇性地抑制活性黑色素細(xì)胞，使黑色素產(chǎn)生細(xì)胞無法增殖，且抑制各細(xì)胞中黑色素的合成，進(jìn)而達(dá)到美白效果，故可利用化學(xué)發(fā)光來進(jìn)行美白化妝或美白美容。
化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光與經(jīng)皮吸收劑組合使用后的效果，可以通過橄欖葉萃取物、藍(lán)色熒光的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來證實(shí)。
在經(jīng)皮吸收或經(jīng)口吸收橄欖葉萃取物的狀態(tài)下，以高亮度型藍(lán)色熒光照射后，人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖率降低，故涂抹或口服橄欖葉萃取物與高亮度型藍(lán)色熒光的照射兩者并用能降低人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖率，進(jìn)而達(dá)到美白效果。
橄欖葉萃取物當(dāng)作為經(jīng)皮吸收劑使用時，具體有液體化妝料成分或涂敷劑成分等使用方式。
以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，可抑制因紫外線照射所造成的黑色素合成以及暴露在紫外線下所造成的皮膚變黑，發(fā)揮美白、美容的功能。
UVB(紫外線B)照射雖然會促進(jìn)黑色素合成，但以高亮度藍(lán)色熒光照射后，證實(shí)其可抑制UVB照射對黑色素合成的促進(jìn)。因此，皮膚即使暴露在陽光等紫外線的環(huán)境下，之后再以高亮度藍(lán)色熒光等化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的熒光對皮膚進(jìn)行照射，就可抑制黑色素的合成、皮膚變黑，以及斑點(diǎn)、雀斑的形成。
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，發(fā)現(xiàn)可達(dá)到預(yù)防皮膚老化的效果。關(guān)于皮膚老化的原因有，纖維母細(xì)胞再生能力衰退、膠原蛋白合成效果變差。通化學(xué)發(fā)光對皮膚進(jìn)行照射，證實(shí)具有促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖、膠原蛋白合成的功能。此處的化學(xué)發(fā)光，例如為橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光。
例如，以橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光、高亮度型橘熒光、高亮度型綠熒光進(jìn)行照射，可幫助纖維母細(xì)胞增殖，促進(jìn)纖維母細(xì)胞的膠原蛋白合成。
化學(xué)發(fā)光與經(jīng)皮吸收劑或經(jīng)口吸收劑組合使用后，證實(shí)其可促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖及膠原蛋白合成。其中可使用抗壞血酸衍生物作為其組合使用劑。
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，皮膚中的膠原蛋白量會增加、肌膚恢復(fù)緊致、撫平皺紋、改善肌膚彈性及柔軟度等，可達(dá)到預(yù)防老化的效果。此外，與含有壞血酸衍生物等試劑組合使用時，更可發(fā)揮倍增的改善效果。在此可利用液體化妝料或面膜霜、口服劑作為組合用劑。
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，發(fā)現(xiàn)可抑制皮膚光老化。
細(xì)胞在UVB照射下，會使DNA受到損傷而產(chǎn)生吡啶二聚物。此情況反復(fù)進(jìn)行就成為所謂的光老化。在擁有光合成能力的原核生物中，存在有修復(fù)此DNA鹽基之二聚作用(dimerization)的光解酶，通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光進(jìn)行照射，證實(shí)可實(shí)現(xiàn)此光解酶的活化。
例如，以高亮度型藍(lán)色熒光照射，可降低吡啶二聚物含有率。此外，將可有助于降低吡啶二聚物含有率的光解酶與高亮度型藍(lán)色熒光合并使用時，更可加倍降低吡啶二聚物含有率，增強(qiáng)抑制光老化的效果。
以各種熒光照射，發(fā)現(xiàn)可促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖。
貧營養(yǎng)化狀況下以化學(xué)發(fā)光照射，可促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖，證實(shí)化學(xué)發(fā)光的功能。例如，使用一般型的紅熒光、綠熒光、黃熒光、高亮度型橘熒光、高亮度型綠熒光進(jìn)行照射，發(fā)現(xiàn)具有細(xì)胞活化效果。其中活性最佳的乃是綠色熒光。
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光進(jìn)行照射，可增加血液流通量。
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚機(jī)械能照射，可增加血液流通量，可直接改善血液流通狀況、提高皮膚溫度，對于促進(jìn)新陳代謝、促進(jìn)經(jīng)皮吸收效果、增進(jìn)照射處對口服劑的功用，都可通過改善血液流通而達(dá)成。
有關(guān)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光，例如可使用近紅外線或橘熒光。
<化學(xué)發(fā)光體>
化學(xué)發(fā)光系利用在化學(xué)上會產(chǎn)生光的二元系統(tǒng)(two component system)來進(jìn)行，一般，系使被稱為「草酸鹽(oxa1ate)」(草酸鹽或草酸鹽酯)及「活化劑(activator)」之兩種化學(xué)溶液成分產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。然后產(chǎn)生化學(xué)熒光。
上述雙成分，可以使用各種方法在活化前進(jìn)行物理分離。大部分情況下，將含有一種成分的封閉易碎玻璃容器，收容在含有另一種成分外側(cè)為柔軟的容器內(nèi)。此外部容器為內(nèi)包有第2成分及充填易碎玻璃容器而使其封閉，其與內(nèi)側(cè)玻璃容器的密接，例如彎曲外部容器所產(chǎn)生的力量造成玻璃容器被破壞，則第1成分就被釋放出來，使第1和第2成分混合后發(fā)光?；瘜W(xué)熒光發(fā)光裝置的目的在于使得可使用的光傳送出來，所以外部容器通常都使用聚乙烯、聚丙烯、硅樹脂等透明或半透明材料來構(gòu)成，讓化學(xué)熒光系統(tǒng)所產(chǎn)生的光可透過其容器壁。又，根據(jù)化學(xué)熒光用組合物不同，可產(chǎn)生各種色彩的光。此裝置也可設(shè)計成讓光只從特別選擇的部位透過，且于構(gòu)成容器的包裝要素上，為適應(yīng)照射部位其材質(zhì)可使用柔軟性薄膜。
有關(guān)化學(xué)發(fā)光，過去已有各種相關(guān)發(fā)明被揭示。例如，日本特開2003-238823號公報(化學(xué)熒光組合物)、日本特開2002-138278號公報(化學(xué)發(fā)光系統(tǒng))、日本特開平11-045602號公報(化學(xué)發(fā)光體)、日本特表2003-532253號公報(化學(xué)發(fā)光法的發(fā)光單元)等發(fā)明。
化學(xué)發(fā)光體之組合物，系以調(diào)配出熒光劑的A溶液，與調(diào)配出氧化劑的B溶液所構(gòu)成。A溶液是由酯溶液與熒光物質(zhì)(fluorescent substance)、鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)等所構(gòu)成；B溶液是由過氧化氫、催化劑、鄰苯二甲酸丁酯(butyl phthalate)等所構(gòu)成。此A溶液與B溶液在使用前各自分開存儲同一個容器內(nèi)，使用時再混合而產(chǎn)生發(fā)光反應(yīng)。
關(guān)于兩種成分，舉例來說，可使用過氧化氫成分與草酸鹽酯成分作為熒光體成分，化學(xué)發(fā)光催化劑媒(catalyst)則可使用水楊酸鋰(Lithium Salicylate)等羧酸鋰鹽(Lithium Carboxylate)催化劑等二元發(fā)光系統(tǒng)用催化劑(catalyst)。通過二元發(fā)光系統(tǒng)用催化劑(catalyst)，可降低反應(yīng)時的活化性能量，也能減少發(fā)光過程的溫度依賴性。
其中之一的成分可浸漬于無紡布或海綿等后使用，可提高柔軟性與對身體凹凸的適應(yīng)性。
此外關(guān)于具體的成分，可使用以下日本特開2003-238823號公報中所揭示的成分。化學(xué)發(fā)光反應(yīng)之成分溶液含有作為化學(xué)發(fā)光反應(yīng)成分之草酸鹽或活化劑。草酸鹽(草酸鹽或草酸鹽酯)若是一般化學(xué)發(fā)光反應(yīng)所使用則沒有特別限制，可為雙(2，6-二氯(dichloro)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸鹽、雙(2，4，6-三氯苯基(trichlorophenyl))草酸鹽、雙(3-三氟甲基(trifluoromethyl)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸鹽、雙(2-甲基(methyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸鹽、雙(1，2-二甲基(dimethyl)-4，6-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸鹽、雙(2，4-二氯苯基(dichlorophenyl))草酸鹽、雙(2，5-二硝基苯(dinitrophenyl))草酸鹽、雙(2-甲?；?formyl)-4-硝基苯(nitrophenyl))草酸鹽、雙(五氯苯(pentachlorophenyl))草酸鹽、雙(1，2-二氫(dihydoro)-2-羰基(oxo)-1-啶基(pyridyl))乙二醛(glyoxal)、雙-N-phthalmydil oxalate)、雙(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbopentoxyphenyl)草酸鹽、雙(2，4，5-三氯(trichloro)-6-carbobutoxyphenyl)草酸鹽、雙(2，4，6-三氯苯基(trichlorophenyl))草酸鹽、雙(2，4，5-三氯(trichloro)-6-pentoxyphenyl)草酸鹽。
活化劑則使用一般過氧化物成分。過氧化物成分包含過氧化氫化合物溶液、過氧化氫化合物、或以稀釋劑稀釋過的過氧化化合物。上述過氧化氫化合物，包含過氧化氫與產(chǎn)生過氧化氫的化合物。過氧化物成分中，以過氧化氫為佳、過氧化氫與溶劑(solvent)的溶液，亦可使用過硼酸鈉、過氧化鈉等無水過氧化氫化合物。又，能產(chǎn)生過氧化氫的任何化合物皆可使用。形成活化劑溶液的溶劑(solvent)雖沒有特別限制，但以檸檬酸三乙酯(triethyl citrate)和鄰苯二甲酸二甲酯(dimethylphthalate)為佳。
第1聚合物樹脂粒子和第2聚合物樹脂粒子可使用各種聚合物，一般沒有限定，但可為聚乙烯(polyethylene)、聚丙烯(polypropylene)、聚氯乙烯(polyvinylchlorie)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate)、聚乙烯苯甲酸(polyvinylbenzoate)、聚醋酸乙烯(polyvinyl acetate)、聚乙烯吡咯烷酮纖維素(cellulosepolyvinylpyrrolidone)、聚丙烯酰氨(polyacrylamide)、環(huán)氧化物(epoxide)、硅類、聚乙烯丁醛(polyvinyl butyral)、聚氨酯(polyurethane)、尼龍、聚甲醛(polyacetal)、聚碳酸酯(polycarbonate)、聚酯(polyester)及聚醚(polyether)。又，可使用架橋聚合物(cross polymer)，例如聚苯乙烯(polystyrene)-聚乙烯苯(polyvinylbenzene)、聚丙烯酰氨-聚甲烯雙丙烯酰胺(polymethylene bisacrylamide)、聚丁二烯(polybutadiene)共聚物等。其中以聚氯乙烯樹脂為佳。
關(guān)于熒光體的成分，可使用以下如日本特開2002-138279號公報中所揭示的成分。例如，蒽(anthracene)、取代的蒽、苯并蒽(benzo anthracene)、菲(phenanthrene)、取代的菲、四并苯(naphthacene)、取代的四并苯、五并苯(penthacene)、取代的五并苯、芘(perylene)、取代的芘、酮紫(Violanthrone)、取代的酮紫取代基等至少具有3個縮合環(huán)的共軛多環(huán)芳香族化合物(conjugated polycyclic aromaticcompounds)。上述化合物的取代基為苯基、低級烷基(C1～C16)、氯基(chloro)、溴基(bromo)、氰基(cyano)、烷氧基(alkoxy)(C1～C16)。較佳熒光物質(zhì)為9，10-雙(苯乙炔(phenylethynyl))蔥、1-甲氧基(methoxy)-9，10-雙(苯乙炔)蔥、芘、1，5-二氯-9，10-雙(苯乙炔)蔥、1，8-二氯-9，10-雙(苯乙炔)蔥、紅螢烯紅熒烯(mbrene)、一單氯及二氯取代9，10-雙(苯乙炔)蔥、5，12-(苯乙炔)四苯(tetracene)、9，10-雙苯基恩雙苯基蒽(diphenylanthracene)、16，17-羥二己基蒽酮紫(dihexyloxy violanthrone)，2-甲基-9，10-bis-(苯乙炔)蔥、9，10-雙-(4-甲氧基苯(methoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、9，10-雙-(4-乙氧基苯(ethoxyphenyl))-2-氯蒽(chloroanthracene)、16，17-蒽酮紫(didecichloxyviolanthrone)、路瑪近·紅(LUMOGEN RED、發(fā)出紅色的芘二甲酰亞胺(perylenedicarboximide)熒光劑)、路瑪近·黃(LUMOGEN YELLOW、發(fā)出黃色的芘二甲酰亞胺(perylene dicarboximide)熒光劑)、路瑪近·橘(LUMOGEN ORANGE、發(fā)出橘色的芘二甲酰亞胺(perylne dicarboximide)熒光劑)、5，12-雙-(苯乙炔)并四苯、5，6，11，12-四苯基并四苯(tetraphenyl naphthacene)及其混合物。
根據(jù)這些組合，可得到波長為300～1200nm的發(fā)射光，此外根據(jù)與催化劑等的配合，也可控制發(fā)光反應(yīng)的速度。而發(fā)光波長或發(fā)光強(qiáng)度，也可通過其劑量的調(diào)整加以改變。本發(fā)明實(shí)施例中，使用兩種強(qiáng)弱不同的熒光強(qiáng)度與近紅外線來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。為方便敘述，較強(qiáng)的一方就以高亮度型稱呼。
現(xiàn)今在治療等方面所使用的激光波長為560～1200nm，所以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)所得到的光的波長，乃足以涵蓋上述激光的波長。其中以下列幾種最為實(shí)用，IPL(Intense Pulsed Light)560～1200nm、LLLT(低功率激光治療lower reactivelevellaser therapy)830nm、用于運(yùn)動傷害治療等的激光波長630nm、780nm、800nm、830nm、904nm。
<化學(xué)發(fā)光劑>
本實(shí)施例使用強(qiáng)弱2種熒光，為方便敘述，亮度高的稱為“高亮度型”、低的稱為“一般型”。熒光的發(fā)光力根據(jù)發(fā)光劑的設(shè)計而可以改變，故本實(shí)施例使用品以下特征的發(fā)射光。
本實(shí)施例中使用日本奧美尼株式會社(OMNIGLOWJAPAN CO.LTD.)制(CYALUME Light shape)blue(以下稱為藍(lán)熒光)、Light shape green(以下稱綠熒光)、Light shape yellow(以下稱黃熒光)、Light shape orange(以下稱橘熒光)、Light shape red(以下稱紅熒光)5種一般型與高亮度型熒光體“高亮度型藍(lán)熒光”、“高亮度型綠熒光”、“高亮度型黃熒光”、“高亮度型橘熒光”、“高亮度型紅熒光”5種高亮度型熒光體。
上述5種一般型，其分光放射亮度是，紅熒光為波長605nm，亮度800×10-5W/(sr·m2·nm)以上，黃熒光為波長550nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以上，綠熒光為波長510nm，亮度450×10-5W/(sr·m2·nm)以上，藍(lán)熒光為波長450nm，亮度260×10-5W/(sr·m2·nm)以上的最高值(peak)。
上述5種高亮度型，其分光放射亮度是，高亮度型紅熒光為波長660nm，亮度0.006W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型橘熒光為波長625nm，亮度0.009W/(sr·m2·nm)，波長525nm，亮度0.004W/(sr·m2·nm)以上、高亮度型黃熒光為波長555nm，亮度0.011W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型綠熒光為波長520nm，亮度0.015W/(sr·m2·nm)以上，高亮度型藍(lán)熒光為波長450nm，亮度0.007W/(sr·m2·nm)以上的最高值。
將這些熒光測量例以圖表呈現(xiàn)，圖1(a)～圖1(d)為一般型熒光，圖2為高亮度型。
<照射熒光特性>
熒光的照度隨時間變化的特性以表1、表2、圖3及圖4表示。表1及圖3表示一般型綠熒光、藍(lán)熒光、橘熒光、紅熒光的數(shù)值。表2及圖4表示高亮度型綠熒光、橘熒光、藍(lán)熒光、紅熒光分?jǐn)?shù)值。這些都將使用在實(shí)施例2至實(shí)施例7中。
表1

表2

實(shí)施例1<改善血液流通>
通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光進(jìn)行照射，可擴(kuò)張血管寬度，具有改善血液流通的作用。
本實(shí)施例中使用橘熒光化學(xué)發(fā)光體。
觀察實(shí)驗(yàn)，從15分至65分的50分鐘用橘熒光照射，經(jīng)過100分鐘后從185分至205分的20分鐘再以橘熒光照射，血管寬度的觀察以圖5表示，包含其前后共235分鐘內(nèi)觀察的血管寬度變化。通過上述步驟可觀察到，照射開始15分鐘后，血管寬度開始擴(kuò)張，照射30分鐘后停止照射，從45分至65分保持?jǐn)U張的狀態(tài)，照射停止80分鐘以上就回復(fù)到實(shí)驗(yàn)開始前的血管寬度，再照射后從185分至擴(kuò)張停止為止，保持?jǐn)U張40分鐘，停止(205分)后經(jīng)過30分鐘逐漸恢復(fù)到大約平常的狀態(tài)。
血管寬度的測量如以下所示。
測量方法在恒溫恒濕度的測量室內(nèi)，室溫23℃，濕度30％的條件下進(jìn)行測量。
1.在測量室內(nèi)保持10分～15分的穩(wěn)定狀態(tài)(穩(wěn)定tranquil state)，測量左手中指的一處固定位置。
2.在固定的部位，以橘熒光照射50分鐘，間隔10分鐘測量數(shù)次。
3.之后，間隔1小時后再度恢復(fù)穩(wěn)定后，進(jìn)行橘熒光照射。
4.照射20分鐘內(nèi)間隔10分鐘進(jìn)行測量。
使用紅色熒光的化學(xué)發(fā)光體來照射前臂內(nèi)側(cè)部2個地方的皮膚后，觀察照射區(qū)域的手肘側(cè)A部位與非照射區(qū)域的手腕側(cè)B部位的皮膚溫度變化，可發(fā)現(xiàn)皮膚溫度會上升而改善血液流通，同時與皮膚外用劑合并使用，可得到促進(jìn)經(jīng)皮吸收的結(jié)果。其測量結(jié)果如表3所示。
5次觀察的平均結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在被照射區(qū)域A部位，由于紅色照射溫度會有0.4℃的上升，在照射區(qū)域周圍的手腕部位，由于紅色熒光的照射溫度會有0.7℃的上升。
表3


因此，以無發(fā)熱現(xiàn)象的化學(xué)反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，可發(fā)現(xiàn)血管寬度會擴(kuò)張，同時使照射部位及其周圍部位的皮膚溫度上升。
<細(xì)胞增殖>
以紅熒光、藍(lán)熒光、橘熒光3種化學(xué)反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚細(xì)胞照射之后，觀察細(xì)胞增殖的現(xiàn)象。其結(jié)果以圖6表示。
使用橘熒光與紅熒光可觀察PMG(作為細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的指標(biāo))與同等的增殖率。
又，PMG為左旋維生素C磷酸鎂鹽(L-Ascorbic Acid Phosphate Magnesium SaltN-Hydrate)的簡稱。
與對照組比較，PMG添加組與橘熒光照射組對細(xì)胞增殖有促進(jìn)意義。
實(shí)驗(yàn)如以下方法進(jìn)行。
1.細(xì)胞正常人體皮膚纖維母細(xì)胞(NHF)2.化學(xué)發(fā)光體CYALUME Light shape blue(藍(lán)熒光)、orange(橘熒光)、red(紅熒光)發(fā)售公司；日本奧美尼株式會社3.檢驗(yàn)方法(1)將NHF2.0×104cells/well，以DMEM·10％S(+)培養(yǎng)基植入24孔培養(yǎng)皿(24well plate)。
(2)培養(yǎng)5天匯合(confluence)后，交換為無色無血清DMEM培養(yǎng)基。
(3)以熒光照射(4小時)。正向?qū)φ諡?00nM PMG添加組。
(4)觀察細(xì)胞型態(tài)(×40)。
(5)使用MTT試驗(yàn)法，以測量波長540nm、對照波長655nm進(jìn)行比色分析法。細(xì)胞增殖率以未經(jīng)實(shí)驗(yàn)處理的對照組為100％，以下列計算式計算。
4.計算式細(xì)胞增殖率(％)＝(〔樣本添加光學(xué)濃度值(以下簡稱OD)(540nm)〕-〔樣本添加OD(655nm)〕)/(〔對照組OD(540nm)〕-〔對照組OD(655nm)〕)×100實(shí)施例2<熒光照射下黑色素的合成>
通過熒光對細(xì)胞的照射可抑制黑色素細(xì)胞的增殖與黑色素的合成。對黑色素細(xì)胞增殖的影響如表4及圖7所示，對細(xì)胞黑色素合成的影響如表5及圖8所示。
(實(shí)驗(yàn)方法)1.細(xì)胞老鼠的黑色細(xì)胞種(B16細(xì)胞)2.化學(xué)發(fā)光體(日本奧美尼株式會社制)一般型blue(藍(lán)熒光)、orange(橘熒光)、red(紅熒光)、green(綠熒光)、yellow(黃熒光)；高亮度類型橘色(橘色熒光)、紅色(紅色熒光)、綠色(綠色熒光)3.檢驗(yàn)方法(1)將B16細(xì)胞3.6×103cells/well，以MEM·10％S(+)．葡萄糖胺培養(yǎng)基植入24孔培養(yǎng)皿(24well plate)。n＝8(2)培養(yǎng)5天之后，以MEM·10％S(+)·茶堿(theophylline)培養(yǎng)基交換。
(3)將熒光發(fā)光體與培養(yǎng)皿接觸并照射熒光，一般型為4小時，高亮度型為30分鐘。對照組為非熒光照射組，正向?qū)φ战M為1mM維生素C(抗壞血酸)添加組。
(4)照射3天后回收細(xì)胞，用0.1％SDS的生理食鹽水將細(xì)胞溶解，測量260nm(細(xì)胞量的指標(biāo))和475nm(黑色素量的指標(biāo))的吸光度，算出細(xì)胞增殖率和每單位細(xì)胞的黑色素合成率。
B16細(xì)胞增殖率如表4及圖7所示，每單位細(xì)胞的黑色素合成率如表5及圖8所示。
4.計算式B16細(xì)胞增殖率(％)＝樣本吸光值(以下簡稱Abs)(260nm)/對照組Abs(260nm)×100每單位細(xì)胞的黑色素合成率(％)＝〔樣本(475nm)/樣本(260nm)〕/〔對照組Abs(475nm)/對照組Abs(260nm)〕×100
表4

表5

從表4及圖7的結(jié)果顯示，以一般型紅熒光、高亮度型的綠熒光、高亮度型橘熒光照射，可明顯達(dá)到抑制黑色素細(xì)胞增加的效果。
以紅熒光、高亮度型綠熒光、橘熒光對皮膚照射，可清楚了解其抑制黑色素瘤細(xì)胞增殖、黑色素細(xì)胞增殖的效果。從以上本發(fā)明的實(shí)施例，可獲得美白效果。
從表5及圖8的結(jié)果顯示，藍(lán)熒光、黃熒光照射群，可明顯抑制每單位細(xì)胞黑色素的合成。
和紫外線不同，以熒光照射不會促進(jìn)黑色素合成，而藍(lán)、黃熒光則可達(dá)到明顯抑制黑色素合成的效果。尤其是照射藍(lán)色熒光，可達(dá)到20％抑制黑色素合成的效果。
以一般型紅熒光、高亮度型綠熒光、高亮度型橘熒光照射，可抑制黑色素細(xì)胞的增殖。由于細(xì)胞數(shù)目減少，全體的黑色素量也因而減少。
因?yàn)檎丈錈晒獠粫种评w維母細(xì)胞的增殖，反而可選擇性地抑制活性化黑色素細(xì)胞增殖，而達(dá)到美白效果。
實(shí)施例3<黑色索合成實(shí)驗(yàn)>
(實(shí)驗(yàn)方法)對三維皮膚模型(黑色素調(diào)光器(MEL-300A))(MatTek公司制)照射紫外線0、48、96小時后，分別以1W/m2的強(qiáng)度照射1J/m2的UVB及/或高亮度型藍(lán)色應(yīng)關(guān)(日本奧美尼株式會社制)1小時，培養(yǎng)7天。
將三維皮膚模型以1N(標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度)氫氧化鈉煮沸溶解，測出黑色素量的指標(biāo)為350nm的吸光度，以下列算式算出黑色素合成率，其結(jié)果如圖9所示。
以未照射UVB、高亮度型藍(lán)熒光中任何一種的組織的溶解液為對照組。
算式〔黑色素合成率〕＝〔各處理時組織溶解液在350nm的吸光度〕/〔對照組組織溶解液在350nm的吸光度〕×100對于人體三維皮膚模型，以UVB照射會促進(jìn)黑色素合成，但以高亮度藍(lán)熒光照射可達(dá)到抑制因UVB照射所造成的黑色素合成。因此，即使皮膚暴露在陽光等紫外線的環(huán)境下，之后再以藍(lán)色熒光等對皮膚進(jìn)行照射，就可抑制黑色素的合成、皮膚變黑，及斑點(diǎn)、雀斑的形成，達(dá)到美白效果，使皮膚可達(dá)到抗光老化。
實(shí)施例4<人體表皮黑色素細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)>
(實(shí)驗(yàn)方法)將人體表皮黑色素細(xì)胞20000cells/cm2使用添加HMGS(黑色素細(xì)胞生長成分)的人體表皮黑色素細(xì)胞用基礎(chǔ)培養(yǎng)基medium154S(倉敷紡織株式會社制)植入24孔培養(yǎng)皿。
經(jīng)過24小時培養(yǎng)后，將樣本替換至為添加有橄欖葉萃取物的培養(yǎng)基(如下記制造例所述)，或作為空白樣本的50％丁二醇水溶液的培養(yǎng)基，以高亮度藍(lán)熒光(日本奧美尼株式會社制)照射1小時后，放置培養(yǎng)72小時。
用磷酸生理食鹽水(以下稱PBS(-))洗凈細(xì)胞后，對含有1W/W％的月桂基(dodecyl)硫酸鈉且以PBS(-)溶解得到的細(xì)胞溶解液，測量260nm的吸光度，以下列算式計算出細(xì)胞增殖率。
以添加空白樣本、不照射高亮度藍(lán)熒光的細(xì)胞溶解液為對照組。
橄欖葉萃取物的添加濃度與黑色素細(xì)胞的增殖率兩者的關(guān)系，該結(jié)果如圖10中所示。
橄欖葉萃取物(橄欖葉萃取物制造例)將1公斤干燥的橄欖葉以90W/W％乙醇浸泡1周后，再濃縮、冷凍干燥后，用50W/W％丁二醇水溶液溶解為1W/W％。
算式〔細(xì)胞增殖率〕＝〔樣本添加時吸光度(260nm)〕/〔對照組吸光度(260nm)〕×100對于人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖，以高亮度藍(lán)熒光照射1小時后雖還看不出改變，但添加橄欖葉萃取物后再以高亮度藍(lán)熒光照射，人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖率會明顯(添加0.5％橄欖葉萃取物時)降低。
與高亮度藍(lán)熒光照射合并使用時，橄欖葉萃取物對降低人體表皮黑色素細(xì)胞增殖率具有加倍的效果。因此，以藍(lán)熒光照射皮膚，可抑制人體表皮黑色素細(xì)胞的增殖，進(jìn)而可達(dá)到美白的效果。
實(shí)施例5<促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖及膠原蛋白合成實(shí)驗(yàn)>
使用一般型紅熒光、高亮度型橘熒光照射纖維母細(xì)胞，可促進(jìn)纖維母細(xì)胞的增殖及纖維母細(xì)胞中膠原蛋白的合成。關(guān)于纖維母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表6及圖11所示，關(guān)于膠原蛋自的合成的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表7及圖12所示。
(實(shí)驗(yàn)方法)1.細(xì)胞；纖維母細(xì)胞(NHF)2.化學(xué)發(fā)光體(日本奧美尼株式會社制)一般型紅(紅熒光)、高亮度型橘((橘熒光)3.膠原蛋白數(shù)量測量以Takara PIP kit工具(寶生物工程株式會社制)測量I型膠原蛋白碳端原勝肽(以下稱PIP)數(shù)量。
4.檢驗(yàn)方法(1)將NHF2.0×104cells/well以DMEM·10％S(+)培養(yǎng)基植入24孔培養(yǎng)皿(2)培養(yǎng)5日后，替換為無色無血清DMEM培養(yǎng)基。
(3)以熒光發(fā)光體接觸24孔培養(yǎng)皿，照射熒光(30分鐘)。正向?qū)φ战M為100mM PMG添加組。
(4)開始照射24小時后，回收培養(yǎng)上清液。
以Takara PIP kit工具(寶生物工程株式會社制)測量PIP數(shù)量，接著使用MTT試驗(yàn)法，以測量波長540nm、對照波長655nm進(jìn)行比色分析法。細(xì)胞增殖率以未經(jīng)實(shí)驗(yàn)處理的對照組為100％，以下列計算式計算。
細(xì)胞增殖率(％)＝(〔樣本添加OD(540nm)〕-〔樣本添加OD(655nm)〕)/(〔對照組OD(540nm)〕-〔對照組OD(655nm)〕)×100膠原蛋白合成率使用PIP數(shù)量與MTT試驗(yàn)法的結(jié)果，以下列算式計算。
膠原蛋白合成率(％)＝{樣本PIP數(shù)量/(〔樣本添加OD(540nm)〕-〔樣本添加OD(655nm)〕)}/{對照組PIP數(shù)量/(〔對照組OD(540nm)〕-〔對照組OD(655nm)〕)}×100表6

由表6及圖11的纖維母細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，用一般型紅熒光、高亮度型橘熒光照射24小時后，在測量細(xì)胞增殖率的促進(jìn)膠原蛋白合成群中，一般型紅熒光、高亮度型橘熒光同樣都具有明顯促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖的效果。和PMG合并使用時，一般型紅熒光、高亮度型橘熒光的照射下，纖維母細(xì)胞也有明顯增殖現(xiàn)象。
表7

由表7及圖12的測量數(shù)據(jù)顯示，每單位細(xì)胞的膠原蛋白合成率中，在一般型紅熒光、高亮度型橘熒光照射群具有明顯促進(jìn)PMG與相同程度的膠原蛋白合成的效果。
以一般型紅熒光、高亮度型橘熒光照射纖維母細(xì)胞，可促進(jìn)纖維母細(xì)胞的增殖及膠原蛋白的合成。又，和PMG合并使用時，更加能促進(jìn)纖維母細(xì)胞的增殖、膠原蛋白的合成。因此，以一般型紅熒光、高亮度型橘熒光等化學(xué)發(fā)光熒光對皮膚照射，可增加肌膚中膠原蛋白的數(shù)量、增加肌膚活性、撫平皺紋、改善彈性與柔軟度、達(dá)到防止老化的效果。又，與含有PMG的皮膚外用劑合并使用，則可獲得加倍的改善效果。
實(shí)施例6<熒光照射下纖維母細(xì)胞的增殖>
以各種熒光對纖維母細(xì)胞進(jìn)行照射，可了解其對纖維母細(xì)胞具有增殖(proliferation)作用。然后進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)，測量結(jié)果如圖13、14、15所示?？偨Y(jié)的評價結(jié)果如表8所示。(實(shí)驗(yàn)方法)1.細(xì)胞纖維母細(xì)胞(NHF)2.化學(xué)發(fā)光體(日本奧美尼株式會社制)一般型熒光blue(藍(lán)熒光)、orange(橘熒光)、red(紅熒光)、yellow(黃熒光)、green(綠熒光)、高亮度型熒光orange(橘熒光)、高亮度型熒光green(綠熒光)3.檢驗(yàn)方法(1)將NHF2.5×104cells/well以DMEM·10％S培養(yǎng)基植入96孔培養(yǎng)皿。
(2)次日，制備無色DEME 5％，并替換為含有1％FBS的培養(yǎng)基。
(3)以化學(xué)發(fā)光體接觸培養(yǎng)皿并照射熒光。以熒光照射0.5、1、2、4小時，高亮度型則只照射0.5小時。以5％CO2、37℃的狀態(tài)培養(yǎng)5天。
(4)使用MTT試驗(yàn)法，以測量波長540nm、對照波長655nm進(jìn)行比色分析法。細(xì)胞增殖率以未經(jīng)實(shí)驗(yàn)處理的對照組為100％，以下列計算式計算。
細(xì)胞增殖率(％)＝(〔樣本添加OD(540nm)〕-〔樣本添加OD(655nm)〕)/(〔控制組OD(540nm)〕-〔控制組OD(655nm)〕)×100表8

明顯差異(()內(nèi)為負(fù)的明顯差異)由圖13、圖14及表8中一般型熒光照射的統(tǒng)計結(jié)果顯示，在5％FBS培養(yǎng)基以綠熒光照射1小時、4小時，以黃熒光照射2小時，都有明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果。
在1％FBS培養(yǎng)基以紅熒光照射2小時，以綠熒光照射0.5小時、1小時、4小時，以黃熒光照射2小時，都有明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果。
在黃色熒光照射組可觀察得出，到2小時為止有隨照射時間增長而效果增加的傾向。
由圖15及表8中以高亮度型(0.5小時照射群)熒光照射的測量結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，在使用高亮度型、1％FBS·DMEM培養(yǎng)基的組別中，以橘熒光與綠熒光照射組具有明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果。尤其是以綠色熒光照射，約有1.5倍的增殖效果。
添加5％FBS培養(yǎng)基，只照射綠熒光則具有明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果。
本實(shí)驗(yàn)組中，F(xiàn)BS濃度越低，則越容易出現(xiàn)促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果。
使用一般型紅熒光、綠熒光、黃熒光，具有細(xì)胞活化效果，而對于綠熒光而言，不論FBS濃度的高低，都具有細(xì)胞活化效果。
又，高亮度型中橘熒光、綠熒光具細(xì)胞活化效果，同樣的在高濃度FBS的情形下，以綠色熒光最具活性。根據(jù)以上的結(jié)果，可推斷出最具活性的熒光色為綠色。
實(shí)施例7<增進(jìn)光解酶活性實(shí)驗(yàn)>
細(xì)胞因UVB的照射而使DNA受損，產(chǎn)生嘧啶二聚物(pyrimidine dimer)。如此反復(fù)累積下，就成為所謂的光老化。擁有光合成作用的原核生物，存有修復(fù)這種DNA鹽基之二聚作用的光解酶(photolyase)，已發(fā)現(xiàn)該光解酶會由于可見光而活化(香妝品科學(xué)研究開發(fā)專門志期刊2002年6月號，49～53頁)，但在熒光發(fā)光體照射下會提高其活性的報告則尚未有人提出。
探討高亮度藍(lán)色熒光照射對光解酶活性的作用，并探討熒光發(fā)光體與化妝品有效成份合并使用下的效果。
(實(shí)驗(yàn)方法)將人體表皮硬蛋白質(zhì)細(xì)胞7.0×105cells/well植入φ60mm培養(yǎng)皿(dish)，經(jīng)一晚的培養(yǎng)后替換為Hanks(-)培養(yǎng)基，以0.5J/m2(1W/m2)UVB照射。再替換為添加Humedia-KG的Epilife培養(yǎng)基(倉敷紡織株式會社制)，添加樣本(空白樣本為50％丁二醇，添加光解酶0.04Units、0.4Units(嘧啶二聚物修復(fù)活力))后，以高亮度藍(lán)熒光(奧美尼株式會社制)照射1小時。以不添加光解酶、不照射高亮度型藍(lán)熒光為對照組。
以UVB照射6小時后，使用DNA提取試劑(DNAzol reagent)(Invitrogen公司制)根據(jù)規(guī)定方法從細(xì)胞回收DNA。
嘧啶二聚物數(shù)量的測量結(jié)果如圖16所示。
(測量嘧啶二聚物數(shù)量的方法)
用該DNA以下列所示的方法測量嘧啶二聚物的數(shù)量。
將1％硫酸魚精蛋白(protamine sulfate)液植入96孔培養(yǎng)皿，在37℃下培養(yǎng)2小時。用無菌水洗凈培養(yǎng)皿，干燥后將提取的DNA分別以2μg植入各培養(yǎng)皿，在于37℃下培養(yǎng)20小時。接著以含有0.05％Tween20的PBS(PBS-T)液洗凈后，放入以含有2％脫脂乳的PBS所制備的胸線嘧啶二聚體單株抗體中，在37℃下培養(yǎng)1小時。然后用PBS-T洗凈，植入HPR結(jié)合山羊抗鼠標(biāo)IgGd抗體，在37℃下培養(yǎng)1小時。繼續(xù)用PBS(PBS-T)洗凈后，另外以PBS(-)洗凈，添加3，3’，5，5’四甲基聯(lián)苯胺(tetramethylbenzidine)溶液(1-StepTMTurbo TMB-ELISA(pierce公司制))，以室溫培養(yǎng)后，以2N硫酸使其停止反應(yīng)。測量在450nm的吸光度，以下列算式算出每2μg DNA的嘧啶二聚物含有率。
光解酶使用藍(lán)綠藻(cyanobacteria)屬的藍(lán)細(xì)菌(anacystic nidulans)，添加AGI Dermatics公司制PHOTOSOMES(R)，其中含有41Units/mL的光解酶。
算式〔嘧啶二聚物含有率(％)〕＝〔樣本添加時吸光度(450nm)〕/〔對照組吸光度(450nm)〕×100圖16為表示測量的嘧啶二聚物含有率。
未添加光解酶、以高亮度藍(lán)熒光照射組的嘧啶二聚物的含有率約為對照組的1/2。
添加0.04Units、0.4Unit光解酶時，嘧啶二聚物的含有率與對照組相比，也約為1/2，但光解酶的添加量即使從0.04Units增加為10倍的0.4Units，在降低嘧啶二聚物含有率的效果上并無差異。然而，高亮度藍(lán)色熒光與光解酶合并使用時，則嘧啶二聚物的含有率會降低，尤其是，以0.4Units與高亮度型藍(lán)色熒光合并使用時，嘧啶二聚物的含有率可降低至約為對照組的1/4。和對照組相比，可以明顯降低嘧啶二聚物含有率的是以高亮度藍(lán)熒光照射、0.04Units光解酶與高亮度型藍(lán)熒光合并使用組、及0.4Units光解酶與高亮度型藍(lán)熒光合并使用組，而光解酶與高亮度藍(lán)熒光合并使用時，可達(dá)到加倍抑制光老化的效果。
特別地，化學(xué)發(fā)光的照射或光解酶的作用可達(dá)到抑制光老化的效果。高亮度型藍(lán)熒光的照射，或與光解酶合并使用下照射高亮度藍(lán)熒光，可抑制因紫外線照射造成皮膚細(xì)胞的DNA損傷，進(jìn)而抑制光老化。
實(shí)施例8
<化學(xué)發(fā)光的近紅外線照射下血流增加實(shí)驗(yàn)>
以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)得到的近紅外線對皮膚照射，觀察血流量的變化。
以化學(xué)發(fā)光得到的近紅外線，其測量例表示時如圖17、18所示。
其實(shí)驗(yàn)條件如表9所示，影像例如圖19所示，各受驗(yàn)者的血流量變化狀態(tài)如圖20所示。
表9


例如受驗(yàn)者其中一人在測量前，照射15分鐘后，照射15分鐘后再經(jīng)過10分鐘的影像，如圖19(a)(b)(c)所示，從圖中可觀察出影像的明亮部份增加，并可看出即使照射結(jié)束經(jīng)過10分鐘，血流量依舊為增加的情況。
從圖20中將影像數(shù)值化而表示各受驗(yàn)者血流量的變化表，可發(fā)現(xiàn)照射后比照射前血流量增加1.5倍至3倍。甚至照射結(jié)束10分鐘后所有人依舊沒有下降而為增加的情況，故可得知其短期的照射而可達(dá)到長期的效果。
實(shí)施例9<使用經(jīng)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)>
使用短邊為50mm、長邊為70mm的橢圓形、且中央部份厚度為8mm的光透過性薄膜制的綠熒光袋，使用同形狀的非熒光袋為對照物。
受驗(yàn)者的5人，右邊臉頰使用非熒光袋(空白樣本)，左邊臉頰使用發(fā)出綠光的綠熒光袋，1天1次，于晚上進(jìn)行30分鐘對左右兩邊臉頰的接觸，持續(xù)進(jìn)行5天，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得知其對肌膚活性的效果，結(jié)果如表10所示。
其結(jié)果為，從第1天開始所有人都能感受到肌膚活性的改善，第3天有3人、第5天有4人感到活性改善。沒有感覺變化的為0人，因此可確定以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的熒光照射對肌膚活性的改善具有效果。
以綠熒光照射，并沒有感覺不適的人。
表10

權(quán)利要求
1.一種以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射的美容和化妝方法。
2.如權(quán)利要求1所述的美容和化妝方法，其特征是，所述的光波長在300～1200nm范圍內(nèi)。
3.如權(quán)利要求1和2所述的美容和化妝方法，其特征是，所述皮膚是指臉部和軀體皮膚。
4.如權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的美容和化妝方法，其特征是，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光通過將兩種液體成分混合后產(chǎn)生。
5.如權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的美容和化妝方法，其特征是，在涂抹皮膚外用劑之后，或者在敷上涂敷劑的同時，以光照射涂抹處。
6.如權(quán)利要求5所述的美容和化妝方法，其特征是，皮膚外用劑或者涂敷劑是指化妝組合物或美容組合物。
7.一種照射皮膚美容和化妝用的發(fā)光體，其特征是，其含有化學(xué)發(fā)光劑。
8.如權(quán)利要求7所述的照射皮膚美容和化妝用的發(fā)光體，其特征是，所述化學(xué)發(fā)光劑是混合后會產(chǎn)生發(fā)光的雙液性化學(xué)發(fā)光劑，其以隔離狀態(tài)存儲于一個容器內(nèi)，使用時將其混合后再照射皮膚。
9.如權(quán)利要求7和8所述的照射皮膚美容和化妝用的發(fā)光體，其特征是，照射皮膚的光波長在300～1200nm的范圍內(nèi)。
10.一種美容及化妝用品，其特征是，其由皮膚外用劑或口服劑與權(quán)利要求7～9任一項(xiàng)所述的照射皮膚美容和化妝用的發(fā)光體所組合而成。
11.一種以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射的美白化妝及美白美容方法。
12.如權(quán)利要求11所述的美白化妝及美白美容方法，其特征是，以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚照射，進(jìn)而抑制黑色素細(xì)胞增加和/或抑制黑色素合成。
13.如權(quán)利要求11和12所述的美白化妝及美白美容方法，其特征是，該化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光是選自藍(lán)熒光、黃熒光、綠熒光、橘熒光、紅熒光中的1種或2種以上的組合。
14.一種美白用發(fā)光體，其含有發(fā)光劑，能以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射。
15.如權(quán)利要求14所述的發(fā)光體，其特征是，該發(fā)光劑能以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而抑制黑色素細(xì)胞增加和/或抑制黑色素合成。
16.如權(quán)利要求14和15所述的發(fā)光體，其特征是，該發(fā)光劑可發(fā)出選自藍(lán)熒光、黃熒光、綠熒光、橘熒光、紅熒光中的1種或2種以上的熒光。
17.如權(quán)利要求11～13任一項(xiàng)所述的美白化妝及美白美容方法，其特征是，將橄欖葉萃取物涂抹于皮膚表面，或作為涂敷劑敷用，亦或口服后，以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的藍(lán)熒光對皮膚照射。
18.一種美白化妝及美白美容用品，其特征是，其由含有藍(lán)色化學(xué)發(fā)光反應(yīng)熒光劑的美白用發(fā)光體與含有橄欖葉萃取物的皮膚外用劑或涂敷劑和/或口服劑組成。
19.一種化妝及美容方法，其特征是以橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中1種或多種化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖和/或膠原蛋白的合成。
20.如權(quán)利要求19所述的化妝及美白方法，其特征是，將抗壞血酸或其鹽和/或抗壞血酸衍生物涂抹于皮膚表面，或作為涂敷劑敷用，亦或口服后，再以橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中的1種或多種化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖和/或膠原蛋白的合成。
21.一種發(fā)光體，其特征是含有發(fā)光劑，可發(fā)出橘熒光、紅熒光、綠熒光、黃熒光4種中的1種或多種熒光的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光，對皮膚進(jìn)行照射可促進(jìn)纖維母細(xì)胞增殖和/或膠原蛋白的合成。
22.一種化妝及美白用品，其特征是由權(quán)利要求21所述的發(fā)光體與含有抗壞血酸或其鹽和/或抗壞血酸衍生物的皮膚外用劑，或涂敷劑及/或口服劑組成。
23.一種以藍(lán)熒光對皮膚照射的光老化抑制方法。
24.如權(quán)利要求23所述的光老化抑制方法，其特征是，以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射，進(jìn)而抑制吡啶二聚物(pyridine dimer)生成。
25.如權(quán)利要求23和24所述的光老化抑制方法，其特征是，以光解酶涂抹于皮膚表面，或者作為涂敷劑敷用和/或口服后，以藍(lán)熒光對皮膚照射。
26.一種抑制光老化用的發(fā)光體，其特征是含有能以藍(lán)熒光對皮膚進(jìn)行照射的化學(xué)發(fā)光劑。
27.一種抑制光老化用化妝及美容用品，其特征是，其由含有能以藍(lán)熒光對皮膚照射的化學(xué)發(fā)光劑與含有光解酶的皮膚外用劑或涂敷劑和/或口服劑組成。
28.一種以化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的熒光和/或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的近紅外線對皮膚進(jìn)行照射以增加血流量的方法。
29.如權(quán)利要求28所述的增加血流量的方法，其特征是，所述化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的熒光為橘熒光。
30.一種增加血流量用的發(fā)光體，含有可發(fā)出熒光和/或近紅外線的化學(xué)發(fā)光劑。
31.如權(quán)利要求30所述的增加血流量用的發(fā)光體，其特征是，所述熒光為橘熒光。
32.一種化妝及美容用品，其特征是由權(quán)利要求30或31所述的增加血流量用的發(fā)光體與皮膚外用劑組成。
33.如權(quán)利要求10、18、22、27、32項(xiàng)任一項(xiàng)所述的化妝及美容用品，其特征是，所述皮膚外用劑為護(hù)膚化妝料、臉部涂敷劑、熱敷劑、貼布、經(jīng)皮吸收劑中的任一種。
34.一種皮膚覆蓋材料，其特征是如申請專利范圍第7、8、9、10、14、15、16、18、21、22、26、27、30、31、32所記載之發(fā)光體、美容及化妝用品，其中任一項(xiàng)，是用于涂抹覆蓋臉部、身體。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種使用化學(xué)發(fā)光的美容法、化妝法、以及照射皮膚從而美容用的發(fā)光體以及美容用品。
文檔編號A61Q19/00GK1917919SQ200580004750
公開日2007年2月21日 申請日期2005年2月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月13日
發(fā)明者田村茂昭, 榎本有希子, 宇田正紀(jì) 申請人:株式會社芳珂, 日本奧美尼發(fā)光株式會社