伊馬替尼及其衍生物在制備治療藥物成癮的藥物中的新用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了伊馬替尼及其衍生物的新用途。本發(fā)明提供了伊馬替尼及其衍生物在制備預(yù)防和/或治療藥物成癮的藥物中的新用途及在制備預(yù)防和/或治療藥物戒斷后復(fù)吸的藥物中的新用途。本發(fā)明采用經(jīng)典評價成癮的大鼠敏化和條件位置偏愛動物模型，分別觀察伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼對大鼠的條件位置偏愛形成戒斷后復(fù)燃行為和敏化行為表達(dá)的影響，結(jié)果表明伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼對嗎啡成癮有抑制作用，且具有嗎啡成癮戒斷后的防復(fù)吸效果。
【專利說明】
伊馬替尼及其衍生物在制備治療藥物成癮的藥物中的新用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及伊馬替尼及其衍生物的新用途，具體為伊馬替尼及其衍生物在制備治 療藥物成癮的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 藥物成癮是一種以失去控制能力、強迫性用藥行為為主要特征的慢性復(fù)發(fā)性腦疾 病，機制復(fù)雜(Leshner，1997)，用藥者在戒斷后會出現(xiàn)強烈戒斷綜合征，導(dǎo)致開始的戒毒難 以徹底實施并復(fù)吸，是戒毒治療的難點。國際禁毒公約將依賴性藥物分為三類:麻醉藥品、 精神藥物和其他。其中麻醉藥品又分為阿片類、可卡因類、大麻類等;精神藥物分為鎮(zhèn)靜催 眠藥及抗焦慮藥如巴比妥類、中樞興奮劑如苯丙胺類、致幻劑麥角二乙胺等;其他的還包括 酒精、煙草和揮發(fā)性有機溶劑等。藥物成癮已成為世界性的公共衛(wèi)生和社會問題，嚴(yán)重危害 人類健康，影響社會穩(wěn)定與和諧發(fā)展。2015年聯(lián)合國World Drug Report顯示，問題毒品使 用人數(shù)登記在冊的大約為2.7億人，嚴(yán)重影響社會和諧與經(jīng)濟的發(fā)展。
[0003] 目前，針對藥物依賴的戒毒治療已經(jīng)積累了很豐富的經(jīng)驗，對于軀體戒斷癥狀可 通過脫毒治療得以控制，但對于由停藥引起的心理渴求導(dǎo)致復(fù)吸仍然難以控制，是目前國 內(nèi)外戒毒治療的難點。國內(nèi)外常用的藥物依賴戒斷后心理渴求的治療方法為替代治療，心 理渴求仍難以消除，只能終身服藥，從而降低危害。因此，目前尚缺乏有效的戒毒治療藥物 及方案，研發(fā)特異有效治療藥物成癮心理渴求的新藥迫在眉睫。
[0004] 伊馬替尼（格列衛(wèi)，imatinib，Novartis)及其衍生物（如甲磺酸伊馬替尼等）目前 在臨床上主要用于治療慢性粒細(xì)胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)和胃腸道基 質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumors，GIST)。伊馬替尼的分子式為C29H31N7O,分子量為 493.60,結(jié)構(gòu)式如下：
[0005；
[0006]伊馬替尼衍生物為N-苯基-2-嘧啶胺衍生物，分子量范圍為171-2000,結(jié)構(gòu)式如 下：
[0007]
[0008] 具中
[0009] 心是4_吡嗪基，1-甲基-IH-吡咯基，氨基或氨基低級烷基取代的苯基(其中在所有 情況下的氨基是游離的、烷基化的或?；模I于一個五元環(huán)上碳原子的IH-吲哚基或 IH-咪唑基、或鍵于一個環(huán)上碳原子的未被取代或低級烷基取代的吡啶基(N原子未被氧取 代）
[0010] R2和R3各自獨立地為氫或低級烷基，
[0011 ] R4，R5，R6，R7和R8基團(tuán)中的一種或兩種各自為硝基，氟取代的低級烷氧基或結(jié)構(gòu)式 (III)所不的基團(tuán)：
[0012] - N(R9) - C(一 X) - (Y)n-Rio (III)
[0013] 其中
[0014I R9是氫或低級烷基
[0015] X是氧、硫、亞胺基、N-低級烷基亞胺基、肟基或0-低級烷基肟基
[0016] Y是氧或N H基團(tuán)
[0017] N是0或1
[0018] Riq是一種至少有5個碳原子的脂肪族基團(tuán)、或一種芳香族的、芳香-脂肪族的、脂環(huán) 族的、脂環(huán)-脂肪族的、雜環(huán)的或雜環(huán)-脂肪族基團(tuán)
[0019] 剩下的基團(tuán)R4，R5 ,R6，辦和辦各自獨立地為氫，未取代的或被游離的或烷基化的氨 基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基或嗎啉基取代的低級烷基，或低級烷?；?，三氟甲基，游離的、 醚化的羥基，游離的、烷基化的或?；陌被蛴坞x的或酯化的羧基，或至少一個成鹽基 團(tuán)的此種化合物的一種鹽。
[0020] 伊馬替尼衍生物優(yōu)選為甲磺酸伊馬替尼，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0021]
[0022]本發(fā)明人意料之外地發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼及其衍生物具有較強的抑制嗎啡戒斷癥狀的 作用，而且還有抗嗎啡成癮心理渴求的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0023] 針對上述【背景技術(shù)】存在的問題，本發(fā)明提供伊馬替尼及其衍生物在制備預(yù)防和/ 或治療藥物成癮的藥物中的應(yīng)用。
[0024] 本發(fā)明另一目的是提供伊馬替尼及其衍生物在制備預(yù)防和/或治療藥物戒斷后復(fù) 吸的藥物中的應(yīng)用。
[0025]為了證明伊馬替尼及其衍生物的新用途，本發(fā)明通過以下實驗完成：
[0026]本發(fā)明經(jīng)灌胃給予實驗大鼠伊馬替尼(0，10，100mg/kg)及其衍生物甲磺酸伊馬替 尼，0，2，20mg/kg)后，皮下注射10mg/kg嗎啡，采用經(jīng)典評價成癮的大鼠敏化和條件位置偏 愛動物模型，分別觀察伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼對大鼠的條件位置偏愛形成戒 斷后復(fù)燃行為和敏化行為表達(dá)的影響，評價伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼對嗎啡成 癮的抑制作用及嗎啡成癮戒斷后的防復(fù)吸效果。
[0027] 結(jié)果可見，未給予伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼的大鼠，條件位置偏愛和 敏化形成;給予伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼處理后，抑制條件位置偏愛和敏化形 成，表明伊馬替尼及其衍生物可抑制嗎啡成癮形成；同時，給予伊馬替尼及其衍生物甲磺酸 伊馬替尼處理后，抑制條件位置偏愛和敏化形成戒斷后的復(fù)燃，表明伊馬替尼及其衍生物 可抑制嗎啡成癮戒斷后復(fù)吸。實驗證實伊馬替尼衍生物生物活性相似，具有相似的藥物效 果。
[0028] 本發(fā)明所述的成癮藥物包括麻醉藥品和精神藥物等，麻醉藥品包括阿片類、可卡 因類、大麻類等；精神藥物分為鎮(zhèn)靜催眠藥及抗焦慮藥如巴比妥類、中樞興奮劑如苯丙胺 類、致幻劑麥角二乙胺等;其他的還包括酒精、煙草和揮發(fā)性有機溶劑等。成癮藥物是作用 于腦內(nèi)獎賞回路中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)及其投射，包括腹側(cè)被蓋區(qū)（ventral tagmental area，VTA)、伏隔核（nucleus accumbens，NAc)、前額皮層（prefrontal cortex，PFC)等，弓丨 起獎賞效應(yīng)，發(fā)生長期神經(jīng)可塑性改變，導(dǎo)致強烈的心理渴求和精神依賴(Nestler，2004， 2005，Hyman et al.，2006)，所有成癮性物質(zhì)作用機制類似，因此作用效果相似。
[0029] 本發(fā)明具有的優(yōu)點：（1)本發(fā)明為治療藥物成癮提供了一種針對心理渴求神經(jīng)環(huán) 路分子靶點治療的有效方法；（2)本發(fā)明效果好，有望改善現(xiàn)有替代治療的方法，對因治療 成癮藥物引起的精神依賴和戒斷后的復(fù)吸，伊馬替尼和甲磺酸伊馬替尼效果相似，甲磺酸 伊馬替尼水溶解度高，生物利用度更好。（3)伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼是美國 FDA已經(jīng)批準(zhǔn)在臨床上使用的藥品，其臨床安全性已經(jīng)得到認(rèn)可，可以節(jié)省藥物研發(fā)的成 本。
【附圖說明】
[0030] 圖1為自發(fā)活動箱裝置圖；
[0031 ]圖2為伊馬替尼對嗎啡敏化形成的影響圖；
[0032] A為給藥實驗流程圖;B為伊馬替尼對大鼠嗎啡敏化形成的影響
[0033] 圖3為條件位置偏愛裝置圖；
[0034] 圖4為伊馬替尼對嗎啡依賴后心理渴求形成的影響圖；
[0035] A為給藥實驗流程圖;B為伊馬替尼系統(tǒng)對CPP分值的影響
[0036] 圖5為伊馬替尼衍生物對嗎啡敏化形成的影響圖；
[0037] A為給藥實驗流程圖;B為伊馬替尼衍生物對大鼠嗎啡敏化形成的影響
[0038] 圖6為伊馬替尼衍生物對嗎啡依賴后心理渴求形成的影響圖；
[0039] A為給藥實驗流程圖;B為伊馬替尼衍生物系統(tǒng)對CPP分值的影響
【具體實施方式】
[0040] 通過以下詳細(xì)說明結(jié)合附圖可以進(jìn)一步理解本發(fā)明的特點和優(yōu)點。所提供的實施 例僅是對本發(fā)明方法的說明，而不以任何方式限制本發(fā)明揭示的其余內(nèi)容。下述實施例中 所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0041] 【實施1】伊馬替尼對大鼠嗎啡敏化形成的影響
[0042]本實施例選擇伊馬替尼作為抗嗎啡成癮高發(fā)性活動的藥物，通過建立嗎啡敏化大 鼠模型，探討伊馬替尼對大鼠嗎啡所致的高發(fā)性自發(fā)活動的改善作用，旨在選擇一種療效 確切、毒性小的抗嗎啡成癮高發(fā)性自發(fā)活動的藥物。
[0043]材料與方法
[0044] 藥品及試劑Morphine(青海制藥廠）；伊馬替尼(Novartis PharmaStein AG)
[0045] 動物SPF級SD雄性大鼠，體重220-250g。湖北省實驗動物研究中心提供，動物合格 證號為NO. 42000600012016,生產(chǎn)許可證號：SCXK(鄂）2015-2018。大鼠飼料，購于武漢大學(xué) 實驗動物中心。
[0046] 實驗方法
[0047] 動物分組與處理:大鼠隨機分為四組，分別為生理鹽水+溶劑組、生理鹽水+伊馬替 尼給藥組和嗎啡+溶劑組、嗎啡+伊馬替尼給藥組。
[0048] 動物造模:實驗前一天(第0天），對實驗大鼠進(jìn)行活動量基線測定，根據(jù)測定結(jié)果 隨機分為4組(η= 10);實驗第1~5天，生理鹽水+溶劑對照組和嗎啡+溶劑對照組均提前45 分鐘灌胃生理鹽水（2ml/kg)，然后生理鹽水-溶劑對照組皮下注射生理鹽水（lml/kg)，嗎 啡-溶劑對照組皮下注射嗎啡（l〇mg/kg);生理鹽水-伊馬替尼給藥組和嗎啡-伊馬替尼給藥 組均提前45分鐘灌胃伊馬替尼（10，100mg/kg)，然后生理鹽水+伊馬替尼給藥組皮下注射生 理鹽水（lml/kg)和嗎啡+伊馬替尼給藥組皮下注射嗎啡（10mg/kg);給藥完后，所有的動物 記錄自發(fā)活動60分鐘。如此實驗重復(fù)5天。然后戒斷5天，于實驗第10天以小劑量嗎啡（5mg/ kg)皮下注射激發(fā)，檢測其自發(fā)活動行為的變化。給藥實驗流程圖見2A。
[0049] 檢測指標(biāo)：
[0050] 各組大鼠注射嗎啡后放入自發(fā)活動檢測箱(如圖1)記錄自發(fā)活動1小時，敏化形成 后，自發(fā)活動采用DigBehv自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制），是由 4個自發(fā)活動觀察箱、視頻合成器、視頻圖樣采樣卡和分析軟件等組成。本系統(tǒng)能對大鼠活 動進(jìn)行視頻跟蹤，自動記錄小鼠活動軌跡，記錄大鼠的活動次數(shù)。自發(fā)活動評價的指標(biāo)是： 大鼠一定時間段內(nèi)（如60min)的活動總次數(shù)，即總次數(shù)增多顯示自發(fā)活動增加。
[0051 ]電腦程序自動記錄大鼠的總活動次數(shù)，每5分鐘記錄一次。
[0052]敏化形成后，在籠養(yǎng)環(huán)境下戒斷5天，用小劑量嗎啡激發(fā)，將大鼠放入自發(fā)活動箱 記錄其自發(fā)活動情況。
[0053]實驗結(jié)果
[0054] 伊馬替尼對大鼠嗎啡敏化形成的作用：
[0055] 各組SD大鼠基線狀況大體一致。分別對生理鹽水對照組（生理鹽水+溶劑對照、生 理鹽水+伊馬替尼給藥)的大鼠灌胃空白溶劑和伊馬替尼，從而排除伊馬替尼自身對動物自 發(fā)性活動的影響。敏化造模過程中，嗎啡-溶劑組大鼠繼續(xù)給予空白溶劑，檢測可知大鼠興 奮性繼續(xù)增高，敏化作用明顯;對另一實驗組即嗎啡-伊馬替尼組大鼠高劑量灌胃伊馬替尼 (0，10，100mg/kg)，觀測可發(fā)現(xiàn)大鼠自發(fā)性活動明顯低于未給伊馬替尼實驗組，興奮性明顯 降低，說明伊馬替尼對嗎啡敏化形成有一定的抑制作用;此外伊馬替尼可抑制敏化形成戒 斷后的復(fù)燃，如圖2B所示。
[0056]【實施例2】伊馬替尼對大鼠嗎啡成癮后心理渴求的影響
[0057]本實施例選擇伊馬替尼作為抗嗎啡成癮心理渴求的藥物，建立嗎啡條件位置偏愛 (conditioned place preference，CPP)模型，研究伊馬替尼對嗎啡成癮心理渴求形成后由 環(huán)境線索誘發(fā)復(fù)吸的作用，旨在選擇一種療效確切、毒性小的治療藥物成癮防止復(fù)吸的藥 物。
[0058]材料與方法
[0059] 藥品及試劑Morphine(青海制藥廠）；伊馬替尼(Novartis PharmaStein AG)
[0060] 動物SPF級SD雄性大鼠，體重220-250g。湖北省實驗動物研究中心提供，動物合格 證號為NO. 42000600012016,生產(chǎn)許可證號：SCXK(鄂）2015-2018。鼠飼料，購于武漢大學(xué)實 驗動物中心。
[0061 ]實驗儀器
[0062]條件位置偏愛儀（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制）：實驗采用計算機自動控制。 裝置由三箱構(gòu)成的條件性位置偏愛箱:兩個側(cè)室和一個中間室(如圖3)。三室由可移動的隔 板分開，內(nèi)外均為黑色。其中A箱和B箱位于中間箱的兩側(cè)，大小相同，A箱側(cè)壁上有9盞發(fā)黃 光二極管構(gòu)成的正方形，底板為不銹鋼鋼條，B箱底板為不銹鋼網(wǎng)格。大鼠在各箱停留時間 和出入次數(shù)可通過數(shù)據(jù)傳送到計算機，自動收集記錄行為學(xué)資料。
[0063] 動物分組與處理:大鼠隨機分為四組，分別為生理鹽水+溶劑組、生理鹽水+伊馬替 尼給藥組和嗎啡+溶劑組、嗎啡+伊馬替尼給藥組。
[0064]實驗方法
[0065] (1)嗎啡CPP模型的建立
[0066] 基礎(chǔ)值測試：
[0067]第1天，開放三箱間通道，啟動計算機上CPP程序，大鼠由中間室放入，任其在三箱 中自由活動15分鐘，電腦同步記錄其在各室中停留的時間。
[0068]條件性位置偏愛訓(xùn)練：
[0069]第2至5天，封閉三箱間通道。上午8:00，實驗組皮下注射嗎啡（10mg/kg)并放入伴 藥側(cè)45分鐘;對照組皮下注射生理鹽水（lml/kg)并放入非伴藥側(cè)45分鐘。下午16:00,實驗 組及對照組鼠均注射生理鹽水，實驗組放入非伴藥側(cè)，對照組放入伴藥側(cè)，均為45分鐘。每 只大鼠的伴藥側(cè)是固定的。每組大鼠之后被放回飼養(yǎng)籠。
[0070] 嗎啡CPP測試：
[0071 ]第6天進(jìn)行CPP測試，與基礎(chǔ)值測試階段相似。開放三箱間通道，不予任何注射，啟 動計算機上CPP程序，大鼠由中間室放入，任其在三箱中自由活動15分鐘，電腦同步記錄其 在各室中停留的時間。偏愛分?jǐn)?shù)(CPP score)被定義為伴藥室所呆時間與非伴藥室所呆時 間的差值。將大鼠在伴藥箱中CPP后測值與前側(cè)值比較確定大鼠是否形成CPP。并根據(jù)CPP后 測值剔除未形成CPP的大鼠，將動物進(jìn)行匹配再分為四組:分別為生理鹽水+溶劑對照組、生 理鹽水+伊馬替尼給藥組和嗎啡+溶劑對照組、嗎啡+伊馬替尼給藥組。
[0072] (2)環(huán)境線索誘發(fā)覓藥行為模型的建立
[0073]在實驗的第7天，每組大鼠分別灌胃給予溶劑和伊馬替尼（100mg/kg)15分鐘后，放 入伴藥箱，停留10分鐘后，大鼠再回到籠養(yǎng)環(huán)境中，24小時后檢測對條件位置偏愛的影響， 給藥實驗流程見圖4A。
[0074] (3)嗎啡CPP重新測試
[0075] 上一步實驗結(jié)束后24小時和7天，即實驗進(jìn)行的第8和14天，分別測試大鼠對伴藥 箱的偏愛程度，15分鐘，與基礎(chǔ)值測試階段相同，觀察大鼠 CPP score的變化。中間第9天到 第13天，對大鼠不做任何處理。
[0076] (4)嗎啡CPP的點燃
[0077]第14天檢測后24小時，即第15天，采用小劑量嗎啡（3mg/kg，i.p.)進(jìn)行點燃。嗎啡 注射后10分鐘，將大鼠放入中間箱開始15分鐘的CPP值測試。
[0078] 檢測指標(biāo)：
[0079] 大鼠訓(xùn)練和小劑量點燃后，檢測大鼠條件位置偏愛評分(CPP Score)用于反映大 鼠成癮后心理渴求行為的變化，若CPP Score降低，成癮行為受到抑制。
[0080] 實驗結(jié)果：
[0081] 伊馬替尼對環(huán)境線索誘發(fā)大鼠嗎啡心理渴求的影響：
[0082] 結(jié)果可見，大鼠條件位置偏愛形成后，環(huán)境線索再暴露前給予生理鹽水和伊馬替 尼后檢測CPP Score，發(fā)現(xiàn)生理鹽水對照組大鼠條件位置偏愛依然存在；而伊馬替尼給藥 組，CPP Score明顯降低，抑制給藥環(huán)境引起的心理渴求，且1周后不被點燃，如圖4B所示。給 藥組與對照組相比差異具有顯著性，說明伊馬替尼可改善嗎啡成癮癥狀。
[0083] 【實施例3】伊馬替尼衍生物（甲磺酸伊馬替尼)對大鼠嗎啡敏化形成的影響
[0084] 本實施例選擇伊馬替尼衍生物作為抗嗎啡成癮高發(fā)性活動的藥物，通過建立嗎啡 敏化大鼠模型，探討伊馬替尼衍生物對大鼠嗎啡所致的高發(fā)性自發(fā)活動的改善作用，旨在 選擇一種療效確切、毒性小的抗嗎啡成癮高發(fā)性自發(fā)活動的藥物。
[0085]材料與方法
[0086] 藥品及試劑Morphine(青海制藥廠）；甲橫酸伊馬替尼（Novartis PharmaStein AG)
[0087] 動物SPF級SD雄性大鼠，體重220-250g。湖北省實驗動物研究中心提供，動物合格 證號為NO. 42000600012016,生產(chǎn)許可證號：SCXK(鄂）2015-2018。大鼠飼料，購于武漢大學(xué) 實驗動物中心。
[0088]實驗方法
[0089] 動物分組與處理:大鼠隨機分為四組，分別為生理鹽水+溶劑組、生理鹽水+甲磺酸 伊馬替尼給藥組和嗎啡+溶劑組、嗎啡+甲磺酸伊馬替尼給藥組。
[0090]動物造模:實驗前一天(第0天），對實驗大鼠進(jìn)行活動量基線測定，根據(jù)測定結(jié)果 隨機分為4組(η= 10);實驗第1~5天，生理鹽水+溶劑對照組和嗎啡+溶劑對照組均提前45 分鐘腹腔注射生理鹽水(2ml/kg)，然后生理鹽水-溶劑對照組皮下注射生理鹽水（lml/kg) 和嗎啡-溶劑對照組皮下注射嗎啡（l〇mg/kg)，生理鹽水-甲磺酸伊馬替尼給藥組和嗎啡-甲 磺酸伊馬替尼給藥組均提前45分鐘甲磺酸伊馬替尼給藥(2，20mg/kg，i .p.)，然后生理鹽水 +甲磺酸伊馬替尼給藥組皮下注射生理鹽水（lml/kg)和嗎啡+甲磺酸伊馬替尼給藥組皮下 注射嗎啡（l〇mg/kg);給藥完后，所有的動物記錄自發(fā)活動60分鐘。如此實驗重復(fù)5天;然后 戒斷5天，于實驗第10天以小劑量嗎啡（5mg/kg)皮下注射激發(fā)，檢測其自發(fā)活動行為的變 化，如圖5A所示。
[0091] 檢測指標(biāo)：
[0092] 各組大鼠注射嗎啡后放入自發(fā)活動檢測箱記錄自發(fā)活動1小時，電腦程序自動記 錄大鼠的總活動次數(shù)，每5分鐘記錄一次。
[0093]敏化形成后，在籠養(yǎng)環(huán)境下戒斷5天，用小劑量嗎啡激發(fā)，將大鼠放入自發(fā)活動箱 記錄其自發(fā)活動情況。
[0094]實驗結(jié)果
[0095]甲磺酸伊馬替尼對大鼠嗎啡敏化形成的作用：
[0096] 各組SD大鼠基線狀況大體一致。分別對生理鹽水對照組（生理鹽水+溶劑對照、生 理鹽水+甲磺酸伊馬替尼給藥)的大鼠灌胃空白溶劑和甲磺酸伊馬替尼，從而排除甲磺酸伊 馬替尼自身對動物自發(fā)性活動的影響。敏化造模過程中，嗎啡-溶劑組大鼠繼續(xù)給予空白溶 劑，檢測可知大鼠興奮性繼續(xù)增高，敏化作用明顯;對另一組實驗組即嗎啡-甲磺酸伊馬替 尼組大鼠不同劑量腹腔注射甲磺酸伊馬替尼（2,20mg/kg)，觀測可發(fā)現(xiàn)大鼠自發(fā)性活動明 顯低于未給甲磺酸伊馬替尼實驗組，興奮性明顯降低，說明甲磺酸伊馬替尼同樣對嗎啡敏 化形成有一定的抑制作用;此外甲磺酸伊馬替尼可抑制敏化形成戒斷后的復(fù)燃，如圖5B所 不。
[0097]【實施例4】伊馬替尼衍生物（甲磺酸伊馬替尼)對大鼠嗎啡成癮心理渴求的影響 [0098]本實施例選擇甲磺酸伊馬替尼作為抗嗎啡成癮的藥物，建立嗎啡條件位置偏愛模 型，研究甲磺酸伊馬替尼對嗎啡成癮心理渴求形成后由環(huán)境線索誘發(fā)復(fù)吸的作用，旨在證 實具有相同功能活性基團(tuán)的伊馬替尼衍生物具有相似的抑制藥物成癮后心理渴求的效果， 選出療效確切、毒性小化合物有效防止藥物成癮后心理渴求。
[0099] 材料與方法
[0100] 藥品及試劑Morphine(青海制藥廠）；甲橫酸伊馬替尼（Novartis PharmaStein AG)
[0101] 動物SPF級SD雄性大鼠，體重220-250g。湖北省實驗動物研究中心提供，動物合格 證號為NO. 42000600012016,生產(chǎn)許可證號：SCXK(鄂）2015-2018。鼠飼料，購于武漢大學(xué)實 驗動物中心。
[0102] 實驗儀器
[0103] 條件位置偏愛儀(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制）：如圖3所示。
[0104] 動物分組與處理:大鼠隨機分為四組，分別為生理鹽水+溶劑組、生理鹽水+甲磺酸 伊馬替尼給藥組和嗎啡+溶劑組、嗎啡+甲磺酸伊馬替尼給藥組。
[0105] 實驗方法
[0106] (1)嗎啡CPP模型的建立
[0107] 基礎(chǔ)值測試：
[0108] 第1天，開放三箱間通道，啟動計算機上CPP程序，大鼠由中間室放入，任其在三箱 中自由活動15分鐘，電腦同步記錄其在各室中停留的時間。
[0109] 條件性位置偏愛訓(xùn)練：
[0110] 第2至5天，封閉三箱間通道。上午8:00，實驗組皮下注射嗎啡（10mg/kg)并放入伴 藥側(cè)45分鐘;對照組皮下注射生理鹽水（lml/kg)并放入非伴藥側(cè)45分鐘。下午16:00,實驗 組及對照組鼠均注射生理鹽水，實驗組放入非伴藥側(cè)，對照組放入伴藥側(cè)，均為45分鐘。每 只大鼠的伴藥側(cè)是固定的。每組大鼠之后被放回飼養(yǎng)籠。
[0111] 嗎啡CPP測試：
[0112] 第6天進(jìn)行CPP測試，與基礎(chǔ)值測試階段相似。開放三箱間通道，不予任何注射，啟 動計算機上CPP程序，大鼠由中間室放入，任其在三箱中自由活動15分鐘，電腦同步記錄其 在各室中停留的時間。偏愛分?jǐn)?shù)(CPP score)被定義為伴藥室所呆時間與非伴藥室所呆時 間的差值。將大鼠在伴藥箱中CPP后測值與前側(cè)值比較確定大鼠是否形成CPP。并根據(jù)CPP后 測值剔除未形成CPP的大鼠，將動物進(jìn)行匹配再分為四組:分別為生理鹽水+溶劑對照組、生 理鹽水+甲磺酸伊馬替尼給藥組和嗎啡+溶劑對照組、嗎啡+甲磺酸伊馬替尼給藥組。
[0113] (2)環(huán)境線索誘發(fā)覓藥行為模型的建立
[0114] 在實驗的第7天，四組大鼠分別灌胃給予溶劑和甲磺酸伊馬替尼（20mg/kg，i.p.) 15分鐘后，放入伴藥箱，停留10分鐘后，大鼠再回到籠養(yǎng)環(huán)境中，24小時后檢測對條件位置 偏愛的影響，給藥實驗流程見圖6A。
[0115] (3)嗎啡CPP重新測試
[0116] 上一步實驗結(jié)束后24小時和7天，即實驗進(jìn)行的第8和14天，分別測試大鼠對伴藥 箱的偏愛程度，15分鐘，與基礎(chǔ)值測試階段相同，觀察大鼠 CPP score的變化。中間第9天到 第13天，對大鼠不做任何處理。
[0117] (4)嗎啡CPP的點燃
[0118] 第14天檢測后24小時，即第15天，采用小劑量嗎啡（3mg/kg，i.p.)進(jìn)行點燃。嗎啡 注射后10分鐘，將大鼠放入中間箱開始15分鐘的CPP值測試。
[0119]檢測指標(biāo)：
[0120] 大鼠訓(xùn)練和小劑量點燃后，檢測大鼠條件位置偏愛評分(CPP Score)用于反映大 鼠成癮后心理渴求行為的變化，若CPP Score降低，成癮行為受到抑制。
[0121] 實驗結(jié)果
[0122] 甲磺酸伊馬替尼對環(huán)境線索誘發(fā)大鼠嗎啡心理渴求的影響：
[0123] 結(jié)果可見，大鼠條件位置偏愛形成后，環(huán)境線索再暴露前給予生理鹽水和甲磺酸 伊馬替尼后檢測CPP Score，發(fā)現(xiàn)生理鹽水對照組大鼠條件位置偏愛依然存在;而甲磺酸伊 馬替尼給藥組，CPP Score明顯降低，抑制給藥環(huán)境引起的心理渴求，且1周后不被點燃，如 圖6B所示。給藥組與對照組相比差異具有顯著性，說明甲磺酸伊馬替尼同樣可改善嗎啡成 癮癥狀。
[0124] 實驗結(jié)論
[0125] 伊馬替尼及其衍生物甲磺酸伊馬替尼能有效抑制由環(huán)境線索誘發(fā)嗎啡成癮的心 理渴求行為，同時改善嗎啡引起的敏化效應(yīng)。因此，伊馬替尼及其衍生物具有抗嗎啡成癮的 效果，且作用特異性強，是一類抗藥物成癮療效好的潛在戒毒治療藥物。
【主權(quán)項】
1. 伊馬替尼及其衍生物在制備預(yù)防和/或治療成癮藥物成癮的藥物中的應(yīng)用。2. 伊馬替尼及其衍生物在制備預(yù)防和/或治療成癮藥物戒斷后復(fù)吸的藥物中的應(yīng)用。3. 權(quán)利要求1或2所述的伊馬替尼衍生物是甲磺酸伊馬替尼和具有相同活性基團(tuán)的其 他衍生物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的成癮藥物是指（1)麻醉藥品，其 中麻醉藥品又分為阿片類、可卡因類、大麻類，阿片類包含天然來源的阿片及從中提取的有 效成分嗎啡，以及將有效成分加工得到的產(chǎn)品海洛因，類似阿片作用的人工合成品；（2)精 神藥物，精神藥物分為鎮(zhèn)靜催眠藥及抗焦慮藥巴比妥類、中樞興奮劑苯丙胺類、致幻劑麥角 二乙胺;（3)酒精、煙草和揮發(fā)性有機溶劑。
【文檔編號】A61P25/34GK106074555SQ201610435136
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月16日
【發(fā)明人】李艷琴, 陳萍萍, 楊奇
【申請人】武漢大學(xué)