匹杉瓊作為淋巴示蹤劑的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明提供了匹杉瓊(式I化合物)及其鹽類(如匹杉瓊馬來(lái)酸鹽、匹杉瓊鹽酸鹽、匹杉瓊硫酸鹽、匹杉瓊醋酸鹽、匹杉瓊?cè)宜猁}、匹杉瓊檸檬酸鹽、匹杉瓊蘋果酸鹽、匹杉瓊酒石酸鹽等)作為淋巴示蹤劑或在制備淋巴示蹤劑方面的應(yīng)用。匹杉瓊及其鹽類可制成注射液，粉針，乳劑，脂質(zhì)體，納米粒和微球等制劑。其既可直接發(fā)揮殺傷惡性腫瘤細(xì)胞的作用，藍(lán)染特性又可作為淋巴示蹤劑，應(yīng)用于癌癥手術(shù)療法中術(shù)中淋巴清掃術(shù)，適用于胃癌，乳腺癌，腸癌，宮頸癌，睪丸癌等。
【專利說(shuō)明】
匹杉瓊作為淋巴示蹤劑的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物新適應(yīng)癥領(lǐng)域，具體涉及匹杉瓊作為淋巴示蹤劑方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 惡性腫瘤已經(jīng)成為繼心血管疾病之后的人類第二大死因。每年全球新增惡性腫瘤 患者超過(guò)1200萬(wàn)人，死于腫瘤的患者約760萬(wàn)。2010年，我國(guó)每年新增腫瘤患者309萬(wàn)人， 死于腫瘤的患者194萬(wàn)人，約占全球腫瘤死亡人數(shù)的1/4。近20年來(lái)，中國(guó)癌癥死亡率上 升了近30%，每四五個(gè)死亡者中就有一個(gè)死于癌癥。癌癥的早期發(fā)現(xiàn)和診斷可以為癌癥的 治療贏得時(shí)間，對(duì)于患者生命有著特殊的意義，而及時(shí)徹底的手術(shù)清除癌細(xì)胞是治療癌癥 成功的關(guān)鍵。眾所周知，惡性腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移途徑無(wú)外乎直接蔓延，血行轉(zhuǎn)移，淋巴轉(zhuǎn)移， 種植轉(zhuǎn)移四種。其中淋巴轉(zhuǎn)移非常重要，在某些腫瘤中是首要途徑。根據(jù)國(guó)際TNM分期，淋 巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況是腫瘤分期的重要組成部分，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多，病期越晚，預(yù)后越差。實(shí)體 癌癥手術(shù)或者放療后遠(yuǎn)期存活率不令人很滿意，失敗的主要原因是癌細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移。因 此，手術(shù)中需要盡可能的將淋巴結(jié)摘除，防止其進(jìn)一步轉(zhuǎn)移，這就需要尋求一種有效地示蹤 劑來(lái)辨認(rèn)淋巴結(jié)。與此同時(shí)，美國(guó)GL0B0CAN數(shù)據(jù)顯示，至2015年在中國(guó)大陸地區(qū)，每年需 要進(jìn)行惡性腫瘤手術(shù)并進(jìn)行淋巴清掃的患者將逼近400萬(wàn)人在全世界范圍內(nèi)，需進(jìn)行淋巴 清掃的患者則達(dá)到了近1300萬(wàn)人。另一方面，采用本身帶有抗癌作用的藥物作為淋巴示蹤 劑，即使未能摘除的淋巴結(jié)能夠富集較高濃度的抗癌藥物，以防止癌細(xì)胞的進(jìn)一步轉(zhuǎn)移。
[0003] 前哨淋巴結(jié)（sentinel lymph node，SLN)是腫瘤細(xì)胞最早轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，是腫瘤 相關(guān)抗原（(tumor associated antigen，TAA)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)最早發(fā)生的部位。前哨淋 巴結(jié)接受原始的淋巴液，引流量最大，所以最容易含有轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞。惡性腫瘤的淋巴結(jié) 轉(zhuǎn)移遵從一定的規(guī)律，即腫瘤細(xì)胞首先隨淋巴管引流至該區(qū)域的一個(gè)或幾個(gè)少數(shù)特定的淋 巴結(jié)如前哨淋巴結(jié)后，再引流至其他的淋巴結(jié)。如果前哨淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移，則該區(qū)域其他的淋 巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移的可能性很小，相反，前哨淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移，則相應(yīng)的該區(qū)域其他淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn) 移的可能性就大大增加。所以，對(duì)前哨淋巴的準(zhǔn)確檢測(cè)以及對(duì)含有腫瘤細(xì)胞的淋巴結(jié)及時(shí) 清除對(duì)癌癥的預(yù)后起著至關(guān)重要的作用。自Giuliano等采用10g/L的異硫藍(lán)進(jìn)行乳腺癌 前哨淋巴結(jié)以來(lái)，各國(guó)醫(yī)生嘗試不同的活性染料以期達(dá)到最佳的前哨淋巴結(jié)檢測(cè)效果。從 理論上講，前哨淋巴結(jié)的性狀能準(zhǔn)確地反映區(qū)域淋巴結(jié)狀況，故通過(guò)一定的技術(shù)手段對(duì)前 哨淋巴結(jié)進(jìn)行定位，再以微侵入的方式取出并進(jìn)行精確活檢，即可推斷趨于淋巴結(jié)現(xiàn)狀。這 對(duì)于實(shí)體癌的臨床治療和判斷預(yù)后有著重大意義。
[0004] 從當(dāng)前的臨床來(lái)看，前哨淋巴結(jié)活檢（sentinel node biopsy SNB)定位方法主 要有以下3種：（1)放射性膠體定位法。將一種放射性同位素標(biāo)記的膠體于術(shù)前l(fā)_6h注射 到乳腺腫瘤周圍組織，術(shù)中應(yīng)用淋巴閃爍顯像或γ -計(jì)數(shù)器探測(cè)儀追蹤探測(cè)，定位前哨淋 巴結(jié)。（2)生物染料定位法。將一種藍(lán)色染料注入腫瘤周圍組織，使腫瘤周做一個(gè)切口，通 過(guò)細(xì)致的解剖，顯露出藍(lán)染的淋巴管，找出離腫瘤最近的藍(lán)染淋巴結(jié)，即前哨淋巴結(jié)。（3) 生物染料與放射性膠體聯(lián)合應(yīng)用定位法。先將放射性膠體注射到腫瘤周圍組織中，然后將 5ml藍(lán)色染料注射到瘤體四周，使用手持γ-計(jì)數(shù)器探測(cè)儀探測(cè)SLN，測(cè)量攝取放射性同位 素的量，并解剖出藍(lán)染的淋巴管和淋巴結(jié)。放射性膠體定位法，雖然操作簡(jiǎn)單，費(fèi)時(shí)少，但需 要專用探測(cè)儀器，費(fèi)用較高；并沒(méi)有直接提高在血染視野清除淋巴結(jié)的準(zhǔn)度及程度。生物染 料定位法是一種成本較低可操作性高的方法。常用的生物染料有異硫藍(lán)（Isosulfan blue dye)，專利藍(lán)V(Patent Blue-V)及淋巴藍(lán)（Iymphazurin)。資料表明：前二者與蛋白結(jié)合 力弱，注射后組織彌散少，并能很快進(jìn)入淋巴管和前哨淋巴結(jié)使之有較深染色，故能獲得較 好的效果。但是，不足之處就是維持染色時(shí)間較短，常需要反復(fù)注射，對(duì)結(jié)果有一定影響，而 且價(jià)格昂貴，國(guó)內(nèi)無(wú)生產(chǎn)廠家，故國(guó)內(nèi)報(bào)道較少；后者能持久維持淋巴結(jié)的藍(lán)染狀態(tài)，但是 與蛋白的結(jié)合力較強(qiáng)，對(duì)周圍的組織也有染色。因而，尋求開(kāi)發(fā)安全有效的淋巴示蹤劑，有 效地對(duì)腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)進(jìn)行清除，是提高癌癥患者生存質(zhì)量、延長(zhǎng)病人壽命的重要手段。
[0005] 匹杉瓊（Pixantrone)是新一代的蒽醌類抗腫瘤藥物，外觀為藍(lán)黑色結(jié)晶，易溶于 水，同時(shí)作為新一代蒽醌累抗癌藥，比同類蒽醌類抗腫瘤藥物作用更強(qiáng)不良反應(yīng)更小。其作 用機(jī)制與米托蒽醌相似，可嵌入細(xì)胞DNA，抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II (Topo-II)。匹杉瓊單一用藥 的疾病完全緩解率達(dá)到20%，當(dāng)匹杉瓊替換了標(biāo)準(zhǔn)治療藥物CHOP(環(huán)磷酰胺+多柔比星+ 長(zhǎng)春新堿+潑尼松）中的多柔比星時(shí)，疾病的完全緩解率達(dá)到59%。大量臨床證實(shí)，匹杉瓊 對(duì)白血病、乳腺癌和惡性淋巴瘤療效顯著。根據(jù)專利文獻(xiàn)報(bào)道，米托蒽醌可以作為淋巴示蹤 劑用于腫瘤手術(shù)中的淋巴結(jié)清除，而匹杉瓊作為新一代的蒽醌類藥物具有與米托蒽醌同樣 的抗腫瘤和染色效果，同時(shí)具有更好的安全治療窗口，使其成為很好的淋巴示蹤劑候選藥 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有示蹤劑染色時(shí)間慢，維持時(shí)間短，周圍組織彌散大，注射 部位殘留嚴(yán)重以及制備工藝復(fù)雜的難題，提供了匹杉瓊及其鹽類作為淋巴示蹤劑方面的應(yīng) 用。
[0007] 匹杉瓊的化學(xué)式如式（I)所示：
[0008]
[0009] 匹杉瓊作為優(yōu)良的淋巴示蹤劑的優(yōu)勢(shì)在于：（1)血漿中消除迅速，不藍(lán)染血管。試 驗(yàn)證明，靜注匹杉瓊后，血藥濃度很快下降，半衰期短，所以幾乎不藍(lán)染血管，不影響淋巴結(jié) 的定位；（2)染色迅速，定位準(zhǔn)確。小鼠實(shí)驗(yàn)證明，匹杉瓊能于10分鐘之內(nèi)藍(lán)染一、二、三級(jí) 淋巴結(jié)；（3)藍(lán)染維持時(shí)間長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)證明，匹杉瓊藍(lán)染淋巴結(jié)后，淋巴結(jié)褪色時(shí)間大于120分 鐘；(4)周圍組織彌散少，注射部位殘留較少；（5)價(jià)格相對(duì)較低廉。
[0010] 綜上，匹杉瓊是一種適宜臨床廣泛應(yīng)用和推廣的優(yōu)良的淋巴示蹤劑。
[0011] 本發(fā)明所述的匹杉瓊的鹽類，包括如匹杉瓊馬來(lái)酸鹽、匹杉瓊鹽酸鹽、匹杉瓊硫酸 鹽、匹杉瓊醋酸鹽、匹杉瓊?cè)宜猁}、匹杉瓊檸檬酸鹽、匹杉瓊蘋果酸鹽、匹杉瓊酒石酸鹽 等。
[0012] 本發(fā)明還提供了匹杉瓊及其鹽在制備淋巴示蹤劑中的應(yīng)用，匹杉瓊及其鹽在制備 淋巴示蹤劑時(shí)可制成匹杉瓊注射液，粉針，乳劑，脂質(zhì)體，納米粒和毫微球等劑型。
[0013] 本發(fā)明所制備的匹杉瓊注射液、粉針、乳劑、脂質(zhì)體、納米粒和毫微球?qū)π∈蟮牧?巴結(jié)有較好的藍(lán)染能力，同時(shí)又沒(méi)有將周圍組織藍(lán)染。經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)論證，匹杉瓊確實(shí)對(duì)小 鼠的淋巴結(jié)有較高的趨向性，并且對(duì)淋巴結(jié)有較深染色，而周圍組織無(wú)藍(lán)染。因此，匹杉瓊 可以開(kāi)發(fā)成有效的淋巴示蹤診斷試劑，加上其本身對(duì)癌癥的治療作用，一方面可以直接殺 死腫瘤細(xì)胞，另一方面，其藍(lán)染特性又可用于癌癥手術(shù)中的淋巴結(jié)清掃術(shù)，可謂一舉兩得， 為癌癥患者帶來(lái)福首。
[0014] 具體的，
[0015] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊注射液，其每1000 ml的處方為：
[0016] 匹杉瓊或其鹽 0.5~100g
[0017] 抗氧劑 0.5~IOg pH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié)pH約3.5~3.5 溶劑 加至1000 ml
[0018] 所述抗氧劑為焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉或兩者組合物；所述pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸，硫 酸，乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、蘋果酸、酒石酸中的一種或多種的組合物；所述溶劑為注射用 水、氯化鈉溶液或葡萄糖溶液。
[0019] 匹杉瓊注射液的制備工藝為：采取溶解法或者稀釋法，將處方量匹杉瓊及其鹽溶 于適量溶劑中，超聲使溶解，用適量pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為3. 5~5. 5,加入抗氧劑使溶解， 加入0. 1 % -0. 5 %針用活性炭，室溫?cái)嚢?0-30min ;然后用0. 8 μL?微孔濾膜過(guò)濾除炭， 0. 45 μ m微孔濾膜精濾，加入溶劑至全量，檢查濾液澄明度，合格后灌裝，I-IOml每只，熔 封，滅菌，測(cè)定pH范圍在3. 5~5. 5之間。
[0020] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊粉針，其每500ml的處方為：
[0021] 匹杉瓊或其鹽 5~IOmg 甘露醇 10~ 肌酐 1~IOmg 注射用水. 加至500ml
[0022] 匹杉瓊粉針的制備工藝為：將上述各成分用處方量注射用水溶解后，無(wú)菌過(guò)濾，分 裝于安瓿瓶中，每支I -IOml，優(yōu)選為5ml，冷凍干燥后封口，漏氣檢查即得。
[0023] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊?cè)閯?，其處方為包括下述重量百分比的組分：
[0024] 匹杉瓊或其鹽 1~5% 大豆油 30~50% Span 80-Twcen 80 (HLB=S) 20-50% Transcutol P 1-10% 5%葡萄糖溶液 1~15%
[0025] 匹杉瓊?cè)閯┲苽涔に嚍椋壕芊Q取處方量的匹杉瓊及其鹽充分溶解于處方量 TranscutolP (二乙二醇單乙基醚），Span80_Tween80(HLB = 8)和處方量的葡萄糖溶液的 混合液中，在35-55°C優(yōu)選45°C下，攪拌10_30min，優(yōu)選為20min，加入處方量的大豆油，攪 拌10-30min，優(yōu)選20min，混勻即得匹杉瓊油包水微乳。
[0026] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊脂質(zhì)體，其處方為：
[0027] 匹杉瓊或其鹽 1-40: mg 大豆卵磷脂 ：2:00-400mg 膽固醇 20-JOOmg
[0028] pH7, 4磷酸鹽緩沖溶液 < 3〇mi
[0029] 匹杉瓊脂質(zhì)體制備工藝為：采用薄膜法制備匹杉瓊脂質(zhì)體。分別稱取處方量大豆 卵磷脂、膽固醇，溶解于適量有機(jī)溶劑，優(yōu)選為5ml無(wú)水乙醚中，抽真空旋轉(zhuǎn)至有機(jī)溶劑完 全去盡，加入處方量磷酸鹽緩沖液（pH7. 4)水合至生成均勻的淡黃色乳液，轉(zhuǎn)入聚丙烯離 心管中，離心管放置在冰浴探頭超聲l_5min，優(yōu)選3min (超聲50s，停IOs)。將此淡黃色半 透明液體倒入裝有已稱重的匹杉瓊的圓底燒瓶中，37°C，旋轉(zhuǎn)混合至生成均勻的藍(lán)黑色膠 體溶液。4°C保存?zhèn)溆谩?br>[0030] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊納米粒，其處方為包括下述重量百分比的組分：
[0031] 匹杉瓊或其鹽 0.2~0.4% 磷脂 1,0~5.0% 山崳酸甘油酯 0.1~5.0% 硬脂酸聚烴氧酯(S-娜： 0,1-1.5% 注射用水 余量
[0032] 匹杉瓊納米粒制備工藝為：采用薄膜分散超聲法制備，將處方量山崳酸甘油酷和 磷脂等置于圓底燒瓶中，加有機(jī)溶劑適量，優(yōu)選氯仿5ml使溶解，減壓蒸發(fā)除盡有機(jī)溶劑， 在瓶?jī)?nèi)壁形成均勻薄膜。加入含處方量S-40的匹杉瓊或其鹽的水溶液，溶脹薄膜，探頭超 聲（工作 5s，停 55s) l_5min，優(yōu)選 2min。
[0033] 本發(fā)明提供了一種匹杉瓊明膠微球，其處方為：
[0034] 匹杉瓊或其鹽 0.1~0.4% 明膠 0.5~2% 蓖麻油 1~30% 脂肪酸山梨坦-80 1-10% 36% 甲醛 1-20% 液體石蠟 10-5 0°/〇 0.1mol/l 鹽酸 3-30%
[0035] 匹杉瓊明膠微球制備工藝為：以明膠水溶液為分散相，蓖麻油為連續(xù)相，加入乳化 劑脂肪酸山梨坦-80,電動(dòng)攪拌得穩(wěn)定乳劑，甲醛交聯(lián)固化制成明膠微球。洗盡甲醛，抽干后 過(guò)400目篩備用；將匹杉瓊或其鹽溶于0. lmol/L HCl溶液，加入上述GMS (明膠微球）靜置 浸入，抽干后過(guò)400目篩，得球徑范圍5. 1-25. 0 μ m匹杉瓊明膠微球。
[0036] 本發(fā)明的積極效果是，提供了新的用于淋巴靶向制劑的原料，它毒性低，無(wú)過(guò)敏， 無(wú)栓塞，為癌癥患者帶來(lái)福音。
【附圖說(shuō)明】
[0037] 圖1、小鼠淋巴結(jié)染色效果圖
[0038] 圖2、大鼠淋巴結(jié)染色效果圖
[0039] 圖3、家兔淋巴結(jié)染色效果圖
【具體實(shí)施方式】
[0040] 以下實(shí)例用于說(shuō)明本發(fā)明。
[0041] 實(shí)施例1、匹杉瓊鹽酸鹽的制備
[0042] 稱取匹杉瓊馬來(lái)酸鹽Ig為起始原料，以MQ超純水作溶劑進(jìn)行溶解，超聲使其充分 溶解。接著以717-強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂（200mL溶脹體積）做交換劑進(jìn)行馬來(lái)酸根交 換。室溫?fù)u床保持30min，將溶液從樹(shù)脂中取出，多次用水浸洗樹(shù)脂，盡可能的取出游離匹杉 瓊?cè)芤?。將獲得的游離匹杉瓊?cè)芤哼M(jìn)行冷凍干燥得游離匹杉瓊粉末。取MQ超純水作為溶 劑溶解，取等物質(zhì)量的濃度為IM的鹽酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)，反應(yīng)在搖床上保持lh。反應(yīng)液冷凍 干燥獲得匹杉瓊鹽酸鹽粉末（收率 95% )。1H-NMR(DMSO) δ -3. 10(dd，4H)，3. 82(dd，4H)， 7· 70 (d，2H)，8· 08 (d，1H)，8· 31 (s，6H)，9· 02 (d，1H)，9· 43 (s，1H)，10. 89 (d，2H)。
[0043] 實(shí)施例2、匹杉瓊硫酸鹽的制備
[0044] 按實(shí)施例1中所述方法，將" IM的鹽酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)"替換為" IM的硫酸進(jìn)行成鹽 反應(yīng)"，獲得匹杉瓊硫酸鹽粉末。1H-NMR (DMSO) δ -3. 10 (dd，4H)，3. 79 (dd，4H)，7. 65 (d，2H)， 7· 92 (d，1H)，8· 16 (s，6H)，9· 03 (d，1H)，9· 49 (s，1H)，10. 96 (d，2H) 〇
[0045] 實(shí)施例3、匹杉瓊?cè)宜猁}的制備
[0046] 按實(shí)施例1中所述方法，將" IM的鹽酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)"替換為" IM的三氟乙酸進(jìn) 行成鹽反應(yīng)"，獲得匹杉瓊?cè)宜猁}粉末。1H-NMR(DMSO) δ-3. 10 (dd，4H)，3.80 (dd，4H)， 7· 64 (d，2H)，7· 8· 08 (s，6H，1H)，9· 01 (d，1H)，9· 45 (s，1H)，10. 97 (d，2H)。
[0047] 實(shí)施例4、匹杉瓊檸檬酸鹽的制備
[0048] 按實(shí)施例1中所述方法，將" IM的鹽酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)"替換為" IM的檸檬酸進(jìn)行成 鹽反應(yīng)"，獲得匹杉瓊檸檬酸鹽粉末。1H-NMR (DMSO) δ -2. 49 (s，0. 5H)，2. 53 (s，2H)，2. 56 (s， 2Η)，2. 60 (s，0· 5Η)，3. 07 (dd，4Η)，3. 79 (dd，4Η)，7. 63 (d，2Η)，8. 06 (d，1Η)，9. 00 (d，1Η)， 9. 47(s，1H)，10. 37(d，2H) 〇
[0049] 實(shí)施例5、匹杉瓊蘋果酸鹽的制備
[0050] 按實(shí)施例1中所述方法，將" IM的鹽酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)"替換為" IM的蘋果酸進(jìn)行成 鹽反應(yīng)"，獲得匹杉瓊蘋果鹽粉末。1H-NMR (DMSO) δ -2. 30 ~2. 40 (q，2H) 2. 52 ~2. 58 (q，2H)， 3. 06 (dd，4H)，3.，77 (dd，4H)，4. 02 (dd，2H)，7. 62 (d，2H)，8. 04 (d，1H)，8. 99 (d，1H)，9. 42 (s， 1H)，10. 96(d，2H) 〇
[0051] 實(shí)施例6、鹽酸匹杉瓊注射液的制備
[0052] 6. 1 處方
[0053] 匹杉瓊鹽酸鹽（實(shí)施例]制備得到） Ig 焦亞硫酸鈉 Ig Ο.ΙηιοΙ/L 鹽酸 調(diào) pH3, 5 注射用水 加至1000 ml
[0054] 6. 2制備工藝
[0055] 制備時(shí)可采取溶解法或者稀釋法，將匹杉瓊鹽酸鹽溶于適量注射用水中，超聲使 溶解，加適量鹽酸調(diào)pH約3. 5,加入焦亞硫酸鈉使溶解，加入0. 1 %針用活性炭，室溫?cái)嚢?30min。然后用0. 8 μ m微孔濾膜過(guò)濾除碳，0. 45 μ m微孔濾膜精濾，加入二氧化碳飽和的注 射用水至全量，制得濃度為lmg/mL的匹杉瓊鹽酸鹽注射液，檢查濾液澄明度，合格后灌裝， 5ml每支，熔封。滅菌。測(cè)定PH值約為3. 50。
[0056] 實(shí)施例7、鹽酸匹杉瓊粉針的制備
[0057] 7. 1 處方
[0058] 匹杉瓊鹽酸鹽（實(shí)施例1制得） IOmg 甘 i/& 酧 1000 mg 肌酐 IOmg 注射甩水 加至500ml
[0059] 7. 2制備工藝
[0060] 將處方中上述各成分用適量注射用水溶解后，無(wú)菌過(guò)濾，分裝于安瓿瓶中，每支 5ml，冷凍干燥后封口，漏氣檢查即得。
[0061] 實(shí)施例8、小鼠淋巴結(jié)染色實(shí)驗(yàn)
[0062] 取小鼠 5只，分別用10%的水合氯醛麻醉，酒精消毒，將實(shí)施例6制備的匹杉瓊注 射液分別注入小鼠前肢掌面和后肢足底，10分鐘后，沿一側(cè)前肢內(nèi)側(cè)和后肢內(nèi)側(cè)做切口，分 離皮下組織，觀察淋巴結(jié)染色情況（見(jiàn)附圖1)。
[0063] 實(shí)施例9、大鼠淋巴結(jié)染色實(shí)驗(yàn)
[0064] 取Wistar大鼠5只，分別用10%的水合氯醛麻醉，酒精消毒，將實(shí)施例6制備的匹 杉瓊注射液分別注入大鼠前肢掌面和后肢足底，10分鐘后，沿一側(cè)前肢內(nèi)側(cè)和后肢內(nèi)側(cè)做 切口，分離皮下組織，觀察淋巴結(jié)染色情況（見(jiàn)附圖2)。
[0065] 實(shí)施例10、家兔淋巴結(jié)染色實(shí)驗(yàn)
[0066] 取家兔3只，麻醉，酒精消毒，將實(shí)施例6制備的匹杉瓊注射液從家兔后腿或乳腺 注入，10分鐘后，沿家兔后腿內(nèi)側(cè)做切口，分離皮下組織，觀察淋巴結(jié)染色情況，見(jiàn)圖3。 [0067] 以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何 熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明所揭示的技術(shù)范圍內(nèi)，可不經(jīng)過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)想到的變化或 替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 匹杉瓊及其鹽作為淋己示蹤劑的用途。2. 匹杉瓊及其鹽在制備淋己示蹤劑中的用途。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊注射液，其 每1000 ml的處方為： 匹杉瓊或其鹽 0.5~lOOg， 抗氧劑 0,.5~IOg :， pH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié)班約3.5~5.5， 溶劑 加至1000 mlo4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述抗氧劑為焦亞硫酸鋼、亞硫酸氨鋼或 兩者組合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊粉針，其每 500ml的處方為： 匹杉瓊或冀盛 5~10mg， 甘戰(zhàn)脾 10-1000 mg, MSf l-lOmg, 注射用水 加至500ml。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊?cè)閯?，其?方為包括下述重量百分比的組分： 匹杉瓊或其鹽 1~:5%:， 大豆油 30~沸％， Span撕-Twe掛80 (HLB=巧 擲~締％， 二么二醇單己基雕 1-1:0%， :5%葡萄糖溶液 1~15%。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊脂質(zhì)體，其 處方為： 匹杉瓊或其鹽 1-40 mg， 大豆卵憐脂 200-400mg， 膽固醇 20-1 OOmg, pH7. 4稱酸鹽緩沖溶液 5-30ml。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊納米粒，其 處方為包括下述重量百分比的組分： 匹杉瓊或其鹽 0.2~0.4%， 磯脂 1.0-5.0%, 山齋酸甘油醋 0.1~5.0%， 硬脂酸聚姪氧醋按-40): 0.1~1.5%.， 注射用水 余量。9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述淋己示蹤劑為一種匹杉瓊明膠微球， 其處方為： 匹杉瓊或其鹽 .0.1~0.4%， 明膠 0.5、2說(shuō)， 蘆麻油 1~30〇/〇， 脂肪酸山梨坦-80 1-10%， 36〇/〇 甲酸 1-20%, 液體石蠟 10-50%， 0.ImoVl 鹽酸 3~30〇/〇。10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述匹杉瓊的鹽選自匹杉瓊 馬來(lái)酸鹽、匹杉瓊鹽酸鹽、匹杉瓊硫酸鹽、匹杉瓊醋酸鹽、匹杉瓊=氣乙酸鹽、匹杉瓊巧樣酸 鹽、匹杉瓊蘋果酸鹽或匹杉瓊酒石酸鹽。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK105983104SQ201510100309
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年3月6日
【發(fā)明人】黃蔚, 王洪, 田小波, 蔣柏鳳
【申請(qǐng)人】中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所, 蘇州洪瑞醫(yī)藥科技有限公司