天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴瘤細(xì)胞u-937細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種天胡姜愈肝片在制備抑制淋己瘤細(xì)胞U- 937細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用及天胡姜愈肝片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 天胡姜愈肝片標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS-10213(ZD-0213)-2002,記載于國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科 肝膽分冊(cè)。由天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎掌草209g作為原料藥制成，具有 清熱解毒，疏肝利膽的功效，用于肝膽濕熱所致的急、慢性肝炎。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有天胡姜愈肝片在在制備抑制人淋己瘤細(xì)胞U-937細(xì)胞增殖藥 物中的應(yīng)用的報(bào)道，也未見(jiàn)有天胡姜愈肝片提取制備方面采用超臨界萃取的報(bào)道，而傳統(tǒng) 水煎煮的方法，工藝粗糖、落后，雜質(zhì)多，導(dǎo)致患者用量過(guò)大，不方便服用，嚴(yán)重影響了本品 在臨床上應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明的目的在于提供一種天胡姜愈肝片在制備抑制淋己瘤細(xì)胞U- 937細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[000引本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種天胡姜愈肝片的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的方案實(shí)現(xiàn)的： 天胡姜愈肝片在制備抑制淋己瘤細(xì)胞U-937細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用，所述天胡姜愈肝 片由天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎掌草209g作為原料藥制成，所述天胡姜愈 肝片的制備方法包括如下步驟:取天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎掌草209g， 加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%， 萃取壓力15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量^3ml/g生藥· min，萃取時(shí)間800-1000min，得超 臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重 0.30邑。
[0007] 優(yōu)選的，上述的天胡姜愈肝片在制備抑制淋己瘤細(xì)胞U-937細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng) 用，所述天胡姜愈肝片的制備方法包括如下步驟:取天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草 699g、虎掌草209g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體 積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，0)2流量2ml/g生藥· min，萃取時(shí)間900min，得超 臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重 0.30邑。
[000引現(xiàn)有技術(shù)中，天胡姜愈肝片口服，一次6片，一日3次。天胡姜愈肝片服藥量大。采用 本發(fā)明方法制備成的天胡姜愈肝片每片重0.30g，每次僅需3片，一日服用3次。在具有更多 活性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可W通過(guò)下述試驗(yàn)證明。
[0009]試驗(yàn)一、不同方法制備的天胡姜愈肝片中齊墳果酸含量的比較 1、儀器及試藥本發(fā)明天胡姜愈肝片:按實(shí)施例1方法制備，使用3005g原料藥，經(jīng)提取制 成500片，每片重0.30g。原天胡姜愈肝片，按照WS-10213(ZD-0213)-2002標(biāo)準(zhǔn)方法制備。 Agi 1 ent 1200高效液相色譜儀;METTLER AE240電子分析天平;齊墳果酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生 物制品檢定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2015年版第四部凡例十五)測(cè)定。
[0011] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙臘-0.1 %憐 酸(80:20)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。理論板數(shù)按齊墳果酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
[0012] 對(duì)照品溶液的制備精密稱取齊墳果酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的 溶液，即得。
[0013] 本發(fā)明的天胡姜愈肝片供試品溶液的制備取本發(fā)明的天胡姜愈肝片，研細(xì)，取 0.75g( 2.5片的量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱 回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml， 加20 %鹽酸溶液5ml，加熱回流2.5小時(shí)，加水30ml，水浴上濃縮至無(wú)醇味，放冷，用二氯甲燒 振搖提取3次(40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲燒提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，轉(zhuǎn)移 至10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0014] 對(duì)照產(chǎn)品供試品溶液的制備取對(duì)照的天胡姜愈肝片20g，研細(xì)，取1.5g(5片的 量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放 冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，加20%鹽酸溶 液5ml，加熱回流2.5小時(shí)，加水30ml，水浴上濃縮至無(wú)醇味，放冷，用二氯甲燒振搖提取3次 (40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲燒提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶 中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0015] 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與本發(fā)明的天胡姜愈肝片供試品溶液、對(duì)照產(chǎn) 品供試品溶液各1〇μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0016] 3、結(jié)果 結(jié)果表明，本發(fā)明天胡姜愈肝片中齊墳果酸的含量為3.22-6.45mg/片；而原天胡姜愈 肝片中齊墳果酸的含量為O.Slmg/片，每次服用量3片的齊墳果酸含量為原片劑6片含量的 2-4倍，在服用量減少的情況下，齊墳果酸含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本發(fā)明制備方法制備的天胡姜愈肝片，有效成分含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高 于WS-10213(ZD-0213)-2002標(biāo)準(zhǔn)記載的方法制備的天胡姜愈肝片。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步的說(shuō)明，W便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于W下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0019] 實(shí)施例1 取天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎掌草209g，加入到C〇2超臨界萃取器中， 乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，0)2 流量2ml/g生藥· min,萃取時(shí)間900min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙 醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重ο. 30g。
[0020] 經(jīng)檢測(cè)，成品中齊墳果酸的含量為6.45mg/片。
[0021] 實(shí)施例2 取天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎掌草209g，加入到C〇2超臨界萃取器中， 乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力15MPa，溫度30°C，0)2 流量Iml/g生藥· min，萃取時(shí)間lOOOmin，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70% 乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0022] 經(jīng)檢測(cè)，成品中齊墳果酸的含量為4.98mg/片。
[0023] 實(shí)施例3 取天胡姜699g、杏葉防風(fēng)1398g、酢漿草699g、虎