本發(fā)明藥物組合物對(duì)大鼠肺炎支原體感染動(dòng)物模型的治療研究 1.試驗(yàn)?zāi)康募胺椒?目的:根據(jù)《中藥新藥藥理學(xué)研究指南》的要求，研究本發(fā)明藥物組合物在治療社區(qū)獲 得性肺炎的主要藥效學(xué)，將具體實(shí)施例1、2得到的本發(fā)明藥物組合物的膠囊劑對(duì)社區(qū)獲得 性肺炎的大鼠模型給藥，觀察本發(fā)明藥物組合物對(duì)社區(qū)獲得性肺炎的影響。
[0038]方法:取75只4-6周SPF級(jí)雄性SD大鼠（購買自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射研究所），平均 體重120-160g，所有動(dòng)物在3級(jí)清潔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)3天以適應(yīng)環(huán)境。取其中50只大鼠每日 接種OOuLlO6CFlVmL的肺炎支原體純培養(yǎng)物，連續(xù)接種4天，將上述45只大鼠隨機(jī)分為4組， 每組15只，分別為感染組、阿奇霉素組、本發(fā)明實(shí)施例1組、本發(fā)明實(shí)施例2組，另外設(shè)15只大 鼠設(shè)為正常對(duì)照組，每組分籠飼養(yǎng)，每籠5只。
[0039] 各組處理如下:感染組跟其他組相同喂食，不做任何藥物處理;阿奇霉素組每日皮 下注射阿奇霉素（l〇mg/kg體重），配制濃度為10mg/mL的阿奇霉素藥物，即將500mg注射用阿 奇霉素溶于50mL生理鹽水中；本發(fā)明藥物組合物治療組每日皮下注射具體實(shí)施例1、2得到 的膠囊劑（l〇mg/kg體重，膠囊劑用生理鹽水溶解配制藥物組合物終濃度為10mg/mL的藥物 溶液）；正常對(duì)照組不做處理立即處死制作病理切片評(píng)分。
[0040]藥物處理后評(píng)估標(biāo)準(zhǔn) 各組均在最后一次接種開始處理，連續(xù)用相應(yīng)藥物組合物處理6天后處死大鼠，切開胸 腔后，經(jīng)氣管向肺內(nèi)注射10%甲醛溶液，固定肺組織。結(jié)扎氣管后，取完整的肺組織(包括完 整的左右支氣管），浸入盛有10%甲醛溶液的潔凈容器中，進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)分。采用用于倉 鼠的社區(qū)獲得性肺炎組織病理學(xué)評(píng)分系統(tǒng)對(duì)大鼠模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。采用盲法對(duì)組織病理學(xué)標(biāo) 本進(jìn)行評(píng)分，也就是評(píng)分的組織病理學(xué)工作者不知道組織的來源且來自于動(dòng)物的左右肺的 全部的被檢玻片均隨機(jī)化檢測(cè)。本評(píng)價(jià)系統(tǒng)由一個(gè)0-23分范圍的可數(shù)評(píng)分組成。在該評(píng)分 系統(tǒng)中，分別對(duì)每張切片的腔周圍浸潤而致的細(xì)支氣管和支氣管的數(shù)目，管腔周圍浸潤的 程度、管腔內(nèi)滲出的嚴(yán)重度、血管周圍浸潤的程度、實(shí)質(zhì)性肺炎的嚴(yán)重度進(jìn)行評(píng)分，合計(jì)積 分，隨后將每一側(cè)肺的評(píng)分相加除以2，得到每一只大鼠的肺組織病理學(xué)評(píng)分。
[0041 ] 組織病理學(xué)評(píng)分系統(tǒng)： A.細(xì)支氣管周圍/支氣管浸潤部位的百分率:0=無；1=少許(〈25%); 2=許多（25% - 75%); 3=所有(>75%) B. 細(xì)支氣管/支氣管周圍浸潤的定性:0=無，偶見輕微浸潤或支氣管周圍淋巴樣細(xì)胞團(tuán) 塊見于正常動(dòng)物；1=輕，不正常。常常伴有間斷的環(huán);2=中度，完整的環(huán)或新月形的環(huán)，伴有〈 5個(gè)細(xì)胞的厚度;3=嚴(yán)重，完全的環(huán)，伴有>5-10個(gè)細(xì)胞厚度 C. 細(xì)支氣管/支氣管腔滲出：0=無；1=輕度，〈25%腔閉合;2=重度，>25%腔閉合 D. 血管周圍浸潤.（部位的百分率）：0=無，1=少(〈10%); 2=許多（10%-50%); 3=大多數(shù)(> 50%) E. 實(shí)質(zhì)性肺炎:0=無；1=輕度:斑狀實(shí)質(zhì)性浸潤;2=重度:斑狀融臺(tái)的實(shí)質(zhì)性浸潤。
[0042] 最后分?jǐn)?shù)為A十3(B十C)+D+E，記錄每組每只大鼠評(píng)分，統(tǒng)計(jì)組間差異以及組內(nèi)差 異評(píng)估本發(fā)明藥物組合物藥效。
[0043]細(xì)菌清除評(píng)分系統(tǒng)： 清除：患者經(jīng)過兩個(gè)療程結(jié)束后，其標(biāo)本中的病原菌完全被清除。
[0044] 部分清除：患者治療后，其原有的病原菌有一種被清除。
[0045] 未清除：患者治療結(jié)束后，既往病原菌無變化。
[0046] 替換:既有病原菌被清除，但有新的病原菌出現(xiàn)，且有臨床癥狀。
[0047] 3.結(jié)果如表1: 表1不同組別病理學(xué)評(píng)分結(jié)果比較
注：與正常對(duì)照比相比，ΔΔΡ〈〇.〇1;與感染組相比，#?〈〇.〇1，與阿奇霉素組相比，％〈 0·05，##Ρ〈0·01〇
[0048] 4.結(jié)論 本發(fā)明藥物組合物能改善社區(qū)獲得性肺炎大鼠模型的病理學(xué)特征，并進(jìn)而改善社區(qū)獲 得性肺炎相關(guān)病癥，相比阿奇霉素，改善肺炎相關(guān)病理學(xué)癥狀的效果更加明顯。
[0049] 試驗(yàn)二:本發(fā)明藥物組合物對(duì)社區(qū)獲得性肺炎臨床志愿者患者的臨床療效觀察 (1)一般資料 患者150例，男75例，女75例；隨機(jī)分為3組，每組50人，年齡20-60歲，平均年齡41歲，明 確診斷為社區(qū)獲得性肺炎。按照國家衛(wèi)生計(jì)委頒發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)，社區(qū)獲得性肺炎篩選標(biāo)準(zhǔn)為：1. 新近出現(xiàn)的咳嗽、咳痰或原有呼吸道疾病癥狀加重，并出現(xiàn)膿性痰，伴或不伴胸痛;2.發(fā)熱； 3.肺實(shí)變體征和(或）聞及濕性哆音;4.WBC>10xl0 9個(gè)/L或<4xl09個(gè)/L，伴或不伴細(xì)胞核左 移;5.胸部X線檢查顯示片狀、斑片狀浸潤性陰影或間質(zhì)性改變，伴或不伴胸腔積液。
[0050] 以上1-4項(xiàng)中任何1項(xiàng)加第5項(xiàng)，并除外肺結(jié)核、肺部腫瘤、非感染性肺間質(zhì)性疾病、 肺水腫、肺不張、肺栓塞、肺嗜酸性粒細(xì)胞浸潤癥及肺血管炎等后，可建立臨床診斷。
[0051 ] (2)治療方法 對(duì)患者采用本發(fā)明具體實(shí)施例1-3得到的中藥組合物膠囊制劑，一日2次，每次3粒，連 續(xù)6日為一個(gè)療程，連續(xù)使用2個(gè)療程并且每個(gè)療程觀察患者癥狀。
[0052] (3)療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 治療效果： 痊愈:患者經(jīng)過治療后，其臨床癥狀、體征、病原學(xué)檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查均完全恢復(fù)正常。 顯效:患者治療后，其癥狀體征等明顯好轉(zhuǎn)，但四項(xiàng)檢查中有一項(xiàng)尚未恢復(fù)正常。
[0053]好轉(zhuǎn):患者治療后，臨床癥狀等有所好轉(zhuǎn)。
[0054]無效:患者經(jīng)過治療后，各項(xiàng)檢查無明顯變化，甚至加重。
[0055] 細(xì)菌清除率： 清除：患者經(jīng)過兩個(gè)療程結(jié)束后，其標(biāo)本中的病原菌完全被清除。
[0056]部分清除：患者治療后，其原有的病原菌有一種被清除。
[0057]未清除：患者治療結(jié)束后，既往病原菌無變化。
[0058]替換:既有病原菌被清除，但有新的病原菌出現(xiàn)，且有臨床癥狀。
[0059] (4)治療結(jié)果如下表。
[0060] 表2社區(qū)獲得性肺炎臨床志愿者使用本發(fā)明藥物組合物1個(gè)療程后的效果統(tǒng)計(jì)
表3社區(qū)獲得性肺炎臨床志愿者使用本發(fā)明藥物組合物2個(gè)療程后的效果統(tǒng)計(jì)
表4社區(qū)獲得性肺炎臨床志愿者使用本發(fā)明藥物組合物后的細(xì)菌清除結(jié)果統(tǒng)計(jì)
(5)結(jié)論 從表2-4可以得出，本發(fā)明藥物組合物具有消炎潤肺，清除病原的功效，而且針對(duì)性強(qiáng)， 療程短，能夠有效治療社區(qū)獲得性肺炎。
[0061] 由于已經(jīng)通過以上較佳實(shí)施例描述了本發(fā)明，在本發(fā)明的精神和/或范圍內(nèi)，任何 針對(duì)本發(fā)明的替換/或組合來實(shí)施本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說都是顯而易見的，且 包含在本發(fā)明之中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法，其特征在于包括以下步驟： S1:稱取藥物組合物中重量份數(shù)的制備原料:桑葉10-20份、鮮地黃9-15份、胡頹子葉8-15份、川貝母8-12份、萊菔子6-12份、沙參3-10份、蘭石草3-10份、麥門冬3-8份、雪里開3-8 份、石斛3-6份、人參2-6份和甘草1-10份;取桑葉，洗去雜質(zhì)，50°C熱風(fēng)干燥5小時(shí)，控制水分 含量為3-8%，粉碎，過40-60目篩，得粗粉，將粗粉吸入氣流式超微粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎，粉 碎壓力0.5MPa，進(jìn)料速度為30mg/s，干燥后分別進(jìn)行超微粉碎，過800目篩，得桑葉超微粉， 備用； S2:取鮮地黃、胡頹子葉、川貝母、萊菔子、沙參、蘭石草、麥門冬、雪里開、石斛、人參和 甘草，加入藥材總量3-7倍重量的蒸餾水浸泡3-8小時(shí)，煮沸3-5小時(shí)，過濾，得到濾液和濾 渣，往濾渣中加入初始藥材3-6倍重量的純化水，煮沸1-3小時(shí)，過濾得到濾液并保存濾渣， 合并兩次濾液，濃縮，得到在65°C檢測(cè)相對(duì)密度為1.10-1.25的浸膏A，備用； S3:往S2的濾渣中加入3-7倍重量的濃度60-75%的乙醇，回流提取1-2次，每次3-6小時(shí)， 過濾，合并濾液，減壓蒸餾除去乙醇并濃縮，得到65°C相對(duì)密度為1.15-1.25的浸膏B，備用； S4:將所述浸膏A與所述浸膏B混合均勻，減壓干燥，粉碎，過100-200目篩，與桑葉超微 粉混勻，添加輔料，利用現(xiàn)代通用的中藥制劑技術(shù)制成臨床需要的成品制劑。2. 如權(quán)利要求1所述的一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法，其特征在 于，所述的藥物組合物包括以下重量份數(shù)的制備原料:桑葉10份、鮮地黃9份、胡頹子葉8份、 川貝母8份、萊菔子6份、沙參3份、蘭石草3份、麥門冬3份、雪里開3份、石斛3份、人參2份和甘 草1份。3. 如權(quán)利要求1所述的一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法，其特征在 于，所述的藥物組合物包括以下重量份數(shù)的制備原料:桑葉15份、鮮地黃12份、胡頹子葉12 份、川貝母10份、萊菔子9份、沙參6份、蘭石草6份、麥門冬5份、雪里開5份、石斛4份、人參4份 和甘草5份。4. 如權(quán)利要求1所述的一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法，其特征在 于，所述的藥物組合物包括以下重量份數(shù)的制備原料:桑葉20份、鮮地黃15份、胡頹子葉15 份、川貝母12份、萊菔子12份、沙參10份、蘭石草10份、麥門冬8份、雪里開8份、石斛6份、人參 6份和甘草10份。5. 如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法， 其特征在于:所述藥物組合物被制成膠囊劑、片劑或顆粒劑。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種制備治療社區(qū)獲得性肺炎的藥物組合物的方法。該方法是將桑葉超微粉碎備用，取鮮地黃、胡頹子葉、川貝母、萊菔子、沙參、蘭石草、麥門冬、雪里開、石斛、人參和甘草煎煮得到濾液并保存濾渣，將濾液濃縮得到浸膏，備用；再將濾渣醇提取并濃縮，得到浸膏備用；將所得兩浸膏混合均勻，減壓干燥，粉碎，過篩，與桑葉超微粉混勻，添加輔料，利用現(xiàn)代通用的中藥制劑技術(shù)制成臨床需要的成品制劑。本發(fā)明制備工藝簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。且本發(fā)明治療社區(qū)獲得性肺炎，針對(duì)性強(qiáng)，療效明顯，治愈率高。
【IPC分類】A61P11/00, A61K36/8984
【公開號(hào)】CN105434891
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511001707
【發(fā)明人】劉學(xué)鍵
【申請(qǐng)人】青島華之草醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年3月30日
【申請(qǐng)日】2015年12月29日