成。
[0041] 材料中膠原蛋白和徑基憐灰石的成分比例與天然骨基本一致?；w結(jié)構(gòu)使用的陶 瓷粉為無機(jī)多孔材料，不但對(duì)細(xì)胞的成長(zhǎng)有誘導(dǎo)作用，還對(duì)提高骨修復(fù)材料的機(jī)械強(qiáng)度有 積極作用，避免了材料過快降解。
[0042] 基體和填充物中都含有促進(jìn)骨折有愈合作用的金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液。金黃 色葡萄球菌發(fā)酵液濾液的主要成分是蛋白質(zhì)、多膚、十八種氨基酸、游離凝固酶。主要藥理 作用是促進(jìn)骨折愈合，治療骨質(zhì)疏松癥。在臨床應(yīng)用中主要在病變部位進(jìn)行肌肉注射，效果 很好，但副作用是引起局部腫脹感、疼痛、發(fā)熱等現(xiàn)象，讓病人產(chǎn)生排斥。本發(fā)明創(chuàng)造性的把 金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液加入到骨修復(fù)材料中，保持金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液在材料 中持續(xù)釋放，發(fā)揮它的獨(dú)特藥理作用，隨著組織液的滲入和材料的降解，先期膠原纖維中金 黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液的藥理成分先快速進(jìn)行釋放，隨后基體材料中的藥理成分隨著基 體材料的分解進(jìn)行后續(xù)的持續(xù)釋放，發(fā)揮長(zhǎng)效作用。
【附圖說明】 陽(yáng)0創(chuàng)本發(fā)明附圖4幅，
[0044]圖1為本發(fā)明骨修復(fù)材料結(jié)構(gòu)示意圖； W45] 圖2為實(shí)施例4制備樣品的掃描電鏡圖；
[0046] 圖3骨修復(fù)材料非主通道部分掃描電子顯微鏡圖像，從掃描圖中可見骨修復(fù)材料 的結(jié)構(gòu)為多維立體，非主通道部分孔徑為30-180μm，微孔占有率為85% ;
[0047] 圖4骨修復(fù)材料主通道中孔徑分布，可見主通道中膠原纖維的孔徑主要為 130-450μL?；
[0048] 圖中，1基體結(jié)構(gòu)；2凸臺(tái)I;3凸臺(tái)II;4凹槽；5通孔；6裂隙。
【具體實(shí)施方式】
[0049] 下述非限制性實(shí)施例可W使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不W 任何方式限制本發(fā)明。
[0050] 本發(fā)明原料采用本領(lǐng)域技術(shù)通用材料即可實(shí)現(xiàn)發(fā)明效果，W下為實(shí)施例為優(yōu)選的 原料預(yù)處理方案：
[0051] 1、礦化膠原；制備方法參見Masanori Kikuchi, Soichiro Itoh, ect. Self-organization mechanism in a Bone-Like Hydroxyapatite/CoHagen Nanocomposite synthesized in vitro and Its Biological民action in vivo. Biomaterials 22 (20〇]_) 1705-1711。其中Ca:P二1~2:1，鞋基5葬灰石：膠原蛋白二 4:0. 8~1. 2,鞋基麟灰石的C軸和膠原纖維長(zhǎng)度平行，電導(dǎo)率小于20us/cm，含水量80% (g/g)。
[0052] 2、陶瓷粉：將按重量比二氧化娃1~5,氧化儀1~5,氣化巧1~5與聚乳酸混 合，成型，200°C烘干，然后在1100~1300°C般燒化，冷卻后粉碎成粒徑為80~300μm，孔 徑為60~210μm，孔隙率大于80%，部分孔是相通的多孔結(jié)構(gòu)體。
[0053] 3、金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液：市售（購(gòu)自于長(zhǎng)春高±達(dá)生化藥業(yè)公司）的金黃 色葡萄球菌發(fā)酵液濾液采用截留分子量為20000道爾頓的超濾膜超濾，膜上部分為含凝固 酶濃縮液，再經(jīng)-0. 〇98MPa40°C低溫真空濃縮制備金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液凝固酶活性 不小于3200μg/ml的濃縮液。
[0054] 4、膠原纖維： 陽(yáng)化5] a.將純度為99. 5 %W上的牛跟腫和/或馬跟腫的I膠原溶于濃度為20mM醋酸或 憐酸溶液中，膠原濃度為2.Og/L，向膠原溶液中滴加堿液，濃度為70mM，并保持lOmMMg2\ 20mMK\20mMHP0/+離子，抑值7. 0。獲得膠原纖維，陳化也然后在4°C6000巧m離屯、 30min，收集膠原纖維沉淀，含水量85% (g/g)。
[0056] 實(shí)施例1-4用于壓制基體結(jié)構(gòu)的模具依照W下結(jié)構(gòu)加工：
[0057] 基體具有層狀的基體結(jié)構(gòu)1 ;所述基體結(jié)構(gòu)1的一個(gè)表面設(shè)有若干列凸臺(tái)I2,另 一表面設(shè)有若干列凸臺(tái)II3 ;所述凸臺(tái)I2與凸臺(tái)II3相間排列；相鄰的凸臺(tái)I2之間、相 鄰的凸臺(tái)II3之間構(gòu)成凹槽4 ;垂直于所述凸臺(tái)I2表面設(shè)有若干個(gè)通孔5。材料由至少兩 層所述的基體結(jié)構(gòu)1層疊構(gòu)成；相鄰兩層基體結(jié)構(gòu)1的凹槽4取向基本垂直；逐層基體結(jié)構(gòu) 1的通孔5相應(yīng)地連通。通孔5的孔壁臨近凹槽4處具有裂隙6,所述通孔5經(jīng)裂隙6與相 鄰的凹槽4連通。 陽(yáng)05引實(shí)施例1
[0059] 骨修復(fù)材料制備
[0060] 步驟一配制基體材料
[0061] 稱取50g礦化膠原材料（含水量為80% )，向其中加入陶瓷粉2g，W10化pm的轉(zhuǎn)速 順時(shí)針攬拌均勻，用1. 0M憐酸液和1. 0M氨氧化鋼堿液調(diào)節(jié)抑值到7. 0,然后用0. 5M碳酸 鋼溶液調(diào)節(jié)抑值到7. 2,電導(dǎo)率為1. 5ms/cm。靜止30min，10000巧m4°C離屯、30min去掉上 清液。向沉淀中加入金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液，使凝固酶活性為1600μg/g，加入37. 5g 膠原蛋白材料（膠原蛋白的純度為40mg/g)，繼續(xù)同一方向均勻攬拌，并調(diào)節(jié)沉淀使復(fù)合礦 化膠原基體的抑值為7. 2,電導(dǎo)率為3.Oms/cm。在大于1. 01X102化真空條件下脫氣，再 繼續(xù)用1. 0M憐酸液和1. 0M氨氧化鋼堿液調(diào)節(jié)使電導(dǎo)率為7.Oms/cm。
[0062] 步驟二預(yù)制基體（制備壓縮前的層狀基體結(jié)構(gòu)）
[0063] 將制備的基體材料向同一順應(yīng)方向壓入模具中，使預(yù)制基體的厚度為8mm，凹槽深 度為2mm，凹槽寬度為2mm;凸臺(tái)I與凸臺(tái)II均寬2mm;通孔孔徑3mm，裂隙寬度1mm;每列凸 臺(tái)I中通孔間距為2mm。然后在30°C，相對(duì)濕度為90%W上的條件下陳化12h，得預(yù)制基體。
[0064] 步驟Ξ制備填充物 陽(yáng)0化]稱取膠原纖維加入水稀釋成15mg/g，向其中加入金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液，使 金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液凝固活性為400μg/g，順序攬拌均勻，在1. 01Xl〇3pa壓力下真 空脫氣。
[0066] 步驟四填充、層疊
[0067] 向步驟二制備的預(yù)制基體上下表面的凹槽和通孔中填充步驟Ξ制備的填充物；填 充時(shí)從一側(cè)向另一側(cè)水平鋪入或充入；然后進(jìn)行立體層疊預(yù)制基體，基體層數(shù)為4層，層疊 時(shí)使層間通孔相通，通孔和基體材料平面形成角度為75~90度，得層疊體。
[0068] 步驟五定型
[0069] 將步驟四制備的層疊體按照垂直于液面方向緩慢移入液氮中凍結(jié)成型，然后真空 冷凍干燥，當(dāng)產(chǎn)品水分含量為10~15% (g/g)時(shí)，進(jìn)行200MPa的冷等靜壓縮，然后再繼續(xù) 真空干燥至水分含量為5 %W下。
[0070] 壓縮后，骨修復(fù)材料厚度為4000μm;非主通道部分孔徑為30~180μm，主通道部 分孔徑為130~450μm。
[0071] 步驟六熱加工
[0072] 將材料進(jìn)行高純氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下110°C交聯(lián)lOh，制得產(chǎn)品。 陽(yáng)〇7引 實(shí)施例2
[0074] 步驟一配制基體材料 陽(yáng)0巧]稱取65g礦化膠原材料（含水量為80% )，向其中加入陶瓷粉2g，W10化pm的轉(zhuǎn) 速順時(shí)針攬拌均勻，然后用1. 0M憐酸液和1. 0M氨氧化鋼堿液調(diào)節(jié)抑值到7. 0,然后用0. 5M 碳酸鋼溶液調(diào)節(jié)抑值到7. 2,電導(dǎo)率為1. 5ms/cm。靜止30min，10000巧m4°C離屯、30min 去掉上清液。向沉淀中加入金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液，使凝固酶活性為3200μg/g，加入 75g膠原蛋白材料（膠原蛋白的純度為40mg/g)，繼續(xù)同一方向均勻攬拌，并調(diào)節(jié)沉淀使復(fù) 合礦化膠原基體的抑值為7. 2,電導(dǎo)率為3.Oms/cm。在大于1. 01X102化真空條件下脫氣， 再繼續(xù)用1. 0M憐酸液和1. 0M氨氧化鋼堿液調(diào)節(jié)使電導(dǎo)率為7.Oms/cm。
[0076] 步驟二預(yù)制基體（制備壓縮前的層狀的基體結(jié)構(gòu)）
[0077] 將制備基體材料向同一順應(yīng)方向壓入模具中，使預(yù)制基體的厚度為9mm，凹槽深度 為4mm，凹槽寬度為3mm;凸臺(tái)I與凸臺(tái)II均寬3mm;通孔孔徑4mm，裂隙寬度1mm;每列凸臺(tái) I中通孔間距為3mm。然后在30°C，相對(duì)濕度為90%W上的條件下陳化12h，得預(yù)制基體。
[0078] 步驟Ξ制備填充物
[0079] 稱取膠原纖維加入水稀釋成lOmg/g，向其中加入金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液，使 金黃色葡萄球菌發(fā)酵液濾液凝固活性為400μg/ml，順序攬拌均勻，在1. 01Xl〇3pa壓力下 真空脫氣。
[0080] 步驟四填充、層疊
[0081] 向步驟二制備的預(yù)制基體的上下表面、凹槽和通孔用填充物從一側(cè)向另一側(cè)水平 鋪入或充入；然后進(jìn)行立體層疊預(yù)制基體，基體材料層數(shù)為4層，層疊時(shí)使層間通孔相通， 通孔和基體材料平面形成角度為75~90度，得層疊體。
[0082] 步驟五定型
[0083] 將步驟四制備的層疊體按照垂直于液面方向緩慢移入液氮中凍結(jié)成型，然后真空 冷凍干燥，當(dāng)產(chǎn)品水分含量為10~15% (g/g)時(shí)，進(jìn)行200MPa的冷等靜壓縮，然后再繼續(xù) 真空干燥至水分含量為5 %W下。
[0084] 壓縮后，骨修復(fù)材料厚度為4000μm;非主通道部分孔徑為30~180μm，主通道部 分孔徑為130~450μm。 陽(yáng)0化]步驟六熱加工
[0086] 將材料進(jìn)行高純氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下105°C交聯(lián)12h，制得產(chǎn)品。
[0087] 實(shí)施例3
[0088] 步驟一配制基體材料
[0089]稱取50g礦化膠原材料材料（含水量為80% )，向其中加入陶瓷粉Ig，W10化pm 的轉(zhuǎn)速順時(shí)針攬拌均勻，然后用1. 0M憐酸液和1. 0M氨