使免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)與生物藥品的給藥相關(guān)的方法和制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種方法和制劑，其使免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)與生物藥品的給藥相關(guān)。
【背景技術(shù)】
[0002] 由于多種原因，例如分子大小，許多現(xiàn)代藥物如生物藥物不適合用于口服給藥。相 反地，需要侵入式注射至血管外位置，如皮下注射（s.c.)、肌內(nèi)注射（i.m.)、或直接注射至 血管系統(tǒng)，如靜脈注射（i.v.)。在這些選擇中，皮下注射途徑通常是最優(yōu)選的。其中一個(gè)主 要的原因是，其允許患者自我給藥，這對(duì)于長(zhǎng)期治療的情況而言是特別重要的。此外，相對(duì) 于靜脈注射給藥，皮下注射是微創(chuàng)的，因此相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)通常較低，如在較差的衛(wèi)生條件情況 下無(wú)意中注入。盡管在皮下空間的吸收僅僅是局部的，且由于生物利用度低通常需要增加 劑量從而導(dǎo)致更高的治療成本，皮下注射給藥也是有利的。
[0003] 除了監(jiān)管和感覺(jué)功能，皮膚的主要功能是保護(hù)。它不但充當(dāng)應(yīng)對(duì)機(jī)械應(yīng)力的屏障， 還充當(dāng)微生物的第一道屏障以保護(hù)個(gè)體，在感染/炎癥的風(fēng)險(xiǎn)增加情況下皮膚會(huì)損傷可以 說(shuō)明此事。單獨(dú)的機(jī)械功能是不夠的，pH值和某些位置、蛋白酶也對(duì)病原體起到附加的化學(xué) 防御機(jī)制。重要的是，保護(hù)的高效機(jī)制是通過(guò)組織的免疫系統(tǒng)加強(qiáng)監(jiān)視。病原體的生理檢 測(cè)是所期望的，而大多數(shù)情況下免疫系統(tǒng)（如病原體）對(duì)生物藥物的處理是不需要的。從 而加強(qiáng)監(jiān)視解釋了生物藥物的皮下注射給藥的第二個(gè)缺陷，也稱為不需要的免疫原性，除 了因更高量的產(chǎn)品使用而導(dǎo)致成本增加之外，還需要在生產(chǎn)開(kāi)發(fā)這種產(chǎn)品類別上做出更多 的努力。這種不需要的免疫原性可能會(huì)導(dǎo)致各種后果?？赡軙?huì)導(dǎo)致療效的損失，增加清除 循環(huán)（clearancefromcirculation)或觸發(fā)潛在危及生命的過(guò)敏反應(yīng)。由于療效損失可 能經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間才注意到，而這種產(chǎn)品類別價(jià)格高，這也可能意味著將不必要的成本轉(zhuǎn)嫁到 醫(yī)療保健系統(tǒng)中。從患者和醫(yī)療接受者最優(yōu)選的角度來(lái)看，有限的生物利用度和如免疫原 性的風(fēng)險(xiǎn)一起會(huì)造成嚴(yán)重的問(wèn)題。
[0004] 由于對(duì)與病人發(fā)生免疫原性相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因素（如遺傳傾向）知之甚少，從而難以 控制?？刂坪蛢?yōu)化產(chǎn)品相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因素是讓患者從現(xiàn)代療法充分受益的唯一機(jī)會(huì)，如生物 制劑，特別是由于規(guī)定了它們是在所有其它治療方案已經(jīng)失敗了情況下才使用，這也是因 為其成本過(guò)高的結(jié)果。
[0005] 在此背景下，在大多數(shù)情況下所希望的調(diào)節(jié)是旨在減少免疫原性，因?yàn)樵诖蠖鄶?shù) 情況下，藥物具有被免疫系統(tǒng)識(shí)別的潛在可能性，包括隨后抗體的形成，只有當(dāng)沒(méi)有這樣的 免疫反應(yīng)發(fā)生時(shí)才是充分有效和安全的。另一方面，療法存在特異性旨在引起合適的免疫 反應(yīng)，以消除指定目標(biāo)或使得指定目標(biāo)失去活性。單獨(dú)的目標(biāo)可能是能被識(shí)別/中和的異 性蛋白。
[0006] 在所有這些情況下，可能希望進(jìn)一步增加藥物產(chǎn)生預(yù)期的免疫反應(yīng)，和在給藥溶 液存在檸檬酸的情況下，或前述制造階段可能是有益于這一方面。
[0007] 現(xiàn)有技術(shù)階段的制劑，例如作為抗TNF-a(anti-TNFα)抗體阿達(dá)木單抗的制劑， Humira、k'含有磷酸鹽且以檸檬酸作為緩沖物質(zhì)，符合給藥耐受性、生物藥品的穩(wěn)定性和保 質(zhì)期的要求。
[0008] 然而，上述制劑具有許多缺點(diǎn)。一個(gè)缺點(diǎn)是許多生物制藥在皮下注射給藥時(shí)會(huì)誘 導(dǎo)如上概述的不需要的免疫原性。由于它們的抗原性質(zhì)，難以分析的其他蛋白質(zhì)類污染物 也會(huì)在人類中觸發(fā)免疫反應(yīng)。此外，由于它們通常的物種特定屬性，動(dòng)物來(lái)源的蛋白質(zhì)會(huì)在 人類中觸發(fā)免疫反應(yīng)。即使在現(xiàn)有技術(shù)制造方法中這樣反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)已經(jīng)很低了，但它可能 會(huì)隨時(shí)間積累，特別是在這類藥物的慢性再運(yùn)用中。
[0009] 特別是要擔(dān)心的是在皮下注射給藥的情況下，這是由于通過(guò)血液去除和分配相比 靜脈注射給藥更延遲。因此，一種有利的制劑將有助于減少藥物誘發(fā)免疫原性并提供更具 成本效益的藥物，或增加藥物誘導(dǎo)免疫原性，在此情況下，這是作為預(yù)防性或治療性干預(yù)的 預(yù)期反應(yīng)。
[0010] 本發(fā)明要解決的問(wèn)題是提供一種用于生物藥品的制劑形式，其不會(huì)表現(xiàn)出上述迄 今已知?jiǎng)┬偷娜秉c(diǎn)，如果需要的話，提供的制劑形式是針對(duì)低免疫原性或?qū)е略黾用庖叻?應(yīng)情況。它特別是適合于由患者或受過(guò)訓(xùn)練的醫(yī)療個(gè)人自我給藥，且具有減少免疫原性或 根據(jù)醫(yī)療狀況增加免疫原性和/或在同一時(shí)間避免不期望的皮膚刺激和/或通過(guò)注射裝置 (自）給藥時(shí)在注射部位發(fā)生的疼痛。
[0011] 因此，有必要提供適用于腸胃外的藥物制劑，特別是皮下注射、給藥/注射。
[0012] 這個(gè)問(wèn)題通過(guò)在權(quán)利要求中表征的實(shí)施方式解決。本發(fā)明制備制劑的方法具有減 少或如在本說(shuō)明書(shū)中描述的增加生物藥品的免疫原性的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明基于令人驚訝的觀察 結(jié)果，即免疫反應(yīng)可以通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)闹苿┻M(jìn)行調(diào)節(jié)，該制劑包括己二酸和/或適當(dāng)水平 檸檬酸。具有被免疫系統(tǒng)識(shí)別的潛力，這對(duì)藥物而言是特別理想。這使得本發(fā)明的制劑在 用于即用型注射器和其所提供的試劑盒是合適和有利的，如用于家庭。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述之前，應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明并不限于所描述裝置的特定 組成部件或所描述方法的工藝步驟，這樣的裝置和方法是可以變化的。還需要理解的是， 本文所使用的術(shù)語(yǔ)僅是為了描述特定的實(shí)施例，并不意圖起限制性作用。必須指出的是， 除非上下文另有明確說(shuō)明外，如在說(shuō)明書(shū)和所附權(quán)利要求中的單數(shù)形式"一個(gè)（a) "，"一個(gè) (an)"，及"該（the)"包括單數(shù)和/或復(fù)數(shù)個(gè)對(duì)象。還需要理解的是，在給出參數(shù)范圍的情 況下，其范圍通過(guò)給出數(shù)值來(lái)確定界限，該范圍被認(rèn)為包括這些限定值。
[0014] 在第一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種制備包含生物藥品的藥物制劑的方法，該方法使 得免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)與其給藥相關(guān)。該方法包括以下步驟：
[0015] (1)提供緩沖液，該緩沖液包括：
[0016] 己二酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽，和/或
[0017] 檸檬酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽
[0018] (2)將該緩沖液與生物藥品接觸
[0019] (3)可選擇地凍干該制劑，及
[0020] (4)得到步驟⑵的制劑或懸浮液和/或步驟（3)的凍干制劑。
[0021] 己二酸（Hexanedioicacid)是羧酸化合物，其也被稱為肥酸（adipicacid)， 1，4-丁二駿酸，1，6-己二酸，己二酸（acifloctin)，己二酸（acinetten)，己二酸（adipinic acid)，八氟己二酸（octafluorohexanedioic)或恪融的肥酸。肥酸的分子式為C6H1Q04，其 分子量為 146.lg/mol。術(shù)語(yǔ)"肥酸（adipicacid)"和"己二酸（hexanedioicacid)"在本 文可互換使用。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種采用己二酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽，和/ 或檸檬酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽的方法，該方法能夠調(diào)節(jié)包含生物藥品的藥物制劑的免 疫原性。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供一種藥物制劑，其可以使免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)與其給 藥相關(guān)。該制劑包含生物藥品，及
[0024] 己二酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽，和/或
[0025] 檸檬酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽，
[0026] 或通過(guò)上述討論的方法獲得的制劑。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"藥物制劑"涉及任何適合于對(duì)患者給藥的制劑，并且包括能表 現(xiàn)出治療和/或診斷效果的藥物。這樣的"藥物制劑"優(yōu)選為藥物緩釋制劑。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種調(diào)節(jié)與藥物制劑給藥相關(guān)的免疫反應(yīng)的方 法。該方法包括在含有緩沖液的制劑中調(diào)整下述物質(zhì)濃度的步驟，
[0029] 乙二酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽，和/或
[0030] 檸檬酸或至少一種其所對(duì)應(yīng)的鹽。
[0031] 如本文所用的術(shù)語(yǔ)"免疫原性（immunogenicity) "和/或"免疫原性的 (immunogenic) "和/或"免疫原性的速率"應(yīng)當(dāng)從分子的勢(shì)能角度來(lái)理解，當(dāng)注射至受試 者，可以被免疫系統(tǒng)識(shí)別，包括在隨后的反應(yīng)中，不論是有意或無(wú)意的，如抗分子的抗體的 形成，即可能導(dǎo)致/誘導(dǎo)影響受試者的免疫系統(tǒng)的反應(yīng)。
[0032] 如本文所用的"免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)"應(yīng)理解為增加或減少給定制劑的與給藥有關(guān)的 免疫原性。而在許多情況下，為提高患者的順應(yīng)性并降低有害的副作用，免疫原性的減少可 能是需要的，在其它情況下免疫原性的增加是需要的。
[0033] 這里使用的術(shù)語(yǔ)"減少的免疫原性"涉及一種包括至少一種生物藥品分子的制劑， 當(dāng)注射給患者，例如皮下注射，會(huì)造成/誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，該免疫反應(yīng)實(shí)質(zhì)上不比參照分子引 起的免疫反應(yīng)強(qiáng)烈，參照分子表示為本質(zhì)上不具有免疫原性。
[0034] 如本文所用的術(shù)語(yǔ)"生物藥品"應(yīng)包括任何從生物或從生物源衍生得到的治療劑 或診斷分子，或化學(xué)合成的等同于從該來(lái)源獲得的產(chǎn)品，如蛋白質(zhì)、肽、核酸、免疫球蛋白、 多糖、細(xì)胞產(chǎn)物、植物提取物、動(dòng)物提取物、重組蛋白或它們的組合。通常，生物藥品是指生 物藥物的活性成分。術(shù)語(yǔ)"藥物"和"化合物"在本文可互換使用，并且是指用于診斷、預(yù)防 或治療疾病的癥狀、身體或精神狀況、損傷或感染的（一個(gè)或多個(gè)）藥劑和/或（一個(gè)或多 個(gè)）藥物。
[0035] 術(shù)語(yǔ)"生物利用度"是指在給藥后，藥物或其他物質(zhì)被吸收或在生理活性的部位變 得有效的程度或速率。大分子的生物利用度可通過(guò)在體內(nèi)采用本領(lǐng)域中已知的藥物動(dòng)力學(xué) 的方法測(cè)定。
[0036] 合適的免疫原性的評(píng)估測(cè)定法是本領(lǐng)域熟知的，包括定性和半定量結(jié)合測(cè)定法、 中和測(cè)定法、和驗(yàn)證性測(cè)定法（免疫以及免疫層析測(cè)定法），用于測(cè)定抗藥物抗體（ADAs)。 進(jìn)一步的分析包括采用定性測(cè)定法進(jìn)行總抗體測(cè)定（屏幕和滴定度（screenandtitre))， 采用了ELISA、ECL、RIA和流式細(xì)胞儀（包括用于增加耐藥性的酸解離"AD"和固相萃取 "SPEAD"和"BEAD"化驗(yàn)）驗(yàn)證性試驗(yàn)（特異性）?；诩?xì)胞檢測(cè)用于測(cè)定大分子的中和抗 體和毒代動(dòng)力學(xué)分析也是眾所周知的。
[0037] 術(shù)語(yǔ)"受試者"或"個(gè)體"或"動(dòng)物"或"患者"或"哺乳動(dòng)物"，是指任何受試者，特 別是哺乳動(dòng)物受試者，對(duì)他們來(lái)說(shuō)，診斷、預(yù)知、預(yù)防或治療是期望的。為了治療的目的，"哺 乳動(dòng)物"是指分類為哺乳動(dòng)物的任何動(dòng)物，包括但不限于人、家畜、及在動(dòng)物園、運(yùn)動(dòng)所的動(dòng) 物或?qū)櫸飫?dòng)物，如狗、馬、貓、牛等任何動(dòng)物。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物為人。
[0038] 在本發(fā)明的范圍內(nèi)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，令人驚訝地發(fā)現(xiàn)：給藥后一周后，相比市售 藥物和參考制劑，己二酸緩沖制劑經(jīng)皮下注射給兔子時(shí)具有良好的可接受性/相容性和更 低的清除（clearance)。因此，如實(shí)施例1和2所示，免疫原性受所選擇的制劑或使用的溶 液中己二酸的適當(dāng)濃度的影響。具有被免疫系統(tǒng)識(shí)別的潛力，這對(duì)于藥物而言是特別理想 的。
[0039] 許多因素會(huì)影響包括生物藥品的藥物制劑的免疫原性，包括結(jié)構(gòu)特征（序列變異 和