一種連續(xù)提取沙棘籽中活性成分的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物的提取與分離純化技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種連續(xù)提取沙棘籽中活 性成分的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 沙棘HippophaerhamnoidesL.為胡頹子科沙棘屬植物，具有健脾消食，止咳祛痰， 活血散瘀功效（高錦明等，1998 ;高錦明和張鞍靈，1999)。沙棘籽除含有大量油脂外，還含 有黃酮、生物堿、多糖、原花色素、皂苷等活性成分。已被制備成處方藥復(fù)方沙棘籽油栓，用 來(lái)治療宮頸炎取得了很好的療效（王雙雙等，2014)。現(xiàn)代藥理研究表明，沙棘籽油對(duì)心腦 血管及肝臟等器官有較好的保護(hù)作用，可以降血脂、抗抑郁、抗輻射、增強(qiáng)免疫力（臧茜茜 等，2015)。
[0003] 沙棘籽主要用來(lái)提取沙棘籽油。目前，對(duì)沙棘籽油的提取主要采用壓榨法、超臨界 流體萃取法和溶劑提取法。壓榨法的出油率低，浪費(fèi)大；超臨界流體萃取法需要的設(shè)備造價(jià) 較高，小型生產(chǎn)廠家難以承受；溶劑提取法在提取過(guò)程中大多要加熱，沙棘油中的熱不穩(wěn)定 性活性成分會(huì)發(fā)生聚合、氧化等作用而導(dǎo)致結(jié)構(gòu)上的破壞。超聲輔助提取法是利用超聲波 的空化作用破壞植物細(xì)胞，使溶劑更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，從而提高提取效率，且提取過(guò)程避 免了高溫對(duì)活性成分的破壞。有學(xué)者研究了沙棘籽油的超聲波提取方法，但沒有考慮超聲 波頻率對(duì)提取得率的影響因素（張海容和朱迎春，2009)。超聲頻率是影響超聲波提取的重 要因素，高頻超聲波對(duì)細(xì)胞只能起到軟化作用，低頻超聲波才能粉碎細(xì)胞壁，促使溶劑進(jìn)入 細(xì)胞提取成分（Dongetal.，2010) 〇
[0004] 此外，提取沙棘籽油后的油柏大多被丟棄，造成資源的巨大浪費(fèi)。研究表明，沙 棘籽黃酮具有抗氧化（陳麗娜和吳瓊，2011)和降血脂作用（楊現(xiàn)艷等，2007)。三萜皂苷 有很強(qiáng)的抗腫瘤作用，且不會(huì)對(duì)正常細(xì)胞造成傷害（Shanmugametal.，2013;Shanmugamet al，. 2014)。但目前未見有關(guān)沙棘籽油、沙棘黃酮和三萜皂苷等活性成分連續(xù)提取的超聲波 提取工藝研究。
[0005] 參考文獻(xiàn)：
[0006] 高錦明，李蕓生，張鞍靈，等·沙棘黃酮化學(xué)研究進(jìn)展，沙棘，1998, 11 (2) :34-39
[0007] 高錦明，張鞍靈.中國(guó)沙棘果實(shí)黃酮成分的研究，西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，1999, 14(3): 52-55
[0008] 王雙雙，楊紅耀，梁殿迅.微波聯(lián)合復(fù)方沙棘籽油栓治療宮頸炎患者人乳頭狀瘤 病毒感染的研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014, 16:4100-4102.
[0009] 臧茜茜，鄧乾春，從仁懷，等.沙棘油功效成分及藥理功能研究進(jìn)展[J].中國(guó) 油脂，2015, 05:76-81.
[0010] 張海容，朱迎春.超聲萃取沙棘籽油的研究[J].中國(guó)釀造，2009, 10:96-98. [0011] 陳麗娜，吳瓊.沙棘籽及果皮渣黃酮粗提物抗氧化作用研究[J].食品研究與開 發(fā)，2011，10:51-53.
[0012] 楊現(xiàn)艷，瞿偉菁，徐自良，等.沙棘籽渣黃酮和沙棘油對(duì)高糖高脂誘導(dǎo)的老年肥 胖雌鼠血脂的影響[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2007, 03:284-287.
[0013] ShanmugamΜK，DaiX,KumarAP，etal.Oleanolicacidanditssynthetic derivativesforthepreventionandtherapyofcancer:Preclinicalandclinical evidence[J] ·CancerLett，2014, 346(2) :206-216.
[0014] ShanmugamΜK，DaiX,KumarAP，etal.Ursolicacidincancerprevention andtreatment:moleculartargets,pharmacokineticsandclinicalstudies[J].Bioch emPharmacol，2013, 85:1579-1587.
[0015] DongJuane，LiuYuanbai，LiangZongsuo,etal.Investigationon ultrasound-assistedextractionofsalvianolicacidBfromSalviamiltiorrhiza root.UltrasonicsSonochemistry, 2010, 17:61-65.

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷和不足，本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡(jiǎn)單、成本低、提 取時(shí)間短、提取效率高的連續(xù)提取沙棘籽中活性成分的方法，該方法克服了傳統(tǒng)提取方法 的提取不全面、提取效率不高、熱不穩(wěn)定性成分破壞的問題，避免了資源的浪費(fèi)，適宜工業(yè) 化大規(guī)模生產(chǎn)。
[0017] 實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)解決方案是：
[0018] -種連續(xù)提取沙棘籽中活性成分的方法，包括以下步驟：
[0019] 步驟一：采用超聲波溶劑浸提法對(duì)沙棘籽進(jìn)行沙棘籽油的提取得到沙棘籽油和沙 棘籽油柏；
[0020] 步驟二：采用超聲波溶劑浸提法對(duì)步驟一得到的沙棘籽油柏進(jìn)行沙棘籽總黃酮和 沙棘籽總?cè)圃碥盏奶崛〉玫酱痔嵋海?br>[0021] 對(duì)步驟二得到的粗提液進(jìn)行萃取純化得到沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥铡?br>[0022] 具體的，所述的步驟二中進(jìn)行沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥盏奶崛“ǎ合?沙棘籽油柏中加入醇溶液進(jìn)行超聲波提取得到沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥沾痔嵋海?超聲波提取功率為400~4000W，超聲波提取頻率為30~80kHz，超聲波提取溫度為20~ 50°C，超聲波提取時(shí)間為5~40min。
[0023] 更具體的，醇溶液的加入量是沙棘籽油柏粉體積重量比的5~30倍；所述的醇溶 液為乙醇溶液，乙醇溶液的體積濃度為50 %~80%。
[0024] 進(jìn)一步的，所述的萃取純化包括將粗提液在30~40°C條件下減壓濃縮真空干燥 得到粗提物，將粗提物用體積重量比為1~3倍量的冷水分散得到混懸液，調(diào)節(jié)混懸液的pH 為2~5,再用乙酸乙酯或正丁醇對(duì)調(diào)節(jié)pH值后的混懸液萃取5~8次；合并萃取液揮干 溶劑，即得沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥铡?br>[0025] 更進(jìn)一步的，所述的步驟一中采用超聲波溶劑浸提法對(duì)沙棘籽進(jìn)行沙棘籽油的提 取包括：
[0026] 將沙棘籽碾壓破皮后加入體積重量比為5~20倍正己烷或石油醚，在頻率為 30~80kHz、功率為400~4000W和溫度為5~30°C的條件下超聲提取5~30min得到沙 棘籽油提取液；將提取液過(guò)濾得到沙棘籽油柏和沙棘籽油。
[0027] 具體的，包括以下步驟：
[0028] 步驟一：將沙棘籽碾壓破皮后加入體積重量比為10倍正己烷，在頻率為30kHz、功 率為400W和溫度為20°C的條件下超聲提取40min得到沙棘籽油粗提液；將沙棘籽油粗提 液過(guò)濾得到沙棘籽油柏和沙棘籽油；
[0029] 步驟二：向沙棘籽油柏中加入乙醇水溶液進(jìn)行超聲波提取得到沙棘籽總黃酮和沙 棘籽總?cè)圃碥盏拇痔嵋?，超聲波提取功率?00W，超聲波提取頻率為30kHz，超聲波提取 溫度為20°C，超聲波提取時(shí)間為40min;
[0030] 對(duì)步驟二中得到的沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥沾痔嵋哼M(jìn)行萃取純化得到 沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥眨?br>[0031] 所述的萃取純化包括將沙棘籽總黃酮和沙棘籽總?cè)圃碥沾痔嵋涸?0°C條件下 減壓濃縮真空干燥得到粗提物，將粗提物用體積重量比為1倍量的冷水分散得到混懸液， 調(diào)節(jié)混懸液的pH為2,再用乙酸乙酯或正丁醇對(duì)調(diào)節(jié)pH值后的混懸液萃取5次，合并萃取 液揮干溶劑即得。
[0032] 且，所述的乙醇水溶液的體積濃度為50 %。
[0033] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為：
[0034] (1)本發(fā)明通過(guò)聯(lián)合的提取工藝依次對(duì)沙棘籽中的沙棘籽油、黃酮和三萜皂苷 類的活性成分進(jìn)行連續(xù)提取，最大程度的對(duì)沙棘