一種新型中藥納米粒口服吸收增強技術(shù)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種新型中藥納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，屬于中藥制劑及制備工藝領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 中藥一般來源于天然，其藥效組分沒有經(jīng)過ADME設(shè)計或化學(xué)修飾，普遍具有低溶 解度、低滲透性的特點從而導(dǎo)致其口服生物利用度很低，極大制約了中藥臨床藥效的發(fā)揮。 例如黃酬類成分是中藥多成分、多環(huán)節(jié)、多祀點整合調(diào)節(jié)作用的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，但口服給藥 后，大量黃酬類成分存在生物利用度低的現(xiàn)象，如水飛劑素、淫羊蕾總黃酬、葛根總黃酬、齊 域果酸等。
[0003] 采用納米技術(shù)可W提高中藥難吸收成分的口服生物利用度，但納米粒子例如脂質(zhì) 體、固態(tài)脂質(zhì)納米粒、納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)體等口服后主要經(jīng)化yer結(jié)上的M細胞或胞飲作用轉(zhuǎn) 運，在胃腸道中的吸收較為有限。微乳和自微乳給藥系統(tǒng)促進口服吸收的作用較好，但是由 于中藥用量大、給藥周期長，微乳中表面活性劑的造成的腸道毒性問題有待解決。
[0004] 近年來，乳鐵蛋白（lactoferrin，LF)因其安全高效的促吸收功能，在新型給藥系 統(tǒng)中的研究與應(yīng)用逐漸引起關(guān)注?，F(xiàn)已證實多種生物的腸道上皮細胞表面均存在大量轉(zhuǎn)鐵 蛋白受體，能夠介導(dǎo)LF通過內(nèi)吞方式進入體內(nèi)，同時，LF具有部分對抗膜蛋白酶和膜凝乳 蛋白酶的降解作用，在胃腸道中穩(wěn)定性好，可用于改善口服給藥吸收情況較差的眾多藥物。 目前載藥乳鐵蛋白給藥系統(tǒng)的研究通常采用化學(xué)合成的方式將藥物分子與載體材料結(jié)合， 如將乳鐵蛋白琉基化后與聚合物馬來獻亞胺-聚乙二醇-聚乳酸一端的馬來酷亞胺基相連 接，或有研究將乳鐵蛋白通過聚乙二醇連接到陽離子高分子聚酷胺-胺為基礎(chǔ)的載體上， 實現(xiàn)載藥，其制備過程復(fù)雜，合成高分子材料中殘留的引發(fā)劑和未聚合的單體，具有較大毒 性，可能對人體造成嚴重后果。因此，無需要化學(xué)合成就能將藥物與載體相連構(gòu)新型給藥傳 輸系統(tǒng)的制備方法成為研究者關(guān)屯、的問題。 陽〇化]本發(fā)明的主要優(yōu)勢在于僅通過超高壓力作用即可使轉(zhuǎn)鐵蛋白分子結(jié)構(gòu)中富含的 二硫鍵發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，包裹藥物形成載藥納米粒，同時借助于轉(zhuǎn)鐵蛋白分子荷電所形成的 空間靜電排斥力進一步穩(wěn)定的納米粒子，該納米制劑制備工藝簡單，條件溫和，可顯著改善 藥物的體外溶出及體內(nèi)吸收狀況，是一種新型納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，具有良好的應(yīng)用 潛能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本
【發(fā)明內(nèi)容】
提供了一種新型中藥納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，其特征在于僅采用溶 劑注入-超高壓勻質(zhì)法即可制備W乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒。
[0007] 本發(fā)明所述載藥轉(zhuǎn)鐵蛋白的納米粒制備方法如下：將處方量藥物溶于適當(dāng)有機溶 劑中，作為油相。按重量比取相應(yīng)濃度的乳轉(zhuǎn)鐵蛋白溶于純水中并W有機酸調(diào)節(jié)抑為3~ 5,37°C水浴保溫，作為水相。攬拌條件下，將油相緩慢注入水相中形成粗乳。粗乳經(jīng)超高壓 勻質(zhì)循環(huán)數(shù)次，減壓揮去溶劑，干燥后即得W乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒。
[0008] 所載藥物可包括中藥黃酬類藥物如水飛劑素、淫羊蕾總黃酬、葛根總黃酬、齊墳果 酸等，并W水飛劑素、齊墳果酸為優(yōu)選藥物。
[0009] 制備方法中的有機溶劑包括甲醇、乙醇、丙酬、乙酸、二氯甲燒、S氯甲燒等。
[0010] 制備方法中的有機酸包括構(gòu)祿酸、班巧酸、酒石酸、草酸、蘋果酸等。
[0011] 制備方法中的干燥方法包括冷凍干燥、噴霧干燥等。
[0012] 制備方法中選定乳鐵蛋白水溶液的配制濃度范圍為0. 4~1. 2g/ml，乳鐵蛋白水 溶液的PH值范圍為3.0~5.0,乳鐵蛋白與藥物的質(zhì)量比范圍為1 : 1~1 : 9。
【附圖說明】
[0013] 圖1齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒粒徑測定結(jié)果
[0014] 圖2齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒Zeta電位測定結(jié)果
[0015] 圖3齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒透射電鏡照片
[0016] 圖4原料藥、物理混合物及齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒溶出結(jié)果
【具體實施方式】
[0017] 實施例1 :齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒的制備
[0018] 精密稱取處方量齊墳果酸溶于無水乙醇中，50°C水浴加熱使其完全溶解。按重量 比1 : 6稱取適量Lf加水于37°C條件下超聲，使之溶解完全，用巧樣酸調(diào)節(jié)Lf水溶液抑 為4. 0,攬拌條件下將齊墳果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高壓均質(zhì)機中，采用 15(K)bar壓力循環(huán)3次，后將其轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，45°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除盡乙醇，過0. 45ym微孔 濾膜，即得齊墳果酸乳鐵蛋白納米混懸液。將上述混懸液置冷凍干燥機中冷凍干燥4她，即 得。
[0019] 實施例2 :齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒的制備
[0020] 精密稱取處方量齊墳果酸溶于甲醇中，50°C水浴加熱使其完全溶解。按重量比 1 : 9稱取適量Lf加水于37°C條件下超聲，使之溶解完全，用巧樣酸調(diào)節(jié)Lf水溶液抑 為5. 0,攬拌條件下將齊墳果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高壓均質(zhì)機中，采用 25(K)bar壓力循環(huán)3次，后將其轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，45°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除盡甲醇，過0.45ym微孔 濾膜，即得齊墳果酸乳鐵蛋白納米混懸液。將上述混懸液經(jīng)噴霧干燥后，即得。
[0021] 實施例3 :水飛劑素乳鐵蛋白納米粒的制備
[0022] 精密稱取處方量水飛劑素溶于丙酬中，40°C水浴加熱使其完全溶解。按重量比 1 : 8稱取適量Lf加水于37°C條件下超聲，使之溶解完全，用酒石酸調(diào)節(jié)Lf水溶液抑 為5. 0,攬拌條件下將水飛劑素注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高壓均質(zhì)機中，采用 250化ar壓力循環(huán)3次，后將其轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，45°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除盡乙醇，過0. 45ym微孔 濾膜，即得水飛劑素乳鐵蛋白納米混懸液。將上述混懸液經(jīng)噴霧干燥后，即得。
[0023] 試驗例1，按照實施例1的方法制備齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒，其表征結(jié)果如附圖 1~3。圖中可見，齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒制劑的粒徑約為205nm，PDI為0. 148,Zeta電 位為26. 3mv，納米粒外觀呈類球形結(jié)構(gòu)，具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)。
[0024] 試驗例2,體外溶出度測定，采用中國藥典規(guī)定方法（漿法），W含有1 %十二烷基 硫酸鋼1000 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，溫度37 + 0. 5°C，分別稱取齊墳果酸原料 藥、齊墳果酸/乳鐵蛋白物理混合物W及齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒制劑（相當(dāng)于齊墳果酸 20mg)，均勻撒布在介質(zhì)液面上，當(dāng)粉末接觸溶液時開始計時，分別于5、10、20、40、60、90、 120min，取樣5ml，經(jīng)0. 45Jim微孔濾膜過濾，同時補加等量介質(zhì)，采用高效液相法進行含量 測定，計算溶出介質(zhì)中的藥物量，見附圖4。
[0025] 溶出度測定結(jié)果顯示，在齊墳果酸乳鐵蛋白納米粒在溶出介質(zhì)中迅速釋放，IOmin 溶出度超過90 %，20min接近100% ;而原料藥溶出度較低，IOmin接近40 %，20min時約為 68% ;兩者物理混合物的溶出行為與原料藥基本一致未見明顯改善。
[00%] 試驗例3,按照實施例2的方法制備水飛劑素乳鐵蛋白納米粒并與水飛劑素原料 藥進行藥代動力學(xué)比較研究。
[0027] 試驗方案：將12只大鼠隨機均分為2組，每組6只。實驗前禁食12h，分別取 水飛劑素和水飛劑素乳鐵蛋白納米粒W30mg/kg劑量（W水飛劑賓計）灌胃，給藥后 按0. 083、0. 167、0. 5、1、1. 5、2、4、7和IOh于大鼠眼眶底靜脈叢取血400yL精密吸取大 鼠空白血漿IOOyL加內(nèi)標溶液SOOiiL(含0.Siig/mL的內(nèi)標溶液），震蕩3min，離屯、 (15000Xg)lOmin，取上清液SiiL進樣分析。應(yīng)用DAS2.0軟件計算藥動學(xué)參數(shù)，結(jié)果見表 Io
[002引表1大鼠口服水飛劑素和水飛劑素乳鐵蛋白納米粒后的藥動學(xué)參數(shù)
[0030] 體內(nèi)藥動學(xué)研究顯示，采用乳鐵蛋白對水飛劑素進行修飾后可顯著改善藥物的口 服生物利用度，Cm。、及AUC均增高約3倍左右。
【主權(quán)項】
1. 本
【發(fā)明內(nèi)容】
提供了一種新型中藥納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，其特征在于僅采用溶劑 注入-超高壓勻質(zhì)法即可制備以乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，將藥物溶于適當(dāng)有機溶劑中，作為油相。按重量比 取相應(yīng)濃度的乳轉(zhuǎn)鐵蛋白溶于純水中并以有機酸調(diào)節(jié)pH為3~5,37°C水浴保溫，作為水 相。攪拌條件下，將油相緩慢注入水相中形成粗乳。粗乳經(jīng)超高壓勻質(zhì)循環(huán)數(shù)次，減壓揮去 溶劑，干燥后即得以乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于藥物可包括中藥黃酮類藥物如水飛薊 素、淫羊藿總黃酮、葛根總黃酮、齊墩果酸等，并以水飛薊素、齊墩果酸為優(yōu)選藥物。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于溶劑包括乙醇、二氯甲烷、甲醇、乙醚 等。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于有機酸包括枸櫞酸、琥珀酸、酒石酸、 草酸、蘋果酸等。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于制備方法中的干燥方法包括冷凍干 燥、噴霧干燥等。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于制備方法中選定乳鐵蛋白水溶液的配 制濃度范圍為0. 4~1. 2g/ml，乳鐵蛋白水溶液的PH值范圍為3. 0~5. 0,乳鐵蛋白與藥物 的質(zhì)量比范圍為1 : 1~1 : 9。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種新型中藥納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，屬于中藥制劑及制備工藝領(lǐng)域。本發(fā)明系采用溶劑注入-超高壓勻質(zhì)法制備以乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒：將處方量藥物溶于適當(dāng)有機溶劑中，作為油相。按重量比取相應(yīng)濃度的乳轉(zhuǎn)鐵蛋白溶于純水中并以有機酸調(diào)節(jié)pH為3～5，37℃水浴保溫，作為水相。攪拌條件下，將油相緩慢注入水相中形成粗乳。粗乳經(jīng)超高壓勻質(zhì)循環(huán)數(shù)次，減壓揮去溶劑，干燥后即得以乳轉(zhuǎn)鐵蛋白為載體的納米粒。該納米制劑制備工藝簡單，條件溫和，可顯著改善藥物的體外溶出及體內(nèi)吸收狀況，是一種新型納米?？诜赵鰪娂夹g(shù)，具有良好的應(yīng)用潛能。
【IPC分類】A61K47/42, A61K31/357, A61K9/14, A61K31/56
【公開號】CN105343005
【申請?zhí)枴緾N201510759803
【發(fā)明人】趙志英, 劉昊煒, 張振海, 呂慧俠
【申請人】中國藥科大學(xué)
【公開日】2016年2月24日
【申請日】2015年11月6日