含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及對(duì)脫礦牙體硬組織進(jìn)行再礦化的材料，尤其涉及一種含納米無(wú)定型磷酸I丐的羧甲基殼聚糖凝膠(CMC，Carboxymethyl chitosan)。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，常見(jiàn)的再礦化制劑主要以鈣及磷酸根等礦物離子為有效成分，并輔以氟離子或其他物質(zhì)，從而達(dá)到在脫礦齲損表層的殘余晶體上進(jìn)行礦物重建的目的。但是，傳統(tǒng)的再礦化制劑均具有一定的局限性。例如:僅能達(dá)到脫礦表層的再礦化很難滲透到深部；操作條件較為苛刻，很難應(yīng)用于臨床的椅旁操作；與牙體表面結(jié)合能力差，很難抵抗唾液的沖刷，在牙體表面停留的時(shí)間很短；在高氟區(qū)應(yīng)用傳統(tǒng)的氟制劑易引起慢性氟中毒；或某些再礦化生物材料中的組成成分由于生物相容性相對(duì)較差，易對(duì)人體產(chǎn)生不良反應(yīng)或?qū)μ囟ㄈ巳壕哂兄旅粜?，因而使其?yīng)用受到限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的主要目的在于克服現(xiàn)有產(chǎn)品存在的上述缺點(diǎn)，而提供一種含有納米無(wú)定型磷酸f丐的羧甲基殼聚糖凝膠，其是由羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)和磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)的混合液與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)以及二水氯化鈣(CaCl2*2H20)的混合液，在進(jìn)行混合而制成；將其涂在脫礦牙體硬組織表面，方便臨床椅旁操作；該凝膠能滲透到脫礦表層以下達(dá)到深層礦化，與牙體表面結(jié)合牢固，從而在牙齒上存留較長(zhǎng)時(shí)間，達(dá)到使脫礦的牙體硬組織再礦化的效果。
[0004]本發(fā)明的目的是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0005]本發(fā)明含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其特征在于，其是由羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)和磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)的A混合水溶液與1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)以及二水氯化鈣(CaCl2.2H20)的B混合水溶液再進(jìn)行混合而制成。
[0006]前述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其中A混合水溶液中羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)、磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)與水的重量份數(shù)比依次為0.5:0.0264:15 ;所述B混合水溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、二水氯化鈣(CaCl2*2H20)以及水的重量份數(shù)比依次為0.092:0.058:0.03675:5 ;該A混合水溶液與B混合水溶液的重量份數(shù)比為15.5264:5.18675。
[0007]前述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其中水為去離子水。
[0008]本發(fā)明含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其特征在于，
[0009]( —)在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘?，向水中順序依次加入羧甲基殼聚?CMC)和磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)，得到澄清透明的A混合水溶液；
[0010](二)在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘拢蛩许樞蛞来渭尤?-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和二水氯化鈣(CaCl2.2H20)，得到澄清透明的B混合水溶液；
[0011 ](三)常溫下，將A混合水溶液與B混合水溶液進(jìn)行混合，混合后液體逐漸變粘稠，約10分鐘后變?yōu)槟z狀，即為成品。
[0012]前述含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其中水為去離子水。
[0013]前述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其中A混合水溶液中羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)、磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)與水的重量份數(shù)比為0.5:0.0264:15 ;所述B混合水溶液中1_(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、二水氯化鈣(CaCl2*2H20)以及水的重量份數(shù)比為0.092:0.058:0.03675:5 ;該A混合水溶液與B混合水溶液的重量份數(shù)比為15.5264:5.18675。
[0014]本發(fā)明含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠在脫礦牙體硬組織仿生再礦化中的應(yīng)用。
[0015]本發(fā)明含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的有益效果，其結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理，制備方法簡(jiǎn)便，能滲透到脫礦表層以下達(dá)到深層礦化，與牙體表面結(jié)合牢固，方便在臨床上進(jìn)行椅旁操作；無(wú)毒、無(wú)刺激，具有良好的生物相容性和低致敏性，對(duì)某些口腔致齲菌，如變形鏈球菌也具有較好的抑制作用，使用效果理想；是一種較理想的脫礦牙體硬組織仿生再礦化的牙科材料。
【具體實(shí)施方式】
[0016]實(shí)施例1:在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘?，?5mL水中順序依次加入羧甲基殼聚糖(CMC) 0.5g和磷酸氫二鉀(K2HP04) 0.0264g，得到澄清透明的A混合水溶液；在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘?，?mL水中順序依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC) 0.092g、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS) 0.058g和二水氯化鈣(CaCl2.2H20)0.03675g，得到澄清透明的B混合水溶液。
[0017]實(shí)施例2:將A混合水溶液15.5264g與B混合水溶液5.18675g在常溫下充分混合，10分鐘后混合液變?yōu)槟z狀，在混合液變?yōu)槟z之前將其涂抹在脫礦的牙體硬組織表面，可促進(jìn)脫礦牙體硬組織的再礦化。
[0018]實(shí)施例3:使用實(shí)施例2中的納米凝膠涂于用35%釉質(zhì)酸蝕劑酸蝕的牙釉質(zhì)表面，干燥后將該牙釉質(zhì)浸泡在去離子水中5h，取出后，用10ml去離子水沖洗釉質(zhì)表面，干燥后對(duì)其表面進(jìn)行紅外分析，其紅外圖譜和本發(fā)明的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的含納米ACP的CMC凝膠紅外圖譜幾乎一致，證明該納米凝膠于牙釉質(zhì)表面有較強(qiáng)結(jié)合能力。
[0019]實(shí)施例4:使用實(shí)施例1中含CMC的A混合水溶液對(duì)接種了活化的變形鏈球菌菌液的釉質(zhì)片進(jìn)行浸泡，并對(duì)釉質(zhì)片在37°C條件下進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，于第2、4、6、8天時(shí)分別進(jìn)行掃描電鏡觀察可以發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，菌斑生物膜細(xì)菌粘附形態(tài)有明顯改變，細(xì)菌數(shù)量顯著減少，證實(shí)CMC對(duì)變形鏈球菌具有抑制作用。
[0020]本發(fā)明實(shí)施例中未進(jìn)行說(shuō)明的內(nèi)容為現(xiàn)有技術(shù)，故，不再進(jìn)行贅述。
[0021]本發(fā)明的作用原理:AB瓶液體混合后快速變?yōu)槟z，該凝膠含直徑約為40-60nm的無(wú)定型磷酸I丐(ACP，amorphous calcium phosphate)微粒，向脫礦表層下滲透力強(qiáng)進(jìn)而提高礦化深度；與牙體表面有較強(qiáng)結(jié)合能力，能較好地抵抗唾液的沖刷；具有良好抗菌性、較好生物相容性及適用人群范圍較廣的牙體硬組織再礦化的納米凝膠。1、該凝膠可以緩釋鈣磷離子，鈣磷離子可進(jìn)入脫礦牙體硬組織的殘余晶體，進(jìn)而礦化恢復(fù)晶體結(jié)構(gòu)；或鈣磷離子通過(guò)異相成核，在殘余晶體表面形成新的晶體。2、納米無(wú)定型磷酸鈣通過(guò)水解作用直接轉(zhuǎn)化為羥基磷灰石晶體(牙釉質(zhì)的主要成分)。
[0022]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其特征在于，其是由羧甲基殼聚糖(CMC，Carboxymethyl chitosan)和磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)的 A 混合水溶液與 1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)以及二水氯化鈣(CaCl2.2H20)的B混合水溶液再進(jìn)行混合而制成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其特征在于，所述A混合水溶液中羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)、磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)與水的重量份數(shù)比依次為0.5:0.0264:15 ;所述B混合水溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、二水氯化鈣(CaCl2.2H20)以及水的重量份數(shù)比依次為0.092:0.058:0.03675:5 ;該A混合水溶液與B混合水溶液的重量份數(shù)比為15.5264:5.18675。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，其特征在于，所述水為去離子水。4.如權(quán)利要求1所述含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其特征在于，(一)在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘?，向水中順序依次加入羧甲基殼聚?CMC)和磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)，得到澄清透明的A混合水溶液；(二)在常溫和磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢柘?，向水中順序依次加?-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和二水氯化鈣(CaCl2.2H20)，得到澄清透明的B混合水溶液；(三)常溫下，將A混合水溶液與B混合水溶液進(jìn)行混合，混合后液體逐漸變粘稠，約10分鐘后變?yōu)槟z狀，即為成品。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其特征在于，所述水為去離子水。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠的制備方法，其特征在于，所述A混合水溶液中羧甲基殼聚糖(CMC, Carboxymethyl chitosan)、磷酸氫二鉀(Κ2ΗΡ04)與水的重量份數(shù)比為0.5:0.0264:15 ;所述B混合水溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)、二水氯化鈣(CaCl2.2H20)以及水的重量份數(shù)比為0.092:0.058:0.03675:5 ;該A混合水溶液與B混合水溶液的重量份數(shù)比為 15.5264:5.18675。7.如權(quán)利要求1所述的含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠在脫礦牙體硬組織仿生再礦化中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種含有納米無(wú)定型磷酸鈣的羧甲基殼聚糖凝膠，由羧甲基殼聚糖和磷酸氫二鉀的A混合水溶液與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀酰亞胺及二水氯化鈣的B混合水溶液再混合而成；可用于脫礦牙體硬組織仿生再礦化中。
【IPC分類】A61K6/02, A61K6/097
【公開(kāi)號(hào)】CN105287230
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410736895
【發(fā)明人】張旭, 李彥秋, 王浩榮
【申請(qǐng)人】天津醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院
【公開(kāi)日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2014年12月6日