一種組合物及其在防治肝臟損傷藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 引起肝損傷的原因有多個：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強，傳 播途徑復(fù)雜，流行面廣泛，發(fā)病率高等特點。2、藥物或化學毒物：許多藥物和化學毒物都可 引起肝臟損傷，發(fā)生藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒：酒精對肝臟的損害是很嚴重的，損 害的后果包括酒精性肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代 謝產(chǎn)物乙醛的毒性對肝細胞直接損害造成的。4、其他原因：原發(fā)和繼發(fā)的肝臟腫瘤、心功 能不全導致肝臟淤血、某些先天性肝臟疾病、靜脈高價營養(yǎng)等，都可以造成不同程度的肝損 害，這些肝損害的早期表現(xiàn)往往是ALT(轉(zhuǎn)氨酶）或膽紅素的升高，不祛除病因，肝臟的損害 會進一步加重。目前在我國由于上述原因每年發(fā)生肝損傷的人數(shù)眾多，形勢不容樂觀。急 需研發(fā)高效低毒的防治肝臟損傷藥物。
[0003] 肝臟損傷的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物中尋 找化合物或先導化合物并進行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物具有 重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（AyumiOhsakietal.，2011. SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfromSalviaprzewalskii. TetrahedronLetters52(2011) 1375 - 1377)的化合物，我們對化合物I進行了結(jié)構(gòu)修飾， 獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合 物并對該組合物抗肝臟損傷活性進行了評價，其具有抗肝臟損傷活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為45%和55%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝臟損傷作用。本發(fā)明的藥學上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物SalviskinoneA的制備
[0011] 化合物SalviskinoneA(I)的制備方法參照AyumiOhsaki等人發(fā)表的文獻 (AyumiOhsakietal. , 2011.SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfrom Salviaprzewalskii.TetrahedronLetters52 (2011) 1375 - 1377)的方法。
[0012]
[0013] 實施例2SalviskinoneA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(312mg，1.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（3.760g，20.OOmmol)和6mL的50%氫氧化鈉溶液。混合物在35 攝氏度攪拌12h。12h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相 溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌4次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮 =100:1.5,v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（327mg， 78% ) 〇
[0015] 4匪1?(5001抱，0150-(16)5 6.63(8，1!1)，6.37(8，1!1)，5.81(8，1!1)，4.51(8,2!1)，3· 84 (s, 1H), 3. 79 (s, 2H), 2. 15 (s, 1H), 2. 04 (s, 1H) ,1-91 (s, 1H), 1. 65 (s, 1H), 1. 39 (s, 3H), 1. 08 (s, 6H), 0. 99 (s, 6H).
[0016]13CNMR(125MHz,DMS0-d6)δ188. 07 (s)，183. 70 (s)，154. 38 (s)，147. 57 (s)，140. 2 1 (s), 136. 40 (s), 134. 71 (s), 131. 25 (s), 128. 40 (s), 118. 83 (s), 72. 12 (s), 45. 49 (s), 37. 5 4 (s), 33. 58 (s), 31. 78 (s), 26. 17 (s), 25. 12 (s), 24. 66 (s), 23. 51 (s), 23. 17 (s), 22. 65 (s).
[0017]HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforC22H28Br03:4 1 9. 12 2 2；found419. 1220.
[0018]
[0019] 實施例3SalviskinoneA的0-(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 將化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀 (34511^，2.5_31)，碘化鉀（8411^，0.5_31)和吡略燒（142〇11^，20_31)，混合物加熱回流 8h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取3次，合并有機相。依次用水和 飽和食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮=100:1. 0,v/V)，收集棕色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的黃色粉末（131. 6mg，65% )。
[0021] NMR(500MHz,DMS〇-d6)δ6. 57 (s, 1Η), 6. 29 (s, 1H), 5. 82 (s, 1H), 4. 25 (s, 2H), 3. 86 (s, 1H), 3. 10 (s, 2H), 2. 55 (s, 4H), 2. 16 (s, 1H), 2. 07 (s, 1H), 1. 893 (s, 1H), 1. 73 (s, 4H), 1 .70 (s, 1H), 1. 38 (s, 3H), 1. 09 (s, 6H), 1. 02 (s, 6H).
[0022] 13CMMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.10(s)，183.71(s)，154.37(s)，147.57(s)，140· 19 (s), 136. 41 (s), 134. 73 (s), 131. 25 (s), 128. 38 (s), 118. 82(s), 69. 23(s), 54. 54 (d,J= 16. 6Hz), 45. 51 (s), 37. 54 (s), 33. 56 (s), 26. 16 (s), 25. 19 (d,J= 10. 3Hz), 24. 73 (s), 23. 5 8(s), 23. 24(s), 22. 69 (s).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC26H36N03:4 1 0 . 26 9 5 ;found:410. 2693。
[0024]
[0025] 實施例4SalviskinoneA的0-(哌啶基）乙基衍生物（IV)的合成
[0026] 將化合物II(209mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀 (345mg，2.5mmol)，鵬化鉀（84mg，0.5mmol)和哌啶（852mg，lOmmol)，混合物加熱回流10h。 反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依次用水 和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物 粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮=100:0.5,v/v)，收集黃色 集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物IV的黃色粉末（116. 3mg，55% )。
[0027]NMR(500MHz,Chloroform-dl)δ6. 44(d,J= 95. 3Hz, 1H),6. 31(s, 1H), 5. 73 (s, 1H), 4. 20 (s, 2H), 3. 74 (s, 1H), 3. 01 (s, 2H), 2. 39 (s, 4H), 2. 07 (s, 1H),L96 (s, 1H), 1. 86 (s, 1H),1. 60 (s, 1H),1. 44 (s, 4H),1. 33 (d,J= 15. 0Hz, 5H),1. 00 (s, 6H),0. 91 (s, 6H).
[0028]13C匪R(125MHz,DMS0-d6)δ188. 16(s), 183. 79(s), 154. 48(s), 147. 63(s), 140. 27 (s), 136. 51 (s), 134. 79 (s), 131. 33 (s), 128. 47 (s), 118. 88(s), 69. 31 (s), 54. 6 9(d,J= 16.2Hz) ,45.56 (s), 37.61 (s), 33.62 (s), 26.21 (s), 25.21 (s), 24.65 (d,J= 19. 1Hz),23. 50 (d,J= 17. 2Hz),23. 23 (s),22. 68 (s).
[0029]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC27H3SN03:424. 28 5 2;found:424. 2856。
[0030]
[0031] 實施例5組合物防治肝損傷的作用
[0032](一）組合物對D-氨基半乳糖胺（D-galactosamine，D_GalN)誘導的小鼠急性肝 損傷的防護作用
[0033] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的45mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的55mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組 合物，使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0034] 小鼠分5組。對照組以生理鹽水灌胃（0. 3mL·(! ^，連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注 射生理鹽水（0. 15mL· 10g^，腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。D-GalN組、組合物 3.Omg*kg1組、化合物III組和化合物IV組分別以生理鹽水、組合物、化合物III和化合物 IV灌胃（0· 3mL·(! ^，連續(xù)7d;且于第 7d還要腹腔注射D-GalN(800mg.kg\ 0· 15mL· 10g4， 腹腔注射16h后取血，測AST及ALT活力。
[0035] 表1組合物對D-GalN誘導的急性肝損傷的防護作用

[0038]注JpfO·Olvs對照組，2)ρ〈0·OlvsD-GalN組
[0039] 由表1可知，組合物能有效抑制D-GalN引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升。 化合物III和化合物IV無此作用。
[0040](二）組合物對CC14誘導的小鼠急性肝損傷的防護作用
[0041] 小鼠分5組，對照組以生理鹽水灌胃（0. 3mL·(! ^，連續(xù)5d，第6d腹腔注射植物油 每只0.lmL· 10gSCC1 4組及組合物、化合物III和化合物IV給藥組（3.Omg*kg4分別以 生理鹽水及組合物、化合物III和化合物IV灌胃（0. 3mL·d^，連續(xù)5d，于第6d腹腔注射 0· 1%CC140.lmL· 10g^ 24h后處死動物，取血清測AST及ALT活力。
[0042] 表2組合物對0：14誘導的急性肝損傷的防護作用
[0043]
[0044]注：&〈0·Olvs對照組，2)p〈0.OlvsCC14組
[0045] 由表2可知，組合物能抑制CC14引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升?；衔?ΠΙ和化合物IV無此作用。
[0046] 結(jié)論：組合物能有效保護D-GalN引起的小鼠肝損傷，組合物能有效保護CC14引起 的小鼠肝損傷，可以用來制備抗肝損傷藥物?；衔颕II和化合物IV不能有效保護D-GalN 引起的小鼠肝損傷，不能有效保護CC14引起的小鼠肝損傷，不可以用來制備抗肝損傷藥物。
[0047] 實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0048] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0049] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0050] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為45%和55%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為45 %和55 %充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述肝臟損 傷為化學物質(zhì)誘導所致的肝臟損傷。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述化學物 質(zhì)為D-氨基半乳糖胺。6. 如權(quán)利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述化學物
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備防治肝臟損傷藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有防治肝臟損傷的作用，具有開發(fā)防治肝臟損傷藥物的價值。
【IPC分類】A61K31/40, A61K31/4453, A61P1/16
【公開號】CN105250292
【申請?zhí)枴緾N201510742128
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年1月20日
【申請日】2015年11月4日