木瓜總?cè)萍捌浣M分在制藥中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及木瓜中總=祗及其組分在治療消化道損傷中 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 非醬體抗炎藥（nonsteroidalanti~inf1ammatory化ugs,NSAIDs)是臨床上廣泛 使用的一類抗炎藥物，是很多骨關(guān)節(jié)疾病如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎的一線治療藥物；近年 來，發(fā)現(xiàn)非醬體抗炎藥可W降低結(jié)腸癌的發(fā)病率，加之越來越多的人長期服用低劑量阿斯 匹林W預(yù)防屯、腦血管疾病及非處方用藥的增加，使得NSAWs成為了世界上應(yīng)用最多的藥 品之一，在中國其用量僅次于抗感染藥物。隨著其臨床的廣泛應(yīng)用，的胃腸道并發(fā)癥也越來 越受到人們關(guān)注。有研究證實(shí)在美國和英國發(fā)生的藥物不良反應(yīng)中，有21 %和25 %的藥物 不良反應(yīng)與應(yīng)用NSAH)s有關(guān)，該不良反應(yīng)包括諸如惡屯、、燒屯、、消化不良等癥狀，又包括消 化性潰瘍及其嚴(yán)重并發(fā)癥，如出血、穿孔、胃排空障礙等，甚至可導(dǎo)致部分患者死亡。當(dāng)前隨 著人口的老年化，NSAms的使用越來越頻繁，NSAI化相關(guān)性上消化道出血也越來越多，有 資料顯示，使用NSAI化者，上消化出血的風(fēng)險(xiǎn)增加4-6倍。盡管出現(xiàn)了新型NSAIDs，但其 胃腸道安全性是否真如大家期望的那樣高，運(yùn)一點(diǎn)尚存有爭議。近來就有研究者發(fā)現(xiàn)，運(yùn) 類藥物可能同傳統(tǒng)的NSAWs-樣，也會(huì)影響胃潰瘍的愈合；雖然當(dāng)前臨床上比較多的采用 侶、秘、&受體括抗劑及質(zhì)子累抑制劑來保護(hù)胃粘膜，但往往存在療效不持久、停藥后容易 復(fù)發(fā)，且所需費(fèi)用大，副反應(yīng)也大，長期使用受到了限制。因此積極尋求因廣泛使用NSAIDs 而導(dǎo)致的消化道損傷，特別是消化性潰瘍已十分迫切。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明本發(fā)明提供了一種提取的木瓜總=祗及其組分在治療非醬體抗炎藥致消 化道損傷中應(yīng)用，具體地是通過W下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0004] a)提供皺皮木瓜中木瓜總=祗及其組分（齊墳果酸、熊果酸、乙酷熊果酸、白枠脂 酸、山植酸、乙酷坡模醇酸、委陵菜酸等等）或其生成可接受的鹽： 陽0化]
[0006] b)從皺皮木瓜中提取的木瓜總=祗及其組分，包含所述的木瓜總=祗和其組分， W及藥學(xué)可接受的藥物中間體、輔料及載體。
[0007] C)將木瓜總=祗及其中一個(gè)組分齊墳果酸應(yīng)用于非醬體抗炎藥引起的消化道損 傷的藥物上的應(yīng)用。
[0008] d)木瓜總=祗及其中一個(gè)組分齊墳果酸應(yīng)用于非醬體抗炎藥引起的胃粘膜損 傷的藥物上的應(yīng)用；研究發(fā)現(xiàn)木瓜總=祗和齊墳果酸可提高胃黏膜損傷模型小鼠血液中 SOD、GSH-Px酶活性，增強(qiáng)了內(nèi)源性氧自由基清除系統(tǒng)的功能，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的 水平和血液中促炎因子TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清中抗炎因子IL-4、比-10的 含量，抑制H7K+-ATPase活性，降低潰瘍發(fā)生率和潰瘍指數(shù)，提高潰瘍抑制率，進(jìn)而改善胃 黏膜組織形態(tài)學(xué)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：木瓜總=祗及其重要=祗組分齊墳果酸對(duì)嗎I噪美辛致小 鼠胃黏膜損傷具有較好的治療作用。
[0009] e)木瓜總=祗及其中一個(gè)組分齊墳果酸應(yīng)用于非醬體抗炎藥引起的小腸黏膜 損傷的藥物上的應(yīng)用；研究發(fā)現(xiàn)木瓜總=祗和齊墳果酸可提高小腸黏膜模型大鼠血液中 SOD、GSH-Px酶活性，增強(qiáng)了內(nèi)源性氧自由基清除系統(tǒng)的功能，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的 水平和血液中促炎因子TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清中抗炎因子IL-4、比-10的 含量，降低小腸黏膜大體損傷評(píng)分和組織學(xué)評(píng)分，改善小腸黏膜組織形態(tài)學(xué)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 明：木瓜總=祗及其重要=祗組分齊墳果酸對(duì)雙氯芬酸鋼致大鼠小腸黏膜損傷具有較好的 治療作用。
【附圖說明】
[0010] 圖1木瓜總S祗的提取，及木瓜總S祗的組分的分離工藝。
[0011] 圖2為木瓜總=祗和齊墳果酸對(duì)嗎I噪美辛致胃黏膜損傷小鼠胃外觀形態(tài)的影響 (A:正常組，B:模型組，C:木瓜總S祗lOOmg/kg劑量組，D:齊墳果酸lOOmg/kg劑量組）。
[0012] 圖3木瓜總=祗和齊墳果酸對(duì)嗎I噪美辛致胃黏膜損傷小鼠胃黏膜組織形態(tài)學(xué)的 影響（A:正常組，B:模型組，C:木瓜總S祗lOOmg/kg組，D:齊墳果酸lOOmg/kg組）。
[0013] 圖4為木瓜總=祗和齊墳果酸對(duì)雙氯芬酸鋼致小腸黏膜損傷大鼠小腸黏膜外觀 形態(tài)的影響（A:正常組，B:模型組，C:木瓜總S祗lOOmg/kg劑量組，D:齊墳果酸lOOmg/ kg劑量組）。
[0014] 圖5木瓜總=祗和齊墳果酸對(duì)雙氯芬酸鋼致小腸黏膜損傷大鼠小腸粘膜組織形 態(tài)學(xué)的影響（A:正常組，B:模型組，C:木瓜總S祗lOOmg/kg組，D:齊墳果酸lOOmg/kg組）。
【具體實(shí)施方式】 陽〇1引 實(shí)施例1
[0016] 皺皮木瓜中提取木瓜總S祗，具體通過W下方法制備：
[0017] 1)皺皮木瓜預(yù)處理
[0018] 皺皮木瓜近成熟的果實(shí)洗盡、切片曬干，取0. 005kg保存，剩下的于48°C恒溫鼓風(fēng) 箱中干燥至恒重，凈重5. 0kg。
[0019] 。皺皮木瓜脫色
[0020] 樣品用粉碎機(jī)粉碎，過20目篩，用石油酸為溶劑按6:1的液固比，在60°C條件下脫 色3次，每次2小時(shí)，得到脫色后木瓜粗粉4. 26kg(見圖1)。
[0021] 3)脫色后木瓜粗粉回流提取
[0022] 將上述2)所得脫色木瓜粗粉用乙酸乙醋為溶劑按5:1的液固比，在50~80°C條 件下回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，用布氏漏斗過濾提取液后，在60°C條件下，用 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，隨后在通風(fēng)楓中揮干至無乙酸乙醋味，得浸膏，稱重得浸膏1.26kg(見圖 1)。
[0023] 4)木瓜乙酸乙醋浸膏脫色
[0024]將上述3)所得浸膏用石油酸為溶劑按15:1的液固比，在60°C條件下脫色3次，每 次1小時(shí)，合并過濾液，在50°C條件下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，隨后在通風(fēng)楓中揮干至無石油 酸味，得到較為精致的木瓜乙酸乙醋浸膏，稱重得浸膏0. 64kg(見圖1)。
[00巧]5)木瓜總S祗分離
[00%] 將上述4)所得的精致木瓜乙酸乙醋浸膏用無水乙醇為溶劑并加活性炭進(jìn)行再次 脫色，其中的無水乙醇：精致木瓜乙酸乙醋浸膏：活性炭按100:1:1，在30°C條件下脫色2 次，每次0. 5小時(shí)，合并過濾液，在60°C條件下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，隨后在通風(fēng)楓中揮干至 無乙醇味，得木瓜總S祗白色的固體粉末，稱重得粉末0. 18kg，用香草醒-高氯酸顯色法測 定其純度為85. 78%，相比較木瓜原藥材其總=祗得率約為3. 04% (見圖1)。
[0027] 6)齊墳果酸分離
[0028] 將上述4)所得的木瓜總=祗用無水乙醇結(jié)晶2次，即得無色齊墳果酸針狀晶體， 稱重得晶體0. 18kg，用HPLC測定其純度為97. 61 %，相比較木瓜原藥材其齊墳果酸得率約 為1. 18% (見圖1)。
[0029] 實(shí)施例2
[0030] 下面結(jié)合具體的實(shí)驗(yàn)例，具體說明木瓜總=祗及其中一個(gè)重要組分齊墳果酸應(yīng)用 于非醬體抗炎藥引起的胃黏膜損傷的藥物上的應(yīng)用。
[0031] 試驗(yàn)方法 陽0巧 1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 陽03引 S峽大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中屯、提供，SPF級(jí)雄性昆明小鼠90只，體重18~22g，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 質(zhì)量合格證號(hào)：SCXK(鄂）2011-0012;動(dòng)物飼養(yǎng)于普通級(jí)動(dòng)物室干燥、通風(fēng)、安靜的環(huán)境，5 只/籠。
[0034]。儀器和試劑
[0035]WFZUV-2100型紫外可見分光光度計(jì)：上海尤尼柯儀器有限公司；全波長酶標(biāo)儀： 瑞±了6〇曰11公司；TP1020型脫水機(jī)：德國Leica公司；ULTRACUTR型超薄切片機(jī)：奧地利萊 卡公司；CS-V1型攤片烤片機(jī)：孝感市宏業(yè)醫(yī)用儀器有限公司；DMR型多功能顯微鏡及圖像 分析系統(tǒng)，德國Leica公司；OlympusKX41型倒置顯微鏡。
[0036]嗎I噪美辛：Sigma曰1化ich公司，使用前用0. 5%簇甲基纖維素鋼配制成2. 5mg/ mL;木瓜總S祗和其組分齊墳果酸為我們分離制備得到，使用前前用0. 5%簇甲基纖維素 鋼配制成相應(yīng)濃度的溶液；H7K+-ATPase、S0D、GSH-Px和MDA試劑盒：南京建成生物制品研 究所；TNF-a、比-1 0、比-6及比-4、比-10ELISA檢測試劑盒：深功化科為生物技術(shù)有限公 司。
[0037] 3)實(shí)驗(yàn)分組及給藥
[0038] 取昆明小鼠90只隨機(jī)分成9組：空白對(duì)照組、胃黏膜損傷模型組、木瓜總S祗組 (25和lOOmg/kg)、齊墳果酸組（25和lOOmg/kg)，空白對(duì)照組和潰瘍模型組給予同容積 0. 5%簇甲基纖維素鋼溶液，每天灌胃給藥1次，連續(xù)7天，模型組和給藥組于第4天開始灌 胃給予嗎I噪美辛50mg/kg(2. 5mg/mL)，連續(xù)3天，于末次給藥的次日進(jìn)行試驗(yàn)。 W39] 4)血液中SOD