0114] 由圖1可W明顯確認，在添加了大葉襲、川棟、木藍、大劑、梓樹或萬壽菊的提取物 的體系中，與對照體系相比，神經酷胺產出量上升。
[0115] 因此，可知含有運些植物提取物作為有效成分的本發(fā)明的神經酷胺產生促進劑可 W促進神經酷胺產生。另外，神經酷胺因為與皮膚的保濕、屏障機能維持有關，因而，由圖1 的結果可知，本發(fā)明的上述植物提取物促進神經酷胺的產生，具有保濕作用。
[0116](制造例7)神經酷胺產生促進活性成分的分離
[0117] 將800g川棟的果實（川棟子，新和物產公司制造）用化50%乙醇在20~35°C下 提取7天，將溶劑濃縮，得到提取固體成分為123. 5g。對得到的提取固體成分通過后述試驗 例的方法將神經酷胺產生促進活性作為指標進行分饋。用水和乙酸乙醋進行液液分配，在 20. 78g(收率16. 8% )乙酸乙醋層中匯集活性。進一步通過硅膠柱對乙酸乙醋層進行分饋， 得到饋分（1) 7. 49g(收率6. 1 % )。再用硅膠柱對該饋分進行分饋，得到饋分（2) 2. 78g(收 率2. 3% )。接著，通過LH-20(GEHealthcareInc.制造，Se地adex?L肥0)分饋該饋分， 得到饋分（3) 1. 28g(收率1. 0 % )。用HPLC將其中340mg分饋，得到饋分（4) 164. 8mg(收 率0. 48% )。再用其中20mg通過HPLC進行分饋，得到饋分巧）1. 4mg(收率0. 03% )。用 NMR對該饋分（5)進行結構分析。另外，在通過NMR的結構分析中將作為試藥市售的川棟素 (Ava化em公司制造）用作比較用。通過NMR的結構分析的結果表示于表1中。
[0118] 其結果，從川棟中分離的活性成分是具有下述表1所示結構的化合物，該化合物 鑒定為川棟素（toosendanin)。另外，表1中，Ac表示乙酷基。
[0119]表 1
[0120]
[0121]
[0122](試驗例2)神經酷胺產生促進效果的驗證
[012引使用培養(yǎng)板，37°C、5% C02下在培養(yǎng)液（商品名稱：EpiLife-KG2, KURAB0公司制 造）中培養(yǎng)正常人表皮角化細胞（商品名稱：NHEK(F)，KURABO公司制造）。
[0124] 其后，將培養(yǎng)液替換為除去了上皮成長因子等增殖因子的化iLife-KG2,添加 〇.〇1%量的將川棟素（4乂日化6111公司制造）的濃度調整為11111巧74口口111)的液體，或添加 0. 01 %量的對照溶液（50%乙醇）。
[01巧]培養(yǎng)3天后，每1孔回收各細胞。
[0126] 從回收的細胞中用Bli曲andDyer法將提取了脂質的有機相移入玻璃管中，氮氣 干固之后，用氯仿、甲醇再溶解，制成脂質樣品。
[0127] 另外，通過在提取了脂質后的細胞中加入0. 1N化0H、1%SDS水溶液，60°C下加熱 2小時，使蛋白質增溶，冷卻至室溫后加入2NHC1進行中和，用BCA法定量蛋白量。
[012引用薄膜色譜法CTLC)W氯仿：甲醇：乙酸=190:9:1將制備的脂質樣品水平展開2 次。用噴霧器噴霧硫酸銅液，檢測用熱板烘烤的神經酷胺，作為神經酷胺的量。
[0129] 結果表示于表2中。另外，表2中表示的神經酷胺量表示將對照溶液添加群作為 1的情況下的相對值。
[0130](參考例）
[0131] 1.按樹提取物的制備
[0132] 將40g藍按巧ucalyp1:usglobulesL油illardiere，新和物產株式會社制造）的 葉切細，加入400mL50 %乙醇，室溫?靜置條件下進行提取7天。其后，過濾，得到291mL按樹 提取物。對于得到的提取物，用下述方法算出蒸發(fā)殘留物，蒸發(fā)殘留物為3.16% (w/v%)。
[0133] 2.神經酷胺產生促進效果的驗證
[0134] 使用得到的按樹提取物，通過與上述試驗例2同樣的方法來驗證神經酷胺產生促 進效果。另外，向細胞中的添加是添加0.001%的將濃度調整為W固體成分換算為1% (w/ V)的提取物。
[0135] 將結果表示于表2中。另外，按樹提取物作為具有神經酷胺產生促進作用的保濕 成分是公知的。
[013引表2[0137]
[013引由表2可知，確認添加了川棟素的體系與對照體系相比，神經酷胺產出量上化含 有W所述通式（1)表示的化合物作為有效成分的本發(fā)明的神經酷胺產生促進劑可W促進 神經酷胺產生。
[0139] 此外，由于神經酷胺與皮膚的保濕?屏障機能維持有關，因而，從表2的結果可知 W所述通式（1)表示的化合物促進神經酷胺的產生，具有保濕作用。目P，與作為公知的保濕 成分的按樹提取物（參考例）同樣，含有W所述通式（1)表示的化合物作為有效成分的本 發(fā)明的保濕劑促進神經酷胺的產生，具有保濕作用。
[0140](處方例1)
[0141] 將所述制造例1~6中得到的提取物作為有效成分，通過通常的方法分別制備下 述所示組成的化妝水、0/w(水包油）型乳液、W/0(油包水）型乳霜、凝膠狀化妝品、液體沐 浴劑。
[0142] 1-1.化妝水的制備1
[0143]
[0147] 2-1. 0/W型乳液的制備1
[014 引
[0151]
[0154] 3-2.W/0型乳霜的制備2


[0166] (處方例2)
[0167] 將川棟素作為有效成分，通過通常的方法分別制備下述所示組成的化妝水、0/ W(水包油）型乳液、W/0(油包水）型乳霜、凝膠狀化妝品、液體沐浴劑W及片劑形態(tài)的食 品D
[016引 1.化妝水的制備
[0169]



[0184] 產業(yè)上利用的可能性
[0185] 本發(fā)明的神經酷胺產生促進劑W及保濕劑具有促進神經酷胺的產生的作用。因 此，本發(fā)明可W利用于化妝品、功能性食品、醫(yī)藥品、醫(yī)療的領域中。
[0186] 盡管將本發(fā)明連同其實施方式進行說明，但是除非特別指定，該說明的任意細節(jié) 并不意在限定本發(fā)明，在不違反附屬的權利要求所示的本發(fā)明的精神和范圍的情況下應該 進行寬泛地解釋。
[0187] 本申請主張基于2009年10月5日在日本專利申請的特愿2009-231847W及2010 年4月28日在日本專利申請的特愿2010-103651的優(yōu)先權，在此作為參考并將其內容作為 本說明書記載的一部分而引入。
【主權項】
1. 以下述通式（1)表示的化合物在用于制造由于神經酰胺產生促進而具有保濕效果 的醫(yī)藥品中的用途，式中，R表示碳原子數為1~5的?；?. 以下述通式（1)表示的化合物在用于制造神經酰胺產生促進劑中的用途，式中，R表示碳原子數為1~5的?；?. 以下述通式（1)表示的化合物在用于制造保濕劑中的用途，式中，R表示碳原子數為1~5的?；?。4. 如權利要求1~3中任一項所述的用途，其中， 通式（1)中，R表示碳原子數為1~3的酰基。5. 如權利要求1~3中任一項所述的用途，其中， 通式（1)中，R表示乙?；?。6. 以下述通式（1)表示的化合物在用于神經酰胺產生促進中的非治療用途， CN 105147702 A TX Λ'? 安小巾 2/3 頁式中，R表示碳原子數為1~5的?；?。7. 以下述通式（1)表示的化合物在用于保濕中的非治療用途，式中，R表示碳原子數為1~5的?；?。8. 如權利要求6或7所述的非治療用途，其中， 通式（1)中，R表示碳原子數為1~3的酰基。9. 如權利要求6或7所述的非治療用途，其中， 通式（1)中，R表示乙酰基。10. 如權利要求6或7所述的非治療用途，其中， 將所述化合物施用于皮膚上。11. 一種促進神經酰胺產生的非治療方法，其包括將以下述通式（1)表示的化合物施 用于皮膚上，式中，R表示碳原子數為1~5的?；?2. -種保濕的非治療方法，其包括將以下述通式（1)表示的化合物施用于皮膚上， CN 105147702 A 權利要求書 _3/3 頁式中，R表示碳原子數為1~5的?；?。13. 如權利要求11或12所述的非治療方法，其中， 通式（1)中，R表示碳原子數為1~3的?；?。14. 如權利要求11或12所述的非治療方法，其中， 通式（1)中，R表示乙酰基。
【專利摘要】一種神經酰胺產生促進劑以及保濕劑，所述神經酰胺產生促進劑以及保濕劑含有選自大葉藜(Chenopodium？hybridum)、川楝(Melia？toosendan)、木藍(Indigofera？tinctoria)、大薊(Cirsium？japonicum)、梓樹(Catalpa？ovata)以及萬壽菊(Tagetes？erecta)中的至少1種植物的提取物，或以下述通式(1)表示的化合物作為有效成分。(式中，R表示碳原子數為1～5的酰基)。
【IPC分類】A61Q19/00, A61K31/585, A61K8/63, A61P17/00, A61K8/97
【公開號】CN105147702
【申請?zhí)枴緾N201510340838
【發(fā)明人】下豐留芳枝, 伊藤正太郎, 菅井由也, 橋本宙, 石川準子
【申請人】花王株式會社
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2010年9月27日
【公告號】CN102686229A, CN102686229B, EP2520304A1, EP2520304A4, US20120196841, WO2011043212A1