一種同種異體骨骨粉及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)涉及但不限于生物材料領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]創(chuàng)傷、骨腫瘤、感染、先天性骨缺損等原因引起的大段骨缺損是臨床修復(fù)重建外科常見(jiàn)而又棘手的問(wèn)題。對(duì)于臨床骨缺損的患者，自體骨移植作為最佳選擇可以避免傳染性疾病的傳播和移植后嚴(yán)重的免疫反應(yīng)。
[0003]然而，供區(qū)并發(fā)癥的發(fā)生以及自體骨的形態(tài)和大小常與受區(qū)缺損不一致使得自體骨移植在骨領(lǐng)域中受到一定限制。同種異體骨作為自體骨的替代選擇可用于骨領(lǐng)域中。
[0004]目前，涉及同種異體骨的相關(guān)文獻(xiàn)如下:CN 200610122058.9、CN 200710107105.7以及 CN 201010231771.3 等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]以下是對(duì)本文詳細(xì)描述的主題的概述。本概述并非是為了限制權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
[0006]本申請(qǐng)的一個(gè)目的是提供一種同種異體骨骨粉。
[0007]本申請(qǐng)的另一個(gè)目的是提供一種制造同種異體骨骨粉的方法。
[0008]本申請(qǐng)的又一個(gè)目的是提供一種包含本申請(qǐng)實(shí)施例的同種異體骨骨粉的凝膠組合物。
[0009]本申請(qǐng)的又一個(gè)目的是提供一種同種異體骨生物凝膠材料的制備方法。
[0010]本申請(qǐng)的又一個(gè)目的是提供一種同種異體骨生物凝膠材料。
[0011]本申請(qǐng)的又一個(gè)目的是提供本申請(qǐng)實(shí)施例的同種異體骨骨粉的用途。
[0012]本申請(qǐng)中所提及的鈣含量是指以氧化鈣計(jì)的同種異體骨骨粉中的鈣的重量百分比。
[0013]在一個(gè)方面，本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方式提供了一種同種異體骨骨粉，其中，所述同種異體骨骨粉以氧化鈣的形式的鈣含量小于30wt%。
[0014]在以上或其他的實(shí)施方式中，同種異體骨骨粉的粒徑可在30微米至100微米的范圍內(nèi)。
[0015]在另一個(gè)方面，本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方式提供了一種同種異體骨骨粉的制備方法，所述方法包括以下任意順序的步驟:粉碎同種異體骨；將粉碎的同種異體骨與核酸酶進(jìn)行酶促反應(yīng)；將粉碎的同種異體骨與洗滌劑，任選地螯合劑進(jìn)行孵育洗滌；任選地將粉碎的同種異體骨用螯合劑進(jìn)行脫鈣處理；以及研磨脫鈣處理后的同種異體骨，以使所制得的同種異體骨骨粉以氧化鈣的形式的鈣含量小于30%。
[0016]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述方法還可包括在所述研磨步驟前的每個(gè)步驟完成之后，將所述粉碎的同種異體骨漂洗的步驟。
[0017]在以上或其他的實(shí)施方式中，在所述研磨步驟中，可以將所述脫鈣處理后的同種異體骨烘干并研磨成粒徑為30微米-100微米的同種異體骨骨粉。
[0018]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述同種異體骨的粉碎步驟可包括:將同種異體骨粉碎成骨片或骨顆粒，任選地將所述骨片或骨顆粒與液氮加到粉碎機(jī)中粉碎。
[0019]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述核酸酶可選自脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶中的一種或更多種。
[0020]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述酶促反應(yīng)可在25°C -60°C的溫度下進(jìn)行，優(yōu)選地，可在37°C的溫度下進(jìn)行。
[0021]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述洗滌劑可包括表面活性劑，所述表面活性劑可選自聚乙二醇辛基苯基醚、十二烷基硫酸鈉、月桂基磺化琥珀酸單酯二鈉、椰油酸二乙醇酰胺、三乙醇胺皂、硫酸化蓖麻油、二辛基琥珀酸磺酸鈉，十二烷基苯磺酸鈉，甘膽酸鈉中的一種或更多種。
[0022]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述螯合劑可選自二氨基乙烷四乙酸、氨基三乙酸、二亞乙基三胺五乙酸、乙二胺四乙酸二鈉鹽、羥乙基乙二胺三乙酸、二羥乙基甘氨酸、檸檬酸、酒石酸、葡萄糖酸、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、水解聚馬來(lái)酸酐、富馬酸中的一種或更多種。
[0023]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述同種異體骨可以是來(lái)源于捐獻(xiàn)骨組織、廢棄骨組織以及市售同種骨組織中的一種或更多種。
[0024]在本申請(qǐng)的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，提供了一種制備同種異體骨骨粉的方法，所述方法如下:
[0025]獲取同種異體硬骨、軟骨；
[0026]將同種異體硬骨、軟骨與液氮共同加入粉碎機(jī)中粉碎；
[0027]將粉碎后的同種異體硬骨、軟骨碎片用蒸餾水漂洗，離心后棄掉上層液體；
[0028]將同種異體硬骨、軟骨碎片與核酸酶在25°C _60°C下進(jìn)行酶促反應(yīng)孵育2-96小時(shí)；
[0029]酶促反應(yīng)結(jié)束后，用蒸餾水漂洗并離心，棄上清液，重復(fù)2-3次；
[0030]將洗凈后的同種異體硬骨、軟骨碎片與表面活性劑在0°C _42°C下洗滌孵育6-96小時(shí)；
[0031]在孵育結(jié)束后，用蒸餾水漂洗并離心，棄上清液，重復(fù)2-3次；
[0032]將洗凈后的同種異體骨、軟骨碎片與螯合劑反應(yīng)12-168小時(shí)；
[0033]用蒸餾水漂洗并離心，棄上清液，重復(fù)2-3次；
[0034]將洗凈后的同種異體硬骨、軟骨碎片在20_100°C下烘干；
[0035]使用組織粉碎機(jī)將烘干后的同種異體硬骨、軟骨碎片磨成粒徑大小約30-100微米的同種異體骨骨粉。
[0036]在另一個(gè)方面，本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方式提供了一種凝膠組合物，包括如上所述的同種異體骨骨粉或如上所述方法制得的同種異體骨骨粉、水溶性生物材料粉末、賦形劑以及水。
[0037]所述同種異體骨骨粉、所述可溶性生物材料粉末、所述賦形劑以及所述水的用量可為:基于每100質(zhì)量份水，所述同種異體骨骨粉為1-50重量份，所述可溶性生物材料粉末為1-100重量份，所述賦形劑為0.01-40重量份。
[0038]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述凝膠組合物的凝膠黏稠度可為1000_3000mPa.S0
[0039]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述同種異體骨骨粉的用量基于每100重量份水可為5-50重量份、或10-50重量份、或20-50重量份、25-50重量份、30-50重量份、40-50重量份。
[0040]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述賦形劑可以是光引發(fā)劑，所述光引發(fā)劑的用量可以是基于每100重量份水的0.05-40重量份。
[0041]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述光引發(fā)劑的用量可以是基于每100重量份水的0.05重量份。
[0042]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述賦形劑可以是光交聯(lián)劑，所述光交聯(lián)劑的用量可以是基于每100重量份水的5-40重量份。
[0043]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述賦形劑為光交聯(lián)劑，所述光交聯(lián)劑的用量可以是基于每100重量份水的30重量份。
[0044]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述水溶性生物材料粉末可以是水溶性的且可具有黏稠度的材料粉末，其可包括促進(jìn)細(xì)胞分化的材料粉末。
[0045]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述促進(jìn)細(xì)胞分化的材料粉末可選自羥基磷灰石、海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、糖胺聚糖、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素鈉、羥丙基纖維素鈉、I型膠原、泊洛沙姆及卵磷脂殼聚糖及其衍生物如，殼聚糖鹽酸鹽、羧甲基殼聚糖、殼聚糖硫酸酯中的一種或更多種。
[0046]在以上或其他的實(shí)施方式中，所述賦形劑能夠使凝膠保持穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，改善其彈性模量及力學(xué)強(qiáng)度，其可選自聚乙二醇雙丙烯酸酯、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯、2-羥基-4’ - (2-羥乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2-羥基-2-甲基-1-苯基丙酮、樟腦醌、雜蒽酮衍生物、二苯甲酮衍生物、苯偶酰衍生物、羥基苯基酮衍生物、硫代硫酸烷基酯鹽、稠環(huán)芳烴衍生物、聚硅烷衍生物、?；⑺猁}類化合物、偶氮型光引發(fā)劑、金屬配合物、氯化鈣、泊洛沙姆、二羥苯丙氨酸及絲素蛋白中的一種或更多種。
[0047]在另一個(gè)方面，本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方式提供了一種同種異體骨生物凝膠材料的制備方法，包括:將如上所述的凝膠組合物中所述同種異體骨骨粉、所述水溶性生物材料粉末以及所述賦形劑混勻，并與水配制為凝膠，進(jìn)行交聯(lián)，得到同種異體骨生物凝膠材料。
[0048]在以上或其他的實(shí)施方式中，在進(jìn)行交聯(lián)的步驟中，可通過(guò)在如紫外光波長(zhǎng)250-420nm或可見(jiàn)光400-800nm照射下進(jìn)行交聯(lián)。
[0049]在另一個(gè)方面，本申