制備的5 g PLLA-PEG微球加入到20 mL透明質(zhì)酸鈉凝膠中300轉(zhuǎn) /分下攪拌6小時混合均勻。用溫度為121°C的高壓蒸汽滅菌35分鐘，無菌灌裝在I mL預(yù) 灌封注射器中，得到含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。
[0031] 實施例3 (1)將 20 g 分子量為 100, 000 的 PLGA-PEG，其中 PLGA 分子量為 99, 000, LA/GA=70/30. PEG分子量為5, 000,加入到200 mL二氯甲烷中溶解，然后滴加到400 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚 乙烯醇水溶液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加完畢，常溫攪拌2小時，升溫至45°C， 除去二氯甲烷得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出9 g 25~45 μ m的微球。
[0032] (2)將0. 4 g透明質(zhì)酸溶于2 mL注射用水中，加入20%的氫氧化鈉溶液0. 2 mL，加 入1，4- 丁二醇二縮水甘油醚15 μ L，加入4 mL 2. 6 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 5~7. 5， 再加入1%的鹽酸利多卡因7 mL，再加入PBS緩沖溶液5 mL調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/ L即得凝膠，得透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的凝膠20 mL。
[0033] (3 )將上述方法制備的5 g PLGA-PEG微球加入到20 mL透明質(zhì)酸鈉凝膠中300轉(zhuǎn) /分下攪拌8小時混合均勻。用溫度為121°C的高壓蒸汽滅菌35分鐘，無菌灌裝在I mL預(yù) 灌封注射器中，得到含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。
[0034] 對比例4 : (1)將40 g分子量為140, 000的PLLA加入到500 mL二氯甲烷中溶解，然后滴加到 1000 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚乙烯醇水溶液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加完畢，常溫 攪拌2小時，升溫至45°C，除去二氯甲烷得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出18 g 25~ 45 μ m的微球。
[0035] (2)將0. 4 g透明質(zhì)酸溶于2 mL注射用水中，加入20%的氫氧化鈉溶液0. 2 mL，加 入1，4- 丁二醇二縮水甘油醚15 μ L，加入4 mL 2. 6 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 5~7. 5， 再加入1%的鹽酸利多卡因7 mL，再加入PBS緩沖溶液5 mL調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/ L即得凝膠，得透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的凝膠20 mL。
[0036] (3 )將上述方法制備的5 g PLLA微球加入到20 mL透明質(zhì)酸鈉凝膠中300轉(zhuǎn)/分 下攪拌6小時混合均勻。用溫度為121°C的高壓蒸汽滅菌35分鐘，無菌灌裝在I mL預(yù)灌封 注射器中，得到含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。
[0037] 效果評價 PH值：對實施例1~3和對比例4所得混合凝膠進(jìn)行pH值測試，結(jié)果見表1。
[0038] 表1實施例1~3和對比例4所得混合凝膠的pH值
滲透壓：對實施例1~3和對比例4所得混合凝膠進(jìn)行滲透壓測試，結(jié)果見表2。
[0039] 表2實施例1~3和對比例4所得混合凝膠的滲透壓
流變學(xué)測試：采用旋轉(zhuǎn)流變儀，25°C測定實施例1~3和對比例4的動力粘度，37°C測 定實施例1~3和對比例4的彈性模量和粘性模量，結(jié)果見表3。
[0040] 表3實施例1~3和對比例4所得混合凝膠的流變性能
水溶液分散性測試：實施例2的微球和對比例4的微球在水溶液分散性比較，結(jié)果見圖 1〇
[0041] 由圖中可以看出，對比例4實施例2比較，PLLA-PEG微球在水相體系中比PLLA微 球分散性更好。結(jié)果表明，本發(fā)明的混合凝膠物理化學(xué)性質(zhì)符合臨床需求，形態(tài)均一穩(wěn)定， 適用于美容和醫(yī)療用途的填充塑型。
【主權(quán)項】
1. 一種注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠，其特征在于：包括：兩親性微球和 透明質(zhì)酸凝膠的鹽溶液； 所述的鹽溶液為氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液； 所述的兩親性微球平均粒徑為1~200 ym，微球在混合凝膠中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~ 50% ； 制備方法為：兩親性微球與透明質(zhì)酸凝膠混合，在滲透壓250~350 mOsm/L、pH6. 5~ 7. 5的氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液中混合均勻，用溫度為115~125°C的高壓蒸汽滅菌 15~35分鐘，灌裝在預(yù)灌封注射器中，得到注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述微球材料為兩親性材料，疏水 端為脂肪碳鏈、芳香烴、酯基、硅烷；親水端為羧基、羥基、氨基、醚鍵，包括PLLA-PEG、PLGA， PLGA-PEG，PLLA-HA，PLGA-HA。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述微球材料中PLLA或PLGA分子 量為 10, 000 ~500, 000, PEG 為 1，000 ~10, 000, PLGA 中，LA/GA=90/10 ~10/90。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述的透明質(zhì)酸用交聯(lián)的透明質(zhì)酸、 動物源的膠原蛋白、殼聚糖、氨基酸、纖維素、海藻酸鈉代替。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述透明質(zhì)酸凝膠中透明質(zhì)酸的分 子量為1〇〇, 〇〇〇~3, 000, 000,透明質(zhì)酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~50% ;交聯(lián)的透明質(zhì)酸的交聯(lián)劑 為二乙烯基砜或縮水甘油醚。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述的兩親性微球中，PLLA-PEG中 PLLA分子量為100, 000~200, 000 ;PEG為1，000~10, 000 ;所述的兩親性微球中，PLGA或 PLGA-PEG 中，PLGA 中 LA/GA=90/10,分子量為 100, 000 ~200, 000, PEG 為 1，000 ~10, 000。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述的兩親性微球在混合凝膠中的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10~30% ;所述的微球的平均粒徑為10~60 ym。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合凝膠，其特征在于：所述的混合凝膠中還含有但不限于 多元醇、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核酸、維生素、多糖及局部類麻醉劑的一種或多種活性成分。9. 一種注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠的制備方法，其特征在于包括以下步 驟： (1) 將兩親性微球材料加入到油相中溶解，然后滴加到含質(zhì)量分?jǐn)?shù)〇. 1~5%的表面活 性劑的水溶液中，滴加速度為50~60滴/分鐘，滴加完畢，常溫攪拌1~2小時，除去油相 溶劑得反應(yīng)液，過濾反應(yīng)液收集濾餅，篩分出10~60 y m的微球； (2) 將透明質(zhì)酸溶于pH6. 5~7. 5的氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液中，加入甘油和甘露 醇調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/L即得凝膠，透明質(zhì)酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20~30% ;或?qū)⑼该髻|(zhì) 酸溶于注射用水中，再加入氫氧化鈉溶液，后加入二乙烯基砜或1，4- 丁二醇二縮水甘油 醚，攪拌得到交聯(lián)透明質(zhì)酸，后用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至6. 5~7. 5,然后用PBS溶液或生理 鹽水調(diào)節(jié)滲透壓至250~350 mOsm/L得凝膠； (3) 將上述方法制備的兩親性微球加入到透明質(zhì)酸鈉凝膠中，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10~30%，在 100~1，000轉(zhuǎn)/分下攪拌1~72小時混合均勻；用溫度為115~125°C的高壓蒸汽滅菌 15~35分鐘，灌裝在預(yù)灌封注射器中，得到注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于：所述的氫氧化鈉溶液的濃度為0. 1~10
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種注射用含兩親性微球的透明質(zhì)酸混合凝膠及其制備方法，所述微球材料涉及PLLA-PEG、PLGA，PLGA-PEG等兩親性材料。PLLA或PLGA分子量為10,000～500,000，PEG為1,000～10,000，PLGA中，LA/GA=90/10～10/90。微球平均粒徑為1～200μm，在凝膠中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1～50%；所述凝膠成分為透明質(zhì)酸，或為二乙烯基砜或縮水甘油醚交聯(lián)的透明質(zhì)酸，透明質(zhì)酸分子量為100,000～3,000,000，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1～50%。凝膠成分還可以為動物源的膠原蛋白、殼聚糖、氨基酸纖維素、海藻酸鈉等。微球混合凝膠在滲透壓250～350mOsm/L、pH6.5～7.5的氯化鈉溶液或磷酸鹽緩沖溶液中配制而成。本發(fā)明將兩親性微球直接與透明質(zhì)酸凝膠混合，兩親性微球容易均勻分布在凝膠中，注射入人體后，在人體水環(huán)境下不易集結(jié)成塊。
【IPC分類】A61L27/26, A61L27/52, A61L27/50, A61L27/54
【公開號】CN105126166
【申請?zhí)枴緾N201510593332
【發(fā)明人】簡軍, 李亦晨
【申請人】北京愛美客生物科技有限公司
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年9月17日