三羥基黃酮在制備用于治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及三羥基黃酮在治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 動(dòng)脈瘤的定義是形態(tài)學(xué)上的變化，即動(dòng)脈壁失去了平行性，最終導(dǎo)致瘤體的擴(kuò)張 和破裂。腹主動(dòng)脈瘤是其中最為常見的一種，最常見于腹主動(dòng)脈腎動(dòng)脈下段，多項(xiàng)研究顯示 其診斷標(biāo)準(zhǔn)為最大前后直徑超過3cm或大于正常的1. 5倍。
[0003] 腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過程，其主要機(jī)制包括氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、 細(xì)胞外基質(zhì)降解、中膜平滑肌細(xì)胞凋亡等。探索促進(jìn)動(dòng)脈壁從失去平行性到瘤體形成直至 破裂的因素至關(guān)重要。影響瘤體形成的因素可能起始于胚胎期，因?yàn)閯?dòng)脈壁內(nèi)的彈性纖 維合成在人體出生后就停止了，因此孕期的胎盤不良因素以及營(yíng)養(yǎng)的缺乏可能會(huì)導(dǎo)致成 人后的腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生。除此之外，胚胎期影響平滑肌行為（比如對(duì)外界刺激因素的反 應(yīng)）的各種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路也有可能參與到疾病的發(fā)生中。曾經(jīng)有觀點(diǎn)認(rèn)為，腹主動(dòng)脈瘤 其實(shí)就是動(dòng)脈粥樣硬化的局部表現(xiàn)，換言之瘤體是繼發(fā)于斑塊產(chǎn)生的。有研究就向這個(gè) 傳統(tǒng)觀點(diǎn)提出質(zhì)疑，該研究認(rèn)為腹主動(dòng)脈瘤患者的主動(dòng)脈全長(zhǎng)都存在異常，動(dòng)脈粥樣硬化 斑塊的形成是因?yàn)閯?dòng)脈瘤影響了血流動(dòng)力學(xué)的緣故，而非其起始因素。值得注意的是，腹 主動(dòng)脈瘤和冠心病具有相似的危險(xiǎn)因素和病理生理學(xué)機(jī)制。腹主動(dòng)脈瘤的組織學(xué)特征主 要包括動(dòng)脈壁全層的變薄擴(kuò)張、膠原纖維和彈性纖維的降解、炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)以及平滑肌 細(xì)胞的死亡（參見AilawadiG，2003)。目前認(rèn)為誘導(dǎo)上述病變的主要因素是氧化應(yīng)激。 活性氧基團(tuán)（reactiveoxygenspecies，R0S)可以激活自由基敏感性轉(zhuǎn)錄因子如AP-1、 AP-2 a、NF-K0等，激活趨化因子如單核細(xì)胞趨化蛋白I(monocytechemoattractant protein-1,MCP-1)和白細(xì)胞介素8 (interleukin-8,IL-8)、促炎性細(xì)胞因子如腫瘤壞死因 子（tumornecrosisfaci〇HhTNF-a)和細(xì)胞外基質(zhì)降解蛋白酶如基質(zhì)金屬蛋白酶 (matrixmetalloproteinases，MMPs)等基因的表達(dá)。同時(shí)，ROS可以直接導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞 的凋亡，促進(jìn)瘤體破裂（參見McCormickML，2007)。
[0004] 血管外科協(xié)會(huì)（SocietyforVascularSurgery,SVS)已經(jīng)發(fā)布了腹主動(dòng)脈瘤的 診斷以及治療指南。腹主動(dòng)脈瘤的患者常常無癥狀，偶爾會(huì)有腹背部疼痛，有時(shí)可能會(huì)被腹 部體格檢查發(fā)現(xiàn)，但是敏感性較低，因此腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)現(xiàn)往往是基于偶然性的檢查。瘤體 破裂的患者常伴發(fā)劇烈腹痛、低血壓、休克等表現(xiàn)，體格檢查可發(fā)現(xiàn)腹部明顯膨隆、搏動(dòng)性 腫塊以及Grey-Turner's征（參見ParavastuSC, 2009)。目前，腹主動(dòng)脈瘤的診斷和評(píng)價(jià) 主要依靠超聲和CT血管成像（computedtomographyangiogram,CTA)，測(cè)量指標(biāo)通常是軸 向的最大直徑，標(biāo)準(zhǔn)是最大前后直徑超過3cm或大于正常的1. 5倍。
[0005] 腹主動(dòng)脈瘤一旦確診，其治療方案往往取決于瘤體的直徑大小及其進(jìn)展的速度 (自然平均每年增大2-3_)。瘤體介于4. 0-5. 5cm者可以早期手術(shù)干預(yù)，大于5. 5cm的患者 需要血管外科專家在手術(shù)治療和藥物干預(yù)方面找到最佳方案。目前指南表明，腹主動(dòng)脈瘤 患者手術(shù)的適應(yīng)癥是最大瘤體直徑超過5. 5cm，這主要是基于隨機(jī)臨床試驗(yàn)的結(jié)果，瘤體直 徑介于3. 0-5. 5cm間的患者，其破裂風(fēng)險(xiǎn)為0-1. 26% ;而大于5. 5cm的患者，風(fēng)險(xiǎn)為27%。 手術(shù)治療手段主要是血管內(nèi)動(dòng)脈瘤修補(bǔ)術(shù)、開腹動(dòng)脈瘤修補(bǔ)術(shù)，手術(shù)適應(yīng)癥的選擇主要是 權(quán)衡破裂風(fēng)險(xiǎn)和圍手術(shù)期的并發(fā)癥。
[0006] 對(duì)于腹主動(dòng)脈瘤的最佳藥物治療方案一直缺乏強(qiáng)有力的證據(jù)，主要是由于患者常 常伴發(fā)其他疾病而且同時(shí)服用多種藥物。目前主要探索或應(yīng)用的藥物有：
[0007] 1)他汀類藥物，其可以降低腹主動(dòng)脈瘤患者術(shù)后的心肌缺血發(fā)生率。其中最佳藥 物是氟伐他汀，術(shù)前術(shù)后各使用一個(gè)月可以使心血管事件的發(fā)生率和死亡率減半；
[0008] 2)抗高血壓藥物，盡管有多個(gè)隨機(jī)臨床試驗(yàn)在探索降壓藥物是否能延緩瘤體生 長(zhǎng)，但目前結(jié)論并不確定。CAESAR研究結(jié)果提示高血壓可以延緩瘤體的修復(fù)，但是UKSmall AneurysmTrial研究結(jié)果并未重復(fù)出相似的結(jié)論；
[0009] 3)P受體阻滯劑，現(xiàn)在還未有強(qiáng)有力的證據(jù)證明P受體阻滯劑可以延緩瘤體進(jìn) 展或者降低其破裂風(fēng)險(xiǎn)。但是，在一些臨床研究中的適宜選擇患者，P受體阻滯劑可以顯 著降低圍手術(shù)期的心血管風(fēng)險(xiǎn)，而不適宜的選擇則可以導(dǎo)致效果的降低甚至有害；
[0010] 4)抗血小板藥物，抗血小板藥物在腹主動(dòng)脈瘤患者的應(yīng)用主要是依靠間接的證 據(jù)。一個(gè)112000例具有心血管疾病危險(xiǎn)因素參與者的薈萃分析證實(shí)，低劑量的阿司匹林可 以顯著降低冠脈事件發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)和死亡率。因此，歐洲血管外科協(xié)會(huì)指南中明確將阿司匹 林列入到腹主動(dòng)脈瘤患者的治療中；
[0011] 5)其他新興藥物，從上述藥物可以看出，目前干預(yù)的對(duì)象主要是腹主動(dòng)脈瘤的危 險(xiǎn)因素，而針對(duì)其發(fā)病機(jī)制研發(fā)的藥物還很少，而且大多只是停留在動(dòng)物水平。比如，抑制 MMPs或其他蛋白酶就是抑制腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生發(fā)展的重要策略。Prall等在小鼠模型上證 實(shí)，MMP的抑制劑多西環(huán)素（doxycycline)可以顯著抑制瘤體的增長(zhǎng)（33-66% )，而且血清 中多西環(huán)素的水平同瘤體的抑制程度呈正相關(guān)。另外，維持動(dòng)脈內(nèi)彈性纖維的完整性對(duì)于 延緩瘤體進(jìn)展也很重要。Isemburg等在大鼠模型上應(yīng)用彈性纖維穩(wěn)定劑PGG，一種與彈性 纖維結(jié)合的多酚類化合物，結(jié)果顯示彈性纖維明顯得到了保護(hù)，瘤體的擴(kuò)張也顯著被抑制 了。有研究證實(shí)JNK通路也參與到腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)生發(fā)展，而JNK的抑制劑可以通過降低 MMP-9的酶活性來抑制腹主動(dòng)脈瘤形成。Yoshimura等利用CaC12誘導(dǎo)小鼠形成腹主動(dòng)脈 瘤，在體內(nèi)應(yīng)用JNK特異性抑制劑SP600125十周。結(jié)果顯示，抑制JNK通路明顯改善了動(dòng) 脈壁內(nèi)彈性纖維的結(jié)構(gòu)、抑制了MMP-9的激活，同時(shí)也減少了巨噬細(xì)胞在動(dòng)脈壁內(nèi)的浸潤(rùn)。 該研究結(jié)論提示，抑制JNK通路可以從多個(gè)角度抑制腹主動(dòng)脈瘤進(jìn)展，為該疾病的防治提 供了新的策略。
[0012] 三羥基黃酮（baicalein，BAI)是一種多酚類化學(xué)物，是中國(guó)傳統(tǒng)藥物黃芩的主要 組成成分。目前研究認(rèn)為BAI是一種高效的抗氧化劑，主要清除超氧陰離子、過氧化氫和羥 自由基等活性氧基團(tuán)。在腎小球系膜細(xì)胞中，BAI可以顯著抑制外源過氧化氫引起的損傷， 具體機(jī)制可能與螯合鐵離子有關(guān)，主要是通過抑制二價(jià)鐵催化的Fenton反應(yīng)，減少羥自由 基的產(chǎn)生。在體外培養(yǎng)的人表皮成纖維細(xì)胞中，BAI可以顯著抑制氧自由基引起的細(xì)胞損 傷，其效能遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過去鐵胺、二甲基亞砜、別嘌呤醇等抗氧化劑，參見HalliwellB. 1995。
[0013]BAI在心血管系統(tǒng)中的作用，目前主要集中在心肌缺血再灌注損傷上。研究證實(shí)， BAI可以明顯改善體外心肌細(xì)胞在缺血或再灌注情況下的存活率和收縮功能。此外BAI可 以明顯減少應(yīng)激條件下ROS的產(chǎn)生，且呈劑量依賴性。其機(jī)制可能與線粒體膜上KATP通道 關(guān)系不大，主要是增強(qiáng)了ROS的清除。遺憾的是，上述研究均未在體內(nèi)得到證實(shí)。
[0014]BAI可以明顯抑制缺血再灌注后的心肌細(xì)胞損傷，具體分子機(jī)制仍有待研究，而且 其是否能影響腹主動(dòng)脈瘤形成尚無文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 本發(fā)明提供三羥基黃酮在制備用于治療或預(yù)防主動(dòng)脈瘤的藥物中的新用途。在一 些實(shí)施方式中，所述主動(dòng)脈瘤是腹主動(dòng)脈瘤。在一些【具體實(shí)施方式】中，所述腹主動(dòng)脈瘤是血 管緊張素II誘導(dǎo)型腹主動(dòng)脈瘤。
[0016] 在一些實(shí)施方式中，所述治療或預(yù)防是指改善選自如下癥狀或指標(biāo)中的一項(xiàng)或多 項(xiàng)：腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生率、腹主動(dòng)脈瘤嚴(yán)重程度、主動(dòng)脈內(nèi)ROS水平、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、細(xì)胞外基 質(zhì)降解相關(guān)蛋白酶的表達(dá)水平或酶活性、血管中膜彈性纖維相對(duì)含量和受體ATlR的水平。
[0017] 在一些實(shí)施方式中，所述腹主動(dòng)脈瘤嚴(yán)重程度選自如下指標(biāo)的一項(xiàng)或多項(xiàng)：主動(dòng) 脈重量與體重比、和瘤體最大徑長(zhǎng)。
[0018] 在一些實(shí)施方式中，所述炎性細(xì)胞選自T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、和巨噬細(xì)胞中的 一種或多種。
[0019] 在一些實(shí)施方式中，所述細(xì)胞外基質(zhì)降解相關(guān)蛋白酶選自：MMP-2、和MMP-9中的 一種或多種。
[0020] 在一些實(shí)施方式中，所述三羥基黃酮的劑量為20_200mg/kg/d;優(yōu)選30mg/kg/d或 100mg/kg/d。
[0021] 根據(jù)本領(lǐng)域的公知技術(shù)，普通技術(shù)人員可以從一種物種的劑量推知另一物種的劑 量。例如，可采用下列方法進(jìn)行人類與不同種類動(dòng)物之間藥物劑量的換算：已知A種動(dòng)物每 kg體重用藥量，欲估算B種動(dòng)物每kg體重用藥劑量時(shí)，可查表1 (表1所列值，各家報(bào)道略 有出入），找出折算系數(shù)（W)，再按下式計(jì)算：
[0022] B種動(dòng)物的劑量（mg/kg) =WXA種動(dòng)物的劑量（mg/kg)
[0023] 表1.動(dòng)物與人體的每公斤體重劑量折算系數(shù)表
[0024]
[0025] 在一些實(shí)施方式中，通過選自如下的方式向受試者提供三羥基黃酮：靜脈內(nèi)、皮 下、皮內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹腔內(nèi)或口服；