一種干細胞眼霜及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種抗衰老的護膚品，具體為一種干細胞眼霜及其制備方法。屬于化 妝品技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 在皮膚抗衰老的化妝品，有多種方法，比如通過激素、植物提取物等配方對皮膚進 行去皺處理，然而這些方法不能從根本上達到抗衰老的作用，激素使用對人體有危害，并且 只能取得短期效果，長期使用加劇皮膚老化，而植物提取物的效果不明顯，需要長期使用。
[0003]隨著生活水平的不斷提高，人們對健康尤其是皮膚的保養(yǎng)越來越受到重視。皮膚 組織是人體最大組織器官，覆蓋在人體表面，阻隔自然界一切有害物質(zhì)對生命機體產(chǎn)生的 損害作用。但是，隨著年齡的增加，皮膚組織器官的功能逐漸老化，從美學觀點看，嚴重影響 人們對生命的熱情；從生理學的角度看，影響人體內(nèi)部器官的有效保護。皮膚老化的主要原 因是，在新陳代謝過程中需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)數(shù)量和質(zhì)量不能從飲食中得到生理性滿足， 從而導(dǎo)致生命細胞核內(nèi)的生命遺傳物質(zhì)載體DNA的合成原料的數(shù)量逐漸減少，最終導(dǎo)致其 調(diào)空合成的蛋白質(zhì)種類和數(shù)量減少，細胞代謝能力隨之下降，壽命相對縮短。皮膚過度衰老 現(xiàn)象的表現(xiàn)是：皮膚松弛、皺紋增多加深、毛孔增大、皮膚紋理變粗變亂、皮膚彈性下降等。 目前，市面上用于護膚的產(chǎn)品大多保濕，功效有限。
[0004]人類臍帶間充質(zhì)干細胞（humanumbilicalmesenchymalstemcells，HUMSC)和 胎盤干細胞（placentalstemcell，PSC)來源于婦女分娩時的廢棄的臍帶和胎盤組織。 臍帶內(nèi)含二條臍動脈、一條臍靜脈，在動靜脈之間含有特殊的胚胎粘液樣結(jié)締組織-華爾 通氏膠（WhartonpsJelly)，從華爾通氏膠分離得到的基質(zhì)細胞即為人臍帶間充質(zhì)干細胞 (humanumbilicalmesenchymalstemcell，HUMSC)。胎盤是胎兒從母體吸取營養(yǎng)的場所， 分為羊膜層、絨毛層及脫基底膜層。研究表明，HUMSC和PSC具有多向分化潛能和可塑性，可 分化成三個胚層來源的組織細胞，如成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、胰島細胞、神經(jīng)細胞、 心肌細胞、生殖細胞（如精原細胞、卵母細胞等），并能分泌豐富的營養(yǎng)因子。這些豐富的營 養(yǎng)因子不僅可以延緩皮膚干細胞的衰老，還可以促進表皮干細胞和毛囊干細胞增殖，對保 持皮膚彈性和健康具有重要作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種效果明顯、療效短并且無副作用的抗衰老護 膚品，具體技術(shù)方案為：
[0006]A組：
[0007]
[0011] 將A組混合，加熱到70-75度。將去離子水加熱到70-75度。將A組加入去離子 水中，混合均勻，攪拌降溫。
[0012] 當溫度下降到40度以下時，加入B組，混合均勻即可。
[0013] 其中，優(yōu)選地，方法和重量份比例如下
[0014] A組：
[0015]
[0019] 將A組混合，加熱到72度。將去離子水加熱到72度。將A組加入去離子水中，混 合均勻，攪拌降溫。
[0020] 當溫度下降到40度以下時，加入B組，混合均勻即可。
[0021] 本發(fā)明的一個發(fā)明點就是和以往的現(xiàn)有技術(shù)不同，將脂溶性物質(zhì)與表面活性劑單 獨處理后，再和其他有效組份混合的方法，這樣對于最終產(chǎn)品的性狀的提高很大，不容易析 出水，屬于本發(fā)明的獨創(chuàng)性創(chuàng)造性發(fā)明點。
[0022] 其中，所述的干細胞提取物優(yōu)選為羊臍帶血干細胞提取物；
[0023] 優(yōu)選地，本發(fā)明的發(fā)明人還驚奇地發(fā)現(xiàn)了在本發(fā)明產(chǎn)品中加入玻璃酸二甲基硅烷 醇酯復(fù)合物，會使得產(chǎn)品的最終效果非常好，其中：
[0024] 玻璃酸二甲基硅烷醇酯復(fù)合物的獲得方法如下：二甲基硅烷一醇或二甲基硅烷二 醇與玻璃酸以酯鍵結(jié)合的化合物，其獲得可以采用已公開的制備方法，如將玻璃酸溶液和 硅烷醇鈉溶液混合反應(yīng)后用陽離子交換樹脂調(diào)整pH獲得復(fù)合物水溶液（FR2961915)，有機 硅化合物與玻璃酸在水和乙醇溶液中反應(yīng)結(jié)合后蒸除溶劑（在歐洲專利EP0867445中有所 公開），按比例將硅烷醇水溶液和玻璃酸水溶液混合（在歐洲專EP0289366中有所公開）， 也可以采用氯硅烷與混懸在有機溶液中的玻璃酸反應(yīng)后經(jīng)沉淀獲得固體復(fù)合物（在中國 專利CN103450368B中有所公開）。
[0025] 上述組合物中優(yōu)選加入：玻璃酸二甲基硅烷醇酯復(fù)合物重量份2-5% ;優(yōu)選3% ;
[0026] 甘油、（可優(yōu)選地，加入：玻璃酸二甲基硅烷醇酯復(fù)合物）海藻糖、維生素A醋酸 酯、維生素E醋酸酯、4'，6, 7-三羥基異黃酮、透明質(zhì)酸鈉、黃原膠、三乙醇胺、肉豆蔻酸異丙 酯、丙二醇、透明質(zhì)酸鈉、防腐劑和去離子水混合加熱至75_80°C，均質(zhì)乳化；
[0027] 降溫至室溫后，加入乳酸、氧化鈦、干細胞提取物，攪拌均勻后真空脫氣。
[0028]優(yōu)選地，包括以下原料按照重量份比例混合，干細胞提取物30 %，玻璃酸二甲基 硅烷醇酯復(fù)合物3 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，維生素A醋酸酯0. 3 %，維生素E 醋酸酯〇. 2%，4'，6, 7-三羥基異黃酮0. 2%，二氧化鈦0. 6%，黃原膠0. 015%，三乙醇胺 0. 025%，肉豆蔻酸異丙酯3 %，丙二醇1 %，透明質(zhì)酸鈉0. 05%，防腐劑1 %，其余為去離子 水。
[0029] 其中，玻璃酸二甲基硅烷醇酯復(fù)合物的優(yōu)選重量比例為3% ;
[0030] 本發(fā)明的干細胞提取物優(yōu)選為植物干細胞提取物；
[0031] 植物干細胞（Plantstemcell)包含有關(guān)于植物發(fā)育和生長的所有程式，擁有永 恒生命力的細胞（immortalcell)，是植物生命力的根源（origin)。植物干細胞存在于被 稱為分生組織的特殊構(gòu)造內(nèi)，具有非常驚人的再生能力。這些使得植物可以在數(shù)百年間不 斷生長，并生成全新的器官?！蹲匀弧?15,715-754(2002)本發(fā)明采用的是商購獲得的蘋果 干細胞、番茄干細胞和葡萄干細胞，但是為了更切合本發(fā)明的發(fā)明目的，發(fā)明人經(jīng)過多次試 驗，將蘋果干細胞進行了處理和調(diào)整，使得本發(fā)明的效果更好，具體的方法如下：
[0032] 按照重量比例I:I: 1 : 2將蘋果干細胞、番茄干細胞，葡萄干細胞和維生素C 混合；
[0033] 常規(guī)方法體外培養(yǎng)并收集培養(yǎng)物；
[0034] 收集上清液中分子量相遇5000Da的成份，進行冷凍干燥，其中，冷凍干燥的方法 如下：〇攝氏度5-10分鐘，-10攝氏度10-20分鐘，-20攝氏度2-3小時，然后-35攝氏度保 存超過5小時，進行冷凍干燥，這是本發(fā)明的一個發(fā)明點經(jīng)過了這個方法，可以最大限度保 持細胞活性物質(zhì)，對最終產(chǎn)品的效果具有非常好的促進作用。
[0035] 干細胞提取物再優(yōu)選為羊臍帶血干細胞提取物。
[0036] 本發(fā)明的取得羊臍帶血干細胞提取物的方法如下：
[0037] (1)臍帶及胎盤的采集。選足月母羊，病毒檢測，在無菌條件下取得羊臍帶血和胎 盤，〇攝氏度條件下運至GMP車間，放入液氮罐內(nèi)進行保存。（2)收集足量的胎盤和羊臍帶 血后，準備生產(chǎn)和加工。
[0038] 其中，所述的干細胞提取物制備方法為：采集羊的臍帶血加入抗凝劑，保持在4°C 的溫度，用生理鹽水稀釋，羊臍帶血和生理鹽水體積比為1-1.2 : 1;
[0039] 將稀釋后的羊臍帶血加入到胎盤活性抽提液中，稀釋的羊臍帶血與胎盤活性抽提 液的體積比為〇. 8-1. 2 : 1，再加入質(zhì)量比為3% -6%明膠溶液，明膠溶液與胎盤活性抽提 液的體積比為〇. 3-0. 5 : 1.進行梯度離心分離，獲取液相交界面細胞懸液；
[0040] 所述的胎盤活性抽提液的制備方法如下：取收集好的備用羊胎盤，洗凈并去除筋 膜，剪碎后稱重，進行組織研磨，加入羊胎盤重量1~2倍的生理鹽水，進行高速組織勻漿， 勻漿后的胎盤為均勻的肉糜狀，然后將羊胎盤勻漿在-30°C~-40°C下冷凍48小時后于 25°C下溶化，如此反復(fù)凍溶2~3次。再經(jīng)5000~70000r/min冷凍離心25~30分鐘，取 上清液靜止透析24~48小時或真空透析10~12小時即可得到胎盤活性抽提液。本發(fā)明 的胎盤活性抽提液的制備方法是本發(fā)明的其中一個發(fā)明點，因為現(xiàn)有技術(shù)中的一次性冷凍 并融化是無法盡量多的得到胎盤活性物質(zhì)的，經(jīng)過發(fā)明人多次試驗，發(fā)現(xiàn)進行2-3此的凍 融，可以明顯增加最終產(chǎn)品的使用效果。
[0041]細胞懸液用磷酸鹽緩沖液進行洗滌兩次得到干細胞；
[0042]洗滌后的干細胞放入1640培養(yǎng)基（商購自青島海博生物技術(shù)有限公司）中測定 活性，活性大于95 %即合格；
[0043]合格的干細胞使用流體剪切力對干細胞進行剪切成超小分子活性物質(zhì)或采用超 聲波破碎法，利用超聲波振蕩器發(fā)射9~10千周聲波處理3-9分鐘。
[0044] 本發(fā)明的其中一個發(fā)明點就在于對于羊臍帶血干細胞的提取工藝，這個工藝是發(fā) 明人多年的經(jīng)驗加上多次試驗的結(jié)果，使得最終活性物質(zhì)的含量非常高，而且安全有效。
[0045] 本發(fā)明的另外一個發(fā)明點還在于，配置了一種天然植物混合液，在均質(zhì)乳化之前， 將其按照重量份3-7%的比例加入后，一起與其他原材料進行均質(zhì)和乳化，其中，所述的天 然植物混合液的制備方法為：將生姜、薄荷、老鸛草（HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量 份I:I: