一種昆明杯冠藤總皂苷的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥領域，具體涉及一種昆明杯冠藤總皂苷的制備方法。
【背景技術】
[0002]昆明杯冠藤(CynanchumwalIichiiWight.)又名斷節(jié)參，是蘿摩科鶴絨藤屬植物。產于我國四川、貴州、云南以及廣西等地，并分布于印度。民間用其治療風濕關節(jié)炎及跌打損傷，云南成藥“虎力散”用其為主藥。
[0003]留體皂苷類成分為昆明杯冠藤主要的組成成分之一，現(xiàn)有研宄雖然可以從昆明杯冠藤根中分離得到一些C21留體類化合物，卻未見報道提供一種有效提取并分離出該甾體皂苷有效部位的方法，也未見昆明杯冠藤C21留體類化合物單體或有效部位的藥理活性相關研宄報道。
[0004]比如，陳剛等在《中國藥物化學雜志》上發(fā)表的論文“昆明杯冠藤中C-21甾類成分的研宄”中通過水提、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析分離、S^hadex LH-20柱色譜精制、制備HPLC再分離等一系列步驟分離得到了數(shù)個C21留體類單體物質。其方法雖然可以分離得到目標物質成分，但是其所要求的設備和材料昂貴、處理量很小，氯仿和甲醇等有機溶劑用量大且不能回收利用，還會對人體造成一定的危害，故該方法僅適合于實驗室研宄，不能夠應用于工業(yè)化大生產當中。

【發(fā)明內容】

[0005]發(fā)明目的:本發(fā)明的第一個目的是提供一種昆明杯冠藤總皂苷的制備方法。
[0006]技術方案:為了解決上述技術問題，本發(fā)明的技術方案是:一種昆明杯冠藤總皂苷的制備方法，包括以下步驟:
1)、昆明杯冠藤藥材粉碎后，用溶劑連續(xù)回流提取，合并提取液并濃縮成浸膏狀，加水熱溶，經過等體積石油醚萃取兩次，合并水層得到水溶液；
2)、步驟I)中得到的水溶液直接上聚酰胺柱，用合適的溶劑體系進行洗脫；
3)、步驟2)中聚酰胺洗脫后的流出液直接上大孔樹脂柱，依次用純化水、20%乙醇和95%乙醇進行洗脫，回收95%乙醇部分，濃縮至浸膏后用適當溶劑溶出；
4)、步驟3)中的溶出液稀釋到合適濃度后直接上硅膠柱，依次用不同的洗脫溶劑洗脫，薄層監(jiān)測后，合并含昆明杯冠藤皂苷部分的流出液，濃縮至干，即得昆明杯冠藤總皂苷。
[0007]其中，步驟I)中的溶劑是純化水、乙醇、甲醇中的一種或其中任意幾種的任意比例的混合溶媒，每次溶劑量為昆明杯冠藤藥材重量的3?15倍量，優(yōu)選為6倍量，提取溫度為30?80°C，優(yōu)選為60 °C。
[0008]其中，步驟I)中的溶劑是乙醇，提取次數(shù)為廣3次，優(yōu)選為2次；提取時間為廣4小時，優(yōu)選為2小時。
[0009]其中，步驟I)中加水溶解所需的量為浸膏重量的21倍量。
[0010]其中，步驟2)中所述的聚酰胺粒度為10-300目。步驟2)中的合適的溶劑是純化水或乙醇，步驟2)中溶劑的體積為聚酰胺柱體積的21倍。
[0011]其中，步驟3)中所述的大孔樹脂型號為H-60、D-101B、DM-130、XAD-16、LS-300和LS-46中的一種。
[0012]其中，步驟3)中所述的浸膏溶出溶劑可以為乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或其中任意幾種的任意比例的混合溶媒
其中，步驟4)中所述的硅膠粒度為60-400目。
[0013]其中，步驟4)中所述的樣品溶液稀釋至重量為原藥材重量的l/4(Tl/10。
[0014]其中，步驟4)中所述的洗脫體系依次分別為乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或其中任意幾種的任意比例的混合溶媒。
[0015]有益效果:相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
①本發(fā)明提供了一種全新的昆明杯冠藤總皂苷的提取分離方法。
[0016]②本發(fā)明所述的制備方法，充分應用了大孔樹脂和聚酰胺技術的優(yōu)勢，設備和材料成本低，工藝流程清晰，處理量大，操作簡便，產品色度好、得率和含量高，適合于工業(yè)化大生產。
[0017]③本發(fā)明所制備的昆明杯冠藤皂苷，可以加入藥學上可以接受的載體制成片劑、膠囊劑或注射液，用于醫(yī)藥和保健領域，使得中藥昆明杯冠藤得到更加高效及廣泛地應用。
[0018]【具體實施方式】:
實施例1:
昆明杯冠藤藥材2 kg經粉碎后，用藥材重量6倍量的95%乙醇連續(xù)回流提取兩次，提取溫度65°C，提取2小時，合并提取液并濃縮至浸膏狀，加入浸膏重量4倍量的水熱溶，經過等體積石油醚萃取兩次，合并水層得到水溶液。水溶液直接經過聚酰胺柱，聚酰胺粒度為100目，用4倍柱體積的純化水繼續(xù)洗脫。流出液直接上LS-46型號大孔樹脂柱，依次用純化水、20%乙醇和95%乙醇進行洗脫，回收95%乙醇部分，濃縮至浸膏后用乙酸乙酯溶出。溶出液稀釋到0.2kg溶液后直接上硅膠柱，硅膠粒度為100目，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯:乙醇(V:V=10:1)、乙酸乙酯:乙醇(V:V=4:1)的洗脫體系洗脫，薄層監(jiān)測后，合并含昆明杯冠藤皂苷部分的流出液，濃縮至干，即得昆明杯冠藤皂苷26.3 g，經檢測總皂苷質量含量達到 92.Tl。
[0019]實施例2
昆明杯冠藤藥材2 kg經粉碎后，用藥材重量3倍量的95%乙醇連續(xù)回流提取兩次，提取溫度50°C，提取2小時，合并提取液并濃縮至浸膏狀，加入浸膏重量8倍量的水熱溶，經過等體積石油醚萃取兩次，合并水層。水溶液直接經過聚酰胺柱，聚酰胺粒度為200目，用6倍柱體積的20%乙醇繼續(xù)洗脫。流出液濃縮至無醇味后直接上LS-300型號大孔樹脂柱，依次用純化水、20%乙醇和95%乙醇進行洗脫，回收95%乙醇部分，濃縮至浸膏后用乙酸乙酯溶出。溶出液稀釋到0.2kg溶液后直接上硅膠柱，硅膠粒度為200目，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯:丙酮(V:V=12:1)、乙酸乙酯:丙酮(V:V=5:1)的洗脫體系洗脫，薄層監(jiān)測后，合并含昆明杯冠藤皂苷部分的流出液，濃縮至干，即得昆明杯冠藤皂苷29.7g，經檢測總皂苷質量含量達到86.3%。
[0020]實施例3:
昆明杯冠藤藥材2 kg經粉碎后，用藥材重量8倍量的甲醇連續(xù)回流提取兩次，提取溫度60°C，提取4小時，合