一種黃精中多種活性成分提取分離的方法
【專利說(shuō)明】一種黃精中多種活性成分提取分離的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于黃精的提取方法,特別屬于提取黃精總皂苷、黃精總黃酮和黃精多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]黃精是百合科黃精屬(PolygonatumMi 11.)宿根性草本植物,別名黃雞萊、狗姜等。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外對(duì)黃精屬植物的研宄不斷深入,已從該屬植物中分離得到多糖、皂苷、黃酮等多種活性成分。已有研宄表明黃精多糖具有增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗輻射、增強(qiáng)記憶力、抗疲勞等作用;黃精皂苷的生物活性研宄多集中在降血糖、抗腫瘤、抗HIV等方面;而黃精黃酮也具有較廣泛的生物活性,包括消除疲勞、保護(hù)血管、防止動(dòng)脈粥樣硬化、降血糖、降血脂、擴(kuò)張毛細(xì)血管、抗衰老、抗菌及活化大腦等功能。因此提取分離黃精中的多糖、留體皂苷和黃酮等活性成分具有重要的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
[0004]黃精多糖的獲得主要包括脫脂?醇析?脫蛋白?透析?干燥等環(huán)節(jié),在提取工藝上,目前主要有水提法、弱酸提取法、弱堿提取法、酶提法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法及超臨界流體萃取法等。上述黃精多糖提取過(guò)程存在時(shí)間長(zhǎng)、成本高、過(guò)程復(fù)雜、多糖純度低等方面的不足。中國(guó)專利CN 103788224公開(kāi)的一種從中藥黃精中提取黃精多糖的方法采用微波輔助抽提?濃縮?超聲振蕩?去蛋白?過(guò)柱的工藝路線,經(jīng)過(guò)反復(fù)分離純化獲得黃精多糖,此工藝存在過(guò)程復(fù)雜、工藝時(shí)間較長(zhǎng)、有機(jī)溶劑耗量大等方面的缺點(diǎn)。
[0005]黃精總皂苷的獲得主要包括提取?分離?純化等環(huán)節(jié),在提取工藝上,目前主要有加熱回流法、索氏提取法、超聲波法、微波法等。CN 101837091專利公開(kāi)的?種連續(xù)提取黃精皂甙和黃精多糖的工藝采用浸泡提取?萃取?上柱的工藝路線,按文獻(xiàn)所說(shuō)黃精皂苷收率為黃精總重的3.9%,為黃精總皂苷的90.7%,純度為95.3%,但是本工藝中所用有機(jī)溶媒用量大、工藝時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。
[0006]黃精黃酮的獲得主要包括提取?分離?純化等3個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié),在提取工藝上,目前主要有浸提法、索式法、微波法、回流法等。王文君等公開(kāi)發(fā)表了黃精黃酮提取方法,其采用脫脂?超聲輔助提取?脫色?干燥工藝路線,工藝過(guò)程復(fù)雜,所需有機(jī)溶劑量大,時(shí)間長(zhǎng),同時(shí)提取率偏低。
[0007]近年來(lái),閃式提取技術(shù)逐漸被用于中藥材活性成分的提取,可大大減少提取時(shí)間,提高其中活性成分的得率。因?yàn)殚W式提取器在工作時(shí),內(nèi)刃高速轉(zhuǎn)動(dòng)并與外刃發(fā)生切割作用過(guò)程中,會(huì)在內(nèi)刃中心形成強(qiáng)力渦流,并帶動(dòng)已粉碎的物料內(nèi)外翻動(dòng),從而產(chǎn)生劇烈攪拌作用,物料中被提取的物質(zhì)分子隨著破碎顆粒的變小而暴露于溶劑環(huán)境中并迅速轉(zhuǎn)移至溶劑中,提取溶劑與物料顆粒間化學(xué)成分的分布隨破碎的進(jìn)行在平衡與不平衡之間快速交替進(jìn)行,最終達(dá)到徹底粉碎,完全平衡的提取,進(jìn)而溢出有效含量。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]本發(fā)明所解決的問(wèn)題是提供一種以黃精生藥為原料,提取工藝簡(jiǎn)單、時(shí)間短,又能得到高純度黃精多糖、黃精皂苷、黃精黃酮的提取方法。
[0009]本發(fā)明解決問(wèn)題的技術(shù)方案依次包括提取黃精總皂苷的方法、提取黃精總黃酮的方法、提取黃精多糖的方法。
[0010]一種黃精中多種活性成分提取分離的方法,包括如下步驟:
(1)黃精皂苷的提取分離
將生黃精藥材粉末與乙醇混合,用閃式提取技術(shù)提取,抽濾,得到黃精總皂苷提取液和黃精藥渣;將黃精總皂苷提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收,得黃精總皂苷粗產(chǎn)品;將黃精總皂苷粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋,加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,先用蒸餾水進(jìn)行洗脫,洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止,再用乙醇進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)皂苷視為洗脫完全,揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重,得到黃精皂苷成品;
(2)黃精黃酮的提取分離
將生黃精藥材粉末與乙醇?鹽酸溶液混合,用閃式提取技術(shù)提取,抽濾,得到黃精黃酮提取液和黃精藥渣;將黃精黃酮提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將乙醇進(jìn)行回收,得黃精黃酮粗產(chǎn)品;將黃精黃酮粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋,加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,先用蒸餾水進(jìn)行洗脫,洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止,再用乙醇進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)黃酮視為洗脫完全,揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重,得到黃精黃酮成品;
(3)黃精多糖的提取分離
合并上述(1)、(2)中黃精藥渣,并添加蒸餾水混合,用閃式提取技術(shù)提取,抽濾,得到多糖提取液;將多糖提取液加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,并用蒸餾水進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)多糖視為洗脫完全;將洗脫液經(jīng)噴霧干燥得到黃精多糖。
[0011]上述黃精中多種活性成分提取分離的方法,優(yōu)選的步驟和條件如下:
(1)黃精皂苷的提取分離
a.將黃精粉末與50%?80%的乙醇混合(體積百分比),用閃式提取器提取0.5?1.5min,抽濾,得到黃精提取液和黃精藥渣;所述黃精粉末與所述乙醇的比為1:10?20(克/升);
b.將黃精提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收,得乙醇提取物;將乙醇提取物用石油醚萃取脫脂;將脫脂后的提取物用水飽和正丁醇進(jìn)行多次萃取,合并正丁醇提取液,回收正丁醇后得黃精總皂苷粗產(chǎn)品;
c.將黃精粗總皂苷用蒸餾水溶解至濃度為0.8?lmg/ml,加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,先用蒸餾水進(jìn)行洗脫,洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止,再用體積濃度為70%?80%的乙醇(體積百分比),進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)皂苷視為洗脫完全,揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重,得到黃精皂苷成品;
(2)提取分離黃精黃酮
a.將黃精粉末與80%?90%的乙醇(體積百分比)混合,用閃式提取器提取0.5?
1.5min,抽濾,得到黃精提取液和黃精藥渣;
b.將黃精提取液中的乙醇溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收,得乙醇溶液提取物;將乙醇溶液提取物用石油醚萃取脫脂;將脫脂后的提取物用水飽和正丁醇進(jìn)行多次萃取,合并正丁醇提取液,回收正丁醇后得黃精總黃酮粗產(chǎn)品;
C.將黃精粗總黃酮產(chǎn)品用蒸餾水稀釋至濃度為0.8?lmg/ml加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,先用蒸餾水進(jìn)行洗脫,洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止,再用體積濃度為80%?90%的乙醇(體積百分比),進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)皂苷視為洗脫完全,揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重,得到黃精黃酮成品成品;
(3)提取分離黃精多糖
a.合并上述黃精藥渣,并蒸餾水混合,用閃式提取器提取0.5?1.5min,抽濾得多糖提取液;所述黃精藥渣為步驟(I) a和步驟(2) a所得;所述黃精藥渣與蒸餾水質(zhì)量比1:10?12(w/w);
b.將多糖提取液加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,并用蒸餾水進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)多糖視為洗脫完全;將洗脫液經(jīng)噴霧干燥得到黃精多糖。
[0012]與現(xiàn)有的技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果表現(xiàn)在:
1.本發(fā)明應(yīng)用閃提技術(shù)提取黃精中多種活性成分,使提取時(shí)間縮短至0.5?1.5min,且全過(guò)程均在常溫下下進(jìn)行,有效避免了黃精中總皂苷、總黃酮及多糖活性在高溫下受到的破壞;
2、本發(fā)明方法實(shí)現(xiàn)了黃精中多種活性成分快速高效的提取,其中,黃精總皂苷收率為黃精總重量的4.95%,純度為89.49% ;黃精黃酮的收率為黃精重量的1.97%,純度為82.81% ;黃精多糖的收率為黃精重量的28.37%,純度為88.76% ;不僅充分利用了黃精資源,提高了原材料的使用價(jià)值,而且本技術(shù)在提取總皂苷和總黃酮的同時(shí),并不影響多糖的提取,回收率高,低污染(所有有機(jī)溶劑均可重新回收)、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。
[0013]3、本發(fā)明方法所使用的有機(jī)溶劑毒性較小,易于回收;且本方法具有工序少、設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、可行性好、生產(chǎn)成本低廉等特點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)發(fā)明作詳細(xì)的說(shuō)明。下述乙醇的百分比為體積百分比。
[0015](一)黃精皂苷的提取分離:
實(shí)施例1:
精密稱取4克生黃精藥材粉末與40ml50%的乙醇混合,用閃式提取技術(shù)提取0.5min,抽濾,得到黃精總皂苷提取液和黃精藥渣;將黃精總皂苷提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收,得黃精總皂苷粗產(chǎn)品;將黃精總皂苷粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋至濃度0.8mg/ml,加至準(zhǔn)備好的大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附,先用蒸餾水進(jìn)行洗脫,洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止,再用體積濃度為70%的乙醇,進(jìn)行洗脫,直至洗脫液無(wú)皂苷視為洗脫完全,揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重,得到黃精皂苷成品;所得黃精皂苷的收率為6.85%,純度為81.21%。
[0016]實(shí)施例2:
精密稱取4克生