用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法及其活性成份應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物提取，具體涉及用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法及其活性成份應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]樹參{Dendropanaxden tiger (Harms) Merr)為五加科{AraliaceaS)樹參屬(Dendropanax)植物，常綠闊葉林或灌叢，分布于我國長江以南各省區(qū)，在海拔幾十米至1800米都能生長，原料易得，資源豐富，有著悠久的民間藥用歷史。《中華本草》記載:樹參具有舒筋活絡(luò)，壯筋骨、祛風(fēng)除濕、活血等功效，常用于風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、臂叢神經(jīng)炎、癱瘓、偏頭痛、扭傷、癰癤、月經(jīng)不調(diào)、麻痹后遺癥等疾病的治療。但目前國內(nèi)外學(xué)者還未有對(duì)樹參葉提取物及其活性成份的藥理活性研宄的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法及其活性成份應(yīng)用，提取方法簡單，提取效率較高，提取的活性成份具有提高兔的免疫力。
[0004]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法，其步驟如下:
a、將樹參當(dāng)年生的鮮樹參葉風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到樹參葉粉末；
b、將樹參葉粉末裝入反應(yīng)釜中加入蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180min，過濾得濾液，濾渣中再加入蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180 min，過濾得濾液，合并濾液得到樹參葉提取液，其中樹參葉粉末與蒸餾水的質(zhì)量體積比為I Kg:12?15 L，濾渣與蒸餾水的質(zhì)量體積比為I Kg:10 L ；
c、將樹參葉提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮至樹參葉提取液初始體積的1/10，得到濃縮液，在濃縮液中加入與濃縮液等體積的石油醚，萃取30?45 min,過濾，石油醚萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的乙酸乙酯，萃取30?45 min，過濾，乙酸乙酯萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的正丁醇，萃取30?45 min，過濾，正丁醇萃取的濾液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105°C下干燥24h，得到黃色的樹參葉活性成份。該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為630mgo
[0005]該樹參葉活性成份在提高兔免疫能力的應(yīng)用。
[0006]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法及其活性成份應(yīng)用，用蒸餾水為溶劑，在反應(yīng)釜中攪拌提取，再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，得到黃色的樹參葉活性成份，該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，每公斤樹參葉粉末可以提取樹參葉活性成份24g左右，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為630mg，本發(fā)明的提取方法簡單，提取效率較高，提取的活性成份具有提高兔的免疫力。
【具體實(shí)施方式】
[0007]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0008]實(shí)施例1
將樹參當(dāng)年生的鮮樹參葉，風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到樹參葉粉末；將1如樹參葉粉末裝入反應(yīng)釜中加入12?15 L蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180 min，過濾得濾液，濾渣中再加入10 L蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180 min，過濾得濾液，合并濾液得到樹參葉提取液約22?25 L ;將樹參葉提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮至樹參葉提取液初始體積的1/10，得到濃縮液，約2.2?2.5 L，濃縮液中加入與濃縮液等體積的石油醚，約2.2?2.5 L，萃取30?45 min,過濾，石油醚萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的乙酸乙酯，約2.2?2.5 L，萃取30?45 min，過濾，乙酸乙酯萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的正丁醇，約2.2?2.5 L，萃取30?45 min,過濾，正丁醇萃取的濾液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105°C下干燥24h，得到黃色的樹參葉活性成份22-25g;石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三級(jí)極性梯度萃取，且正丁醇萃取的主要成分為皂甙。因此該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，用香草醛-冰乙酸-高氯酸顯色法測定，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為630mg，該提取物中皂甙主要成分為:β -胡蘿卜苷、芥子醛葡萄糖苷、丁香苷、杜仲樹脂醇雙吡喃葡萄糖苷、丁香樹脂醇雙吡喃葡萄糖苷和丁香酚-蕓香糖苷。
[0009]實(shí)施例2
2月齡試驗(yàn)兔分2組，每組50只兔子，分別為試驗(yàn)組和空白組，將實(shí)施例1的樹參葉活性成份用水配制成質(zhì)量百分濃度0.1% 口服液，試驗(yàn)組用口服液喂養(yǎng)15日，每天一次，每次10mL，空白組用等量的清水喂養(yǎng)，喂養(yǎng)結(jié)束，隔一天取兔血清測定血清總蛋白、抗體水平、白蛋白、球蛋白和血清免疫球蛋白IgG、IgM濃度水平，試驗(yàn)組血清總蛋白65.79 g/Ι、抗體水平 175.36 pg/ml、白蛋白 33.56 g/Ι、球蛋白 32.54 g/1、IgG4.228 g/1、IgM0.2437g/l，空白組血清總蛋白62.18 g/Ι、抗體水平169.32 pg/ml、白蛋白38.56 g/Ι、球蛋白28.54 g/l、IgG3.122 g/1 ,IgM0.235g/l，其中血清總蛋白、抗體水平、球蛋白、IgG濃度水平極顯著高于對(duì)照，IgM濃度水平高于對(duì)照，白蛋白濃度水平顯著低于對(duì)照。
[0010]實(shí)施例3
與實(shí)施例2基本相同，所不同的只有試驗(yàn)組50只兔子，試驗(yàn)組喂養(yǎng)的是0.5% 口服液，試驗(yàn)組血清總蛋白67.13 g/Ι、抗體水平177.18 pg/ml、白蛋白34.12 g/Ι、球蛋白34.19 g/l、IgG4.435 g/1、IgM0.2418g/l。
[0011]實(shí)施例4
與實(shí)施例2基本相同，所不同的只有試驗(yàn)組20只兔子，試驗(yàn)組喂養(yǎng)的是1.0% 口服液，試驗(yàn)組血清總蛋白66.39 g/Ι、抗體水平173.39 pg/ml、白蛋白34.27 8/1、球蛋白33.06 g/l、IgG4.392 g/1、IgM0.392g/lo
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法，其特征在于步驟如下: a、將樹參當(dāng)年生的鮮樹參葉風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到樹參葉粉末； b、將樹參葉粉末裝入反應(yīng)釜中，加入蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180min,過濾得濾液，濾渣中再加入蒸餾水，100°C下機(jī)械攪拌提取150?180 min,過濾得濾液，合并濾液得到樹參葉提取液，其中樹參葉粉末與蒸餾水的質(zhì)量體積比為I Kg:12?15 L，濾渣與蒸餾水的質(zhì)量體積比為I Kg:10 L； c、將樹參葉提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮至樹參葉提取液初始體積的1/10，得到濃縮液，在濃縮液中加入與濃縮液等體積的石油醚，萃取30?45 min,過濾，石油醚萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的乙酸乙酯，萃取30?45 min，過濾，乙酸乙酯萃取的濾液中加入與濃縮液等體積的正丁醇，萃取30?45 min，過濾，正丁醇萃取的濾液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105°C下干燥24h，得到黃色的樹參葉活性成份。2.權(quán)利要求1所述的樹參葉活性成份在提高兔免疫能力的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了用反應(yīng)釜提取樹參葉活性成份的方法及其活性成份應(yīng)用，用蒸餾水為溶劑，在反應(yīng)釜中攪拌提取，再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，得到黃色的樹參葉活性成份，該樹參葉活性成份的主要成份為皂苷，每公斤樹參葉粉末可以提取樹參葉活性成份24g左右，每克樹參葉活性成份中皂苷含量約為630mg，本發(fā)明的提取方法簡單，提取效率較高，提取的活性成份具有提高兔的免疫力。
【IPC分類】A61P37/04, A61K36/25
【公開號(hào)】CN104887730
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510252750
【發(fā)明人】王強(qiáng)
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院
【公開日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2015年5月19日