制備SOD和血紅素、上清為鹿血血漿蛋 白用于制備活性肽;(I)SOD和血紅素的制備①沉淀的血細(xì)胞中加入鹿血等體積的去離子 水靜置過夜,再加入〇. 5~2倍去離子水體積的體積比為I :2-4的乙醇/氯仿混合液攪拌 10~50分鐘后,靜置并以1000~10000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心10分鐘,上清在50~80 °C 加熱10~50分鐘后離心10分鐘,上清即為SOD粗品,沉淀為血紅素粗品;②SOD粗品加入 2倍鹿血體積的丙酮并攪拌后靜置5-10分鐘,過濾,沉淀加入丙酮等體積的蒸餾水溶解后, 于2000~10000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心10~50分鐘,上清冷凍干燥后用0. 05~1M、pH = 6~9的磷酸緩沖液溶解,上S印hadexG-75凝膠柱純化,得到精制的鹿血SOD組分;③血紅 素粗品加入與沉淀血細(xì)胞等體積的NaHS03溶液,NaHS03溶液的終質(zhì)量濃度為0. 1~1%, 攪拌均勻后加入1~5倍NaHS03溶液體積的丙酮,用0.1 -IM鹽酸調(diào)pH至1~4,過濾,濾液 中加入質(zhì)量濃度5-50%氨水調(diào)pH至4. 5~8,沉淀水洗后冷凍干燥為精制鹿血血紅素;(2) 活性肽的制備將鹿血上清經(jīng)化學(xué)或熱變性、冷凍干燥后,用PH2~9的磷酸緩沖液溶解配成 重量濃度1~50%的溶液加入蛋白水解酶,干燥的血漿蛋白與酶的重量比為10~500 :1, 在20~80°C溫度下酶解0. 5~24小時(shí),再冷凍干燥得到粉末狀鹿血活性肽;活性肽檢測 具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制活性和免疫增強(qiáng)活性。據(jù)信該發(fā)明將幾種活性組分提取和制備 工藝集成,保留并提高了鹿血所有已知和未知的活性組分,與傳統(tǒng)鹿血全血直接食用相比, 功能明確的鹿血活性組分更具有應(yīng)用前景。
[0016] CN1994319A(200510136797. 9,九九鹿業(yè),鹿血粉膠囊及其制備方法)公開了一種 保健食品及其制備方法,具體地說是一種鹿血粉膠囊及其制備方法。本發(fā)明產(chǎn)品是將400 目以上細(xì)度的凍干超微細(xì)鹿血粉置于膠囊內(nèi);膠囊內(nèi)超微細(xì)粉的含水量<3%。所述產(chǎn)品 鹿血粉膠囊的制備方法為:A.檢疫的鹿血裝入托盤,速凍至-26°C~_28°C;B.托盤中鹿血 在經(jīng)冷凍干燥機(jī)凍干25-28小時(shí)取出;C.超微細(xì)粉至400目以上;D.殺菌處理裝膠囊。據(jù) 信該發(fā)明的所給出的鹿血粉膠囊,因其制備過程中,營養(yǎng)成分不被破壞,不會(huì)產(chǎn)生營養(yǎng)成分 流失,可使人的充分吸收利用鹿血內(nèi)有效成分,其營養(yǎng)價(jià)值高,保健效果好,保質(zhì)期長。且便 于攜帶,食用方便,屬純天然綠色保健食品。
[0017] CN1346636A(01141090. 6,羅才良,活性鹿血粉膠囊)公開了一種活性鹿血粉膠 囊的生產(chǎn)工藝,其特征在于:生產(chǎn)工藝是將剛采集的鹿血置于托盤內(nèi),放在冷藏箱中冷藏 3~10個(gè)小時(shí),溫度為2-5°C ;然后置于冷凍干燥機(jī)的干燥箱內(nèi)的擱板上,擱板上鋪血量 為8~10kg/l. 00平方米,開通制冷設(shè)備,通過擱板中的冷凍管將干燥箱內(nèi)的溫度調(diào)節(jié) 為-45~-38°C,使鹿血凍結(jié)2~5個(gè)小時(shí);開通機(jī)械真空泵,使干燥箱內(nèi)壓力調(diào)為13~ 14Pa,開通羅茨真空泵,壓力降至1. 25~I. 33Pa,此時(shí)凍結(jié)了的鹿血中的冰即升華變?yōu)樗?蒸氣;開通冷凝器,溫度調(diào)為-60~_55°C,水蒸氣即在冷凝器上結(jié)為霜。開啟加熱系統(tǒng),將 擱板溫度從-40~38°C緩慢加熱至9~KTC,此過程12~14小時(shí);緩慢將擱板溫度加熱 至28~30°C,此過程8~10小時(shí),冷凝器捕水量占總量的85~90%。
[0018] CN102269697A(201110115185. 7,民族學(xué)院,鹿血粉鑒定)公開了一種鹿血粉的鑒 定方法,其特征在于真品與贗品的鑒定方法;具體步驟為:(1)取已知真品鹿血粉和樣品粉 分別用KBr壓片、測其紅外光譜圖,對兩紅外光譜圖進(jìn)行峰位、峰強(qiáng)度、峰形和波數(shù)的對比 分析;不同則為贗品,相似或相同則進(jìn)行下步驟分析;(2)取已知真品鹿血粉和樣品粉分別 用正己烷、石油醚、甲醇、乙醇、乙醇與水混合物進(jìn)行溶劑提取,其提取物分別測定其紅外光 譜圖,分別用同一種溶劑提取物的真品與樣品的紅外光譜圖進(jìn)行峰位、峰強(qiáng)度、峰形和波數(shù) 的對比分析;5種溶劑提取物中有3種及3種以上紅外光譜圖對比分析中不相同則為贗品; 其中:所述石油醚為60~90°C餾分,溶劑乙醇與水混合物中乙醇與水的體積比為1 :1 ;所 述溶劑提取為:每克干血粉加溶劑定容至10mL,超聲波常溫下提取20min,離心分離過濾, 溶液相蒸干溶劑,分別得到相應(yīng)溶劑的提取物;所述紅外光譜圖用傅里葉變換紅外光譜儀 測得,測量波數(shù)范圍4000-400(3!^1,對比分析中,波數(shù)波動(dòng)范圍為iScnr1。據(jù)信該發(fā)明無需 對原藥成分進(jìn)行逐一分離,可快速、簡便、不失原藥材本性地直接判斷鹿血粉的真?zhèn)巍?br>[0019] 由于鹿血作為中藥材需要經(jīng)歷長期貯藏過程,因此其中的水應(yīng)該絕大部分地除 去,除水后既有利于鹿血長期貯藏,而且利于服用。為此,制備干燥的鹿血產(chǎn)品在臨床上是 有極大需求的。本領(lǐng)域通常將新鮮鹿血干燥后得到的塊狀物稱為鹿血,而將該干燥的鹿血 粉碎形成細(xì)微的顆粒稱之為鹿血晶,亦有人稱之為鹿血粉。干燥的鹿血在水中的溶解速度 是相對來講是比較慢的,通常溶解速度在人們服用時(shí)是難以接受的。鹿血晶服用比之于干 燥的鹿血是極其有利的,一個(gè)重要的特點(diǎn)是鹿血晶具有比之于鹿血更快的溶解速度。但是 現(xiàn)有的一些鹿血晶制備方法仍然難以令人滿意,例如,將干燥的鹿血粉碎之后,在未添加其 它添加劑的情況下,其流動(dòng)性不足,特別是在分裝成小瓶包裝,例如5g以下小瓶包裝時(shí),流 動(dòng)性不足造成分劑量不均勻。
[0020] 盡管現(xiàn)有技術(shù)已有諸多制備鹿血晶的方法,但是制備具有優(yōu)異性能的鹿血晶,特 別是制備不含任何添加劑且具有優(yōu)異生產(chǎn)工藝適應(yīng)性的鹿血晶的方法,仍然是本領(lǐng)域技術(shù) 人員極其期待的。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0021] 本發(fā)明的目的在于提供一種鹿血晶,以及提供一種制備本發(fā)明鹿血晶的方法,尤 其是制備具有優(yōu)異生產(chǎn)工藝適應(yīng)性的鹿血晶,特別是制備不含任何添加劑且具有優(yōu)異生產(chǎn) 工藝適應(yīng)性的鹿血晶,更特別是制備不含任何添加劑且具有優(yōu)異生產(chǎn)工藝適應(yīng)性的鹿血晶 的新晶態(tài)的方法。
[0022] 為此,本發(fā)明第一方面的提供了一種鹿血晶,其未添加任何添加劑。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,(例如其照中國藥典2010版一部附 錄IX H第一法(即烘干法)測定水分含量)其水分低于15%,優(yōu)選低于12 %。上述水分 含量測定方法具體如下:取供試品2~5g,平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中,厚度不超過 5mm,疏松供試品不超過10mm,精密稱定,打開瓶蓋在100~105°C干燥5小時(shí),將瓶蓋蓋好, 移置干燥器中,冷卻30分鐘,精密稱定,再在上述溫度干燥1小時(shí),冷卻,稱重,至連續(xù)兩次 稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量,計(jì)算供試品中含水量(%)。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其(例如照中國藥典2010版一部附 錄IX K法(即總灰分測定法)測定總灰分)其總灰分低于8%,優(yōu)選低于6%。上述總灰 分測定方法具體如下:取供試品約5g,精密稱定,置熾灼至恒重的坩堝中,稱定重量(準(zhǔn)確 至〇. Olg),緩緩熾熱,注意避免燃燒,至完全炭化時(shí),逐漸升高溫度至600°C,使完全灰化并 恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?,?jì)算供試品中總灰分的含量(%)。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其照如下方法測定外觀均勻度,顯 示色澤均勻,無花紋與色斑:取供試品適量,置光滑紙上,平鋪約5cm2,將其表面壓平,在明 亮處觀察。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其80%以上的顆??赏ㄟ^50目篩, 例如其90%以上的顆??赏ㄟ^50目篩。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述鹿血晶其30%以上的顆 粒不可通過100目篩,例如其20%以上的顆粒不可通過100目篩。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其照如下方法測定吸濕率,吸濕率 小于10%,例如小于7. 5%,例如小于5% :取樣品約2克,用萬分之一天平精密稱重,為初 始重量(記為W0),將該樣品疏松地平鋪于直徑IOcm的平皿(平皿預(yù)先使用上述天平精密 稱重)中,再將該平鋪樣品的平皿置于相對相對濕度85%的密閉容器中,使樣品平衡24小 時(shí),再取出平皿,精密稱重,扣除平皿重量并計(jì)算此時(shí)樣品的實(shí)際重量(記為Wl),按下式計(jì) 算吸濕率(% :吸濕率(% ) = [ (Wl-WO) + WO] X 100 %。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其是通過包括如下步驟的方法制備 得到的:將鹿科動(dòng)物梅花鹿或馬鹿的新鮮血液經(jīng)過冷凍干燥以除去水分,然后粉碎,即得。
[0029] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其中所述新鮮血液是在殺鹿或鋸鹿 茸時(shí)采集的新鮮鹿血。
[0030] 根據(jù)本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案的鹿血晶,其中所述新鮮血液在冷凍干燥之 前,向血液中添加食用酒精并混合均勻,所述新鮮血液與食用酒精的重量比為100 :2~10, 例如重量比為100 :6~9。術(shù)語"食用酒精"是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的,例如其應(yīng)符合國家 標(biāo)準(zhǔn)GB10343-2008。已經(jīng)出人意料地發(fā)現(xiàn),經(jīng)此處理后的新鮮血液再進(jìn)行冷凍干燥,然后再 將干燥塊狀物粉碎成細(xì)粉,不但可以完全除去乙醇(下文各實(shí)施例添加了食用酒精處理 制得的全部鹿血晶,經(jīng)中國藥典2010年版二部10頁乙醇項(xiàng)下的氣相色譜法檢測,已經(jīng)發(fā)現(xiàn) 全部的這些鹿血晶中,乙醇?xì)堄嗔康陀谠揋C方法的檢測限),并且經(jīng)此處理所得鹿血晶具 有優(yōu)異的流動(dòng)性,在以每瓶小于5克例如以每瓶2克的量分裝到玻璃瓶中時(shí),其具有優(yōu)異的 分裝均勻度。<