人胚胎素制作方法及應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物藥品技術領域，尤其是一種人胚胎素，具體述及該人胚胎素的制 作方法和應用。
【背景技術】
[0002] 人類疾病雖然有上千種，然而真正的疾病只有一種，那就是細胞病，任何一個器官 的細胞新陳代謝出了問題，細胞死亡達到一定程度，那么這個器官才會生病，導致細胞故障 主要的原因是二方面：一是細胞營養(yǎng)、氧氣供應不足，二是代謝廢物不能及時排出導致細胞 中毒所致，而現(xiàn)在對疾病的認識只是疾病的表現(xiàn)，而不是真正的原因，在治療上多為對癥治 療（如疼痛、發(fā)熱等的處理）或?qū)怪委煟▽δ[瘤的切除，放、化療等），而不能從修復與補 充功能細胞這一根本方法入手。
[0003] 1912年，瑞士科學家卡爾教授首次發(fā)現(xiàn)羊胚胎細胞中有一種能使細胞恢復活力的 神奇物質(zhì)一羊胚胎素；1931年，尼翰教授首次通過注射的方式將小羊的甲狀旁腺細胞應用 于一位在手術中甲狀旁腺受損的臨危病人挽救了其生命；1937年，尼翰教授第一次將活細 胞療法應用到大腦神經(jīng)細胞，以后，尼翰教授將活細胞療法擴展應用到肝臟、胰腺、腎臟、心 臟、十二指腸、胸腺和脾臟。由于羊胚胎素來源于羊的胚胎細胞，與人類細胞有諸多方面不 同，臨床應用時有許多禁忌癥，如過度敏感性人群，甲狀腺機能亢進、嚴重的高血壓患者，孕 期婦女使用、腫瘤患者等不能應用。
[0004] 由于鮮活細胞不能長時間保存，1949年尼翰教授和瑞士雀巢公司的科學家共同協(xié) 作，首次研制出凍干活細胞進行細胞活化治療；1955年瑞士 Dr. Alfred Pfister醫(yī)學博士 部分解決了細胞提取時（凍干或凍結）造成的損傷和惡化過程與保存技術的缺陷。
[0005] 1980年，由于鮮活羊胚胎素缺乏嚴格的消毒抑菌措施，無法長期保存，發(fā)生感染的 危險性很大，瑞士醫(yī)學界一直致力于發(fā)展提純，消毒，殺菌，保存技術，但仍不能達到長時間 保存的目的。
[0006] 1970年Martin Evans首次從小鼠胚囊中分離出與體外培養(yǎng)出小鼠胚胎干細胞 (embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞。）；1998年美國科學家體外培養(yǎng)人 胚胎干細胞成功，此后國內(nèi)外學先學者采用不同的干細胞治療不同的疾病，其短期治療效 果可以肯定，但目前存在以下問題：無論是羊胎素還是胚胎干細胞，由于是異種（羊）與異 體都存在著免疫排斥反應、過敏、體外培養(yǎng)時污染細菌引起全身感染等嚴重并發(fā)癥。
[0007] 1983年，愛德華.貝馳博士繼承尼翰羊胚胎素活性療法的成就，發(fā)展出個性化的 治療技術，提純?yōu)樾》肿拥?全器官精華素"，更加易于吸收；幫助人體活化和新生出結構完 整，功能活躍的新細胞；替換由于各種致害因素所導致的衰老病變細胞，增強各生命系統(tǒng)的 功能，恢復人體精力和體力，達到更加顯著的抗衰老療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，提出一種人胚胎素制作方法及應用，操作簡便，功效 廣泛。
[0009] 為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術方案：一種人胚胎素的制作方法，包 括以下過程：對人胚胎干細胞進行細胞破膜處理，去雜，得到人萬能胚胎素和人定向胚胎素 混合物。
[0010] 優(yōu)選的，該人胚胎干細胞為人誘導多能干細胞和人胚胎干細胞的單細胞傳代及培 養(yǎng)得到。
[0011] 優(yōu)選的，該人胚胎干細胞為采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理人胚胎組織分離得 到。
[0012] 優(yōu)選的，該人胚胎干細胞為神經(jīng)干細胞、心肌干細胞、胸腺干細胞、胰島干細胞、腎 臟干細胞、肝臟干細胞或軟骨干細胞。
[0013] 一種人胚胎素，采用如上所述制作方法得到的人胚胎素。
[0014] 一種人胚胎素在制備治療慢性或疑難性疾病藥物中的應用。
[0015] 一種人胚胎素在制備治療抗衰老藥物中的應用。
[0016] 優(yōu)選的，該應用為多途征用藥。
[0017] 優(yōu)選的，該多途征用藥為皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、病部注射、靜脈注射、動 脈注射、鞘內(nèi)注射、介入治療、立體定向、病灶表面噴灑或局部封閉。
[0018] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：從人胚胎干細胞中分離得到人萬能胚胎 素和人定向胚胎素混合物，能使人體內(nèi)各種細胞保持活力，延長工作細胞的壽命；修復損傷 細胞，恢復細胞的功能；激活體內(nèi)休眠細胞，補充有效的工作細胞；保護自身干細胞的衰減 和促進干細胞生成；激活自身休眠干細胞分化出新的細胞替補死亡的細胞，達到復原臟器 的作用，它既超過目前干細胞移植的治療作用，又無干細胞移植后可能出現(xiàn)的并發(fā)癥，如免 疫排斥反應、過敏反應、感染等，為從根本上治療各類、各種疾病，尤其是慢性、疑難性疾病， 抗衰老、延長壽命、美容等。
【具體實施方式】
[0019] 下面結合實施例對本發(fā)明進行詳細描述，本部分的描述僅是示范性和解釋性，不 應對本發(fā)明的保護范圍有任何的限制作用。
[0020] 本發(fā)明是通過從人胚胎干細胞（hES)中提取的人胚胎素（HEF)，用于治療目前被 視為各類不治之癥性疾病，尤其是各類慢性、疑難性疾病和抗衰老。
[0021] HEF的作用原理：HEF能保持細胞活力，延長工作細胞的壽命；修復損傷細胞，恢復 細胞的功能；延長體內(nèi)干細胞的壽命；激活體內(nèi)休眠細胞，補充有效的工作細胞；激活自身 休眠干細胞，分化不同組織細胞，以替代更新衰老、損傷和死亡的細胞，使組織器官復原，達 到源頭根治疾病，逆轉(zhuǎn)青春的效果。
[0022] 人胚胎干細胞，包括人工受精中冷凍的多余的胚胎、自愿捐獻的卵子者體外受 精培養(yǎng)、自愿捐獻工流產(chǎn)的胚胎組織、胎盤、臍帶血中提取的干細胞、人誘導多能干細胞 (hiPSCs)和人胚胎干細胞（hESCs)的單細胞傳代及培養(yǎng)的胚胎干細胞等。還可采用細胞分 離技術從人胚胎組織中獲得人胚胎干細胞，獲取胚胎組織一后，祛除各類危險因子與雜質(zhì)， 采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使胚胎組織分解出胚胎細胞。
[0023] 對人胚胎干細胞采用物理與化學法進行破膜處理，包括細胞膜與細胞核模，同時 可使細菌破膜，而滅活作用。
[0024] 本發(fā)明人胚胎素分為萬能胚胎素與定向胚胎素（各系統(tǒng)，如心、神經(jīng)、肝等20種）。
[0025] 本發(fā)明人胚胎素 （Human embryo factores，HEF)，按不同期來源的胚胎干細胞分 別為人萬能胚胎素 （Human universal embryo factores，HUEF)和人定向胚胎素 （Human directional embryo factores，HDEF)，HDEF根據(jù)不同期胚胎干細胞和功能又分為神經(jīng)系 統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、骨骼及肌肉系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、 生殖系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)人定向胚胎素等20種，其作用能保持細胞活力，延長工作細胞的壽 命；修復損傷細胞，恢復細胞的功能；激活體內(nèi)休眠細胞，補充有效的工作細胞；保護自身 干細胞的衰減和促進干細胞生成；激活自身休眠干細胞分化出各類細胞，替補死亡的細胞， 達到復原臟器的作用，用于治療各類疾病，尤其是慢性或疑難性疾病與抗衰老療效非常顯 效，該產(chǎn)可長期保存、無毒性、無排異反應。
[0026] 實施例1人胚胎素的制作方法
[0027] 1.挑選合格的人胚胎組織與hES，根據(jù)來源條件，可選擇以下組織與hES。
[0028] I. 1萬能胚胎素胚胎細胞或胚胎組織的來源
[0029] I. I. 1來自試管嬰兒：6-18d收集受精卵，觀察是否受孕，收集，一般為多余的受 精卵（已經(jīng)有公開使用干細胞）。
[0030] I. 1. 2受精卵的收集：選擇自愿者（20~30歲健康女性，無遺傳性、傳染性疾病 者）一打針（雌性激素）一排卵一受精一抽出（6-18d)，（已經(jīng)有公開使用干細胞）。
[0031] I. 1. 3胎盤、臍帶血中提取的干細胞。（已經(jīng)有公開使用細胞）。
[0032] I. 1. 4人誘導多能干細胞（hiPSCs)和人胚胎干細胞（hESCs)的單細胞傳代及培 養(yǎng)的方法的hES。（已經(jīng)有公開使用干細胞）。
[0033] I. 1. 5人工培養(yǎng)的萬能干細胞（實驗室）（已經(jīng)有公開使用干細胞）。
[0034] 1.1.6人工流產(chǎn)（選擇自愿者20~30歲健康女性，無遺傳性、傳染性疾病 者）35~50天的胚胎組織，由婦產(chǎn)科醫(yī)生可通過宮腔鏡可視技術將孕囊吸出，收集胚胎組 織，全程無菌操作（末有公開使用，本創(chuàng)新點）。
[0035] 1. 2定向胚胎素胚胎細胞或胚胎組織的來源
[0036] 1.2. 1引產(chǎn)胎兒器官（選擇自愿者，且合法引產(chǎn)胎兒，與自愿者辦理合法手續(xù)。母 20~30歲健康女性，無遺傳性、傳染性疾病者）選擇14~24周胎兒，由婦產(chǎn)科醫(yī)生可通過 水囊引產(chǎn)引出的胎兒，當即取出不同的器官與組織分別為按各系統(tǒng)組織保存，如心、神經(jīng)、 血液、骨、肌、腎、心、肝、胰、等組織20種），冷凍保留（_18°C)，暫不作處理。（末有公開使 用，本方法為創(chuàng)新）。
[0037] 1.2.2胎盤組織：取引產(chǎn)胎盤或分娩后的胎盤組織冷凍保留（_18°C )，暫不作處 理。（末有公開使用，本方法為創(chuàng)新）。
[0038] 2.從胚胎組織中獲取細胞。
[0039] 2. 1以上獲得的受精卵和培養(yǎng)的萬能干細胞冷凍保留（_18°C )，暫不作處理。
[0040] 2.2胚胎組織與胎盤組織提取萬能干細細作以下