一種用于癌痛治療的寡肽聯(lián)合或與哌替啶組合的產(chǎn)品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于癌痛治療的寡肽聯(lián)合或與哌替啶組合的產(chǎn)品。具體而言，本發(fā)明涉及寡肽Asqffglm-NH2在提高受試者中δ阿片受體的轉(zhuǎn)錄和/或表達(dá)水平，并進(jìn)而與哌替啶的組合能夠用于治療或減緩癌痛。
【背景技術(shù)】
[0002]速激肽是具有共同羧基末端序列（FXGLM-NH2)的肽家族，其最為人所熟知的成員包括：P物質(zhì)（SP)、神經(jīng)激肽A (NKA)和神經(jīng)激肽Β(ΝΚΒ)，它們是從兩個(gè)不同的基因編碼而來：Ppta編碼SP、NKA ；Pptb編碼NKB。在2000年和2002年，第三個(gè)前速激肽基因Pptc被鑒定，它編碼HK-I。HK-I最初是在小鼠造血細(xì)胞中被鑒定出來，它在祖B細(xì)胞發(fā)育到前B細(xì)胞的過程中起著重要的作用。后來，它在大鼠和人中也被鑒定出來。
[0003]許多證據(jù)表明，人和小鼠HK-I與SP對神經(jīng)激肽受體具有類似的激活活性，都對神經(jīng)激肽受體I (NKl受體）有著很高的親和性和選擇性。然而，與r/mHK-l和SP不同的是，hHK-Ι和hHK-1 (4-11)對于神經(jīng)激肽受體I的親和性降低許多（分別是14倍和70倍）。一些研究者研究了人和小鼠HK-I在免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和痛覺系統(tǒng)的一些生物學(xué)活性。在調(diào)控痛覺傳遞方面，本發(fā)明的發(fā)明人之前發(fā)現(xiàn)，r/mHK-1和hHK_l在側(cè)腦室注射后都能產(chǎn)生劑量和時(shí)間依賴的鎮(zhèn)痛效果，并且神經(jīng)激肽受體I的拮抗劑和μ阿片受體拮抗劑能夠分別顯著阻斷由r/mKH-1和hHK_l引起的鎮(zhèn)痛效果。也就是說r/mKH-1和hHK_l的鎮(zhèn)痛效果分別依賴于神經(jīng)激肽受體I和μ阿片受體。
[0004]內(nèi)源性的阿片肽和阿片受體參與了疼痛的調(diào)節(jié)過程。目前，臨床上大多使用μ阿片受體的激動(dòng)劑來緩解疼痛，但是其耐受性和極易產(chǎn)生的身體和精神的依賴性等副作用嚴(yán)重制約了其使用。相反，選擇性的激活δ阿片受體在產(chǎn)生強(qiáng)效止痛效果的同時(shí)，很少有副作用產(chǎn)生。因此，激活S阿片受體目前被認(rèn)為是一種理想的止痛手段。
[0005]有文獻(xiàn)報(bào)道，疼痛是腫瘤患者最常見卻又最難控制的癥狀之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計(jì)，全世界每年有1000萬新發(fā)癌癥患者，600萬人死于癌癥，其中50%的患者有癌性疼痛癥狀，70%的晚期癌癥患者以疼痛為主要癥狀。在疼痛患者中，因各種原因使50%?80%的疼痛沒有得到有效控制。當(dāng)前，中國每年新發(fā)癌癥患者數(shù)約180萬，每年死于癌癥的人數(shù)達(dá)到140萬。研究表明，中國癌性疼痛病人發(fā)病率高達(dá)50%左右，疼痛的原因以腫瘤直接引起的疼痛占第I位約占80%，同時(shí)治療腫瘤也可引起疼痛，發(fā)生率占10%左右。其他10%為與腫瘤相關(guān)或無關(guān)原因。
[0006]對于可能治愈的癌癥患者，確切有效的止痛可以明顯改善病人的一般情況，使其順利地完成臨床放療、化療等抗腫瘤治療計(jì)劃，達(dá)到治愈的目的。對于難以治愈的患者，有效的止痛可以使其獲得較為舒適的帶瘤生存，提高其生存質(zhì)量，并可能延長其生存期。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了上調(diào)δ阿片受體，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過長期不懈地努力發(fā)現(xiàn)寡肽Asqffglm-Nh2能夠上調(diào)δ阿片受體的表達(dá)。
[0008]因此，本發(fā)明一方面提供了一種上調(diào)受試者體內(nèi)δ阿片受體表達(dá)水平的方法，其包括向所述受試者(例如哺乳動(dòng)物，例如人)使用有效劑量的寡肽asqffglm-nh2。
[0009]本發(fā)明的另一方面提供了寡肽Asqffglm-NH2在制備用于上調(diào)受試者(例如哺乳動(dòng)物,例如人)體內(nèi)δ阿片受體表達(dá)水平的制劑(例如藥物)中的用途。
[?σιο] 本發(fā)明還提供了寡肽Asqffglm-Nh2聯(lián)合或與哌替啶的組合在制備用于在受試者(例如哺乳動(dòng)物，例如人)中對抗(例如治療或減緩)癌痛的制劑(例如藥物)中的用途。
[0011]本發(fā)明進(jìn)一步地還提供了寡肽Asqffglm-NH2在制備用于增強(qiáng)哌替啶的對抗(例如治療或減緩)癌痛效果的制劑(例如藥物)中的用途。
[0012]本說明書以及權(quán)利要求書中有可能涉及一些縮寫，這些縮寫所代表的內(nèi)容是本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的。但是，為了便于理解本發(fā)明的內(nèi)容，將相關(guān)的縮寫所代表的內(nèi)容引述如下:
[0013]r/mHK-1:大鼠/小鼠hemokinin-1 ;FAM:羧基熒光素；PPT:前速激肽原；M0R:μ -阿片受體；P0MC:阿黑皮素原；K0R: K -阿片受體；PDYN:強(qiáng)啡肽原；D0R: δ -阿片受體；PENK:腦啡肽原；GAPDH:甘油醛 _3_ 磷酸脫氫酶；HK_1 (4-11):ASQFFGLM_NH2。
【附圖說明】
[0014]圖1:小鼠側(cè)腦室注射寡肽Asqffglm-NH2后，nki受體和不同前速激肽原在mRNA水平的表達(dá)變化情況。a，b和c分別是用ABI7300系統(tǒng)軟件獲得的具有代表性的NKl受體，PPT-A和PPT-C的擴(kuò)增曲線。A，B和C直方圖顯示的分別是來自至少獨(dú)立三次重復(fù)的NKl受體、PPT-A和PPT-C的相對mRNA表達(dá)水平，內(nèi)參基因?yàn)楣芗一騁APDH。所有反應(yīng)每次一式三份，至少進(jìn)行三次獨(dú)立重復(fù)。每個(gè)值被注射生理鹽水的對照組所標(biāo)準(zhǔn)化，對照組的值設(shè)為1，結(jié)果以平均值土SEM呈現(xiàn)。與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組沒有顯著性差異。
[0015]圖2:小鼠側(cè)腦室注射寡肽Asqffglm-NH2后內(nèi)源性阿片受體和內(nèi)源性阿片肽在mRNA水平的表達(dá)變化情況。a，b，c, d，e和f分別是用ABI7300系統(tǒng)軟件獲得的具有代表性的M0R( μ -阿片受體)，P0MC(阿黑皮素原)，K0R( K -阿片受體)，PDYN(強(qiáng)啡肽原)，DORO-阿片受體)和PENK(腦啡肽原)的擴(kuò)增曲線。A，B，C，D，E和F直方圖顯示的分別是來自至少獨(dú)立三次重復(fù)的MOR，POMC, KOR, PDYN, DOR和PENK的相對mRNA表達(dá)水平，內(nèi)參基因?yàn)楣芗一騁APDH。所有反應(yīng)每次一式三份，至少進(jìn)行三次獨(dú)立重復(fù)。條對應(yīng)于平均值的標(biāo)準(zhǔn)差。***P ^ 0.001:與各自對照組相比有極顯著性差異。
[0016]圖3:半定量Western Blotting實(shí)驗(yàn)測定小鼠側(cè)腦室注射寡肽ASQFFGLM_NH2后NKl受體，MOR, POMC和DOR蛋白表達(dá)和對照組蛋白表達(dá)情況。這些圖片是來自于至少三次獨(dú)立重復(fù)的代表性圖片。柱形圖分別表示的是NKl受體(A)，MOR(B), POMC(C)and DOR(D)的相對蛋白表達(dá)水平情況，內(nèi)參基因?yàn)棣?actin。*p彡0.05;**p彡0.01:與各自對照組相比有顯著性差異。
[0017]圖4:側(cè)腦室注射人HK-1 (4-11)聯(lián)合皮下注射哌替啶后，在48.5°C的溫浴甩尾實(shí)驗(yàn)中能劑量和時(shí)間依賴的產(chǎn)生協(xié)同鎮(zhèn)痛效果。*P ( 0.05，**p ( 0.01和_p ( 0.001，表明人HK-1 (4-11)聯(lián)合哌替啶注射組與單獨(dú)哌替啶注射組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著性差異。
【具體實(shí)施方式】
[0018]本發(fā)明的發(fā)明人以ICR小鼠(由浙江省杭州市杭州師范大學(xué)動(dòng)物中心提供)為研究對象，研究了寡肽Asqffglm-NH2對各種阿片肽受體及其配體的表達(dá)水平的影響。我們實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示NKi受體和前速激肽原的表達(dá)水平不受側(cè)腦室注射寡肽Asqffglm-Nh2的影響。相對應(yīng)我們目前的工作，與生理鹽水對照組相比，側(cè)腦室注射寡肽Asqffglm-Nh2之后，mor(μ阿片受體)[和K0R(k阿片受體)，以及它們各自的內(nèi)源性配體POMC和TOYN的表達(dá)水平幾乎沒有改變。有趣的是，在我們目前的研究中，D0R(S阿片受體)的轉(zhuǎn)錄和蛋白水平發(fā)生極其顯著的上調(diào)，然而PENK (D0R的內(nèi)源性配體)的表達(dá)水平?jīng)]有發(fā)生顯著變化。
[0019]因此，本發(fā)明一方面提供了一種提高受試者中δ阿片受體的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平的方法，其包括向所述受試者施用有效量的寡肽asqffglm-nh2。本發(fā)明也提供了寡肽Asqffglm-Nh2在制備用于提高受試者中δ阿片受體的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平的制劑(例如藥物)中的用途。本發(fā)明的再一方面提供了一種藥學(xué)產(chǎn)品(例如藥物或藥劑)或藥物組合物，其包括作為活性成分的提高受試者中s阿片受體的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平的寡肽Asqffglm-Nh2 ;以及包括該涉及藥學(xué)產(chǎn)品的說明書。
[0020]本發(fā)明一方面提供了一種提高受試者中哌替啶的對抗(治療或緩解)癌痛效果的方法，其包括向所述受試者施用有效量的寡肽Asqffglm-NH2，該施用是在哌替啶的施用之前或之后進(jìn)行，或者與哌替啶同時(shí)施用。本發(fā)明也提供了寡肽Asqffglm-Nh2在制備用于提高在受試者中哌替啶的對抗(治療或緩解)癌痛的效果的制劑(例如藥物)中的用途。本發(fā)明的再一方面提供了一種藥學(xué)產(chǎn)品(例如藥物或藥劑)或藥物組合物，其包括作為活性成分的提高受試者中哌替啶的對抗(治療或緩解)癌痛的效果的寡肽Asqffglm-Nh2 ；以及包括該涉及藥學(xué)產(chǎn)品的說明書。
[0021]對于本發(fā)明所述的受試者，其優(yōu)選為哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選為人。
[0022]對于本發(fā)明的提高受試者中寡肽Asqffglm-NH2的活性，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對其作出任何修飾，前體是所述修飾不負(fù)面影響其活性。例如，可以對該寡肽進(jìn)行PEG化，以提高其在體內(nèi)的半衰期；可以與已知的穿透肽連接，以促進(jìn)本發(fā)明寡肽的透皮吸收等?？傊绢I(lǐng)域技術(shù)人員可對本發(fā)明的寡肽進(jìn)行各種修飾以提高遞送效率并保持其活性。這類修飾的寡肽也是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)的。
[0023]本發(fā)明的作為活性成分的寡肽Asqffglm-NH2可以連同藥學(xué)上可接受的載體一起使用。除活性成分外，本發(fā)明的方法、用途和產(chǎn)品還可以包含合適的藥學(xué)上可接受的載體，包括促進(jìn)活性化合物加工成制劑的賦形劑和助劑。
[0024]例如適于注射或輸注的制劑包括水性和非水性無菌注射液和水性和非水性無菌混懸劑，所述無菌注射液可任選地包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和能使制劑與目的接收者的血液等壓的溶質(zhì)，所述無菌混懸劑可包括懸浮劑和增稠劑。所述制劑可存在于單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿，并且可以保存在凍結(jié)干燥的(凍干)條件，在立即使用前僅需要加入無菌液體載體，例如注射用水。
[0025]本發(fā)明的活性成分任選地可與固體賦形劑相組合，且任選地磨碎所得到的混合物，并且需要時(shí)